急性白血病儿童黑色素瘤特异性抗原基因表达的意义

目的检测黑色素瘤特异性抗原(PRAME)基因在急性白血病儿童中的表达,并探讨其临床意义。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测72例急性白血病(AL)患儿及20例对照者骨髓或外周血中PRAME基因mRNA的表达,并对PRAME基因mRNA表达阳性者进行动态检测。结果急性白血病患儿确诊时PRAME基因的阳性表达率为40.28%,其中45例急性淋巴细胞白血病患儿阳性表达率为40.0%,27例急性髓细胞白血病患儿中PRAME基因的阳性表达率为40.74%,两者之间无显著差异(P>0.05);而对照组均为阴性表达。PRAME基因的表达在白血病缓解期明显降低,当病情复发时PRAME基因的表达再次上升。结论PRAME基因在儿童AL中有较高水平表达,其动态变化与预后密切相关,可作为儿童AL微小残留病变的一个监测指标,对判断预后、指导治疗有重要意义。     

黑色素瘤特异性抗原基因在儿童急性白血病中的表达及初步应用

目的探讨急性白血病(AL)儿童骨髓及外周血单个核细胞(MNC)中黑色素瘤特异性抗原(PRAME)基因表达情况,以及用于微小残留病监测的临床意义。方法釆用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测31例初发、6例复发、10例完全缓解期AL儿童骨髓及外周血PRAME mRNA的表达情况,同时检测10例非血液系统恶性疾病患儿骨髓、5例正常成人外周血中PRAME mRNA的表达情况,分析该基因与疗效、预后之间的关系。结果 37例初发及复发AL病例中15例PRAME mRNA表达阳性(40.5%),其中在急性淋巴细胞白血病(ALL)组、急性髓系白血病(ANLL)组的阳性率分别为37.9%、50.0%,两组比较差异无显著性(P0.05)。在初发组及复发组的表达率分别为38.7%、50.0%,两组比较差异无显著性(P0.05)。10例完全缓解期及15例对照组病例中PRAME mRNA表达均阴性。PRAME基因表达阳性的患儿完全缓解率(CR)显著低于表达阴性的患儿(CR率分别为60.0%,90.99%,P=0.042)。随访1例初诊PRAME基因表达阳性的ALL患儿,经化学治疗达完全缓解后PRAME基因表达转阴。结论 PRAME基因可在AL患儿中呈阳性表达,并可随疾病的缓解情况逐渐降低或转阴。因此,PRAME基因作为儿童AL的一个重要基因标记物,动态监测其表达水平在评估疗效、判断预后、预测复发方面有一定的意义。     

表达PRAME基因的儿童急性B淋巴细胞白血病的临床特点及预后分析北大核心CSCD

目的研究在无特异性融合基因表达时,黑色素瘤特异性抗原(preferentially expressed antigen of melanoma,PRAME)基因阳性在儿童急性B淋巴细胞白血病(acute B lymphoblastic leukemia,B-ALL)中的临床及预后意义。方法纳入167例新诊断的B-ALL患儿,其中70例PRAME基因阳性,97例PRAME基因阴性,所有患儿均不表达MLL-r、BCR/ABL、E2A/PBX1、ETV6/RUNX1,分析2组患儿的临床特点、预后及预后的相关因素。结果PRAME阳性组肝肋下>6 cm患儿比例高于PRAME阴性组(P<0.05)。诱导化疗后PRAME基因拷贝数较治疗前下降(P<0.05),诱导化疗后微小残留病(minimal residual disease,MRD)阳性组中,PRAME基因拷贝数与MRD水平无相关性(P>0.05);在诱导化疗后MRD阴性组中,二者亦无相关性(P>0.05)。PRAME阳性组4年无事件生存率高于PRAME阴性组(87.5%±4.6%vs 73.5%±4.6%,P<0.05),2组4年总生存率差异无统计学意义(88.0%±4.4%vs 85.3%±3.8%,P>0.05)。Cox比例风险回归模型分析显示PRAME基因表达是影响B-ALL患儿4年无事件生存率的保护因素(P<0.05)。结论尽管PRAME基因不能作为MRD监测,但在B-ALL中PRAME基因过表达提示预后良好。     

WT1、PRAME、ERG基因在急性髓系白血病中的研究进展

白血病特异性基因是目前监测白血病微小残留病灶的主要生物学标记.近年来发现PRAME、WT1、ERG等可能是潜在的急性白血病相关分子,可用于急性髓系白血病(AML)微小残留病的监测,用来指导临床分层治疗和判断预后.该文就这些白血病相关分子的致病机制、在白血病中的发生率及与临床预后的关系等做一综述.     

流式细胞术免疫分型在急性白血病诊断中的应用

目的 评价流式细胞术免疫分型在急性白血病(AL)诊断及治疗中的意义.方法 对本院2002年1月-2006年12月收治的46例AL患儿进行免疫学分析,取患者肝素抗凝骨髓或静脉血2 mL,采用FACSCan型流式细胞仪进行测定.用CD45/侧向角光散射(SSC)设门分析R2内细胞,根据细胞CD45的抗原表达及细胞颗粒表达程度区分各种细胞及异常细胞群.阳性细胞≥20%为阳性.结果 46例患者中,有2例形态学误诊被免疫分型纠正.形态学不典型无法准确判断者3例,经免疫学检查确诊为急性杂合细胞白血病.32例急性髓性白血病10例(31.25%)伴淋系抗原表达;11例急性淋巴细胞白血病3例(27.27%)伴髓系抗原表达.结论 流式细胞术免疫分型可提高AL诊断的准确性,有利于患者进行个体化治疗及预后的判断.     

选择性T细胞清除骨髓移植--协调移植物抗宿主病和移植物抗白血病的移植新策略

移植物抗宿主病(GVHD)与移植物抗白血病(GVL)本质上是异基因淋巴细胞介导的细胞免疫反应,各细胞亚群在GVHD和GVL中作用不平衡,选择性清除活化细胞,可在减轻GVHD的同时保留GVL.应用基因工程技术人为增加T细胞识别标记,如自杀基因和特异性次要组织相容性抗原,可选择性清除T细胞,为协调GVHD和GVL提供一种新策略.目前实验室选择性T细胞清除的骨髓移植已取得成效,临床应用也逐步开展.     

选择性T细胞清除骨髓移植——协调移植物抗宿主病和移植物抗白血病的移植新策略

移植物抗宿主病(GVHD)与移植物抗白血病(GVL)本质上是异基因淋巴细胞介导的细胞免疫反应,各细胞亚群在GVHD和GVL中作用不平衡,选择性清除活化细胞,可在减轻GVHD的同时保留GVL.应用基因工程技术人为增加T细胞识别标记,如自杀基因和特异性次要组织相容性抗原,可选择性清除T细胞,为协调GVHD和GVL提供一种新策略.目前实验室选择性T细胞清除的骨髓移植已取得成效,临床应用也逐步开展.     

白血病过继免疫治疗的研究进展

过继细胞免疫治疗是指在体外激活免疫活性细胞,然后输给带瘤宿主,使免疫活性细胞在体内杀伤、溶解肿瘤细胞,直接或间接介导抗瘤效应的一种新型的治疗方法.该文主要对用于白血病治疗的几种免疫活性细胞过继免疫新策略(包括自然杀伤细胞、人工抗原递呈细胞、白血病细胞分化的抗原递呈细胞、CD4+ T细胞及Th17细胞和混合免疫细胞)的最新进展进行综述.     

HOXA7基因与白血病

HOXA7作为HOX基因家族的一员,是造血细胞增殖分化的主控基因,其在白血病中的表达及功能受多种上游因子的调控及协同作用分子、其他HOX基因的影响,并且作用于下游靶基因,导致白血病的发生、发展.HOXA7可影响白血病的临床表现,且其过表达与白血病疗效差及预后不佳密切相关.     

骨髓基质细胞及VLA-4抗体对儿童白血病细胞凋亡影响的研究

目的：研究骨髓基质细胞（BMSCs）对儿童白血病细胞的保护作用及细胞粘附分子缓慢抗原-4（VLA-4）抗体对原代白血病细胞凋亡的影响。方法：分离儿童白血病骨髓单个核细胞,培养BMSCs及白血病细胞。实验分4个组：①白血病细胞单独培养组（对照组）;②BMSCs＋白血病细胞组（BMSCs组）;③BMSCs上清+白血病细胞组（上清组）;④BMSCs＋白血病细胞＋VLA-4抗体组（抗体组）。流式细胞仪检测各组白血病细胞的凋亡率,RT-PCR方法检测各组白血病细胞survivin和bcl-2基因的表达。结果：BMSCs组和上清组的白血病细胞凋亡率均低于对照组,P<0.05。与BMSCs组和上清组比较,抗体组的凋亡率显著增高,P<0.05。抗体组12 h的凋亡率与24 h的凋亡率比较,差异有统计学意义,P<0.01。与BMSCs组和上清组比较,抗体组survivin、bcl-2基因的表达均有降低,P<0.05。结论：BMSCs对白血病细胞有保护作用,VLA-4抗体能够抑制白血病BMSCs与白血病细胞间的粘附,促进白血病细胞的凋亡。［中国当代儿科杂志,2010,12（11）：897-901］     

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??The development of biotechnology has spawned a new generation of cell therapy represented by chimeric antigen receptor gene modified T cells??CART??. The treatment for refractory and relapsed childhood leukemia is a formidable clinical problem. CART cell therapy has preliminary improved outcome??which is initiating a new idea for the treatment.However??the long-term efficacy and safety of CART cell therapy needs to be further observed.     

急性白血病免疫分型与临床研究

目的了解儿童急性白血病(AL)免疫表型的分布情况和抗原表达规律,并与临床特征及预后相结合,为临床个体化用药提供指导。方法对85例新近诊断为AL患儿,采用CD45/SSC双参数散点设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。其中胞膜抗原采用单克隆抗体三色直接免疫荧光标记法,胞浆内抗原采用双色直标法。结果1.AL 85例免疫分型:未分化型(AUL)1例,占1.2%;杂合型7例,占8.2%;急性髓性白血病(AML)18例,占21.2%;急性淋巴细胞白血病(ALL)59例,占69.4%。其中B-ALL 50例,占84.7%;T-ALL 6例,占10.2%;T/B-ALL 3例,占5.1%。2.ALL 59例中髓系抗原表达31例,占52.5%。髓系抗原表达阳性组和阴性组临床特征、治疗反应及预后方面无明显差异。3.AML患儿中有淋系抗原表达5例,占27.8%,低于ALL有髓系表达。其中以CD7阳性率最高,为60%;CD14在M4、M5表达率为75%;CD13、CD33在AM中表达率分别为83.3%、94.4%。4.混合型白血病7例。其中B/M 6例,TB/M 1例;2例在FAB分型中疑为混合型,余5例为ALL。结论应用多色流式细胞术可较好地分析每例白血病患儿,尤其是对于混合型白血病及抗原交叉表达者更有意义。     

CDX2基因与白血病关系的研究进展

尾型同源盒基因(CDX)家族成员CDX2基因是促进胚胎发育和参与造血调控的主控基因.新近研究发现,CDX2在各型白血病中异常表达,是与白血病发生、发展和颅后相关的新的致白血病基因,可望成为白血病微小残留病检测的泛基因标志.CDX2通过调节HOX基因参与白血病转化,进一步探讨CDX2的致白血病机制及其与白血病的关系,对预...     

急性白血病IgH基因重排的研究

对１０５例儿童白血病细胞作了ＩｇＨ基因重排半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）分析，结果显示重排主要见于Ｂ细胞系急性淋巴细胞白血病（阳性率７５．５％）及相关杂合性白血病（ＨＡＬ）中，说明ＩｇＨ基因重排ＰＣＲ分析结果可作为分型指标之一。１５例正常外周血淋巴细胞则无明显条带，说明可以区分克隆性和反应性增生。２２例同时与ＤＮＡ印迹比较，结果相关。５例ＰＣＲ产物序列分析表明序列同源性小，是克隆特异性的。３例动态分析示３例均在完全缓解期测得白血病克隆，说明ＩｇＨ基因重排ＰＣＲ分析可以检测白血病克隆的消长、演变，值得进一步研究。     

三色流式细胞术在120例儿童急性白血病免疫分型中的应用

目的探讨三色流式细胞术在儿童急性白血病AL免疫分型中的应用价值,了解儿童AL抗原表达规律和免疫亚型的分布情况。方法采用CD45/侧散射(SSC)双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术细胞表面及浆内分化抗原的分析。结果120例儿童白血病免疫分型可分为4类:未分化型占0·8%,急性髓细胞性白血病(AML)占35·0%,急性淋巴细胞白血病(ALL)占57·5%,混合型急性白血病占6·7%。69例儿童ALL中,B淋巴细胞白血病(B-ALL)占75·3%,T淋巴细胞白血病(T-ALL)占24·7%。AML伴淋巴系抗原表达为28·8%,主要表达CD5、CD7及CDl9(均为9·6%)。B-ALL伴髓系抗原CDl3、CD33表达分别为40·4%和5·8%,T-ALL伴髓系抗原CD13、CD33表达分别为35·3%和5·9%。结论应用流式细胞术几乎能对所有儿童急性白血病进行准确分型,对儿童白血病患者的治疗方案选择及预后判断等均有重要价值。     

Elevated common acute lymphoblastic leukemia antigen expression in pediatric immune thrombocytopenic purpura.

Bone marrow examination is often performed in thrombocytopenic children to distinguish immune thrombocytopenic purpura (ITP) from acute leukemia. We describe a patient with thrombocytopenia and 50% common acute lymphoblastic leukemia antigen (CALLA) positivity in his marrow who was subsequently shown to have ITP. CALLA (CD10) is a surface antigen found in early B-lymphocytes and is elevated in most cases of childhood acute lymphoblastic leukemia (ALL). This case prompted us to prospectively study the frequency of immature lymphocyte populations in children with ITP. Fourteen patients with acute ITP and five with other conditions were studied. The two groups were comparable with respect to age: ITP mean, 4.3 (range 0.3-15.5) years; control mean, 5.8 (0.6-13.8) years. The ITP group had a significantly higher percentage of CD10 positive bone marrow lymphocytes (p = 0.007). Five of the 10 patients younger than 4 years of age in the ITP group had CD10 levels of greater than 30%, which is in the leukemic range, whereas none of the control patients had a CD10 levels of greater than 17% (p = 0.003). There was good correlation between CD10 positivity and B4 positivity indicating that both of these markers arise from the same population of immature B-lymphocytes. None of the ITP patients who were older than 4 years had a CD10 level of greater than 30%. We conclude that it is common to have an increase in the proportion of immature lymphocytes in the marrow of young children with ITP. The cause of this increase in CD10 positive cells is unknown.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)