邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达水平的影响。方法:将80只5周龄SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500 mg/kg)、DEHP高剂量组(1 500 mg/kg),每组雌雄各10只,每周染毒5 d,每天灌胃染毒1次,连续6周。末次染毒24 h后处死动物,提取睾丸或卵巢组织蛋白,应用Western blot分别检测睾丸组织中3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、促性腺激素释放激素受体(GnRHR)、卵泡刺激素受体(FSHR)及卵巢组织中黄体生成素受体(LHR)和GnRHR的蛋白表达水平。结果:与对照组比较,雄鼠睾丸组织在DEHP 500和1 500 mg/kg剂量时3β-HSD蛋白表达水平均显著升高(P均<0.01);GnRHR蛋白表达水平在1 500 mg/kg剂量组显著下降(P均<0.01);FSHR蛋白表达水平在500和1 500 mg/kg组显著下降(P<0.05或P<0.01)。雌鼠卵巢组织在DEHP 100 mg/kg剂量组时LHR和GnRHR蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),在DEHP 500和1 500 mg/kg剂量组LHR表达水平比对照组下降25%~35%,GnRHR下降60%~80%(P<0.05或P<0.01)。结论:DEHP染毒可引起大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达水平的改变,干扰大鼠体内性激素的代谢,推测此作用与DEHP的生殖毒性存在密切关系。     

5-FU联合胸腺肽对H22细胞皮下移植瘤小鼠免疫功能的影响

目的:探讨5-FU联合胸腺肽的抗肿瘤及免疫调节功效。方法:32只ICR小鼠建立H22小鼠肝癌细胞的皮下移植瘤模型,分为对照组(生理盐水),5-FU组(10mg/kg),5-FU+胸腺肽组(10mg/kg+0.2mg/kg),胸腺肽组(0.2mg/kg),连续给药5天后测量肿瘤重量和体积,检测外周血WBC及淋巴细胞(LY)数量及外周血中CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞的百分含量、血清中白介素2(IL-2)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的浓度。结果:5-FU联合胸腺肽显著抑制了小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.01),胸腺肽上调了5-FU降低的WBC及LY细胞数量(P<0.05),增加外周血中CD3+、CD4+及NK细胞的水平(P<0.05);与对照组比,显著升高了血清中IL-2和TNF-α的浓度(P<0.01)。结论:5-FU联合胸腺肽可增强机体的细胞免疫功能,上调血清中细胞因子的表达水平,具有显著的抗肿瘤功效。而不良反应较小。     

苦参碱对大鼠原发性肝癌防治作用及其机制的研究

目的:研究苦参碱对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导的大鼠原发性肝癌的防治作用及其可能的机制。方法:SD大鼠46只,模型组:21只,DEN35mg/kg灌胃,2次/周,共16周;苦参碱组:15只,DEN灌胃的同时给予苦参碱3mg/(kg.d)灌胃,共20周;空白对照组:10只,每日等体积生理盐水灌胃。大鼠肝脏HE染色观察病理改变,免疫组化SP法观察凋亡抑制蛋白Survivin、细胞周期蛋白Cyclin B1在肝脏的表达。结果:苦参碱组较模型组死亡率降低(40.0%vs76.2%),P<0.05;病理检查示,苦参碱组较模型组成癌率低(53.3%vs90.5%),P<0.05;免疫组化检测示,Survivin和Cyclin B1两种蛋白在模型组表达多,空白组表达少,苦参碱组表达较空白组多而较模型组少,苦参碱组与模型组比较差异有统计学意义,P<0.05。结论:苦参碱对DEN诱导大鼠原发性肝癌有防治作用,其机制可能与降低Survivin及Cyclin B1表达有关。     

番茄红素对荷卵巢癌大鼠免疫功能的影响及其机制研究

目的 研究番茄红素(LP)改善荷卵巢癌大鼠免疫功能的作用并探讨其机制。方法 将卵巢癌细胞NUTU-19接种于腋窝皮下,制备荷卵巢癌大鼠模型,取60只模型大鼠随机分为模型组、顺铂组(2 mg/kg)和LP(40、20、10 mg/kg)组,每组12只;各治疗组均隔天腹腔注射给药一次,共5次。观察各组大鼠一般生存状态和肿瘤生长状况;称量肿瘤重量并计算抑瘤率,通过HE染色观察肿瘤组织形态结构变化;噻唑蓝(MTT)比色法测定脾淋巴细胞转化率;酶联免疫(ELISA)法测定血清中白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;流式细胞仪术(Flow cytometry)检测血中T淋巴细胞亚群(CD4⁺、CD8⁺)百分率并计算CD4⁺/CD8⁺。结果 与模型组比较,发现LP各组大鼠饮食状况好转,瘤体减小、活动度和硬度较差,肿瘤组织细胞皱缩、呈片状坏死等病变,上述改变以LP 40 mg/kg组最为显著;LP(40、20 mg/kg)组瘤重显著减轻且抑瘤率显著升高(P＜0.05,P＜0.01),脾淋巴细胞转化率显著升高(P＜0.05,P＜0.01),血清中IL-2和TNF-α含量均显著降低(P＜0.05,P＜0.01),血液中CD8⁺百分率显著降低(P＜0.05,P＜0.01),LP 40 mg/kg组CD4⁺百分率显著升高(P＜0.05),LP(40、20 mg/kg)组CD4⁺/CD8⁺显著升高(P＜0.05,P＜0.01)。结论 LP具有提高荷卵巢癌大鼠免疫功能的作用,其机制可能与LP能够有效降低炎症细胞因子(IL-2、TNF-α)含量以及提高CD4⁺/CD8⁺比值有关。     

MAP2K6-FP和紫杉醇对上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:研究靶向融合肽MAP2K6-FP（mitogen-activated protein kinase kinase 6-fusion protein)、紫杉醇单独和两者联合对上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:建立卵巢癌HO8910细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,分为空白对照组（予生理盐水 5 ml/kg腹腔注射治疗）、MAP2K6-FP组（予0.25 mg/kg MAP2K6-FP腹腔注射治疗）、紫杉醇组（予15 mg/kg 紫杉醇腹腔注射治疗）、联合用药组（予0.25 mg/kg MAP2K6-FP+15 mg/kg 紫杉醇腹腔注射治疗）,比较4组裸鼠的移植瘤生长速度、体积、裸鼠体质量;TUNEL法、免疫组织化学法和蛋白印迹法分别检测移植瘤中细胞凋亡情况、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达以及Bcl-2、Beclin 1蛋白的表达。结果:联合用药组裸鼠移植瘤体积（90 mm3）,小于MAP2K6-FP组（324 mm3）、紫杉醇组（215 mm3）和空白对照组（804 mm3）（P<0.05）。联合用药组肿瘤细胞的凋亡指数（apoptosis index,AI）(28.88±2.03)%,高于MAP2K6-FP组(14.36±0.56)%、紫杉醇组(15.78±0.87)%以及空白对照组(4.78±0.87)%（P<0.05）。联合用药组VEGF蛋白表达水平(0.14±0.06),低于MAP2K6-FP组(0.32±0.10)、紫杉醇组(0.29±0.08)及空白对照组(0.78±0.14）（P<0.01);联合用药组PCNA表达水平(18.4%),低于MAP2K6-FP组(32.3%)、紫杉醇组(29.8%)及空白对照组(81.4%）（P<0.05）。联合用药组Beclin 1/Bcl-2比例较单一用药组高(P<0.05)。结论:MAP2K6-FP联合紫杉醇能够显著抑制卵巢癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与促进细胞凋亡有关。     

阿特拉津对大鼠多巴胺神经元凋亡相关因子表达的影响

目的:探讨阿特拉津对多巴胺神经元凋亡相关因子表达的影响。方法:将7~8月龄的SD雄性大鼠40只随机分为4组,即对照组和阿特拉津低(10 mg/kg)、中(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组,每组10只,连续灌胃90 d后处死,收集中脑黑质部分,通过透射电镜观察神经元细胞的凋亡情况,分别采用Real-time PCR和Western blot检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA和蛋白的表达情况。结果:与对照组相比,随阿特拉津染毒剂量增加,电镜下神经元细胞线粒体出现肿胀、空泡以及线粒体自噬等现象;Bax mRNA及蛋白的表达随剂量增加而增加(P均<0.05);Caspase-3的mRNA在低剂量下表达增高(P均<0.05),但在中、高剂量下表达下降(P均<0.05),其蛋白的表达量随剂量的增加而增加(P均<0.05);但Bcl-2 mRNA及蛋白的表达随剂量增加均呈下降趋势,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:阿特拉津可通过调节线粒体凋亡相关因子的表达促进多巴胺神经元凋亡。     

大剂量维生素E和C抗氧化活性及对DNA损伤影响的研究

背景与目的:观察大剂量维生素E(VitaminE,VE)和C(VitaminC,VC)的抗氧化活性及对大鼠DNA氧化损伤、烷化损伤的影响。材料与方法:将72只Wistar大鼠(雌雄各半)随机分为6组,每组12只,即对照组(基础饲料,VE、VC摄入量分别为5、0mg/kg·d),VC组(VE5mg/kg·d、VC1000mg/kg·d),VE1组(VE33mg/kg·d、VC0mg/kg·d),VE2组(VE500mg/kg·d、VC0mg/kg·d),VE1 VC组(VE33mg/kg·d、VC1000mg/kg·d)和VE2 VC组(VE500mg/kg·d、VC1000mg/kg·d),实验期为8周。实验结束前收集动物24h尿液,实验结束后处死动物,留取血液,分离血浆并收集淋巴细胞,测定超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathioneperoxidase,GSH-Px)活性、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量,分析DNA损伤。结果:VE1组的抗氧化活性显著提高:血浆SOD、GSH-Px活力明显高于对照组(P<0.05)、MDA含量低于对照组;而VE1 VC组SOD、GSH-Px则较VE1组显著下降(P<0.05)。VE1组10μmol/LH2O2诱导的淋巴细胞DNA氧化损伤为150.42AU,显著低于其它组(P<0.05);该组DNA烷化损伤产物尿O6-甲基鸟嘌呤(O6-methylguanine,O-6meG)含量为0.89mg/g肌酐,比对照组、VE2组分别下降了50.28%、50.00%(P<0.05)。结论:较大剂量VE能提高大鼠抗氧化活性,降低DNA氧化损伤及烷化损伤,但联合补充大剂量VC时可能对其影响产生拮抗作用;过大剂量VE和VC补充时均未观察到有利作用,并且可能降低机体的遗传稳定性。     

血红素氧化酶-1在急性镉中毒大鼠肾皮质中的表达

背景与目的:观察急性镉中毒大鼠肾皮质中血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的变化.材料与方法:健康雄性SD成年大鼠24只,随机分为4组,3个染镉组连续5 d分别腹腔注射0.4、0.8、1.6 mg/kg氯化镉(CdCl2);对照组连续5 d腹腔注射生理盐水.给药结束后5 d取双肾皮质分别进行RT-PCR及免疫组织化学分析,观察HO-1 mBNA及蛋白表达的变化.结果:对照组观察到HO-1的生理性表达.在mRNA水平,0.4 mg/kg组未见表达增加,0.8及1.6 mg/kg组较对照组明显升高(P＜0.05).mRNA与染镉剂量呈剂量-效应关系(r=0.97,P＜0.05).免疫组化结果显示,肾皮质HO-1蛋白表达的变化较mRNA敏感.在蛋白水平,3个试验组与对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:镉的急性毒性作用可诱导肾脏表达HO-1增高,其表达可能具有保护作用.     

生命早期暴露于百草枯和代森锰对子代SD大鼠认知记忆功能的影响

目的:探讨生命早期联合暴露于农业除草剂百草枯(PQ)和杀真菌剂代森锰(MB)对子代大鼠海马内认知及记忆功能相关基因表达的影响及可能机制。方法:清洁级SD大鼠随机分为3组,即对照组(生理盐水)和低(PQ 10 mg/kg+MB 30 mg/kg)、高(PQ 15 mg/kg+MB 45 mg/kg)剂量染毒组,孕第5天起经口染毒直至仔鼠出生后21 d断乳。仔鼠继续饲养(未染毒)至3月龄,进行Morris水迷宫实验,比较其穿梭次数。取仔鼠海马组织对其形态变化进行光镜和透射电镜观察,并通过实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白免疫印迹技术(Western blot)分别检测海马环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化的环磷腺苷效应元件结合蛋白(P-CREB)及脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA和蛋白表达量的变化。结果:与对照组相比,Morris水迷宫结果显示,染毒剂量组仔鼠运动轨迹明显复杂,且穿梭次数显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05);光镜下高剂量染毒组海马细胞形态变化明显;电镜下各染毒剂量组海马神经元超微结构均出现明显变化;qPCR结果显示,各染毒剂量组仔鼠CREB、P-CREB和BDNF mRNA表达量显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05,低剂量组BDNF mRNA除外)。蛋白免疫印迹结果显示,各染毒剂量组仔鼠海马中CREB、P-CREB和BDNF蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05,低剂量染毒组CREB蛋白除外)。结论:生命早期联合暴露于PQ和MB可能通过影响仔鼠海马内认知及记忆功能相关基因表达,造成子代大鼠认知及记忆功能的损伤。     

邻苯二甲酸二丁酯亚慢性染毒对大鼠睾丸Insl3 mRNA表达的影响

背景与目的:观察邻苯二甲酸二丁酯(DBP)亚慢性染毒对青春期大鼠睾丸间质细胞功能标志物胰岛素样因子3(Insl3)mRNA表达水平的影响。材料与方法:青春期健康雄性SD大鼠72只,随机分为3组:溶剂对照组(玉米油),DBP 50 mg/kg和250 mg/kg剂量的染毒组,每组24只。隔日染毒,等体积灌胃,连续染毒90 d。分别于染毒后30、60和90 d各组随机选取8只大鼠处死。取睾丸、附睾、心、肝、脾、肾称重并计算脏器系数,放免法检测血清睾酮含量,实时荧光定量PCR法检测睾丸Insl3 mRNA表达。结果:DBP 250 mg/kg组染毒90 d肝脏系数显著大于对照组(P<0.05);50 mg/kg组染毒60 d大鼠血清睾酮水平较对照组显著升高(P<0.05),而250 mg/kg组比50 mg/kg组显著下降(P<0.01);各染毒组大鼠睾丸Insl3 mRNA表达水平较对照组显著下调(P<0.01),染毒30 d、60 d时DBP 250 mg/kg剂量组较DBP 50 mg/kg组显著下调(P<0.05),各染毒组睾丸Insl3 mRNA表达水平均随处理时间延长先下调而后上调,60 d较30 d显著降低(P<0.05),90 d较60 d显著升高(P<0.01)。结论:青春期大鼠DBP亚慢性暴露可干扰血清睾酮及睾丸Insl3 mRNA表达水平,对肝脏可能有潜在毒性。     

桑黄胞内多糖抗肿瘤效应的实验研究

背景与目的:探讨桑黄胞内多糖的抗肿瘤和增效作用以及对S180荷瘤小鼠免疫功能的影响,为开发桑黄胞内多糖提供理论依据.材料与方法:采用S180荷瘤小鼠,随机分为正常对照组,荷瘤对照组,环磷酰胺(CP)组,桑黄胞内多糖低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg)和CP与桑黄胞内多糖低、中、高剂量联合用药组共9组,每组10只.分别观察桑黄胞内多糖及与CP联合用药后的抑瘤效果及对荷瘤小鼠免疫功能的影响,采用MTT法测定对S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞转化能力的影响.结果:200、100 mg/kg剂量的桑黄胞内多糖对S180的抑制率分别为57.02%和61.40%;与环磷酰胺联合使用后,100 mg/kg的剂量抑制率可达79.51%;联合用药组荷瘤小鼠的胸腺指数和脾脏指数明显增加(P＜0.05),显示其对环磷酰胺造成的免疫器官损伤有明显的保护作用;桑黄胞内多糖组及其与CP联合用药组白细胞数(OD值)均较荷瘤组和CP组高(P＜0.05或P＜0.01),显示桑黄胞内多糖对CP造成的白细胞数下降有明显的拮抗作用,具有促进机体白细胞生成能力;桑黄胞内多糖对S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞的转化具有明显的促进作用.结论:桑黄胞内多糖有明显的抗肿瘤作用,明显增强荷瘤小鼠免疫功能,并能降低化疗药物造成的免疫系统损伤,对环磷酰胺起增效减毒作用.     

沙苑子黄酮抗肝癌生长作用及对免疫功能的影响

目的:探讨中药提取物沙苑子黄酮(flavonoids extracts from semen Astragali complanati,FAC)对小鼠肝癌H22细胞生长的影响及其机制.方法:建立H22荷瘤小鼠模型,观察FAC对H22肝癌移植瘤生长的抑制作用及其对荷瘤小鼠免疫器官、巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞转化功能及生存期的影响.结果:高、中、低剂量组FAC对荷瘤小鼠肝癌细胞生长具有显著抑制作用,与正常对照模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);其中环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对照组的抑瘤率与FAC高剂量组相近(P>0.05). FAC可以明显延长荷瘤小鼠的存活期,高、中、低剂量组的生命延长率分别为64.9%、56.7%和28.1%,与CTX对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01).另外,高、中、低剂量组FAC明显提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数,与正常对照模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);且高、中剂量组能显著提高巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞转化能力,与正常对照模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01);而CTX的作用方向相反,与正常对照模型组比较差异也具有统计学意义(P<0.01).结论:FAC可抑制肝癌H22细胞生长,延长荷瘤小鼠存活期,并能提高荷瘤小鼠的非特异性免疫功能.FAC可能通过调节机体免疫功能来发挥抗肿瘤作用.     

皂角刺提取物对荷瘤小鼠肿瘤生长及细胞因子的影响

目的探讨皂角刺提取物对荷瘤小鼠肿瘤生长及细胞因子水平的影响。方法建立小鼠肉瘤S180及小鼠肝癌H22移植性肿瘤模型,观察皂角刺提取物对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;采用ELISA法测定白介素-2(IL-2)、白介素 6(IL-6)、白介素 12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,探讨皂角刺提取物对荷瘤小鼠细胞因子的影响。结果皂角刺提取物在50、100 mg/kg时对S180的生长抑制率分别为44.59%、53.38%,对H22生长抑制率分别为39.88%、46.63%,且能提高荷瘤小鼠的脾指数和胸腺指数;皂角刺提取物能提高荷瘤小鼠细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α的表达水平。结论皂角刺提取物有较强的体内抗肿瘤活性,且能促进细胞因子的表达,增强机体免疫功能。     

AUGMENTATION OF IMMUNE FUNCTIONS AND AUTOLOGOUS TUMOR-KILLING ACTIVITY BY KAPPA-SELENOCARRAGEENAN IN MICE BEARING SARCOMA 180

Ｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｋｎｏｗｌｅｄｇｅｏｆｔｕｍｏｒｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｄｃａｎｃｅｒｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ，ｉｔｈａｄｂｅｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄｔｈａｔｈｏｓｔｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎｓｍａｒｋｅｄｌｙａｆｅｃｔｔｈｅｏｃｕｒｅｎｃｅ...     

Efficient inducation of local and systemic antitumor immune response by liposome-mediated intratumoral co-transfer of interleukin-2 gene and interleukin-6 gene.

Interleukin 2 (IL-2) expressing plasmid and interleukin 6 (IL-6)-expressing plasmid were encapsulated in liposome and administrated intratumoraly into tumor-bearing mice 4 days after subcutaneous inoculation of B16F10 melanoma cells. The results showed that treatment of tumor-bearing mice with IL-2 gene or IL-6 gene transfer inhibited the growth of subcutaneous tumor and prolonged the survival of tumor-bearing mice significantly when compared with the treatment of PBS or control gene transfer mediated by liposome (P < 0.01). Combined transfer of IL-2 gene and IL-6 gene was found to elicit inhibitory effects on the growth of B16F10 tumor more significantly and prolonged the survival period of tumor-bearing mice more obviously. We investigated the local immunity in tumor microenvironment and found that IL-2 and IL-6 gene transfer could significantly increase the expression of lymphocyte function-associated antigen-1 on tumor infiltrating lymphocytes (TIL) and MHC-I molecule on tumor cells freshly isolated from the tumor mass. The NK and CTL activity of TIL increased markedly after the combined transfer of these two cytokine genes. We also observed the systemic antitumor immune response in the tumor-bearing mice and demonstrated that NK and CTL activity of splenocytes and the production of IL-2, tumor necrosis factor and interferon-gamma from splenocytes increased obviously in mice after the combined transfer of IL-2 and IL-6 gene. In conclusion, local and systemic antitumor immunity of the tumor-bearing host could be induced efficiently after the combined gene transfer. The enhanced specific and non-specific antitumor immunity might be responsible for the more potent antitumor effects of the combined gene therapy.     

Polysaccharide extracted from Rheum tanguticum prevents irradiation-induced immune damage in mice

Aim: To investigate the protective effect of purified fraction 1 polysaccharide extracted from Rheum tanguticumRTP1 on irradiation-induced immune damage in mice. Methods: Kunming mice were randomly divided into fivegroups: normal group (NC), irradiation control group (IC), RTP1 low dose (200 mg/kg), middle dose (400 mg/kg)and high dose (800 mg/kg) groups. RTP1 was adminstered by the gastric route for 14 d, mice in the NC and ICgroups being given by 0.9% sodium chloride solution in the same way. The mice in all groups except NC groupwere irradiated with 2.0 Gy 60Co γ-ray on the fourteenth day. Immune indives of non-specific immune function,cellular immunity and humoral immunity were assessed at the 24th hour after radiation. Results: Comparedwith the IC group, the spleen index, thymus index, rate of carbon clearance, phagocytic function of macrophages,lymphocyte proliferation, hemolysin value of blood serum and NK activity were increased markedly (P < 0.05or P < 0.05). Conclusion: RTP1 has an obvious protective effects on damage in γ-ray radiated mice.     

松针叶绿素-胡萝卜素软膏对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及其对免疫功能的影响

目的探讨松针叶绿素-胡萝卜素软膏对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及其对免疫功能的影响,为其进一步研发提供实验依据。方法采用小鼠移植性S180肉瘤模型,观察和测定松针叶绿素-胡萝卜素软膏(400、600、800 mg/kg)单独给药和联合环磷酰胺给药时的抑瘤率和免疫器官指数,并通过测定荷瘤小鼠血清半数溶血值、廓清指数以及吞噬系数来评价其对免疫功能的影响。结果松针叶绿素-胡萝卜素软膏中、高剂量组有显著抑瘤效果(P<0.05,P<0.01),低、中剂量组对环磷酰胺有显著的协同增效作用(P<005,P<0.01)。松针叶绿素-胡萝卜素软膏可显著提高荷瘤小鼠以及环磷酰胺化疗导致的血清半数溶血值(P<0.01)、廓清指数K和吞噬系数α值下降(P<0.05)。结论松针叶绿素-胡萝卜素软膏能抑制小鼠移植性S180肉瘤生长,提高环磷酰胺化疗效果,其机制可能与增强机体免疫功能有关。     

Enhanced antitumor immune responses of IL-2 gene-modified tumor vaccine by combination with IL-1 and low dose cyclophosphamide.

To enhance the antitumor immunity induced by IL-2 gene-modified tumor vaccine, we proposed a combined protocol to treat tumor-bearing mice using IL-2 gene-modified tumor vaccine in combination with IL-1 and low-dose Cyclophosphamide(Cy). After treatment with IL-2 gene-modified B16 melanoma cell vaccine alone, the pulmonary metastases of tumor-bearing mice were reduced and their survival time was prolonged. The anti-metastases effect was improved when the vaccine was used in combination with IL-1 or low-dose Cy. The best therapeutic effect was achieved when the IL-2 gene-modified vaccine was combined with IL-1 and low-dose Cy. The cytotoxicity of the splenic CTL, NK, and the levels of IL-2, TNF secreted by splenocytes increased after tumor-bearing mice were treated with the IL-2 gene-modified tumor vaccine. The above antitumor immune functions were augmented more significantly when IL-1, low-dose Cy were used in combination with IL-2 genemodified tumor vaccine. These results demonstrated that the IL-2 gene modified vaccine could exert more potent anti-metastases effects when it is combined with IL-1 or/and low-dose Cy by activating the specific and non-specific antitumor immune responses more effectively.     

Immunological Characteristics of the Effector Cells Induced by a Combination Therapy with Cyclophosphamide and Allogeneic Lymphocytes

A significant inhibition of tumor growth was observed when sarcoma 180 (S180)-bearing ICR strain mice were treated by a combination therapy, with a low dose of cyclophosphamide (CY) and an inoculation of allogeneic lymphocytes collected from C57BL/6 mice. The growth-inhibitory effect was significantly increased by an inoculation of a relatively lower dose of allogeneic lymphocytes (1 × 10⁵ cells) and CY. The effector cells induced in the mice treated with CY and allogeneic lymphocytes expressed the Lyt 1.2, Lyt 2.2, IL-2R antigens on their membrane surface and did not express the H2KbDb (donor H-2) antigen, and they showed a specific cytostatic activity against S180 cells. These results strongly suggested that a combination therapy with a low dose of CY with an inoculation of allogeneic lymphocytes augmented an induction of specific cytotoxic T lymphocytes in the tumor-bearing recipient mice.     

Th17细胞过继免疫治疗对荷弥漫大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的 探讨Th17细胞过继免疫治疗对荷弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)小鼠肿瘤生长的影响.方法 采用Mini MACS免疫磁珠分离纯化BALB/c小鼠脾来源的CD4+ CD62L+初始T细胞,采用"转化生长因子(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ抗体(anti-IFN-γ)、白细胞介素4抗体(anti-IL-4)、白细胞介素23(IL-23)"因子组合体外诱导小鼠Th17细胞分化,采用ELISA法测定Th17细胞产生IL-17水平;采用DLBCL细胞株SUDHL-4接种SCID小鼠建立DLBCL荷瘤小鼠模型;选择0、8、18d(3组,5只小鼠/每组)对荷瘤小鼠进行Th17细胞过继免疫治疗,计算肿瘤体积,观察荷瘤小鼠生存期.结果 小鼠在接种SUDHL-4细胞8d左右均形成瘤结节,成瘤率为100％.与对照组小鼠相比,3个过继免疫治疗组小鼠肿瘤体积均明显缩小(P＜0.05),荷瘤小鼠生存期均显著延长(P＜0.05).结论 Th17细胞过继免疫治疗对DLBCL荷瘤小鼠具有抗肿瘤作用.