重组人内皮抑素对小鼠肺腺癌肿瘤血管生成及肺转移的抑制作用

目的观察酵母表达重组人内皮抑素(recombinant human endostatin, rhES)对小鼠肺腺癌LA795原位肿瘤微血管生成及肺转移的抑制作用。方法对含有人内皮抑素基因的重组酵母菌株进行诱导表达及纯化rhES;将接种LA795小鼠肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成两组,每组各10只,于接种后第6日起给予rhES和磷酸缓冲盐液(PBS)皮下注射,每日1次,连续14 d;观察两组小鼠原位肿瘤微血管生成情况及肺部肿瘤转移情况。结果经甲醇诱导酵母转化子表达rhES,并用肝素亲和层析的方法获得纯化的rhES;治疗结束后用免疫组化方法观察两组小鼠原位肿瘤微血管密度发现rhES治疗组肿瘤微血管密度明显小于PBS对照组(P<0.01);观察两组小鼠肺部发现rhES治疗组小鼠肺部未见有明显肿瘤转移病灶,而PBS对照组小鼠肺部可见大量散在肿瘤转移病灶;两组小鼠肺湿重比较具有显著性差异(P<0.01)。结论rhES具有良好的生物学活性,显著抑制了小鼠肺腺癌LA795肿瘤血管生成,并能有效抑制肿瘤的肺部转移。     

重组人内皮抑素对小鼠肺腺癌肿瘤血管生成及肺转移的抑制作用

目的：观察酵母表达重组人内皮抑素（recombinant human endostatin,rhES)对小鼠肺腺癌LA795原位肿瘤微血管生成及肺转移的抑制作用。方法：对含有人内皮抑素基因的重组酵母菌株进行诱导表达及纯化rhES;将接种LA795小鼠肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成两组，每组各10只，于接种后第6日起始予rhES和磷酸缓冲盐液（PBS）皮下注射，每日1次，连续14d；观察两组小鼠原位肿瘤微血管生成情况及肺部肿瘤转移情况。结果：经甲醇诱导酵母转化子表达rhES，并用肝素亲和层析的方法获得纯化的rhES；治疗结束后用免疫组化方法观察两组小鼠原位肿瘤微血管密度发现rhES治疗组肿瘤微血管密度明显小于PBS对照组（P＜0．01）；观察两组小鼠肺部发现rhES治疗组小鼠肺部未见有明显肿瘤转移病灶，而PBS对照组小鼠肺部可见大量散在肿瘤转移病灶；两组小鼠肺湿重比较具有显著性差异（P＜0．01）。结论：rhES具有良好的生物学活性，显著抑制了小鼠肺腺癌LA795肿瘤血管生成，并能有效抑制肿瘤的肺部转移。     

人内皮抑素在毕赤酵母中的表达、纯化及其对小鼠肺腺癌LA795细胞生长的抑制

目的通过基因重组技术获得能高效分泌表达人内皮抑素的毕赤酵母菌株;观察纯化的重组人内皮抑素(rhES)对小鼠肺腺癌LA795生长的抑制作用。方法 利用氯化锂转化法将人内皮抑素基因整合入毕赤酵母基因组,获得可分泌表达人内皮抑素(endostatin)的菌株。用肝素亲和层析的方法纯化目的蛋白。观察人内皮抑素对碱性纤维生长因子(bFGF)刺激的人血管内皮细胞系ECV－304细胞增殖的作用。将接种LA795肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成2组,分别给予rhES和磷酸缓冲盐液(PBS)皮下注射,每日1次,连续14d。观察2组小鼠肿瘤生长情况。结果经筛选获得表达量较高的转化菌株,其表达的rhES能明显抑制bFGF刺激的人血符内皮细胞系ECV－304细胞的增殖,与对照组比较具有显苫差异(P＜0．001),动物实验表明其有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长(P＜0．001)。结论用毕亦酵母作为宿主分泌表达的rhES具有良好的生物学活性,能有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长。     

重组人白介素-2抑制小鼠LA795肺腺癌高转移株肺转移的研究

目的探讨不同剂量的重组人白介素-2抑制LA795肺腺癌高转移株皮下肿瘤生长及肺转移的作用.方法皮下接种LA795肺腺癌高转移株于T739同系小鼠,腹腔注射不同剂量的重组人白介素-2,观察抑制肿瘤生长及肺转移的作用.结果rhIL-2 1.5×105U/d能明显地抑制肿瘤生长.肿瘤体积,瘤体湿重以及肺转移结节数较对照组小和少,抑制率分别达66.03%、76.03%、97.54%(P＜0.01).小剂量rhIL-2 2.6×103U/d,抑制肿瘤生长的抑制率仅为5.13%(P＞0.05),而对肺转移有68.75%的抑制率(P＜0.01).结论大剂量的rhIL-2仅能有效地抑制LA795肺腺癌的肺转移,且能较好地抑制肿瘤生长.小剂量的rhIL-2仅对LA795肺腺癌转移有一定的抑制作用.因此rhIL-2治疗肿瘤应使用大剂量.     

人内皮抑素在毕赤酵母中的表达、纯化及其对小鼠肺腺癌LA795细胞生长的抑制

目的：通过基因重组技术获得能高效分泌表达人内皮抑素的为酵母菌株；观察纯化的重组人内皮抑素（rhES)对小鼠肺腺癌LA795生长的抑制作用，方法：利用氯化锂转化法将人内皮抑素基因整合入毕赤酵母基因组，获得可分泌表达人内皮抑素（endostatin)的菌株，用肝素亲和层析的方法纯化目的蛋白。观察人内皮抑素对碱性纤维生长因子（bFGF)刺激的人血管内皮细胞系ECV－304细胞增殖的作用。将接种LA795肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成2组，分别给予rhES和磷酸缓冲盐液（PBS）皮下注射，每日1次，连续14d，观察2组小鼠肿瘤生长情况，结果：经筛选获得表达量较高的转化菌株，其表达的rhES能明显抑制bFGF刺激的人血管内皮细胞系ECV－304细胞的增殖，与对照组比较具有显著差异（P＜0．001），动物实验表明其有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长（P＜0．001），结论：用毕赤酵母作为宿主分泌表达的rhES具有良好的生长学活性，能有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长。     

Augiostatin对小鼠肺腺癌LA795的生长抑制作用

为探讨ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ（血管抑制因子）对小鼠肺腺癌ＬＡ７９５的治疗作用,将４×１０５ＬＡ７９５细胞接种于Ｔ７３９小鼠皮下,细胞接种后第１４ｄ,治疗组给予ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ腹腔注射,对照组注射等量ＰＢＳ液,共１４ｄ,观察肿瘤大小及动物生存期。结果：治疗组肿瘤直径由２．３５±０．１６ｃｍ缩小至０．９７±０．３４ｃｍ,而对照组瘤体直径由２．２６±０．１２ｃｍ增至４．０２±０．３６ｃｍ,两者之间差异显著（Ｐ＜０．０１）。治疗组平均生存期７６．６ｄ,对照组为３８．４ｄ,统计学分析差异显著（Ｐ＜０．０１）。结论：ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ可以抑制ＬＡ７９５细胞所致小鼠实验性肿瘤的生长,显著延长动物生存期,可能是治疗恶性肿瘤的一种全新的有效物质。     

HSV-TK/ACV治疗小鼠肺腺癌LA795及其与机体免疫系统的关系

目的 :探讨HSV -TK/ACV(GCV)系统对小鼠肺腺癌细胞LA795治疗作用及其与机体免疫系统的关系。方法 :用重组逆转录病毒载体上清感染体外培养的小鼠肺腺癌细胞LA795 ,然后用新霉素类似物G41 8进行筛选 ,得到转染HSV -TK基因的LAtk细胞 ,分别将LA795细胞和LAtk细胞接种于小鼠皮下 ,观察ACV治疗后肿瘤生长情况、抗免疫功能以及对动物生存期的影响。结果 :体外转染HSV -TK基因的LAtk细胞获得了对ACV的敏感性 ,接种LAtk细胞的治疗组动物在ACV治疗后出现了肿瘤体积缩小 ,而对照组接种LA795细胞的动物在ACV治疗后肿瘤体积逐渐增大 ,两者具有显著差异 (P<0 .0 1 )。治疗组动物生存期为 5 1 .8d ,对照组动物生存期平均为 1 5 .9d ,两者具有显著差异 (P <0 .0 1 )。光镜下观察治疗组肿瘤组织及血管周围有大量的淋巴细胞浸润 ,计数 75个高倍视野中的淋巴细胞为 1 1 6.0 3± 5 2 .95 ,而对照组为 1 0 .41± 5 .5 2 ,二者具有显著差异 (P <0 .0 1 )。超微结构观察显示淋巴细胞群攻击癌细胞现象 ,癌细胞出现凋亡征象。结论 :①HSV -TK/ACV系统可以显著杀伤小鼠肺腺癌细胞LA795 ,使肿瘤消退 ,动物生存期延长 ,提示该系统有良好的治疗效果和应用前景。②HSV -TK/ACV系统治疗肿瘤除了其直接杀伤作用外 ,尚有机体免疫系统的     

重组人内皮抑素在酵母中的表达及对人肺腺癌Astc-a-1细胞生长的抑制

目的在一种高效外源基因表达系统———毕赤酵母系统表达重组人内皮抑素,评价纯化的内皮抑素对人肺腺癌Astc-a-1细胞生长抑制的作用,为临床研究做进一步的探讨。方法和结果在酵母系统成功表达了重组人内皮抑素(re-combinant human endostatin),经肝素亲和层析得到了较高纯度的内皮抑素,经过筛选的人内皮抑素能够有效抑制ECV-304细胞的增殖,并与对照组有非常显著性差异(P<0.01);动物实验表明其能够有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1细胞的生长,统计学分析有非常显著性差异(P<0.01)。结论酵母系统内能够大量表达具有生物学活性的重组人内皮抑素,能在人体外有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1的生长,对其应用于临床具有重要意义。     

内皮抑素及其对血管生成抑制作用的研究进展

目的 对内皮抑素的来源、表达、结构、作用机制以及其对血管生成的抑制作用研究进展作一综述.方法 对近几年的相关资料进行总结、归纳.结果与结论 国内外对于内皮抑素对各种肿瘤的抑制作用已有了大量的研究,经证实内皮抑素作为一类内源性血管生成抑制剂,对于各类肿瘤有较好的治疗作用,具有良好的应用前景.     

Effect of recombinant human endostatin on endometriosis in mice

Background Direct and indirect evidences have suggested that angiogenesis is a prerequisite for the development of endometriosis. Aiming at offering experimental evidences for anti-angiogenesis therapy, we transplanted the eutopic endometrium from patient with endometriosis into the severe combined immunodeficiency disease (SCID) mice, to evaluate the effect of the endostatin on the growth and angiogenesis of the established endometriosis lesions in SCID mice model.Methods Eutopic endometrium of women with endometriosis was transplanted into the SCID mice. The mice were randomized into treatment (n=10) and control groups (n=10). Two weeks after the implantation of endometrium fragment, the treatment group was injected with recombinant human endostatin YH-16 into the peritoneal cavity (2 mg·kg(-1)·d(-1)), whereas the control group received equivalent volume of PBS (200 &micro;l/d). The volume of endometriotic lesions in SCID mice was measured every three days, and all the treatment lasted for 14 days. Immunohistochemistry was used to determine microvessel density (MVD) and the expression of VEGF. The results were analyzed by t test and χ(2) test to value the treating effect. Results Compared with the control group, growth of endometriosis lesion was reduced in the mice treated with YH-16. Statistically significant differences in the volume and weight of the ectopic lesions were observed between the treatment and the control groups (P&lt;0.05). Microscopical examination showed that after being treated with YH-16, the volume of the endometrial tissues decreased, the glands depauperated, and the glandular epithelium partially degenerated. Necrotic debris was observed in the endometrial stroma. MVD and expression of VEGF in the treatment group were significantly lower than those in the control group (P&lt;0.05). Conclusions Recombinant human endostatin affects the maintenance and growth of endometriotic tissues by inhibiting angiogenesis and reducing the expression of VEGF in ectopic lesion. The angiostatic agent may be promising as a therapy for endometriosis.     

苏拉明联合紫杉醇对LA795肺腺癌小鼠移植瘤生长的抑制作用及机制

目的观察苏拉明联合紫杉醇对LA795肺腺癌小鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法将32只皮下接种LA795肺腺癌细胞T739小鼠随机分为对照组、紫杉醇组、苏拉明组和联合组,每组8只。观察移植瘤生长情况,饲养24 d后处死小鼠,剥离皮下移植瘤,采用免疫组化检测移植瘤组织中血管生成素-2(Ang-2)和微血管密度(MVD)。结果紫杉醇组、苏拉明组和联合组移植瘤的生长明显受到抑制,以联合组生长最慢。对照组移植瘤质量大于其他3组(P<0.05)。紫杉醇组和苏拉明组移植瘤质量大于联合组(P<0.05);苏拉明组、紫杉醇组及联合组的抑瘤率分别为22.638%、25.629%及54.109%,其Q值为1.274(>1.15)。苏拉明组和联合组移植瘤组织内Ang-2的表达均低于对照组和紫杉醇组(P<0.05)。对照组移植瘤组织内MVD高于其他3组(P<0.05);紫杉醇组或苏拉明组移植瘤组织内MVD高于联合组(P<0.05)。移植瘤组织中Ang-2表达、MVD与移植瘤质量均呈正相关(r=0.468、0.526,P<0.01)。结论苏拉明可下调肿瘤组织Ang-2表达,抑制肿瘤内微血管形成,与紫杉醇联合对LA795肺腺癌小鼠皮下移植瘤生长发挥协同抑制作用。     

重组人血管内皮抑制素注射液治疗2例ALK融合肺腺癌并心包转移体会并文献复习

目的 提高重组人血管内皮抑制素注射液治疗间变性淋巴瘤激酶(ALK)融合肺腺癌并心包转移的认识.方法 分析遵义医科大学附属医院2017—2018年收治的2例肺腺癌并心包转移的患者,以肺腺癌、重组人血管内皮抑制素注射液、心包转移为检索词检索中国生物医学文献服务系统(SINOMED)、万方医学数据库及维普信息资源系统,以...     

重组人血管内皮抑制素通过改善乏氧增强肺腺癌放射敏感性的体外实验研究

目的 研究重组人血管内皮抑制素(恩度)改善乏氧、增强肺腺癌细胞系A549的放射敏感性效果.方法 ①在常氧和乏氧培养下,以不同浓度的恩度与A549细胞分别处理不同的时间,用MTT法分别选择生长抑制率为20％的药物浓度(IC20);②将A549细胞分别在常氧和乏氧培养下分为对照组和恩度组,加药培养24h后,分别给予高能X线0、2、4、6、8 Gy剂量照射.集落形成率实验检测各组在不同条件下的细胞存活分数,根据多靶单击模型拟合细胞存活曲线,求出各组的平均致死剂量(D0)、准域剂量(Dq)、外推数N、照射2Gy时的细胞存活率(SF2)、放射增敏比(SER);③将A549细胞分别在常氧和乏氧培养下,分成对照组、单放组、恩度组和联合组.4组分别处理24h后,通过流式细胞仪对各组凋亡细胞进行定量检测,得出各组的凋亡率.结果 ①恩度可以抑制常氧和乏氧培养下的A549细胞的生长,且呈时间-剂量依赖性,IC20分别是(330.34±4.18) mg/L和(437.23±3.32)mg/L;②在多靶单击模型中,在常氧下对照组和恩度组的D0值分别是1.36、1.30,Dq值分别是1.02、1.02;在乏氧培养下对照组和恩度组的D0值分别是1.70、1.39,Dq值分别是2.45、1.03.常氧和乏氧组恩度的SER分别为1.04和1.22;③在常氧培养下,对照组、单放组、恩度组和联合组的凋亡率分别为(15.91±0.57)％、(42.70±0.37)％、(19.90±0.48)％、(41.52±0.38)％,联合组和单放组比较,差异无统计学意义(F=1.22,P=0.479);在乏氧培养下4组的凋亡率分别为(16.72±0.67)％、(30.11±0.95)％、(26.71±0.62)％、(36.34±0.71)％,联合组和单放组比较,差异有统计学意义(F=3.34,P=0.036).结论 恩度在常氧培养下没有放射增敏作用,细胞凋亡率没有明显增加;而在乏氧培养下能提高A549的放射敏感性,而且细胞凋亡率明显增加.