血浆中葛根素的高效液相色谱测定法及其在狗体内的药代动力学

为阐明葛根素的代谢规律,建立了血浆中葛根素的高效液相色谱荧光检测法。用YWG-C₁₆为固定相,甲醇—水—0.1mol·L^-1磷酸缓冲液(pH7.4)(450∶522.5∶27.5)为流动相,大豆甙元作内标,以峰高比计算含量。葛根素的平均回收率为95.3%,RSD为4.8%;最低检测量为0.04ng,相当于10ng·mL^-1血浆。方法灵敏、特异、简便、快速。狗静注2.25mg·kg^-1葛根素的血药浓度—时间曲线符合开放二室模型,T_1/2α及T_1/2β分别为6.0及57.4min。     

血清中美西律的柱前衍生化-液相色谱荧光检测

目的建立血清中盐酸美西律的柱前衍生化-液相色谱荧光检测法。方法血清样品用丙酮液直接沉淀蛋白后,定量加入荧光胺丙酮溶液,得盐酸美西律的荧光衍生物。采用Alltima C₁₈ (150 mm×4.6 mm,5 μm)为分析柱;流动相为甲醇-水-2.4 mol·L^-1二乙胺-磷酸缓冲液(pH 4.0)(70∶28∶2);荧光检测激发波长(E_x)为392 nm,发射波长(E_m)为480 nm。盐酸美西律的保留时间为6.5 min。结果盐酸美西律在0.100～6.400 mg·L^-1线性关系良好。本法的最低检测质量浓度为5 μg·L^-1,(S/N≥4)。批内、批间精密度为1.34%～5.31%。结论本法操作简便、有良好的灵敏度和专一性,可满足盐酸美西律的临床血药浓度的监测和药代动力学研究。     

氯雷他定血药浓度的HPLC荧光检测法及生物等效性研究

目的建立高效液相色谱法荧光检测血浆中氯雷他定(loratadine)含量的方法,以评价氯雷他定的相对生物利用度。方法色谱柱为Alltech C₁₈,4.6 mm×150 mm;流动相为乙腈-水-冰醋酸-三乙胺(90∶100∶6∶0.15);流速为1 mL·min^-1;荧光检测器测定波长,E_x＝274 nm,E_m＝450 nm。结果HPLC测定线性范围为0.2～30 μg·L^-1,最低定量限0.2 μg·L^-1,方法回收率为96％～98％。人体生物利用度结果表明,实验片、胶囊与对照片间的AUC,t_max,C_max和t_1/2β均无显著性差异(P>0.05),两者的相对生物利用度分别为107%±17%和100%±14%。AUC和C_max经可信区间法检验生物等效。结论3种制剂生物等效。     

柱前衍生-高效液相色谱荧光法测定大鼠血浆中硫普罗宁

建立了测定大鼠血浆中硫普罗宁含量的柱前衍生-高效液相色谱荧光法。血浆样品经二硫苏糖醇(DTT)还原后，再经N-(1-芘)马来酰亚胺(NPM)衍生化后进样测定。以0.2%乙酸(含0.015 mol·L^-1磷酸二氢钾)-乙腈(56∶44)为流动相，采用Kromasil C₁₈色谱柱分离，在λ_ex=340 nm，λ_em=375 nm下荧光检测。硫普罗宁线性范围为0.1～10.0 μg·mL^-1，定量下限为0.1 mg·L^-1，日内、日间精密度(RSD)分别为5.3%～10.8%和7.0%～10.8%，提取回收率在73.7%～79.7%。大鼠单剂量给予硫普罗宁后，药代动力学行为符合二室模型。该法准确可靠，专属性强，适用于硫普罗宁的药代动力学研究。     

HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度

目的 建立测定人血浆中氯氮平高效液相色谱法。方法 血浆样品经适当处理,色谱柱为Vova-pak C₁₈柱,流动相为0.5%三乙胺溶液-乙腈(74∶26,v/v),流速1 ml·min^-1,检测波长215 nm,安定为内标。结果 测定方法在50～1600μg·ml^-1范围内,氯氮平线性关系良好(r=0.9992);日内、日间相对标准误差(RSD)在3.6%～5.7%之间。结论 本方法快速、简便、准确,可用于血药浓度监测。     

应用UPLC研究亚胺培南在大鼠体内的药动学

目的 建立灵敏的超高效液相色谱法测定大鼠血浆中亚胺培南的浓度。方法 血浆样品采用乙腈蛋白沉淀方法,色谱柱为Dikma Diamonsil C₁₈;以0.1 mol·L^-1磷酸氢二钠(85%磷酸调pH至7.0)-甲醇(45∶55)为流动相;流速为1.0 mL·minL^-1;柱温为35 ℃;检测波长为295 nm。结果 亚胺培南血药浓度在0.5～100 μg·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 7),最低检测限为0.5 μg·mL^-1;日内、日间RSD均≤10％,提取回收率在80.5％~81.2％之间。6只SD大鼠单剂量口服给予亚胺培南后药动学参数分别为：C_max(75.3±6.2)μg·mL^-1;t_1/2(6.72±1.58)h;AUC_0-t(694.1±28.3)h·μg·mLL^-1;AUC_0-∞(746.2±32.9) h·μg·mL^-1。结论 本方法简便、准确、灵敏、专属性强,同样适用于人血浆中亚胺培南浓度的测定及其药动学研究,对于评价亚胺培南疗效和安全性有重要意义。     

高灵敏度LC-MS/MS法测定犬血浆中的坦洛新

犬口服盐酸坦洛新控释片后血浆药物浓度C_max小于10 ng·mL^-1，需建立测定犬血浆中坦洛新的高灵敏度液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。血浆样品加入内标苯海拉明，用正己烷-二氯甲烷(2∶1)萃取后，反相C₁₈色谱柱分离，以甲醇-乙腈-甲酸铵(30∶40∶30，v/v/v)为流动相，流速为0.4 mL·min^-1。选用大气压化学离子化源(APCI)三重四极杆串联质谱仪，以选择反应监测方式进行检测，用于定量分析的离子反应分别为m/z 409→228(坦洛新)和m/z 256→167(苯海拉明)。坦洛新线性范围为0.02～50 ng·mL^-1，定量下限为0.02 ng·mL^-1。批内、批间精密度(RSD)均小于9.72%，准确度(RE)在-2.61%～8.82%。本方法灵敏度高，专属性强，用于犬口服盐酸坦洛新控释片后的药代动力学研究。     

固相萃取高效液相色谱法测定人血浆中依那普利浓度

建立了用固相萃取高效液相色谱法测定依那普利血药浓度的方法。色谱柱为200mm×4.6mm不锈钢柱,内填 Spherisorb C₈(5μm),流动相为乙醇—水—10% H₃PO₄—三乙胺(30∶70∶1.5∶0.1);流速1.0ml·min^-1,紫外检测波长215nm。血样用固相小柱预处理。此法线性范围25～150ng·mL^-1。最小检测浓度1.5ng·mL^-1,日内及日间误差<8.8%,平均回收率>91.6%。用此法测定了8例健康志愿者po国产依那普利片后的血药浓度并计算了药代动力学参数。     

人血浆中尼莫地平的毛细管气相色谱电子捕获检测法及药代动力学

目的：建立测定人血浆中尼莫地平的毛细管气相色谱电子捕获检测法,并用本法研究尼莫地平片剂在健康人体内的药代动力学及相对生物利用度。方法：色谱柱为25 m×0.2 mm ID OV-101熔融石英毛细管柱,检测器为⁶³Ni电子捕获检测器。内标为尼群地平,血浆样品在碱性条件下用正己烷—乙酸乙酯(1∶1)提取。结果：浓度在2.0～150.0 ng.ml^-1与峰面积比呈良好线性关系,γ=0.99989。人血浆中尼莫地平的最低检出浓度为0.1 ng.ml^-1,方法重现性好,提取回收率大于80%。10名志愿者随机交叉口服单剂量100 mg二种国产尼莫地平片剂后,以本法测定其体内过程符合一室模型。二种片剂的AUC_0→∞。C_max,T_max均无显著差异。结论：尼莫地平血药浓度测定结果表明两种尼莫地平片剂生物等效,A片剂对B片剂的相对生物利用度为102.0%。     

HPLC-FD同时测定人血浆中沙库巴曲缬沙坦3种成分的浓度及其应用

目的 建立人血浆样品中沙库巴曲、缬沙坦及其主要代谢产物LBQ-657的高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FD)分析方法。方法 采用乙腈沉淀法处理血浆样品，SN-38作为内标进行内标法定量。采用Agilent Eclipse SB-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，荧光检测器；以甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(pH 3.0)(67∶33)为流动相；流速1.0 mL·min^–1；柱温25 ℃；进样量20 μL。采用多波长法，在0~6 min，λ_EX=380 nm，λ_EM=430 nm，定量检测SN-38；6~9.4 min，λ_EX=255 nm，λ_EM=314 nm，定量检测LBQ-657；9~12 min，λ_EX=255 nm，λ_EM=374 nm，定量检测缬沙坦；12~18 min，λ_EX=255 nm，λ_EM=314 nm，定量检测沙库巴曲。5例患者口服100 mg沙库巴曲缬沙坦钠片后1.5，3 h分别采样，检测血浆中沙库巴曲、缬沙坦及LBQ-657浓度。结果 人血浆样品中各成分在0.1~20 μg·mL^-1内线性关系良好(r>0.999)，低、中、高质控血浆样品的提取回收率为80.30%~96.45%。日内、日间精密度、准确度和稳定性均符合生物样品分析要求。结论 建立的HPLC-FD定量分析方法快速、灵敏、准确，可用于人血浆中沙库巴曲、缬沙坦及其主要代谢产物LBQ-657的含量测定。     

十大功劳属部分植物茎中生物碱的高效毛细管电泳法测定

目的：对十大功劳属植物中3种生物碱的含量进行测定,为其内在质量的评价提供科学依据。方法：运用毛细管区带电泳(CZE)模式,以马钱子碱为内标化合物,测定了小檗碱、巴马亭和药根碱的含量。背景缓冲溶液为0.1 mol.L^-1磷酸缓冲液(pH 7.0)与甲醇(2∶1)的混合体系。线性范围：盐酸小檗碱为4.9～498.6 μg.mL^-1(γ=0.9990);盐酸巴马亭为5.0～504.9 μg.mL^-1(γ=0.9996);盐酸药根碱为5.1～505.8 μg.mL^-1(γ=0.9984)。回收率：盐酸小檗碱为96.00%～101.66%;盐酸巴马亭为100.15%～102.97%;盐酸药根碱为96.68%～102.44%。结果：不同品种、不同产地、不同采集时间的植物中的生物碱含量均有较大差别。结论：高效毛细管电泳法是中草药质量控制的一种简便、快速、有效的方法。十大功劳属多种植物生物碱含量较高,可作为新的药用资源。     

反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定人工牛黄中多组分含量

目的 :建立人工牛黄中多组分色谱分离条件 ,并对除无机盐外各成分同时测定进行方法学考察。方法 :用反相高效液相色谱 蒸发光散射检测法 ,蒸发光散射检测器参数 :漂移管温度 10 5℃ ,雾化气体 (N2 )流速 :2 0 5SLPM。结果 :在选定色谱条件下 ,胆固醇、各种胆汁酸及无机盐在室温下可达很好分离 ,胆酸与猪去氧胆酸的非衍生分离尚属首次。除无机盐外 ,各物质色谱峰面积与浓度呈良好线性关系 (γ >0 998)。 3个浓度水平的回收率测定值为 98 3 %～ 10 2 4 %。进样 2 0 μL组分最低检出量为 0 0 5～ 0 10 6μg。 结论 :蒸发光散射检测器与高效液相色谱法联用 ,可使不含生色团物质的分离、分析更为准确、灵敏。可为人工牛黄的质量控制提供更为科学的依据     

Rp-HPLC法测定血清中的抗生育甾体药物利洛司酮

以RU₄₈₆为内标,建立了血清样品中新型抗孕激素甾体药物利洛司酮(lilopristone)的反相高效液相色谱法。色谱分析条件为μBondapakC₁₈柱10μm,300mm×3.9mmID;流动相为甲醇-二氯甲烷-10mmol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH4.0)(67:5:28v/v);紫外检测波长为302nm。利洛司酮的检测限为1ng(S/N≥4:1)。血清样品经二次液一液超声振荡萃取后,得到了较好的净化。血清样品中利洛司酮的方法回收率为103.3%,日内精密度及日间精密度平均RSD为3.51%及2.92%。在浓度为10～1000ng·ml^-1血清范围内呈线性关系。     

Determination of ketorolac in human serum by high-performance liquid chromatography

A high-performance liquid chromatographic (HPLC) assay has been developed for the determination of ketorolac in human serum using a new extraction method with a good recovery. Human serum samples (1.0 ml) spiked with known concentrations of ketorolac tromethamine and 10 μg of ketoprofen as the internal standard (IS) were acidified with 200 μl of 1N HCl and extracted with 7 ml ofn-hexane-ether (7∶3 v/v). Extracts were centrifuged and organic layer was back-extracted with 400 μl of 0.1% tromethamine solution. Twenty μl of centrifuged aqueous layer was injected onto a reversed-phase octyl column and eluted with a mixture of acetonitrile, water, methanol, and triethylamine [35∶55∶10∶0.1 (v/v), pH 3.0] at a flow rate of 1.0 ml/min. Ultraviolet detection of ketorolac and IS was carried out at 300 nm. The calibration curve obtained using peak area ratios showed a good linearity (in concentration range 10–150 ng/ml r²=0.9944; in range 50–2000 ng/ml, r²=0.9998). The mean intra-day accuracy and precision for this HPLC method were found to be 3.6 and 3.7%, respectively. The mean inter-day accuracy and precision were found to be 4.0 and 3.7%, respectively, in the concentration range 50–2000 ng/ml. The recovery of ketorolac from serum was 92.0 (±5.7)% at the concentration of 100 ng/ml. This method proved to be readily applicable to the assay of ketorolac in human serum.     

三维HPLC法同步测定犬血浆中的葛根素及阿魏酸

以对 羟基苯甲酸为内标 ,甲醇 水 醋酸 (5 6 2 5mol/L ) (39∶5 8∶3 ,v/v)为流动相 ,InertsilODS 3色谱柱 (15 0mm× 4 6mm ,5 μm)为固定相 ,流速 0 9mL/min。以二极管阵列检测器同时获取 2 48nm和 32 1nm两个波长下的数据 ,并通过三维图观察其紫外吸收定性 ,以沸水浴法处理血浆样品。结果 :葛根素和内标及阿魏酸分离完全 ,葛根素在 0 2 35 4～ 1 883μmol/L范围内线性关系良好 (r =0 9943) ,变异系数 <10 % ,平均回收率为 10 1 0 2 % ,最低检测限为 0 33ng ,最低检测浓度为 0 0 396 μmol/L;阿魏酸则在 1 0 341～ 5 35 6 μmol/L范围内线性关系良好 (r =0 9942 ) ,变异系数 <10 % ,平均回收率为 10 0 88% ,最低检测限为 0 45ng ,最低检测浓度为1 115 9μmol/L。此法可用于不同波长下同步以内标法测定血浆中两种或多种成分     

HPLC法同时测定沉香舒郁丸中四种成分的含量

目的建立波长切换联合梯度洗脱HPLC法同时测定沉香舒郁丸中和厚朴酚、厚朴酚、木香烃内酯和去氢木香内酯4个成分的含量。方法采用Phenomenex C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-0.5%磷酸溶液(B)为流动相,进行梯度洗脱,流速0.9 mL/min,检测波长:294 nm(和厚朴酚、厚朴酚),225 nm(木香烃内酯、去氢木香内酯),柱温30℃,进样量10μL。结果和厚朴酚、厚朴酚、木香烃内酯和去氢木香内酯4个成分的质量浓度分别在4.30~86.00μg/mL(r=0.999 8)、4.46~89.20μg/mL(r=0.999 5)、5.12~102.40μg/mL(r=0.999 9)、6.18~123.60μg/mL(r=0.999 2)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率及相应的RSD分别为98.57%(1.08%)、99.93%(0.73%)、97.26%(1.24%)、97.65%(0.99%);重复性良好,RSD≤1.75%;精密度良好,RSD≤1.06%。供试品溶液在室温条件下24 h内稳定,RSD≤1.11%。平均加样回收率在97.26%~99.93%,RSD≤1.24%。结论所建立的方法专属性好,准确度高,灵敏度高,快速,为沉香舒郁丸的质量控制提供依据。     

Simultaneous determination of tetrahydropalmatine,protopine, and palmatine in rat plasma by LC-ESI-MS and its application to a pharmacokinetic study

A sensitive and specific liquid chromatography-electrospray ionization-mass spectrometry (LC-ESI-MS) method has been developed and validated for the simultaneous quantification of tetrahydropalmatine, protopine and palmatine in rat plasma using phenacetin as the internal standard (IS). Two hundred microliters plasma samples were extracted by dichloromethane under a strong basic condition. The analytes were separated by a C18 column and detected with a single quadrupole mass spectrometer. The used mobile phase was acetonitrile–water (40:60, v/v) containing 5 mM ammonium acetate and 0.2% glacial acetic acid. Detection was carried out by positive electrospray ionization in selected ion reaction (SIR) mode at m/z 356.6 for tetrahydropalmatine, 354.6 for protopine, 352.6 for palmatine and 180.4 for the IS, respectively. The method was validated over the concentration range of 1.00–500 ng mL⁻¹ and the lower limit of quantification (LLOQ) was 1.00 ng mL⁻¹ for all three analytes. The intra- and inter-day precision values were less than 9% relative standard deviation (R.S.D.), and the relative error ranged from −7.4 to 4.8%. The extraction recoveries were on average 91.42% for tetrahydropalmatine, 84.75% for protopine, 57.26% for palmatine, and 83.18% for IS. The validated method was successfully applied to a pharmacokinetic study of tetrahydropalmatine, protopine and palmatine in rats after oral administration of Rhizoma Corydalis Decumbentis extract.     

HPLC波长切换法同时测定宝宝乐中四种成分的含量

目的建立HPLC波长切换法同时测定宝宝乐中芍药内酯苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量。方法采用Venusil MP C_(18)(250 mm×4.6 mm,5.0μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,进行梯度洗脱,检测波长分别为230 nm(芍药内酯苷、芍药苷)和254 nm(毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素),流速0.9mL/min,柱温30℃,进样量为10μL。结果芍药内酯苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素4个成分的质量浓度分别在4.18~83.60μg/mL(r=0.999 8)、5.14~102.80μg/mL(r=0.999 5)、5.60~112.00μg/mL(r=0.999 9)、4.72~94.40μg/mL(r=0.999 3)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率及相应的RSD分别为99.66%(0.96%)、98.17%(1.39%)、97.00%(1.48%)、99.92%(0.58%);精密度良好,RSD≤1.06%;重复性良好,RSD≤1.69%。供试品溶液在室温条件下12 h内稳定,RSD≤1.12%。结论所建立的方法灵敏度高、快速、专属性好、准确度高,为宝宝乐的质量控制提供了依据。     

RP-HPLC法测定黄连上清片中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀的含量

目的:建立测定黄连上清片中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为AgilentC18反相柱,流动相为乙腈-25mmoL·L-1庚烷磺酸钠和50mmoL·L-1磷酸二氢钾溶液(含0.14%三乙胺,磷酸调pH至3.0)=30:70,检测波长为348nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,进样量为5μL。结果:盐酸小檗碱检测浓度在40.48～141.70μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率为100.34%,RSD=1.14%;盐酸药根碱检测浓度在6.04～14.08μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率为99.70%,RSD=1.02%;盐酸巴马汀检测浓度在10.10～30.30μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率为100.02%,RSD=1.17%。3批样品中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀的含量分别为每片40.64、6.09、10.50μg,40.35、6.05、10.43μg,40.26、6.03、10.40μg。结论:本方法灵敏、准确,专属性强,重复性好,可作为黄连上清片的质量控制方法。     

RP-HPLC同时测定丙戊酸钠和卡马西平的血药浓度

目的：建立同时测定血清中卡马西平（CBZ）及丙戊酸钠（VPA）的高效液相色谱法。方法：0.1mL样本血清经1mL二氯甲烷：异丙醇（95∶5）混合液提取,以氟西泮（FZP）为内标,流动相为乙腈：磷酸盐缓冲液（30∶70）,色谱柱Agilent ZORBAX Extend-C18（4.6mm×150mm,5μm）,检测波长210nm。结果：在一定浓度范围内（CBZ：0.47～30.00μg.mL-1,VPA：1.25～80.00μg.mL^-1）被测药物与内标的峰面积之比与浓度呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.5%、97.5%,日内和日间精密度均小于3%。结论：本方法操作简便,精密度好,回收率高。经临床用于常用抗癫痫药血药浓度的监测,其结果稳定可靠,可为临床进行群体药动学研究及实施个体化给药提供真实可信的资料。