hMAM mRNA在检测乳腺癌外周血微小转移中的应用

目的 探讨乳腺组织特异性基因hMAM mRNA作为检测乳腺癌血道微小转移指标的可能性。方法 采用巢式PCR结合荧光定量PCR,对63例乳腺癌患者、8例乳腺增生患者、5例乳腺纤维腺瘤患者、25例其他癌患者以及31例健康志愿者的外周血进行检测。结果63例乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA阳性率30．2％（19／63）,手术后阴转率为31．6％（6／19）。乳腺良性疾病、胃癌、大肠癌、食管癌、肺癌、卵巢癌患者外周血中均阴性,而31例健康献血员中有1例阳性。hMAM mRNA表达随肿瘤分期进展阳性率增高,但与肿瘤分期、ER和PR状态无关（P＞0．05）。结论 hMAM mRNA特异表达于乳腺癌患者外周血,有可能作为检测乳腺癌血道微小转移的指标。     

hMAM mRNA的定量检测对乳腺癌外周血微转移的诊断价值

目的:建立SYBR Green I实时定量逆转录PCR(Real-Ti me QuntitativeRT-PCR,Q-RT-PCR)技术定量检测人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)mRNA的技术,并应用于检测外周血hMAM mRNA,探讨其诊断乳腺癌患者外周血微转移的可行性及意义。方法:应用自行建立的SYBR Green I Q-RT-PCR检测技术,检测61例乳腺癌、33例乳腺良性肿瘤患者以及11例健康志愿者外周血hMAM mRNA的表达量,分析其表达水平与乳腺癌临床病理特征及ER、PR及HER-2表达的关系。结果:61例乳腺癌患者外周血中10例检出hMAM mRNA表达,其癌组织HER-2阳性者占8例,HER-2阴性组未见hMAM mRNA阳性表达。HER-2阳、阴性组间外周血hMAM mRNA表达,差异具有统计学意义,P=0.028;与其他临床、病理特征无相关性,P>0.05。HER-2阳性患者外周血中hMAM mRNA表达量范围1.98×102~6.21×103,中位数4.0×102,在临床、病理特征间差异无统计学意义,P>0.05。乳腺良性肿瘤及健康志愿者外周血hMAM mRNA均阴性。结论:SYBR GreenI Q-RT-PCR技术可定量检出乳腺癌患者外周血hMAM mRNA;乳腺癌患者外周血hMAM mRNA表达与其乳腺癌组织HER-2表达相关。定量检测hMAM mRNA可作为乳腺癌外周血微转移的重要方法。     

hMAM mRNA表达情况与乳腺癌的关系

目的 探讨人乳腺珠蛋白(hMAM)mRNA在乳腺癌患者外周血中的表达情况及意义.方法 选取87例乳腺癌患者、70例乳腺良性肿瘤患者和50例健康志愿者,采用巢式-逆转录-聚合酶链反应检测其外周血hMAM mRNA的表达水平.结果 乳腺癌患者的外周血hMAM mRNA阳性率为54.02%,高于乳腺良性肿瘤患者的1.43%和健康志愿者的0,差异均有统计学意义(P﹤0.05);乳腺良性肿瘤患者和健康志愿者的外周血hMAM mRNA阳性率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05).Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的乳腺癌患者的hMAM mRNA阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移的患者(P﹤0.05).乳腺癌患者化疗后的外周血hMAM mRNA阳性率为18.39%,低于化疗前的54.02%(P﹤0.05).结论 乳腺癌患者外周血hMAM mRNA的阳性表达与TNM分期和淋巴结转移情况有关,可为临床诊断和预后判断提供依据.     

乳腺癌患者外周血hMAM及SBEM检测及其临床意义

目的研究乳腺癌患者外周血人乳腺珠蛋白（hMAM）及乳腺上皮粘蛋白（SBEM）的表达及临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测58例乳腺癌患者外周血hMAM mRNA及SBEM mRNA的表达，并用健康志愿者及乳腺良性肿瘤患者各10例作为对照。结果hMAM及SBEM在58例乳腺癌患者外周血的阳性表达率分别为34.5%、25.9%，乳腺良性肿瘤和正常对照均无阳性表达，两者的阳性表达与患者的临床分期显著相关（P〈0.05），两者联合检测的总阳性率为41.4%（24/58），与单一标志物相比缺乏统计学意义。结论hMAM及SBEM特异性表达于乳腺癌外周血，可作为检测乳腺癌外周血肿瘤细胞标志物，并有可能在乳腺癌微转移诊断和预后判断中具有重要意义。     

早期乳腺癌hMAM mRNA阳性循环肿瘤细胞检测及其临床意义

 目的 研究早期乳腺癌hMAM mRNA阳性循环肿瘤细胞检测的临床意义。 方法 巢式RT PCR检测50例早期乳腺癌患者术后辅助治疗前外周血hMAM mRNA阳性细胞,随访。24例乳腺良性疾病患者和20例健康体检志愿者作对照。 结果 早期乳腺癌患者术后辅助治疗前外周血有核细胞hMAM mRNA阳性率26.0%,与良性乳腺疾病患者（4.2%）、健康体检志愿者（0%）比较,差异有统计学意义(分别为P=0.025、P=0.012);其hMAM mRNA阳性率与癌组织HER2过表达相关（P=0.037）;13例阳性患者中8例（61.5%）随访出现复发转移（P=0.004）,中位无瘤生存期明显降低（P=0.002）。 结论 hMAM mRNA是检测乳腺癌循环肿瘤细胞较为理想的分子标记物。早期乳腺癌患者术后辅助治疗前hMAM mRNA阳性循环肿瘤细胞检测,可能是预测复发转移和预后不良的辅助指标。     

SBEM和hMAM在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨乳腺上皮粘蛋白（SBEM）和人乳腺珠蛋白（hMAM）在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测109例乳腺癌患者和25例对照组（5例健康者与20例其他肿瘤患者）外周血SBEM mRNA和hMAM mRNA的表达情况,流式细胞术检测SBEM和hMAM阳性表达细胞的比例;并分析其与临床病理特征的关系。结果 RT-PCR检测显示SBEM mRNA和hMAM mRNA仅表达于乳腺癌患者外周血中,在健康者和其他肿瘤患者外周血中无表达。流式细胞术检测显示SBEM和hMAM在乳腺癌患者中阳性表达细胞的比例分别为55.9％和40.4％,而在健康者和其他肿瘤患者中仅为10％左右。乳腺癌外周血SBEM和hMAM表达与TNM分期、淋巴结转移有关,而与年龄、肿瘤大小、激素受体和C erbB-2均无关。结论 SBEM mRNA和hMAM mRNA在乳腺癌患者外周血中均有高表达,两者联合检测有助于判断血道微转移的存在。     

hMAM RNA 和CEA RNA T-PCR检测乳腺癌外周血微转移

目的应用RT-PCR法检测乳腺癌患者外周血中的human ammaglobin(MAM)mRNA和CEA RNA表达情况.方法用RT-PCR法,检测52例乳腺癌患者外周血中hMAM RNA和CEA RNA的表达情况,另抽取28例乳腺良性疾病患者和10例健康志愿者外周血标本作为对照.结果 52例乳腺癌患者外周血中hMAM RNA和CEA RNA的阳性率分别为30.8％、34.6％.28例乳腺良性疾病患者和10例健康志愿者外周血中hMAM RNA、CEA RNA表达均为阴性.两者的阳性表达均与患者的腋淋巴结状况、TNM分期差异有显著性意义(P<0.05).而与患者的年龄、原发肿瘤大小、病理类型以及激素受体状况等均无显著性差异(P＞0.05).结论 hMAM RNA、CEA RNA均可作为标志物来检测乳腺患者外周血中微转移,联合检测可增加外周血中循环肿瘤细胞的检测率.     

hMAM mRNA和CEA mRNA RT-PCR检测乳腺癌外周血微转移

目的:应用RT-PCR法检测乳腺癌患者外周血中的hMAM mRNA和CEA mRNA表达情况.方法:用RT-PCR法,检测52例乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA和CEA mRNA的表达情况,另抽取28例乳腺良性疾病患者和10例健康志愿者外周血标本作为对照.结果:52例乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA和CEA mRNA的阳性率分别为30.8%、34.6%.28倒乳腺良性疾病患者和10例健康志愿者外周血中hMAM mRNA、CEA mRNA表达均为阴性.二者的阳性表达与患者的腋淋巴结状况、TNM分期差异均有显著性意义(P＜0.05),而与患者的年龄、原发肿瘤大小、病理类型以及激素受体状况等差异均无显著性(P＞0.05).结论:hMAM mRNA、CEA mRNA均可作为标志物来检测乳腺癌患者外周血中微转移,联合检测可增加外周血中循环肿瘤细胞的检出率.     

乳腺癌hMAM mRNA和CD44V6 mRNA表达及临床意义

目的研究人乳腺珠蛋白(human mammoglobin,hMAM)mRNA及CD44V6 mRNA在乳腺癌中的表达,探讨它们作为乳腺癌微转移标志物的可能性.方法采用巢式逆转录聚合酶链反应(nested-RT-PCR)技术,检测乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织、乳腺良性肿瘤中hMAM mRNA及CD44V6 mRNA,检测乳腺癌、乳腺良性肿瘤患者及健康志愿者外周血hMAM mRNA和CD44V6 mRNA,同时对胃癌、结直肠癌、食管癌、肺癌、卵巢癌组织中hMAM mRNA的表达进行检测.结果 hMAM-mRNA在胃癌、结直肠癌、食管癌、肺癌、卵巢癌组织中无表达,在乳腺癌、癌旁组织及乳腺良性肿瘤组织中的阳性表达率分别为96.72%、96.72%和93.75%,3组间差异无显著性(P>0.05);CD44V6 mRNA在乳腺癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织及乳腺良性肿瘤组织(P<0.05).乳腺癌患者外周血hMAM mRNA检出率为45.90%,Ⅳ期乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA的阳性表达率明显高于其他各组(P<0.05);而hMAM mRNA在健康人及乳腺良性肿瘤患者外周血中均无表达;CD44V6 mRNA在乳腺癌、乳腺良性肿瘤患者和健康人外周血中的阳性表达率各组之间无显著性差异(P>0.05).结论 hMAM mRNA相对特异性地表达于乳腺组织,外周血检测出hMAM mRNA提示已有癌细胞进入血流,因此可能作为检测乳腺癌血道微转移的标志物;而CD44V6 mRNA作为血液中乳腺癌细胞的特异性标志物缺乏特异性.     

腋淋巴结阴性乳腺癌外周血hMAM检测意义

目的:应用乳腺癌特异性标志物乳腺珠蛋白(hMAM)检测腋淋巴结阴性乳腺癌(axillary lymph node negative breast cancer,ALNNBC)外周血中微转移,并探讨其与临床病理因素的关系.方法:采用巢式RT-PCR方法,分别检测62例ALNNBC、6例乳腺良性疾患和6例健康成人女性外周血中hMAM mRNA的表达,并以MDA-MB415细胞为阳性参考检测该方法的灵敏度.结果:ALNNBC外周血hMAM表达阳性率为32.3%(20/62),乳腺良性疾患组和健康成人女性组全部阴性表达;该方法检测外周血微转移的灵敏度达1/106;C-erbB2基因阳性表达者微转移发生率高(P＜0.01),月经状态、肿瘤大小、组织学类型、ER状态、p53表达等与微转移无关(P＞0.05);复发转移组较无瘤生存组外周血中微转移率高(P＜0.01).结论:hMAM可作为乳腺癌外周血微转移的标志物;ALNNBC微转移与C-erbB2密切相关;外周血微转移可以作为ALNNBC预后指标.     

乳腺癌患者外周血中SBEM和hMAM的个体化检测意义

Objective

The aim of the study was to explore the individual detection significances of small breast epithelial mucin (SBEM) and human mammaglobin (hMAM) in peripheral blood (PB) of breast cancer patients.

Methods

SBEM and hMAM expressions in PB samples of 109 primary breast cancer patients were detected by flow cytometry (FCM) and RTPCR. Relationship between the biomarkers?? expression and prognostic parameters were analyzed.

Results

SBEM and hMAM expressions in PB of breast cancer patients were much higher than those of healthy donors and other cancer patients. SBEM and hMAM expressed in 53.2% (50/94) and 39.4% (37/94) cases at stages I-III and expressed in 73.3% (11/15) and 46.7% (7/15) cases at stage IV respectively. SBEM and hMAM mRNA were only detected in PB samples of breast cancer patients, while no expression of them was found in that of healthy donors and other cancer patients.

Conclusion

hMAM mRNA detection maybe helpful to predict hematogenous micrometastasis in ER-positive, well-differentiated breast cancers and SBEM mRNA detection maybe helpful to predict hematogenous micrometastasis in ER-negative, poorly-differentiated breast cancers.     

CK19和hMAM及SBEM检测乳腺癌微转移价值分析

目的：探讨生物学标志乳腺上皮小黏蛋白（smallbreastepithelialmucin,SBEM）、乳腺珠蛋白（humanmamma—globin,hMAM）和细胞角蛋白19（cytokeratin19,CK19）检测乳腺癌外周血及淋巴结微转移的临床应用价值。方法：收集2012-04—13—2012-10—10广西医科大学附属肿瘤医院乳腺外科首诊的患者外周血及组织标本。采用巢式PCR技术对47例乳腺癌患者和45例乳腺良性肿瘤患者外周血有核细胞中SBEM、hMAM和CK19的mRNA进行检测;采用半定量PCR技术对10例乳腺癌组织及对应的癌旁组织,以及10例乳腺良性肿瘤患者组织mRMA进行检测;采用免疫组化技术对其中27例乳腺癌患者的109个淋巴结进行检测。结果：乳腺癌和乳腺良性肿瘤患者的外周血SBEM表达率分别为82．98％（39／47）和62．22％（28／45）,χ2=5．005,P=0．021;乳腺癌和乳腺良性肿瘤患者的外周血hMAM表达率分别为65．96％（31／47）和42．22％（19／45）,差异有统计学意义,χ2=5．220,P=0．022;乳腺癌和乳腺良性肿瘤患者的外周血CK19表达率分别为89．36％（42／47）和80．00％（36／45）,差异无统计学意义,χ2=1．562,P=0．211。免疫组化CK19在52个转移性淋巴结中强阳性表达,在57个常规病理检查未发现的转移性淋巴结中检出5个淋巴结存在转移灶;hMAM及SBEM在转移性淋巴结中表达比CK19弱,而且阳性细胞染色不均一。结论：SBEM、hMAM和CK19作为乳腺癌外周血微转移生物学标志具有较高的灵敏性,但缺乏特异性,联合检测可以提高特异性,对发现早期乳腺癌微转移有一定临床意义;CK19可用于检测乳腺癌腋窝淋巴结的微小转移灶。