活血祛瘀法在肾间质纤维化中的防治机制研究进展

肾纤维化是几乎所有肾脏疾病进展到终末期肾衰竭的共同通路,其特征包括肾小球纤维化、肾问质纤维化、肾血管纤维化^[1],是各种肾脏疾病慢性化主要的病理学表现之一,是各种肾小球、血管和小管间质本身疾病的最后结局。肾间质纤维化（RIF）是以细胞外基质（ECM）在肾间质的过度积聚与沉积以及成纤维细胞增生为特征,     

低氧诱导因子1α／结缔组织生长因子在肾间质纤维化中的表达及关系

目的探讨低氧诱导因子1α与结缔组织生长因子致肾间质纤维化的作用及关系。方法应用单侧输尿管结扎手术建立单侧输尿管结扎模型,将32只健康成年的雄性SD大鼠随机分为2组,假手术组（Sham组,n=16）、模型组（n=16）。分别于术后第7天、第14天处死大鼠,留取肾组织行HE染色并观察病理变化。应用原位杂交检测低氧诱导因子1a、结缔组织生长因子在肾小管间质中的表达,并检测二者之间的相关性。结果与7天对照组比较,7天模型组肾间质面积明显增加（P〈0．01）。与14天对照组比较,14天模型组肾问质面积也明显增加（P〈0．01）。与7天模型组比较,14天模型组大鼠肾脏间质纤维化显著增加（P〈0．05）,肾间质面积（0．51±0．04）、（0．82±0．06）,表明梗阻性肾病大鼠肾脏组织形态学呈进行性损害。7天模型组肾间质HIF1α及CTGFmRNA的表达较7天对照组均显著增加（均P〈0．01）。14天模型组肾间质HIF1αmRNA的表达明显增加（P〈0．05）,为（19．69±4．11）、（30．45±6．27）,CTGFmRNA的表达亦明显增加（P〈0．05）,分别为（21．38±4．26）、（37．18±7．52）,且HIF1αmRNA的表达与CTGFmRNA的表达在第7天、14天均呈正相关（分别为r=0．697,P〈0．01;r=0．715,P〈0．01）。结论低氧诱导因子1α及结缔组织生长因子促进了肾间质纤维化发生和发展的过程,二者之间相关性显著。     

神经胶质瘤相关蛋白-2与肾小管间质纤维化的关系

神经胶质瘤相关蛋白-2（glioma pathogenesis-related protein 2,GLIPR-2）是新近发现的一种蛋白质,属于CAP蛋白超家族成员之一.研究发现,它能诱导肾小管上皮细胞发生上皮细胞间充质转分化（Epithelial-to-Mesenchymal Transition,EMT）,从而参与肾小管间质纤维化的发生发展.本文就GLIPR-2的生理及病理机制、在肾间质纤维化中的作用作一综述,以期丰富肾间质纤维化的发病机制,为肾间质纤维化治疗的研究提供新的思路.     

血清转化生长因子-β_1与肾间质损害相关研究

目的：探讨血清转化生长因子-β1（TGF-β1）与肾间质、肾小管损害间的关系。方法：对156例肾病患者行肾穿刺活检、血清TGF-β1检测,参照Katafuchi标准进行肾间质浸润、纤维化评分及肾小管萎缩评分,分析肾间质、肾小管评分与血清TGF-β1关系。结果：（1）肾间质浸润评分≥0.5组血清TGF-β1、肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）显著高于0分组,肾间质浸润评分与血清TGF-β1显著相关,相关系数0.296,P〈0.01。（2）肾间质纤维化评分≥0.5组血清TGF-β1、Scr、BUN显著高于0分组,肾间质纤维化评分与血清TGF-β1显著相关,相关系数0.248,P〈0.01。（3）经Logistic回归分析,肾间质纤维化评分是影响血清TGF-β1水平的相关因子。结论：血清TGF-β1与肾间质浸润和纤维化相关,是评估肾间质浸润和纤维化的指标。     

雷米普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织BMP-7表达的影响

目的 观察雷米普利对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstructionUU0）大鼠肾脏间质损伤及骨形态蛋白-7（bone morphogenetic protein-7 BMP-7）表达的影响。方法3（）只雄性SD大鼠随机分为假手术组（SHAM组），1周模型组（UUO-1组），2周模型组（UU0-2组），1周干预组（ACEF1组），2周干预组（ACEF2组）。各组大鼠于术后相应时间（除UUO-1组为术后1周，其余各组均为术后2周）取梗阻侧肾组织行Masson染色，按小管问质损害的特征进行半定量评分，用RT-PCR方法检测肾组织BMP-7mRNA水平。结果①SHAM组肾间质损伤指数较低，BMP-7高表达于肾组织。UUO-1组与sHAM组比较，肾间质损伤指数增加，BMP-7表达下降，UUO-2组与UUO-1组比较，肾间质损伤指数增加，BMP-7表达下降；②ACEI-2组较UUO-2组肾间质损伤指数下降，BMP-7表达增加；③UUO-1组已有少量间质纤维化，在此基础上ACEF1组比UUO-2组肾间质损伤指数下降，BMP-7表达增加。结论①在肾间质纤维化模型中，随着肾间质纤维化的进展，肾间质损伤指数逐渐增加，BMP-7表达逐渐下降；②雷米普利可部分维持肾间质纤维化过程中BMP-7的表达，从而延缓肾间质纤维化进展，对已发生纤维化的肾组织仍然有此作用。     

肾纤康对肾间质纤维化大鼠Smad信号通路的影响

目的：研究肾纤康对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad2、Smad3、Smad7表达的影响,探讨肾纤康防治肾间质纤维化的作用机制。方法：将40只大鼠随机分为4组,即假手术组、模型组、肾纤康组、苯那普利组,采用左侧输尿管梗阻方法造模,用免疫组织化学方法作肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7检测,并观察肾脏病理学变化。结果：模型组和各治疗组肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3面积比增加,Smad7面积比减少,与假手术组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。与模型组相比,药物治疗组肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3面积比减少,Smad7面积比增加,差异有统计学意义（P〈0.05）。肾纤康组与苯那普利组肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7面积比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：肾纤康通过下调TGF-β1、Smad2、Smad3在肾间质的表达及增加Smad7的表达而抑制单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化,与肾纤康可调节TGF-β1/Smad信号转导通路有关,其作用与苯那普利差异无统计学意义。     

银杏叶对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的：观察银杏叶对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的影响并探讨其可能机制.方法：UUO大鼠分别给予银杏叶（300 mg·kg^-1·d^-1）、依那普利（10 mg·kg^-1·d^-1）、银杏叶联合依那普利治疗,肾组织标本作常规病理检查,用免疫组化法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子-β1（TGF-β1）表达和胶原蛋白含量.对结果进行定量或半定量分析.结果：银杏叶和依那普利均可抑制肾间质的α-SMA、TGF-β1表达,减少胶原蛋白含量（P＜0.05）.结论：银杏叶和依那普利可通过抑制肾小管上皮细胞转分化,从而减轻UUO术后肾组织间质纤维化.     

结缔组织生长因子在大鼠肾小管间质纤维化中的表达及意义

在一些伴有细胞增殖、细胞外基质（ECM）沉积和小管间质损伤的肾脏疾病，肾间质结缔组织生长因子（CTGF）mRNA表达上调，提示它是调节肾脏纤维化的关键因子，但CTGF在肾小管间质纤维化发生发展中的动态变化规律，及其对肾间质ECM合成和降解的调节机制仍待阐明。     

水飞蓟素对单侧输尿管结扎大鼠肾组织TGF-β1及TSP-1表达的影响

目的 探讨水飞蓟素对肾间质纤维化的影响及其可能机制.方法 将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组（C组）、模型组（M组）和水飞蓟素治疗组（S组）,各12只.对M组和S组大鼠建立单侧输尿管结扎（UUO）模型,C组仅分离左侧输尿管,未行结扎.S组大鼠给予水飞蓟素（50 mg/kg）灌胃.每组大鼠于术后第7、21天分别处死6只.观察各组大鼠肾组织病理学表现,采用RT-PCR方法检测各组大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）和血小板反应蛋白1（TSP-1）mRNA表达水平.结果 术后第7天,M组大鼠肾组织出现肾小管明显扩张,偶见肾小管上皮细胞坏死、肾间质水肿、轻度纤维化,并有较多单个核细胞浸润;第21天,肾小管扩张进一步加重,并出现肾小管上皮细胞大量坏死,并可见肾间质大量胶原纤维组织增生,伴大量炎症细胞浸润;S组较M组肾组织损伤减轻,肾小管间质损伤指数降低（P〈 0.05）.术后第7、21天,M组TGF-β1和TSP-1 mRNA表达均较C组升高（P〈0.01）,S组TGF-β1和TSP-1 mRNA表达均较M组降低（P〈0.05）.结论 水飞蓟素可减轻肾组织损害,延缓肾间质纤维化的进展,可能与其抑制肾组织TSP-1及TGF-β1的表达有关.     

缬沙坦对腹主动脉缩窄大鼠肾脏的保护

目的 观察缬沙坦对腹主动脉缩窄（AAC）大鼠肾功能及肾间质纤维化的影响,并探讨其作用机制。方法 选择AAC术后的24只雄性SD大鼠,将其随机分为3组（对照组、低剂量缬沙坦组、高剂量缬沙坦组）,另选8只作为假手术组。治疗10周后,测各组大鼠颈动脉压、尿微量白蛋白（mAlb）、内生肌酐清除率（Ccr）;使用Masson染色评估肾间质纤维化,放射免疫法检测血浆及肾脏血管紧张素（AngⅡ）的浓度,免疫组化法检测肾脏结缔组织生长因子（CTGF）的表达。结果与假手术组比较,对照组颈动脉压、。肾间质纤维化程度、尿mAlb、血浆及肾脏AngⅡ、CTGF表达水平均显著增高,而Ccr水平显著降低（P〈0．01）;与对照组比较,高剂量缬沙坦组颈动脉压、肾间质纤维化程度、尿mAlb、肾脏CTGF表达均明显下降,Ccr水平显著升高（P〈0．01）,而低剂量缬沙坦组颈动脉压无明显变化,但其他指标明显优于对照组（P〈0．05或P〈0．01）。结论 缬沙坦可以有效地抑制AAC大鼠肾间质纤维化、改善肾功能,其作用机制可能与阻滞肾脏AngⅡ与AT1受体结合,CTGF的表达下调有关。     

方格星虫粗提物对5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的：研究方格星虫粗提物（SNP）对5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的防治作用。方法：SD大鼠40只,随机分为假手术组和手术组,手术组行5/6肾切除术并于术后2周随机分为模型组、SNP低剂量组、SNP高剂量组,各组大鼠分别给予生理盐水或相应剂量的SNP灌胃治疗18周末称重处死大鼠,心脏采血检测大鼠RBC、Hb、HCT及血清Scr、BUN、Ca2＋、P3-水平;取残肾称重并观察肾小管间质病理变化;免疫组化法检测肾组织α-SMA、FN的表达。结果：治疗组大鼠相应血清学指标与模型组比较,差异均无统计学意义;治疗组大鼠肾小管-间质损伤指数及高剂量组肾小管间质FN表达较模型组下降（P〈0.05）。结论：SNP可能有改善肾小管-间质纤维化的作用,其机制可能是通过抑制肾小管-间质α-SMA、FN的表达,减少ECM成分在肾间质内过分沉积,从而减轻肾间质纤维化的进程。     

怡肾汤对腺嘌呤致肾衰竭大鼠肾间质BMP-7及α-SMA表达的影响

目的：研究怡肾汤对腺嘌呤致肾衰竭大鼠肾间质骨形态发生蛋白-7（BMP-7）及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响,并对其肾间质纤维化作用机制进行初探。方法：采用腺嘌呤灌胃诱导肾间质纤维化的动物模型,将32只SD大鼠完全随机分为正常组、模型组、依那组和怡肾组。大鼠适用性饲养1周后造模：正常组予生理盐水按10mg·kg-1.d-1灌胃,其他3组予2.5%的腺嘌呤混悬液按250mg·kg-1.d-1灌胃。造模与药物干预同天进行：怡肾组（怡肾汤）、模型组和正常组（等体积生理盐水）、依那组（依那普利）,每日1次,共21d。观察大鼠肾功能、肾组织形态,用免疫组化法检测BMP-7及α-SMA的表达。结果：（1）造模后大鼠与正常组比较Scr、BUN明显升高,治疗组与模型组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）,各治疗组间差异无统计学意义。（2）细胞形态学观察：正常组无异常,模型组单核巨噬细胞、淋巴细胞浸润,肾间质水肿较两治疗组严重,差异有统计学意义（P〈0.01）,两治疗组间差异无统计学意义。（3）正常组α-SMA仅在小动脉表达,BMP-7在肾间质高度表达,两治疗组相对模型组肾间质α-SMA表达减少,BMP-7表达增强,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：怡肾汤可以减轻肾间质损伤和炎细胞浸润,抑制α-SMA表达、促进BMP-7表达,延缓肾功能恶化和减轻肾间质纤维化。     

从瘀论肾间质纤维化的防治

肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis）是指由多种原因引起的细胞外基质（extracellular matrix,ECM）成分在。肾间质内过度沉积和肾间质成纤维细胞（fibroblast）的增生。肾间质纤维化几乎是所有慢性肾脏疾病进行性发展的共同通路,是导致慢性肾衰竭（CRF）的病理学基础。现代医学对于肾间质纤维化发病机制的研究已逐步全面,其中尤以转化生长因子-β（TGF—β）一直被认为是肾纤维化治疗的靶点。     

肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化与肾间质纤维化

肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化（EMT）在肾间质纤维化进程中发挥重要作用。多种细胞因子和信号转导途径参与调节EMT，其中TGF-B1／Smad信号通路发挥核心作用。肝细胞生长因子（HGF）及骨形成蛋白-7（BMP-7）可抑制EMT，减轻肾间质纤维化。激活素可能参与了EMT的进程。     

肥大细胞参与蛋白负荷肾病大鼠肾间质的纤维化

目的 观察肥大细胞（MC）在蛋白负荷肾病肾间质纤维化大鼠模型肾脏的分布并探讨其与蛋白尿所致肾间质纤维化、肾间质转化生长因子β1（TGF-β1）及干细胞因子（SCF）表达的关系。 方法 60只SD大鼠行右肾全切术后，模型组腹腔注射牛血清白蛋白（BSA）复制蛋白负荷肾病大鼠的模型（n=30），对照组腹腔注射生理盐水（n=30），分别于模型成功后第3、7和11周，随机处死10只大鼠，检测尿蛋白和血生化指标。采用甲苯胺蓝组织化学和糜蛋白酶（chymase）免疫组化的方法观察肥大细胞在肾脏的浸润。采用免疫组化法检测TGF-β1、SCF在肾组织的表达，并分析它们之间及与蛋白尿所致肾间质纤维化的相关性。 结果 模型组大鼠随着BSA注射量的增加, 尿蛋白量（24 h）增加，第7周达到高峰[(199.1±98.4) mg], 以后开始下降，第11周为(133.7±67.8) mg。在模型组大鼠的肾皮质、髓质均可见甲苯胺蓝染色阳性及chymase阳性的肥大细胞, 以间质纤维化区域最为多见。随着肾间质纤维化的加重, 肥大细胞数目增多，各时间点模型组大鼠与对照组差异均有统计学意义（P < 0.05）。TGF-β1及SCF主要在肾小管、间质、部分系膜细胞及壁层上皮细胞表达，随时间的延长表达量增加，各时间点模型组大鼠与对照组差异均有统计学意义（P < 0.05）。肥大细胞的数量与肾间质纤维化的程度、TGF-β1和SCF的表达均呈正相关(r分别为0.722、0.521、0.916, 均P < 0.01)。 结论 肥大细胞浸润与蛋白负荷肾病大鼠肾间质纤维化程度密切相关。蛋白尿可能通过SCF介导肥大细胞到肾脏，释放chymase，促进肾组织TGF-β1表达，介导蛋白尿所致的肾间质纤维化。     

和解聚散方对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的：研究和解聚散方对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠肾间质纤维化的防治作用。方法：采用UUO建立大鼠肾间质纤维化模型,随机分为模型组、贝那普利组和和解聚散方组,另设假手术组;术后7d、14d、21d分批取材,检测血清肌酐、尿素氮,采用HE和Masson染色检测肾脏病理、免疫组化法检测肾组织TGF-β1的表达。结果：与模型组相比,和解聚散方组血清尿素氮、血清肌酐水平均降低（P〈0.05）,肾小管损害百分比和肾间质损害分值较低（P〈0.05）,肾组织TGF-β1表达减少（P〈0.05）。结论：和解聚散方可以降低尿素氮、血清肌酐水平,减轻大鼠肾间质纤维化的程度,下调UUO大鼠肾组织TGF-β1的表达,验证了和解聚散法的正确性。     

化瘀解毒汤对TGF-β1及MMP1mRNA表达作用的探讨

目的：探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制。方法：采用单侧输尿管梗阻（UUO）法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分（Ⅰ、Ⅲ型胶原）、TGF－β1mRNA及MMP1mRNA表达,并作尿α1－MG检测以及相关肾组织学检查。结果：模型组和各治疗组大鼠肾组织Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA的面积比显增加（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比显降低（P＜0．05）;各治疗组大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比较模型组减少（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比较模型组增加（P＜0．05）;治疗组中以中药预防组鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比最低、MMP1mRNA面积比最高（P＜0．05）。经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善。结论：化瘀解毒汤通过下调TGF－β1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达、以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维。此外还可减轻肾小管病理性损伤。     

依普利酮对大鼠单侧输尿管梗阻模型肾间质纤维化的影响

目的：研究依普利酮对大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）模型肾间质纤维化的影响,探讨依普利酮的抗肾间质纤维化作用机制。方法：42只雄性Wistar大鼠随机分成假手术（SO）组、UUO组和UUO＋依普利酮治疗组（T-UUO组,依普利酮100mg.kg-1.d-1）。于术后7d、14d分别处死各组7只大鼠。免疫组织化学法测定α-平滑肌肌动蛋白（α-smoothmuscle actin,α-SMA）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）、单核细胞/巨噬细胞-1（monocytes/macrophages-1,ED-1）,及增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen,PCNA）的表达。结果：UUO组肾间质α-SMA、MCP-1、ED-1、PCNA的表达较SO组增加（P〈0.05）;在术后各时间点,使用依普利酮治疗的T-UUO组大鼠肾间质α-SMA、MCP-1、ED-1、PCNA的表达较UUO组显著减少（P〈0.05）,但仍高于SO组（P〈0.05）。结论：依普利酮可通过降低α-SMA和MCP-1表达、抑制单核/巨噬细胞浸润和和系膜细胞增生,减轻肾间质纤维化。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾脏转化生长因子β受体亚型表达的变化

目的 探讨转化生长因子β（TGF-β）Ⅰ型受体（RⅠ）、Ⅱ型（RⅡ）受体以及下游Smad蛋白在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾脏中表达及意义。 方法 90只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组（CON组）、假手术组（SOR组）和单侧输尿管梗阻组（UUO组）,分别于术后1、3、7、14、21 d处死,检测各组大鼠肾功能;PAS与Masson染色观察大鼠肾间质病理形态改变;实时定量PCR基因芯片分析正常大鼠和肾间质纤维化大鼠肾组织TGF-βⅠ、Ⅱ、Ⅲ型受体及Smad蛋白家族表达。筛选出差异表达的受体亚型,进一步应用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法、免疫荧光法检测和验证筛选出的差异受体亚型在不同分期肾间质纤维化大鼠肾组织的分布和表达。 结果 与CON组相比,UUO组大鼠的Scr及BUN于术后3 d开始升高（P < 0.05）,第21天达峰值（P < 0.01）;UUO组术后3 d肾间质可见明显炎性细胞浸润;14 d后出现明显肾小管萎缩;21 d可见明显肾间质纤维化。UUO组肾组织TGF-βⅠ型受体ALK-5、ALK-7和TGF-βRⅡ的mRNA表达于术后3 d上升并随梗阻时间延长逐渐增加（P < 0.05）,于14 d达到峰值（均P < 0.01）;ALK-6的mRNA表达于术后3 d下降（P < 0.05）并随梗阻时间延长逐渐减少,于14 d达谷值（P < 0.01）。ALK-5、ALK-6、ALK-7和TGF-βRⅡ蛋白表达与基因表达一致。Smad2/3及磷酸化（p）-Smad2/3的蛋白表达于术后3 d上升（均P < 0.05）并随梗阻时间延长逐渐增加,于14 d达到峰值（均P < 0.01）。 结论 在肾间质纤维化进展中不同TGF-β受体亚型存在不同的变化规律并与肾间质纤维化进展密切关联。     

黄葵胶囊对5/6肾切除大鼠肾间质纤维化中炎性因子表达的影响

目的：本文拟观察黄葵胶囊对慢性肾间质纤维化中炎性因子表达的影响。方法：以5/6肾切除方法建立肾间质纤维化模型作为研究对象,随机分为模型组、黄葵治疗组及假手术组,经治疗后检测24h尿蛋白定量、血清肌酐（Scr）;测定细胞间黏附分子1（ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的表达与变化情况;通过肾组织Masson染色进行病理形态学观察等。结果：经黄葵胶囊治疗后,其肾功能显著改善,肾小球硬化程度、系膜区增生程度、小管萎缩、扩张、蛋白管型形成及间质纤维化范围等均较模型组明显减轻,提示黄葵胶囊对5/6肾切除大鼠的肾脏有保护作用（P〈0.01）。结论：黄葵胶囊可能通过调节ICAM-1、MCP-1炎性因子的表达,从而延缓肾间质纤维化的进展。