二甲双胍通过抑制MAPK信号通路增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性

目的：探讨二甲双胍是否可以提高卵巢癌细胞对顺铂的敏感性及相关的作用机制。方法：BRDU ELISA方法检测顺铂联合或者不联合二甲双胍对SKOV3细胞增殖的影响;二甲双胍联合或者不联合MAPK信号通路阻断剂后BRDU ELISA方法检测细胞增殖的变化。Western blotting检测二甲双胍作用下卵巢癌细胞系SKOV3的磷酸化AMPK/总AMPK水平和磷酸化p38 MAPK/总MAPK水平的变化。结果：（1）二甲双胍不仅能抑制卵巢癌细胞系SKOV3细胞的增殖,而且能提高对顺铂的敏感性,并且这种作用是依赖于AMPK激活的;（2）p38 MAPK阻断剂SB203580能够抑制SKOV3的增殖,二甲双胍能够增强这种抑制作用。结论：二甲双胍可增强顺铂对卵巢癌细胞的抑制作用,并且二甲双胍可能通过激活AMPK信号通路进而抑制MAPK信号通路增加顺铂对卵巢癌细胞的抑制增殖作用。     

IGFBP-rP1通过调控MEK/ERK信号通路对抑制子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖的影响及机制探讨

目的:探讨外源性胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 (IGFBP-rP1)联合MEK/ERK信号通路抑制剂PD98059对子宫内膜癌细胞HEC-1A增殖的影响及其机制.方法:体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-1A细胞,向培养基中添加不同浓度人重组胰岛素生长因子结合蛋白相关蛋白1 (rhIGFBP-rP1)和PD98059,上调IGFBP-rP1的水平,采用Cell CountingKit-8(CCK-8)法检测不同浓度rhIGFBP-P1及rhIGFBP-P1联合MEK/ERK信号通路抑制剂PD98059对HEC-1A细胞增殖的影响,并用蛋白免疫印迹(western blot)法分析不同浓度rhIGFBP-rP1作用下子宫内膜癌细胞HEC-1A细胞总的ERK1/2和磷酸化ERK1/2水平变化.结果:添加rhIGFBP-rP1子宫内膜癌细胞HEC-1A增殖受到明显抑制,其抑制作用呈浓度和时间依赖性(P＜0.05);4ag/ml rIGFBP-rP1对HEC-1A增殖抑制作用随着时间延长越来越明显,12、24、48、72 h增殖抑制率比较差异有统计学意义(P＜0.05).而MEK/ERK通路抑制剂PD98059能增强其抑制作用,rIGFBP-rP1(4μg/ml)与PD98059(25 μmol/L)联用,以上各时间点细胞增殖抑制率分别增至(10.04±2.71)％、(17.02±1.58)％、(28.59±2.04)％、(35.29±1.12)％,各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot示添加rhIGFBP-rP1,磷酸化的ERK1/2水平显著降低,磷酸化的ERK1/2水平与rhIGFBP-rP1呈剂量依赖性.结论:IGFBP-rP1可以通过MEK/ERK信号通路抑制细胞增殖.     

异丙酚调控miR-212-5p/TRPV6轴对卵巢癌细胞增殖 迁移及侵袭影响的机制研究

目的探讨异丙酚通过调控miR-212-5p/TRPV6轴对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭影响和机制,为临床诊治卵巢癌奠定理论基础。方法不同浓度的异丙酚[(0μM (μmol/L)、0.125μM、0.25μM、0.5μM和1.0μM]作用SKOV3细胞48 h后,MTT实验检测细胞活力,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,qRT-PCR和Western blot检测miR-212-5p、TRPV6、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白的表达变化。同时,构建抑制miR-212-5p表达的SKOV3细胞株,进行上述实验检测相应指标。双荧光素酶实验和Western blot验证miR-212-5p和TRPV6的靶向关系。结果异丙酚呈浓度依赖性地抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制TRPV6、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白的表达,促进miR-212-5p的表达。抑制miR-212-5p表达可减轻异丙酚处理对SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制作用。TRPV6是miR-212-5p的靶基因,miR-212-5p可负性调控TRPV6的表达。沉默TRPV6可部分逆转抑制miR-212-5p表达对异丙酚处理的卵巢癌细胞SKOV3增殖、迁移和侵袭的影响。结论异丙酚通过上调miR-212-5p表达,抑制TRPV6表达,从而抑制卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

SDF-1和PI3K/Akt通路对卵巢癌CAOV3细胞增殖和侵袭能力的影响研究

目的:探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)通过磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号传导通路对卵巢癌CAOV3细胞增殖和侵袭能力的影响及其作用机制.方法:将卵巢癌CAOV3细胞分为对照组(未给药),实验组1(100 ng/ml SDF-1),实验组2(50 μmol/L PI3K/Akt信号传导通路抑制剂LY294002)和实验组3(50 μmol/L LY294002,作用0.5h后加入100 ng/ml SDF-1).采用MTT法检测卵巢癌CAOV3细胞经不同药物处理后24、48和72 h的细胞增殖能力.采用Transwell体外细胞侵袭实验和Western Blot法检测经不同药物处理48h后卵巢癌CAOV3细胞的侵袭能力、Akt磷酸化程度和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平.结果:SDF-1可以明显促进卵巢癌CAOV3细胞的增殖和侵袭(P＜0.05),LY294002可以抑制卵巢癌CAOV3细胞的增殖和侵袭(P＜0.05);实验组3卵巢癌CAOV3细胞的增殖和侵袭能力与实验组2比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:SDF-1能够通过PI3K/Akt信号传导通路诱导MMP-9蛋白表达上调,增强卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力;应用LY294002阻断PI3 K/Akt信号传导通路可显著抑制SDF-1对人卵巢癌CAOV3细胞增殖和侵袭的促进作用.     

慢病毒介导HMGN5基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制研究

目的观察慢病毒介导的高迁移率族核小体结合域5(HMGN5)基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并对其机制进行初步探讨。方法 RT-qPCR法检测人卵巢上皮细胞株IOSE及4株不同卵巢癌细胞中HMGN5的表达情况,将HMGN5 shRNA慢病毒载体转染至人卵巢癌细胞SKOV3中,RT-qPCR和Western blot检测SKOV3细胞中HMGN5 mRNA和蛋白表达情况,MTT法检测沉默HMGN5基因对细胞增殖能力的影响,划痕实验检测沉默HMGN5基因对细胞迁移能力的影响,Transwell实验检测沉默HMGN5基因对细胞侵袭能力;Western blot检测SKOV3细胞中PCNA、MMP-9、Wnt1和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平。结果与卵巢上皮细胞株IOSE相比,HMGN5在卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、HO-8910、Caov3中的表达明显升高(P<0.05)。与Blank组和NC组相比,sh-HMGN5组SKOV3细胞中HMGN5 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显下降(P<0.05),细胞中PCNA、MMP-9、Wnt1和β-catenin蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论沉默HMGN5可能通过阻碍Wnt/β-catenin信号通路的激活抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力。     

黄连素与顺铂联合用药对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨黄连素与顺铂联合用药对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响。方法免疫荧光检测不同卵巢癌细胞株对黄连素和顺铂的敏感性;Western blotting检测对不同浓度黄连素和顺铂对抗凋亡蛋白BAG-3的影响;Transwell侵袭实验检测黄连素、顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的侵袭能力的影响;平板克隆实验检测黄连素、顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的侵袭能力的影响。结果相比A2780细胞株,SKOVE3受黄连素影响明显,25 ng/l浓度的黄连素对SKOV3细胞中BAG-3蛋白的抑制水平最佳;加入黄连素后卵巢癌细胞株SKOV3的侵袭和增殖能力明显降低。结论黄连素与顺铂联合用药可以抑制卵巢癌SKOV3细胞株的增殖和侵袭。     

冬凌草甲素抑制人卵巢癌细胞恶性行为及机制研究

目的 研究冬凌草甲素（Oridonin）对人卵巢癌（Human ovarian cancer）SKOV3 细胞迁移和侵袭能力的影响及其潜在的分子机制。方法 采用CCK-8 法检测不同浓度（0、5、10、20、40、80μmol/L）的冬凌草甲素作用SKOV3细胞24、48 和72h 后细胞活力的变化,计算半数抑制浓度（IC50）。采用Annexin V-FITC/PI 双染法检测SKOV3细胞凋亡。采用划痕修复实验检测SKOV3细胞的迁移能力,Transwell小室实验检测SKOV3的侵袭能力。Western blot检测SKOV3细胞上皮细胞间充质转化（EMT）蛋白［E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）］和Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路中β-catenin及下游靶分子原癌基因（C-myc）、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）蛋白的表达。结果 冬凌草甲素可抑制SKOV3 细胞活力,且具有时间-剂量依赖性,作用24、48 和72 h后IC50值为23.57、12.48和7.29μmol/L。与对照组比较,5、10和20μmol/L冬凌草甲素作用SKOV3细胞24h 后,细胞凋亡率明显升高,迁移率和侵袭率降低（P<0.05）。与对照组比较,5、10和20μmol/L冬凌草甲素可升高E-cadherin 蛋白表达（P<0.05）,降低Vimentin 表达（P<0.05）。与对照组比较,5、10和20 μmol/L冬凌草甲素可降低β-catenin、C-myc和Cyclin D1表达（P<0.05）。结论 冬凌草甲素具有抑制SKOV3细胞增殖、转移和侵袭能力的作用,该作用与其抑制Wnt/β-catenin 信号通路有关。     

小檗碱对卵巢癌SKOV3细胞S1P/S1PR1通路调控作用及对血管生成的影响

目的 探讨小檗碱(BBR)对卵巢癌SKOV3细胞血管生成的影响及对鞘氨醇-1-磷酸/鞘氨醇-1-磷酸受体1(S1P/S1PR1)通路调控作用,为临床研究提供理论参考。方法 将卵巢癌SKOV3细胞分为空白对照(Control)组、BBR不同浓度(5、10、25、50、100 mmol/ml)处理干预SKOV3细胞组,用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖抑制率;划痕实验及Transwell小室法分别观察各组细胞的迁移及侵袭能力;管腔实验检测各组细胞血管生成情况;Western blot检测各组细胞通路蛋白S1P和S1PR1、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-8(IL-8)、金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶-2(MMP-2)相对表达水平。结果 与Control组相比,5、10、25、50、100 mmol/ml BBR组人卵巢癌细胞株SKOV3癌细胞增殖抑制率明显增高(P<0.05),侵袭和迁移能力、S1P、S1PR1、MMP-9、MMP-2、VEGF和IL-8蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.05),且BBR不同浓度组呈剂量依赖性。结论 BBR可下调S1P/S1PR1通路相关蛋白表达,抑制人卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移及血管生成。     

ERK信号转导通路调控乙醛刺激的肝星状细胞增殖的研究

目的特异性ERK阻断剂PD98059作用于乙醛刺激的HSC后,观察HSC内ERK活性、细胞增殖、细胞周期时相和细胞周期蛋白(Cyclins)表达的变化;为肝纤维化的发生和防治提供依据.方法体外培养人鼠HSC;HSC经PD98059预处理,用乙醛刺激后收集细胞,分别采用Western?blot、MTT比色法、流式细胞仪、RT-PCR法检测ERK活性、细胞增殖、细胞周期时相及CycinnDlmRNA表达的变化.结果HSC被乙醛刺激后,磷酸化ERK(p-ERK)水平增高、细胞周期蛋白CyclinDlmRNA表达增加、细胞由G1-S期转化增多、促进细胞增殖;20、50、100rLmol几PD98059均能抑制乙醛刺激的HSC内p-ERK水平,50、100pmol几的PD98059可明显抑制乙醛刺激的HSC内CyclinDlmRNA表达,并明显抑制细胞由Gl-S期的转化和细胞增殖,与对照组比较有统计学差异(P<0.05).结论乙醛刺激HSC后,引起ERK信号传导通路活化;ERK信号传导通路调控乙醛刺激的HSC增殖可能与其调控HSC内CycinnDlmRNA表达和细胞周期变化有关.     

沉默ITGA2通过下调ZEB1的表达抑制卵巢癌细胞SKOV3侵袭转移

目的探讨整合素A2(ITGA2)调控卵巢癌细胞系锌指增强子结合蛋白1(ZEB1)的表达对卵巢癌转移侵袭能力的影响。方法分析490例卵巢癌标本中ITGA2与ZEB1 mRNA表达的相关性;应用Western blot比较4种卵巢癌细胞系中ITGA2与ZEB1蛋白水平的相关性;将针对ZEB1的siRNA转染到SKOV3细胞系中,Western blot验证ZEB1蛋白表达变化,Transwell验证其转移侵袭能力的变化;将针对ITGA2的siRNA转染到SKOV3细胞系,Western blot验证其ITGA2及ZEB1的蛋白表达变化,Transwell验证其转移侵袭能力的变化。结果 490例卵巢癌标本中,ZEB1与ITGA2在mRNA水平呈显著正相关(P0.01);卵巢癌细胞系中ZEB1和ITGA2蛋白水平呈正相关;下调ZEB1后,卵巢癌细胞侵袭转移能力降低;下调ITGA2后,ZEB1表达降低,卵巢癌细胞转移侵袭能力也降低。结论 ITGA2正调控ZEB1的表达,促进卵巢癌细胞转移侵袭,提示降低ITGA2和ZEB1的表达可抑制卵巢癌细胞的转移侵袭。     

SLC4A11通过JAK信号通路对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨溶质转运家族4成员11蛋白(SLC4A11)在卵巢癌增殖、迁移和侵袭中的生物学作用机制。方法：RT-qPCR检测卵巢癌细胞中SLC4A11表达。将SKOV3细胞分为对照组(转染siRNA-NC序列)、SLC4A11-siRNA组(干扰SLC4A11表达)和SLC4A11-siRNA+JAK组(干扰SLC4A11表达+激活JAK信号通路)。采用CCK-8、伤口愈合实验和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。RT-qPCR和Western blot检测Janus激酶2(JAK2)和信号传导及转录激活因子3(STAT3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)表达。结果：SLC4A11在卵巢癌组织中高表达(P<0.05)。SLC4A11-siRNA组SKOV3细胞中p-JAK2/JAK2(0.286±0.048)、p-STAT3/STAT3(0.571±0.042)、Bcl-2(0.335±0.040)均低于对照组(1.001±0.093、1.004±0.089、1.005±0.142),也低于SLC4A11-siRNA+JAK组[p-JAK2/JAK2(1.001±0...     

PI3K/Akt/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中协同作用及机制

目的初步探讨PI3K/Akt/m TOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中的协同作用。方法采用不同浓度的PI3K/Akt/m TOR和MAPK/ERK信号通路抑制剂rapamycin与PD98059分别单独及联合作用于胃癌细胞SGC-7901。采用CCK8法检测SGC-7901细胞增殖情况;实时荧光定量PCR检测关键基因m RNA的表达;蛋白印迹法(WB)检测相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化。结果 Rapamycin(12.5、25、50、100、150、200 nmol/L)与PD98059(25、50、100、200、300、400μmol/L)单独作用可抑制SGC-7901细胞增殖活性,联合作用也可抑制其活性,且联合组的抑制作用强于单独作用(P0.05)。与rapamycin、PD98059单独作用相比,联合组对AKT、m TOR、MEK、ERK基因m RNA表达和p-AKT、p-m TOR、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达的抑制作用明显增强(P0.05)。联合组阻滞于G0/G1期的细胞比例显著增多,且具有更强的促凋亡作用。结论 PI3K/Akt/m TOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞生长中具有一定的协同调控作用。     

瘦素对子宫内膜癌细胞增殖的影响

目的探讨瘦素对子宫内膜癌细胞增殖的影响。方法荧光倒置显微镜下观测Ishikawa细胞瘦素相关受体(OBRb)的定位。分别使用0、10、50、100、150 ng/ml浓度梯度的瘦素分别在6、12、24 h 3个时间点对Ishikawa细胞进行干预处理,然后采用MTT比色法测定不同处理组细胞的增殖水平。Ishikawa细胞在使用瘦素进行干预后,同时分别加用STAT3通路阻断剂AG490和ERK1/2通路阻断剂PD98059,采用MTT比色法测定两种通路阻断剂对增殖水平的影响。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测100 ng/ml浓度瘦素处理Ishikawa细胞不同时间点(0、20、40、60 min)STAT3和ERK1/2的蛋白磷酸化水平。结果倒置显微镜在Ishikawa细胞中能够观察到瘦素受体表达。Ishikawa细胞在体外经过瘦素干预后,其增殖水平明显增强,并随着药物剂量升高和处理时间延长而增强。在24 h时间点,Ishikawa细胞在100ng/ml浓度的瘦素刺激下其增殖能力达到最高水平,而100 ng/ml组与150 ng/ml组比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度梯度的STAT3通路阻断剂AG490与ERK1/2通路阻断剂PD98059都能明显下调细胞的增殖水平,并且其抑制作用与药物浓度呈正相关;采用100ng/ml浓度的瘦素处Ishikawa细胞后,STAT3和ERK1/2蛋白磷酸化升高水平与处理时间延长呈正相关。结论瘦素可能通过上调激活STAT3和ERK信号传导通路,进而增强子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖能力。     

VEGF的RNAi对卵巢癌细胞SKOV3生物学活性的影响

目的检测靶向血管内皮生长因子(VEGF)的短发夹RNA(shRNA)质粒载体对卵巢癌细胞株SKOV3生物学活性的影响作用。方法构建携带有GFP报告基因的VEGF-shRNA质粒载体,脂质体转染方法转入卵巢癌细胞株SKOV3,通过流式细胞术检测细胞的转染效率,RT-PCR及Western blot检测转染细胞内VEGF-mRNA及蛋白的表达变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,人工基底膜侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果VEGF-ShRNA稳定转染后,SKOV3细胞内VEGF-mRNA及蛋白表达水平显著下降;VEGF-ShRNA对SKOV3细胞具有明显的增殖抑制作用,其抑增殖效应呈时间依赖性;VEGF-CshRNA组可有效抑制SKOV3细胞的人工基底膜体外侵袭能力。结论VEGF在卵巢癌增殖、侵袭转移中发挥重要作用,通过RNA干扰技术实现VEGF沉默在卵巢癌的生物治疗中具有较好的应用前景。     

大鼠胃黏膜细胞EGFR通过ERK-1/2信号传导通路激活AP-1

目的 探讨大鼠胃黏膜细胞EGFR活化AP—1的信号传导通路。方法 用EGFR配体TGF—α刺激分离的大鼠胃黏膜细胞。Western blot和EMSA方法检测ERK—1／2信号传导通路的活化程度。结果 1nmol／L TGF—α刺激胃黏膜细胞30min不仅显著诱导AP—1的活性，而且明显激活MEK和ERK—1／2；EGFR特异性抑制剂PD153035或MEK特异性抑制剂PD98059能完全阻断TGF—α诱导的胃黏膜细胞AP—1活化。结论 大鼠胃黏膜细胞EGFR通过ERK—1／2信号传导通路激活AP—1。     

VEGF-C反义寡核苷酸和姜黄素联合化疗对卵巢癌细胞SKOV3生长、粘附、侵袭能力的抑制作用

目的探讨VEGF-C反义寡核苷酸(VEGF-C ASODN)和姜黄素联合化疗对人卵巢癌细胞SKOV3生长粘附侵袭能力的抑制作用。方法 MTT法检测VEGF-C ASODN和姜黄素联合化疗对卵巢癌细胞的增殖抑制效应;MTT法检测卵巢癌细胞与细胞外基质粘附能力,体外侵袭实验检测卵巢癌细胞侵袭人工基底膜的能力。结果 VEGF-C ASODN和姜黄素联合化疗对卵巢癌细胞有明显的增殖抑制作用,使卵巢癌细胞对细胞外基质粘附率明显降低,穿透重组基质膜数目明显下降。结论 VEGF-C ASODN和姜黄素联合化疗能明显抑制卵巢癌细胞体外实验中的生长粘附侵袭能力,可望为卵巢癌提供一种有效的联合化疗方法。     

姜黄素与卡铂联合用药对肺癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨姜黄素与卡铂联合用药对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响。方法通过Western blotting检测、细胞活性检测不同浓度姜黄素和卡铂对肺癌细胞的影响;划痕实验Transwell侵袭实验检测加入姜黄素和卡铂对肺癌细胞的侵袭能力的影响;Western blotting检测NF-k B信号通路受不同浓度姜黄素和卡铂的影响。结果 10 m M姜黄素和50、100 m M卡铂联用对肺癌A549细胞的影响效果最佳;加入姜黄素和卡铂后,肺癌细胞株A549的侵袭和增殖能力明显降低,且联合用药效果较好;加入姜黄素和卡铂后,NF-k B信号通路蛋白相应下调。结论姜黄素和卡铂联合用药可以通过NF-k B信号通路抑制肺癌A549细胞株的迁移和侵袭能力。     

洛铂对卵巢癌细胞SKOV3增值抑制及对bax、bcl-2凋亡基因表达的影响

目的:研究洛泊作用于浆液性卵巢癌细胞SKOV3后其对凋亡基因bcl-2和bax表达的影响。方法:体外培养卵巢癌细胞SKOV3,用MTT比色法检测洛铂对SKOV3细胞株的增殖抑制作用,流式细胞仪检测凋亡相关蛋白bax、bcl-2的表达。结果:体外培养的卵巢癌SKOV3细胞经不同浓度的洛泊处理后细胞生长明显受到抑制,洛泊作用于卵巢癌SKOV3细胞可诱导细胞的凋亡,同时随着洛铂浓度的增加,bax基因的表达增加,而bcl-2表达减少。结论:卵巢癌SKOV3细胞对洛泊具有药物敏感性,洛泊可诱导卵巢癌细胞的凋亡,bax蛋白的表达增加和bcl-2蛋白表达的减少可能是洛泊诱导卵巢癌细胞的凋亡机制之一。     

抗菌肽merecidin通过ERK/mTOR 信号通路对肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的 探讨抗菌肽merecidin通过ERK/mTOR 信号通路对肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 实验分为对照组Control、抗菌肽Merecidin干预组和雷帕霉素Rapamycin干预组。通过CCK-8 法检测A549细胞的增殖能力,通过流式细胞术检测A549细胞凋亡和周期,通过平板划痕试验和Transwell检测A549细胞的迁移和侵袭能力,通过 Western blot 法检测A549细胞中MAPK1、MEK2、mTOR、PRAS40、EIF4EBP1 磷酸化蛋白的表达量。结果 抗菌肽merecidin能够明显抑制A549的增殖能力,处理24 h后的 IC50值为10.01 μmol /L(P<0.05)。与control组比较,抗菌肽merecidin处理后促进细胞凋亡(P<0.05),阻滞细胞周期于S期(P<0.05),细胞的迁移及侵袭能力均降低(P<0.05)。同时抗菌肽merecidin可抑制p-MAPK1和p-MEK2蛋白的表达,并且降低了mTOR、PRAS40和EIF4EBP1 的磷酸化水平(P<0.05)。结论 抗菌肽merecidin可抑制肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于S期,该作用可能与其抑制ERK/mTOR通路有关。     

羟苯维胺脂对卵巢癌细胞SKOV3的体外影响

目的探讨羟苯维胺脂(4-HPR)对卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响.方法通过细胞生长曲线和MTT法观察4-HPR对卵巢癌细胞株SKOV3的生长抑制作用,通过流式细胞观察4-HPR对细胞周期的影响和诱导凋亡作用.结果5和10 μmol/L的4-HPR可显著抑制卵巢癌细胞株SKOV3的生长和增殖,MTT显示IC50为3.2μmol/L.流式细胞检测显示4-HPR可使S期和G2期的比例增加,可诱发卵巢癌细胞株SKOV3的凋亡,其诱导凋亡的作用呈时间和剂量依赖性.结论4-HPR可抑制卵巢癌细胞的增殖,促进细胞的凋亡,在卵巢癌的治疗上有临床应用前景.