60株鲍曼不动杆菌喹诺酮类耐药基因分析

目的探究鲍曼不动杆菌喹诺酮类耐药的机制。方法收集2009年1-12月天津市三所三甲医院各类标本分离的鲍曼不动杆菌60株。采用聚合酶链反应（PCR）扩增技术对质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、acc（6’）．Ib．cr、qepA及染色体基因gyrA和parC进行基因检测,并对阳性结果进行酶切和测序鉴定。结果60株鲍曼不动杆菌中qnrA、qnrB、qmS和qepA基因均为阴性,acc（6’）-Ib基因12株阳性,经测序证实均未出现变异。37株环丙沙星耐药的鲍曼不动杆菌中30株（81．0％）gyrA基因不被HinfI酶切,26株（70％）parc基因不被Hinf I酶切,证实有基因突变存在。结论天津地区尚未发现鲍曼不动杆菌中存在质粒介导的喹诺酮耐药机制,gyrA和parC基因变异仍为鲍曼不动杆菌喹诺酮耐药的主要原因,但同时亦有其他喹诺酮耐药机制的存在。     

颅脑外伤病人痰液中鲍曼不动杆菌gyrA基因突变与环丙沙星耐药关系研究

目的了解分离自颅脑外伤病人痰液中鲍曼不动杆菌gyrA基因突变与环丙沙星耐药性的关系。方法用ATB药敏试验条板微量肉汤法测定27株鲍曼不动杆菌对14种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析gyrA基因序列。结果27株菌中除HZ16号菌株对环丙沙星敏感外,其余26株均耐药。序列分析表明HZ16号菌株gyrA基因无突变,其序列已登录GenBank(accessionAY642140),其余26株耐药菌均存在gryA基因突变,导致耐喹诺酮决定区(QRDR)第83位的丝氨酸被亮氨酸取代。其中HZ28号菌株gyrA基因序列也已登录(GenBankAY642141)。结论gyrA基因突变是导致分离自颅脑外伤病人痰液中鲍曼不动杆菌对环丙沙星耐药的主要原因。     

鲍曼不动杆菌耐药机制与治疗现状

鲍曼不动杆菌在医院内感染中占有重要的地位,特别是近年来,其在临床标本分离的革兰阴性菌中的比例增高;由于外界抗菌药的压力、鲍曼不动杆菌自身变异等因素的影响,其耐药性正在升高.     

鲍曼不动杆菌对临床抗菌药物耐药机制

鲍曼不动杆菌是医院感染最常见的病原菌之一.近年来,多重耐药及泛耐药鲍曼不动杆菌感染日渐增多,对临床构成严重威胁.本文就鲍曼不动杆菌对临床主要使用的抗菌药物的耐药机制作一综述.     

泛耐药鲍曼不动杆菌对消毒剂抗药性分析

目的探讨泛耐药鲍曼不动杆菌（PDR—AB）对普通消毒剂的抗药性。方法应用K-B法进行抗菌药物敏感性试验,筛选出鲍曼不动杆菌泛耐药菌株5株,采用纸片法和肉汤培养进行消毒剂敏感试验。结果泛耐药鲍曼不动杆菌对0．5％聚维酮碘（PVP．I）、0．1％醋酸氯己定溶液（洗必泰）、即配0．2％三氯异氰尿酸、2％强化戊二醛（浸泡）敏感性好,而对75％乙醇、0．1％-氧化氯、0．1％PVP-I和配制30min后0．2％三氯异氰尿酸等不敏感。结论0．5％PVP-I、0．1％醋酸氯己定溶液、即配0．2％三氯异氰尿酸、2％强化戊二醛（浸泡）对PDR-AB具有良好的杀灭效果,推荐采用;而低浓度含碘、含氯消毒剂以及75％乙醇效果差,不宜采用。     

骨科患者术后创面感染鲍曼不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性分析

目的了解医院骨科患者手术后创面感染的鲍曼不动杆菌的耐药情况,以指导医生合理用药,有效控制鲍曼不动杆菌耐药性的进一步发展,预防和减少医院感染的发生。方法从骨科患者手术后创面感染标本分离鲍曼不动杆菌28株,作gyrA基因测序,并进行BLASTn比对;通过测定最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)进行药敏试验,测定鲍曼不动杆菌的耐药性;选取经纯培养的鲍曼不动杆菌菌落置入含蛋白酶K溶液的离心管内,分别进行水浴,再离心,留取上清液,以此为模板PCR扩增与喹诺酮类抗菌药物耐药性相关的gyrA、qepA、qnrS、qnrA、qnrB和aac(6)-Ib基因,使用Chromas分析软件进行测序。结果鲍曼不动杆菌对诺氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、司帕沙星、左氧氟沙星、加替沙星、莫西沙星的耐药率分别为:96.43%、96.43%、96.43%、89.29%、85.71%、85.71%、82.14%、78.57%和78.57%。PCR检测28株鲍曼不动杆菌gyrA基因100%阳性,即都发生了gyrA基因突变,而其他相关基因检测均阴性。基因测序看出,其83位发生突变,即由TCA转变为TTA。结论本组分离骨科患者手术创面感染的鲍曼不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药情况严重,其中对诺氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星等的耐药率均在90%以上。临床抗感染治疗应根据耐药结果进行用药,并控制喹诺酮类抗菌药物的使用。     

志贺菌喹诺酮类耐药株gyrA和parC基因突变研究

目的检测志贺菌对喹诺酮类药的耐药情况,指导临床合理用药;探讨志贺菌喹诺酮类耐药株gyrA和parC基因的突变,分析GyrA和ParC氨基酸改变与喹诺酮类耐药的关系。方法 2010~2012年从宿州市3家综合性医院收集志贺菌76株,进行分离培养和血清型鉴定;采用K-B纸片法进行药物敏感试验;采用PCR方法检测志贺菌喹诺酮耐药决定区（QRDR）相关gyrA和parC基因,并挑选部分PCR产物进行DNA测序分析。结果收集的76株志贺菌中福氏志贺菌74株（占97.4%）,宋内志贺菌2株（占2.6%）;药敏结果显示志贺菌耐药情况严重,其中对阿莫西林耐药率最高,达100%;对头孢噻肟耐药率最低,为6.5%。对gyrA基因的序列分析发现3个导致氨基酸改变的基因点突变：Ser83→Leu,Asp87→Gly及His211→Tyr;对parC基因序列分析发现2个导致氨基酸改变的基因点突变：parC Ser80→Ile和Asp197→Asn。结论宿州市志贺菌感染仍以福氏志贺菌为优势菌群,且耐药严重,临床治疗志贺菌感染可优先选择头孢噻肟。志贺菌属对喹诺酮类药物产生耐药性与gyrA和parC基因突变有关,GyrA His211→Tyr和ParC Asp197→Asn氨基酸变异与喹诺酮类耐药的关系需进一步研究。     

耐药鲍曼不动杆菌感染的防治进展

鲍曼不动杆菌是医院感染重要条件致病菌.近年来,鲍曼不动杆菌感染日益增多,呈现多重耐药现象,给临床治疗带来很大困难.现将鲍曼不动杆菌感染的预防措施和治疗用药等防治进展作一综述.     

鲍曼不动杆菌临床感染和耐药机制研究进展

鲍曼不动杆菌是一种不发酵葡萄糖的革兰阴性球杆菌,广泛分布于土壤、水体、下水道和医院环境,还能存在于人体潮湿皮肤表面。它是一种重要的条件致病菌,不仅引起医院内感染,而且还可导致严重的社区感染和野战外伤感染。近年来,随着临床上广谱抗菌药物的大量应用,出现了多重耐药菌株,并有逐年上升趋势,特别是耐碳青霉烯类菌株出现,给临床抗感染化疗提出了严峻的挑战。研究表明其耐药机制复杂,表现在不仅可产生多种灭活酶,而且还存在外膜蛋白缺失和主动外排泵机制,是临床研究的热点和难点。     

2007-2010年医院鲍曼不动杆菌感染的耐药分析

目的 了解医院鲍曼不动杆菌感染的分布及耐药情况.方法 分析鲍曼不动杆菌菌株的标本来源和临床分布情况,用最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)法结合纸片扩散法(K-B法)检测其对抗菌药物的敏感性.结果 2007-2010年共分离鲍曼不动杆菌62株,其中53株(占85.5%)分离自痰标本,21株(占33.9%)分离自重症监护室(intensive care units,ICU).62例患者中54.8%(34例)的患者患有严重的肺部感染疾病.分离菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为20.0%、敏感率为73.3%,对其他抗菌药物的耐药率超过60.0%.泛耐药菌占33.9%(21株),其中52.4%(11株)的泛耐药鲍曼不动杆菌感染发生在ICU病房.结论 鲍曼不动杆菌的耐药率较高,且呈多重耐药趋势.加强菌株的耐药性监测,以药敏结果指导临床用药有助于减少耐药菌株的出现.

Abstract：

Objective To investigate the prevalence and antimicrobial resistance of Acinetobacter baumannii in nosocomial infection.Methods Clinical features and the origin of A.baumannii samples were analyzed retrospectively.The minimal inhibitory concentration(MIC)and Kriby-Bauer diffusion test(K-B)were used to determine the Susceptibility to the antimicrobial agents.Results A total of 62 strains of A.baumannii were isolated from 2007 to 2010.Fifty-three strains(85.5%) of specimens were separated from respiratory tract.The isolation rate of A.baumannii was the highest in intensive care units(ICU)(21 strains,33.9%).54.8%(34/62)of patients suffered from severe lung infection.The resistance rate of cefoperazon/sulbactam was 20.0%.and the susceptible rate was 73.3%.The resistance rate to other antimicrobial agents is above 60.0%.The prevalence of multi-drug resistance of A.baumannii Was about 33.9%,and 52.4% of this kind of A.baumannii were occured in ICU.Condusion The infection of A.baumannii is more and more severe and tends to be resistant to multiple-drug and pan-drugs.The susceptible testing should be conducted to help the clinic to decrease the resistance rate.     

多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学研究

目的 了解我院临床分离的43株多重耐药鲍曼不动杆菌的遗传背景和可能性来源,以及不同来源菌株整合子的携带情况.方法 采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对鲍曼不动杆菌进行分子分型,限制性内切酶选择Apa I;采用多位点序列分型(MLST)技术对全部菌株的等位基因谱进行比较分析;采用PCR方法对全部菌株的整合子进行扩增.结果 PFGE结果显示43株鲍曼不动杆菌共分成4个型,其中A型和B型又分别划分为4个和2个亚型,MUST结果则显示有3个等位基因谱,分别为1-3.3-2-2-7-3,1.3-3-2-2-11-3,1-3-3_2-2-14-3,其中PFGE方法中B型和D型菌株具有相同的等位基因谱(1-3-3-2-2-11-3);A型克隆株主要分布于ICU,烧伤科病房仅检测到B型和D型克隆株;43株菌株整合子的携带率为62.8%,其中A1、A2、A3、A4、B1、B2、C及D型菌株所占的构成比分别为40.7%、18.5%、7.4%、3.7%、14.8%、3.7%、3.7%及7.4%.结论 本地区多重耐药鲍曼不动杆菌不仅呈多克隆系并存,而且同一克隆系在不同环境条件刺激下可进一步分化成不同亚型;相同类型整合子的不同携带情况也证实了菌株在进化过程中耐药机制可能会出现变化.     

鲍曼不动杆菌的临床分佈及多重耐药危险因素分析

目的鲍曼不动杆菌是重要的医院获得性感染的病原菌。多重耐药(MDR)鲍曼不动杆菌感染常与住院时间长,住院花费多,病死率高相关。探讨我院鲍曼不动杆菌临床分布和MDR危险因素。方法收集2010年1月-2012年12月我院分离出的鲍曼不动杆菌住院患者病例,分析其分佈及耐药情况,并分析MDR危险因素。结果共收集鲍曼不动杆菌感染病例500例,MDR组患者440例,非MDR组患者60例,科室分佈以心外科最多,占47.5%,标本分佈以下呼吸道标本最多,占84.8%。MDR独立危险因素有2个:年龄70岁(OR 0.871,95%CI 0.447-1.698,P=0.037)和住院时间50 d(OR 0.695,95%CI 0.325-1.489,P=0.046)。结论 MDR鲍曼不动杆菌感染多发生于心外科,以肺部感染最为多见。年龄70岁,住院时间50d患者易发生MDR鲍曼不动杆菌感染,应予以重视。     

呼吸重症监护病房多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因研究

目的 观察我院呼吸重症监护病房(RICU)临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因和消毒剂耐药基因qacE△1-sul1存在状况.方法 收集RICU分离多重耐药鲍曼不动杆菌16株,采用PCR方法检测8种β-内酰胺酶基因(TEM、SHV、PER、DHA、IMP、VIM、OXA-23、OXA-24)和消毒剂耐药基因(qacE△1-sul1)共9种基因.采用多基因聚类分析方法进行多重耐药菌株亲缘性分析.结果 16株多重耐药鲍曼不动杆菌中blaOXA-23阳性5株(31.25%),blaTEM阳性2株(12.50%),blaDHA 2株(12.50%),blaOXA-24 1株(6.25%),blaPER 1株(6.25%).blaSHV、blaIMP、blaVIM均未检出,消毒剂耐药基因检测qacE△1-sull阳性16株(100.00%).多基因聚类分析发现存在克隆传播现象.结论 我院RICU多重耐药鲍曼不动杆菌携带多种β-内酰胺酶基因,消毒剂耐药基因携带率高,聚类分析显示存在克隆传播现象,应引起临床重视.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药性及同源性分析

目的明确我院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药谱特点及其同源性。方法采用Vitek-32全自动细菌鉴定药敏系统及纸片扩散法（K-B法）测定鲍曼不动杆菌对16种抗菌药物的敏感性;通过重复序列引物聚合酶链反应（rep-PCR）分析其基因同源性。结果33株亚胺培南耐药株除对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率〈10％,对其他抗菌药物的耐药率均在54．5％以上;rep-PCR将鲍曼不动杆菌分为E1、E2、E3三个基因型,其中A型15株,为主要的流行型别。结论我院流行的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的多重耐药现象严重,且主要是由同一克隆株传播所致。     

常用消毒剂对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑制作用

目的 明确临床常用消毒剂对我院ICU病房流行的多重耐药鲍曼不动杆菌的最低抑制浓度（MIC）值,帮助临床选取正确的多重耐药鲍曼不动杆菌消毒剂.方法 收集本院ICU流行鲍曼不动杆菌临床分离株8株,制备菌液,以微量稀释法测定临床常用消毒剂对8株鲍曼不动杆菌的MIC值.结果 碘伏、过氧乙酸,氯己定、2%戊二醛和乙醇对8株鲍曼不动杆菌的MIC值分别为0.001 6%、0.01 1%、62.5mg/L、1%和75% 肥皂对鲍曼不动杆菌无作用.5种消毒剂对鲍曼不动杆菌的有效稀释比,从高到低依次是过氧乙酸、氯己定、碘伏、戊二醛和乙醇.结论 过氧乙酸、氯己定为本院抑杀环境中多重耐药鲍曼不动杆菌的首选消毒剂,而2%戊二醛不主张应用.碘伏能够作为体表中的有效消毒剂,而乙醇应用消毒时一定要保证浓度在75%.我们认为消毒剂对于不同细菌的MIC值检测正如抗菌药物敏感试验一样对于控制细菌感染性疾病的流行有着重要价值.     

宁波地区耐多药结核分枝杆菌喹诺酮耐药gyr基因突变研究

目的 为阐明宁波地区耐多药结核分枝杆菌(Multiple drug-resistant tuberculosis, MDR-TB)的gyr基因突变特征,深入研究MDR-TB对喹诺酮类药物耐药与gyr基因突变特征的关系。方法 采用1%比例法对MDR-TB进行氧氟沙星药敏检测实验,通过 DNA直接测序法分析MDR-TB的gyr基因突变情况。结果 120株MDR-TB临床分离株中有34株对喹诺酮耐药,总耐药率为28.33%(34/120)。34株耐喹诺酮菌株中,30株gyr基因发生突变,突变率为88.24%(30/34)。30株gyr基因发生突变的菌株中gyrA基因突变有29株,占96.67%(29/30),突变位点包括90、91和94位氨基酸;gyrB基因突变有2株,其中1株均合并gyrA基因突变,占6.67%(2/30),突变位点包括499和502位氨基酸。结论 宁波地区MDR-TB对喹诺酮类药物耐药形势较为严峻,gyrA基因突变与MDR-TB对喹诺酮类药物耐药相关。     

鲍曼不动杆菌基因分型方法的研究进展

目前用于鲍曼不动杆菌基因分型的方法很多，主要包括质粒图谱分析、随机扩增多态DNA（RAPD）、重复序列聚合酶链反应（REP—PCR）、稀有限制区聚合酶链反应（IRS-PCR）和脉冲场凝胶电泳（PFGE）等方法，本文就这5种方法的原理、特点、实验方法和应用实例等方面做一简要综述。