穿膜肽-抗体-微球偶联物的制备方法研究

目的：探讨制备穿膜肽-抗体-微球新型药物传送系统的可行性。方法：采用N-琥珀酰亚胺基-3-（2-吡啶二硫）-丙酸酯（SPDP）交联法将穿膜肽-增强型绿色荧光蛋白融合蛋白（CPPs-EGFP）、牛血清白蛋白微球（BSA-NS）、乙肝高效价免疫球蛋白（HBIg）分别采用一次偶联法和二次偶联法两种交联方案进行共价交联,采用还原和非还原SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和免疫荧光法评价穿膜肽、抗体、微球间的交联。结果：两种交联方案制备的穿膜肽-抗体-微球偶联物,SDS-PAGE还原电泳均可见在低分子量端形成三条蛋白条带,非还原电泳均未见条带;在不同激发波长的荧光显微镜下,均可见微球表面分别发出绿色荧光和红色荧光。结论：应用SP-DP交联剂,无论是一次偶联法还是二次偶联法均能够将穿膜肽、抗体、微球有效地进行偶联,为进一步研究穿膜肽-抗体-微球新型药物传送系统的特性奠定了基础。     

星点设计-效应面法优化去甲斑蝥素壳聚糖-丝素蛋白栓塞微球的制备

目的:制备去甲斑蝥素壳聚糖-丝素蛋白栓塞微球(Norcantharidin-loaded chitosan-fibroin micro-spheres for embolization,NCTD-CS-SF-MS),考察其包封率,载药量及外观形态,并对其体外释放特性进行考察。方法:采用乳化-交联固化法制备NCTD-CS-SF-MS,其中以液体石蜡为油相,壳聚糖(chitosan CS)与丝素蛋白(silk fibroin SF)的物理混合溶液为水相,Span-80为乳化剂,戊二醛为交联剂。星点设计-效应面法优化制备工艺,扫描电镜观察微球表面形态及X-射线衍射(XRD)、差示量热扫描(DSC)表征微球特性。采用体外动态透析法测定微球在不同介质条件下的释药性能。结果:制备的微球形态圆整,大小均匀,平均粒径约(184±5)μm,载药量(15.08±2.85)%,包封率(27.46±1.25)%。微球在0.1 mol.L-1 HCl、PBS(pH=7.4)和生理盐水中的释放均遵循Weibull方程。结论:所优化的制备工艺简单易行,缓释作用显著。     

右旋酮洛芬-β-环糊精明胶微球的制备

目的:优化右旋酮洛芬-β-环糊精明胶微球的处方和制备工艺.方法:以单因素试验法初选,均匀设计精选.结果:所得微球平均包封率为94.9%,平均载药量为47.4%,药物平均含量为28.7%,平均粒径为(51.16±20.34)μm.结论:以优化的制备工艺制得的微球粒径分散良好,达到了缓释口服微球制剂学的要求.     

注射用人α-心房肽缓释微球的制备及体外释药研究

目的 制备注射用人α-心房肽缓释微球,以实现缓释作用和减少用药次数.方法 采用复乳-液中干燥法和冷冻干燥,以聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)为载体,羧甲基纤维素钠(CMC)水溶液为分散介质,乙酸乙酯为有机溶剂,甘露醇为保护剂,制备注射用人 α-心房肽缓释微球;采用正交试验法,以微球粒径、收率、包封率为指标,优化微球的处方和制备工艺;采用透析法考察含药微球的体外释药特性,计算微球累积释药百分率,绘制体外释药曲线.结果 通过正交设计筛选出了制备注射用人 α-心房肽缓释微球的处方和制备工艺,载药量为35.4%,包封率为89.7%,Zeta电位为(-28.6±1.64)mV,含药缓释微球的体外释药过程符合Higuchi方程.结论 制备的注射用人 α-心房肽缓释微球具有长时间的缓释作用.     

胰岛素聚β-羟基丁酸酯微球制备工艺的研究

目的以生物降解材料聚β-羟基丁酸酯(PHB)为载体材料制备胰岛素微球.方法采用液中干燥法制备,并通过均匀设计法和星点设计法来优化其制备工艺,经差示扫描量热分析(DSC)进行物相验证.结果微球的DSC图谱中仅有PHB的峰,而胰岛素的特征峰消失.结论证明形成了胰岛素聚β-羟基丁酸酯微球.     

阿奇霉素壳聚糖-海藻酸钠肠溶微球的制备和评价

目的:制备阿奇霉素壳聚糖-海藻酸钠肠溶微球,并评价各因素对微球性质的影响.方法:以壳聚糖-海藻酸钠为基质材料,采用复凝聚法制备阿奇霉素壳聚糖-海藻酸钠肠溶微球.通过单因素考察研究对粒径、收率和包封率影响较大的因素,以包封率和释放度为指标进行正交设计优化最佳处方.结果:海藻酸钠浓度为3％、氯化钙浓度为2.5％、壳聚糖浓度为0.25％和投药量为20％为最佳处方.该处方制得的微球形态圆整,粒径分布合理,包封率和收率均较高.体外溶出试验表明,该条件制得的微球在酸中的释放量小于10％,可减少阿奇霉素的胃肠道不良反应;在pH6.8的缓冲液中快速释放,能迅速达到最小抑菌浓度(MIC).结论:阿奇霉素壳聚糖-海藻酸钠肠溶微球能有效避免药物在酸性环境中释放.     

顺铂白及胶微球的制备及栓塞特性

目的:顺铂白及胶微球的制备及栓塞特性的考察.方法:采用乳化-冷凝-化学交联技术制备顺铂白及胶微球,利用正交试验设计法优选顺铂白及胶微球的制备条件和工艺;对微球的载药量、大小及分布、形态及表面状态、体外释放以及栓塞特性等进行了研究.结果:微球平均粒径为(108.3±35.2)μm,顺铂含量为(20.7±6.2)%;电镜扫描显示,微球球形圆整,表面粗糙;微球经60Co辐射灭菌要求;其体外释药实验表明顺铂白及胶微球有明显的缓释性能;动物栓塞试验以及对肿瘤患者的栓塞治疗均显示良好的栓塞效果.结论:该微球制备工艺可行,制得的顺铂白及胶微球可达到介入栓塞和化疗的双重目的,适用于肝癌患者的介入栓塞治疗.     

白藜芦醇-羟丙基-β-环糊精-壳聚糖缓释微球的制备及表征

目的:制备白藜芦醇(RES)-羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)-壳聚糖缓释微球(RES-HP-β-CD-Chitosan),并进行表征。方法:按质量比1∶7∶0.25称取RES原料药、HP-β-CD和壳聚糖,先采用溶剂法制备RES-HP-β-CD包合物,在此基础上加入壳聚糖,采用喷雾干燥法制得RES-HP-β-CD-Chitosan。采用光学显微镜观察所制缓释微球的粒径。采用X射线衍射法、差式扫描量热法、红外光谱法、扫描电子显微镜对所制RES-HP-β-CD-Chitosan进行表征。采用紫外分光光度法测定所制缓释微球中RES的含量,计算载药量和包封率。结果:所制RES-HP-β-CD-Chitosan的粒径为(2.23±0.35)μm(n=300),表征结果显示,RES-HP-β-CDChitosan呈球形,微球表面出现收缩褶皱,RES被包合于羟丙基-β-环糊精中,以分子状态或无定型状态存在。RES-HP-β-CD-Chitosan的载药量为11.67%(n=3)、包封率为96.27%(n=3)。结论:成功制得RES-HP-β-CD-Chitosan。     

去甲斑蝥素壳聚糖-丝素蛋白栓塞微球的制备以及体外释放研究

目的:研究利用壳聚糖(chitosan,CS)和良好生物相容性的丝素蛋白(silk fibroin,SF)为载体,去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)为模型药物,制备去甲斑蝥素壳聚糖-丝素蛋白微球(norcantharidin-chitosan-silk fibroin-microspheres,NCTD-CS-SF-MS)。并考察微球的载药量、包封率及微球表面形态以及微球的体外释放特性。方法:以液体石蜡为油相,壳聚糖与丝素蛋白的物理混合溶液为水相,Span-80为乳化剂,戊二醛为交联剂;采用乳化-交联固化法制备NCTD-CS-SF-MS。星点设计优化制备工艺,扫描电镜,观察微球表面形态及X-射线粉末衍射法(X-ray power diffraction,X-RD)和差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)表征微球特性;采用体外动态透析法测定微球在不同介质条件下的释药性能。结果:制备的NCTD-CS-SF-MS形态圆整,粒径分布较为均匀,平均粒径约(184.0±5.0)μm,载药量(15.08±2.85)%,包封率(27.46±1.25)%。NCTD-CS-SF-MS在0.1mol/L HCl,PBS(pH=7.4)和9.0mg/mL氯化钠溶液的3种介质中的释放均遵循Weibull方程。结论:优化的NCTD-CS-SF-MS制备工艺简单易行,载药量高,缓释作用良好。     

美罗培南-海藻酸钙微球的制备与性能研究

目的 针对野战条件下战创伤感染缺乏长效抑菌杀菌药物现状,研制一种高效、安全、易用的新型外用抗感染复合材料.方法 应用天然高分子海藻酸钠、无水氯化钙为基质材料,强效抗生素美罗培南为包被药物,采用静电液滴法及冷冻干燥等制备工艺,制备美罗培南-海藻酸钙微球,并对其包封率、载药量、膨胀性及体外释药性进行检测,采用模拟药敏纸片法对其抑菌效果进行评估.结果 所制备的载药微球包封率为62.27%,载药量为19.40%,膨胀率可达80%;微球的释药模式符合缓释特征,可长效抑菌.结论 静电液滴法制备美罗培南-海藻酸钙微球具有可行性,微球性质稳定,释药模式理想、抑菌效果好.     

胰高血糖素样肽-1长效注射微球的研究

目的制备载胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的长效注射微球，并对其体外释放特性及药效学进行考察。方法采用复乳法(W/O/W)制备载GLP-1聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物(PLGA)的微球；考察微球的粒径大小、外观及包封率等理化特性；以HPLC法测定微球的体外释放速率；在体动物法评价微球制备工艺和体外释放过程中GLP-1的生物学活性。在糖尿病模型小鼠体内考察了微球的降血糖作用。结果微球球形圆整，分散性好，包封率在80%以上；GLP-1微球1个月的体外累积释放可达85%，其释放行为符合近似零级释放模式；使用明胶溶液作为内水相，较好地保持了制备工艺过程中的GLP-1生物学活性，在体外释放过程中GLP-1的生物学活性略有下降；GLP-1微球可显著降低糖尿病模型小鼠的血糖水平，降糖作用可维持1个月。结论用可生物降解的聚合物PLGA作为载体材料，可以将GLP-1制备成缓释1个月的注射微球。     

左炔诺孕酮-聚3-羟基丁酸酯缓释微球的研究

目的：优化制备工艺,用可生物降解的成球材料制备缓释并有优良抗生育效果的左炔诺孕酮-聚3-羟基丁酸酯微球。方法：以均匀设计优化微球的液中干燥法制备工艺,用DTA确证含药微球的形成,对微球的外观、粒径、载药量、体外释药、稳定性及小鼠体内抗生育等进行了研究。结果：微球平均粒径为64 μm,(28.7～85.8) μm的微球占总数90％以上,微球中氯仿残留量低于0.001％,体外释药符合Higuchi方程,释药T_1/2比原药延长约1.8倍,4,25及40℃(RH 75%)放置3个月稳定。对小鼠具有抗生育效果。结论：微球的制备工艺满意,与原药相比,微球对小鼠有明显的缓释、延长抗生育时间和降低毒性的作用。     

HPLC法测定5-氟尿嘧啶磁性碳微球的药物含量及包封率

目的:建立磁性碳微球中5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)含量及包封率的HPLC测定法.方法:色谱柱为DiamonsilTM ODS-C18柱(200mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(10∶90)为流动相,流速1.0 ml· min-1,检测波长为260 nm,柱温为30℃,采用磁性分离法分离微球和游离药物,测定并计算药物含量和包封率.结果:5-Fu在1.0～300.0 μg·ml-1范围内线性关系良好(r =0.999 9),方法回收率为99.52％～ 100.12％,日内、日间RSD均小于1.0％,制备的微球平均包封率为(66.62±1.18)％,平均载药量为(221.69±3.99) μg·mg -1.结论:本法简便,灵敏,准确,可用于5-Fu磁性碳微球的含量及包封率测定.     

喷雾干燥法制备神经毒素-Ⅰ壳聚糖鼻腔给药微球

采用喷雾干燥法制备神经毒素-Ⅰ壳聚糖微球,利用正交设计优化微球处方,所得微球平均载药量为(19.23±0.42)%、收率为(92.1±2.1)%。体外释药数据用Higuchi模型拟合得方程Q=11.42t1/2-5.89(r=0.9920),表明该微球具有缓释作用。     

含烟酸高分子药物微球的合成研究

目的 合成可提高药物吸收度的含烟酸的高分子纳米微球。方法 通过DCC法和酰氯法将降血脂药物烟酸以酯键连接到甲基丙烯酸-2-羟基乙酯上得到不饱和的含烟酸的单体(MP)化合物，在此基础上用乳液聚合法制备含烟酸的纳米级高分子微球。结果 单体和聚合物的结构均经核磁共振谱确定，微球的粒径及表观形态用透射电子显微镜观测。结论 乳液聚合法是合成含烟酸高分子药物微球的一种行之有效的方法。     

MTT法分析5-氟尿嘧啶缓释微球的体外细胞毒作用

目的:探讨两种不同制剂5-氟尿嘧啶在体外对胃癌细胞的影响,为临床腹腔灌洗防治胃癌腹腔种植奠定实验基础.方法:人胃癌细胞株BCG820常规培养于含10%小牛血清的DMEM, MTT法来观察不同处理因素(DMEM对照组、5-Fu组和5-Fu缓释微球组)随时间对肿瘤细胞生长的影响.结果:BCG820胃癌细胞在5-Fu组和5-Fu缓释微球组培养均出现细胞的大体形态改变,第6天BCG820细胞杀伤率, 5-Fu为91.6%;5-Fu缓释微球组为97.1%.结论:不同时间不同处理因素肿瘤细胞细胞杀伤率,可见5-Fu缓释微球组体外对胃癌细胞杀伤作用随时间延长优于5-Fu组.     

药用载体星状聚乳酸-羟基乙酸共聚物的合成与表征

目的降低水溶性药物微球制剂突释现象。方法以辛酸亚锡为催化剂,采用熔融缩聚法合成星状聚乳酸-羟基乙酸共聚物(star-poly(lactic acid-glycollic acid)copolymer,star-PLGA);采用IR、1H-NMR、GPC、DSC及葡萄糖鉴别反应确证共聚物结构,考察理化性质;以天麻素为模型药物,考察star-PLGA微球和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic acid-glycollic acid)copolymer,PLGA)微球的释放行为。结果红外光谱和核磁共振分析结果与文献报道一致;凝胶渗透色谱测定重均相对分子质量为15 178;差示扫描量热分析结果表明star-PLGA为非结晶态;葡萄糖鉴别反应表明star-PLGA中有共价键结合的葡萄糖。Star-PLGA微球能很好地控制突释现象,释放行为平稳,其释放曲线符合Higuchi方程。结论成功合成了star-PLGA(物质的量比50∶50),作为微球制剂的载体star-PLGA能降低水溶性药物的突释现象。     

格列吡嗪壳聚糖-三聚磷酸钠pH敏感性微球的制备及性能研究

目的:以壳聚糖为载体,制备格列吡嗪壳聚糖-三聚磷酸钠pH敏感性微球,并对其性能进行研究。方法:采用正交试验设计法L9(34)优化处方组成及微球制备工艺,通过扫描电镜法、红外光谱法对微球的表面形态及内部结构进行表征,并对其体外释放性能进行研究。结果:最佳工艺条件下制得的微球形状圆整、表面光滑,平均包封率、载药量、粒径分别为75.17%,11.04%和50μm。此微球在模拟胃液中3 h,累积释放率达50%,转移到肠液中19 h后,累积释放率达80%。结论:该微球具有明显的pH敏感性和控释性能。     

干扰素-α微球的制备及其体外释药性能研究

目的:通过正交设计试验优化干扰素-a聚乳酸-羟乙酸共聚物微球的制备工艺,并考察其体外释药性能.方法:采用复乳-溶剂挥发法制备干扰素微球,通过L9(3)4正交试验设计优选微球最佳制备工艺条件,并对制备工艺的重现性、微球的性质及体外释药性能进行了考察.结果:干扰素微球的最佳制备工艺稳定、重现性好,微球的形态圆整,粒度分布均匀,平均粒径为10.71μm,干扰素被证明包裹在微球中,载药量为8.06%,包封率为36.97%.干扰素微球在61 h的累积释药量约为86%,t1/2为10.8 h.结论:本研究获得了较满意的干扰素微球制备工艺,其体外释药性能符合长效制剂特征.     

白益母草总生物碱聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球的制备

目的:优化蒙药白益母草总生物碱的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球的处方工艺,制备微球并对其进行质量考察。方法:采用复乳-液中干燥法制备白益母草总生物碱PLGA微球,以处方中PLGA质量浓度、聚乙烯醇(PVA)浓度及内水相/油相体积比为因素,以微球的载药量、包封率、收率的综合评分为指标,采用L9(34)正交试验优化制备微球的处方工艺,并考察微球形态、粒径及体外释药情况。结果:最优工艺为PLGA 200 mg/ml、PVA 2%、内水相/油相的体积比为1∶5;验证试验中平均包封率为(83.2±2.4)%,平均载药量为(4.16±0.17)%,平均收率为(86.7±3.6)%,综合评分结果为(95.7±4.4)%,RSD均小于5.0%(n=3);制备的微球形态圆整,表面光滑,粒径分布均匀,平均粒径为(22.3±2.4)μm;微球24 h体外累积释放度为(82.3±3.5)%,符合一级释放模型(r=0.972 4)。结论:优选工艺稳定;制备的微球具有良好的缓释性能,质量符合要求。