615系小鼠可移植性乳腺癌株(Ca761)的实验研究

Ca761是将615系小鼠的一自发A型乳腺癌,经同系移植而建立的一个新的小鼠乳腺癌模型。经11年190多代的移植,生长特性已基本稳定:它是615系小鼠的一个同基因型瘤株,在615系小鼠中移植成功率为100%,无自然消退,宿主平均存活时间为17.6±4.6天;基本不受615系小鼠性别和年龄的影响,无论是用埋块法或悬液法接种,或经液氮冷冻,复苏,其生长特性均保持稳定。 Ca761有明显的转移倾向;并已建成其腹水型及体外细胞系;它对所试12种常用抗癌药中的7种表现出不同程度的敏感性,这与乳癌的临床化疗情况有一定的相似性,故Ca761对肿瘤和乳腺癌的防治研究可能具有较大的实用价值。     

615系小鼠乳腺癌的超微结构研究

本文综合报道了615系小鼠乳腺癌自发瘤Ca841、Ca842和乳腺瘤株Ca759、Ca761、Ca763移植瘤的透射电镜观察。Ca841、Ca842、Ca761、Ca763的原代瘤光镜诊断符合Duun氏小鼠乳腺癌分类的A型,而Ca759则为B型。在超微结构方面,它们之间相似之处主要表现在瘤细胞均呈现不同程度的多形性,核质此高,核仁明显,可见核分裂相,表面有微绒毛,细胞间有细胞连接,胞质中均可见A型病毒样颗粒,核糖体特别丰富而其它细胞器较少。综上符合一般癌细胞的特征。它们之间不同之处,在Ca841、Ca842,其瘤细胞与肌上皮样细胞形成腺泡样结构,含有A型和B型两种病毒样颗粒,瘤细胞可分明、暗二型;Ca759瘤细胞多紧排列成癌巢,也有明、暗二型瘤细胞;Ca761、Ca763瘤细胞排列较分散,不能区分明、暗细胞,其细胞器较丰富除含大量多聚核蛋白体外,尚可见高尔基复合体和微丝。除Ca761外,均可见基膜。在Ca761有时可见从中心粒直接发出伸向细胞表面的纤毛。就我们所见,进行了讨论。其中特别值得提出的是:原代A型乳腺癌在移植过程中有的可转变成B型;存在于原代癌中的A型及B型病毒颗粒在移植中B型颗粒多丧失而A型颗粒可持续存在;明细胞与暗细胞似乎是处于不同功能状态的同一细胞,暗细胞可能处于功能活跃状态;某些瘤细胞中所见的微纤维与瘤细胞的活动与侵袭可能存在一定关系。另外,令人感兴趣的是Ca763的某些瘤细胞中,可见有从中心粒发出的纤毛,这点在其它文献中尚未见报道。     

615系小鼠可移植性乳腺癌Ca763和Ca761的超微结构

本文报告615系小鼠可移植性乳腺癌Ca763和Ca761的透射电镜观察。发现两瘤株细胞均呈片状或散在分布,未形成原始腺腔样结构。细胞大小不一,多形性,由发育不良的紧密连接相连,间质极少,几无淋巴细胞浸润。Ca761、Ca763原代癌属A型腺泡癌,多代移植使瘤组织类型发生了变异,腺泡型去分化为实性型,瘤组织中也未见B型病毒样颗粒,而A型颗粒则存在于Ca761、Ca763各代粗面内质网内。Ca761胞质内可见大量成团排列的胞质细丝,但未见致密小体及胞质微饮小泡。Ca763少部分瘤细胞内亦可见与质膜平行排列的胞质细丝,有时可见半桥粒和不连续的基板,少数细胞可见直接从中心粒长出的纤毛突向细胞间隙。     

三株小鼠乳腺癌(Ca759, Ca761, Ca763)的肿瘤演进

观察了三株615系小鼠可移植性乳癌(Ca759、Ca761、Ca763)在建株和保种过程中肿瘤组织形态学与生物学行为方面的变化。分析比较肿瘤的演进过程,其共同特点为:瘤组织结构趋向简化,核分裂数增多,接种后肿瘤生长的潜伏期和宿主生存期缩短。但是这些变化发生的迟早、进展快慢及形态学表现等,在三个瘤株之间也有某些差异。Ca759自第1代至140代,Ca761自第1至79代,传代过程组织结构简化均呈渐进性。Ca763移植至第5代后肿瘤潜伏期与宿主存活期急剧缩短,组织学图象与原发瘤及第4代有显著差别。Ca761自80代以后宿主存活期突然缩短,瘤细胞核分裂数增多。三个瘤株演进的这些差异似乎表明在引起演进的机制上存在着差别,这是值得进一步探讨的问题。     

615系小鼠可移植性乳腺癌株(Ca759)的实验研究

Ca759是1975年9月将615系经产雌鼠的一自发B型乳腺癌经同系移植而建立的一个新瘤株,迄今已传201代,其移植成功率均为100%,皮下移植瘤的潜伏期为5.0±0.3天,存活期为26.9±3.6天。Ca759于常规移植后,局部肿瘤的生长曲线可分为潜伏期、缓慢生长期和快速生长期,即使到晚期局部肿瘤十分巨大,也很少发生溃破,而带瘤宿主也无明显的恶液质表现,转移罕见。随着肿瘤的增长,脾脏也进行性增大,瘤系数与脾系数也均不断增大,两者呈明显的正相关。 Ca759对临床常用十种抗癌药中有8种表现出不同程度的敏感性,特别是环磷酰胺对Ca759的抑瘤率达到100%,对氨甲碟呤、三尖杉酯碱也敏感,这就为抗癌药物的筛选及抗肿瘤作用原理的研究提供有一个较敏感而又有特点的模型。     

615系小鼠自发乳腺癌的发病率及病理形态学观察

100对615系种鼠,常规饲养繁殖,观察33个月(终生),其乳腺癌发病率为5.5%(11例全部发生于经产雌鼠),低于肺腺癌(11%,22例,雌雄各半)而居第二位,故615系小鼠仍属低乳癌品系。对615系小鼠的46例自发乳腺癌进行了病理形态学检查分析:瘤细胞可分为小、中、大三类。组织分型属A型者18例,多由小细胞及少量中细胞构成;属B型者28例,除小细胞外往往可见较多的中细胞甚或主要由大细胞与中细胞构成。B型乳腺癌的分化程度似较A型者为低。转移主要发生于肺部。7例经镜检证实属乳腺癌的肺转移瘤,其原代瘤属A型者1例,属B型者6例。肺转移瘤的组织像与原发瘤基本相同者4例;而细胞变大,呈实心排列,显示分化程度低于原发瘤者3例。     

615系小鼠乳腺癌细胞系(Ca761/L)的建立及其生物学特性

Ca761/L是将615系小鼠实体型乳腺癌株(Ca761/S)在体外培养而建成的一个小鼠乳腺癌细胞系,它是一个生长迅速而稳定的悬浮培养的瘤细胞系,迄今已在体外培养二年,传至150余代。其细胞形态以中圆形为主,多为单核,电镜下显示恶性细胞的征象并可见到A型病毒样颗粒。细胞化学(DNA、RNA、SDH、5′AMPase、ACP等)的观察结果与电镜所见相符。培养至第5天细胞可增长27.4倍。分裂指数以第3天最高达18‰。瘤细胞核型为45或43,-2X,tri12±tri17,+M1～5。≥7μg/ml ConA就产生凝集反应,甚至不加ConA也可能出现自发凝集。将5×10~6浓度细胞经不同途径接种于615系小鼠,成瘤率达100%。无一例自发缓解且保存其转移特性。支原体检测阴性。因此,Ca761/L具有较大的推广应用价值。     

两株人胃腺癌裸鼠移植瘤模型的建立

用两株人胃腺癌细胞系（ＧＣ－８０３和ＳＧＣ－７９０１）接种于裸小鼠皮下，形成初代移植瘤后鼠间传代，观察和比较了两株胃癌细胞系初代和子代移植瘤的移植成功率、生长特性和组织病理变化。结果显示：两株胃癌细胞系均能形成裸鼠皮下移植瘤，鼠间传代目前已至第１０代，总移植成功率达１００％，尚未发现移植瘤自发消退现象。比较两组移植瘤的生长速度，发现ＳＧＣ－７９０１组比ＧＣ－８０３组生长迅速。实验中未观察到裸鼠的主要脏器有转移灶形成。组织学检查表明两组移植瘤均为低分化腺癌结构，染色体分析显示两株移植瘤均具有人类恶性肿瘤细胞染色体的特点。该裸鼠移植瘤模型可作为一种有价值的工具用于胃癌防治的研究     

615系小鼠自发性乳腺癌Ca841、Ca842原代瘤的超微结构

615系小鼠原代乳腺癌Ca841、Ca842的组织学所见主要为大小不一的腺泡样结构。腺泡由排列紧密、大小较为一致的瘤细胞和肌上皮细胞组成,间质极少,符合小鼠A型乳腺癌诊断。癌细胞分明、暗两种,外形不规则,表面多微绒毛,核质比高,核大多呈卵圆形,偶见畸形。核仁增大、增多,可见边集。细胞器简单,除大量多聚核蛋白体外,有少量粗面内质网。胞质内可见70nm左右的A型病毒样颗粒,腺泡腔面微绒毛上可见正在出芽的B型病毒样颗粒,腺腔中有大量100nm大小的成熟B型病毒样颗粒。     

可移植性小鼠白血病模型L_(7212)的建立

作者于1972年在615系小鼠中发现1只自发白血病小鼠,以其脾及淋巴结细胞悬液在同系成年小鼠中移植传代,成功地建立了另1株可移植性小鼠白血病模型,定名为L_(7212)。通过对其进行一般生物学特性、病理形态学、细胞化学、电子显微镜下结构及对抗肿瘤药物的敏     

大鼠自发性乳腺癌瘤株的建立和病理学研究

[目的]评价重组人干扰素α2b鼻腔喷雾剂对预防治疗SARS-CoV病毒感染恒河猴的作用。[方法]10只恒河猴随机分为2组,每组5只。分别为试验组(重组人干扰素α2b鼻腔喷雾剂)和对照组(空白干扰素)。分别在攻毒前19h和1h,攻毒后7h、23h、31h、47h、55h、71h、95h和119h不同时间经鼻吸入受试物,0.4ml/只。按计划定时取咽拭子做real-timePCR检测和病毒分离;取静脉血做病毒分离检测、中和抗体、IgG、血常规、血生化和血凝指标。[结果]1.SARS感染对照组:全部动物咽拭子标本经real-timePCR均检出SARS-CoV病毒,持续时间从攻毒后2天至8天。攻毒后2天3只、5天1只、7天2只,其咽拭子标本中病毒分离阳性,进一步证实病毒在体内的复制。攻毒后,诱导产生高滴度的抗体和中和抗体,证实病毒感染。大体解剖全部动物肺脏为灰白色,有大面积出血,其中2只动物肺脏与胸壁有粘连,组织病理称典型SARS肺炎性病变。2.干扰素试验组:和对照组相同时间取的咽拭子等标本中,real-timePCR检测和病毒分离均未检出病毒。攻毒后病毒导致机体产生的中和抗体和IgG抗体的反应很弱。血常规、血生化和血凝指标结果表明干扰素试验组动物攻毒后各项指标较试验前比较没有显著性改变;大体解剖动物肺脏为灰粉色,4只动物肺脏有少量出血,其中1只动物肺脏与胸壁有粘连,组织病理未见典型SARS肺炎性病变。因而认为,重组人干扰素α2b鼻腔喷雾剂可以有效阻断SARS-CoV病毒对恒河猴的感染;;为预防人类感染SARS提供参考。     

三株小鼠乳腺癌(Ca759,Ca761,Ca763)带瘤小鼠的免疫形态学研究

通过对三株(Ca759,Ca761,Ca763)可移植性乳腺癌带瘤小鼠的双侧腋下与腹股沟区淋巴结、脾脏、胸腺及肿瘤周围间质的组织学动态变化进行比较观察,认为此三组带瘤小鼠免疫形态学的共同变化是;1.淋巴结副皮质区缩小(开始时间各有早晚);2.淋巴结髓质增宽,表现为髓索浆细胞增多,窦组织细胞增生及窦扩张;3.脾红髓增生致脾进行性增大;4.晚期胸腺萎缩。而在三株带瘤宿主中由形态学改变所反映的免疫功能损害各有差别。早期副皮质增生见于Ca759组,不见于Ca761与Ca763组;副皮质区缩小,髓质增宽在Ca761组出现最早,进展最剧,晚期脾白髓萎缩见于Ca761与Ca763组,而不见于Ca759组;胸腺萎缩在Ca761组出现最早,程度显著,而在Ca759组则直到濒死前才发生。本文并分析了淋巴结等免疫器官形态学改变与外周血和肿瘤局部浸润淋巴细胞增减的相关程度及肿瘤本身性质对宿主免疫状态的影响。     

津白Ⅱ小鼠自发乳癌（ⅥTA_2MA－891）高自发肺转移模型

本模型获自我组１只３４８日龄雌性津白Ⅱ小鼠右侧第五乳腺处一肿物。病理切片检查为乳腺腺癌，属于Ｄｕｎｎ（１９５９）分类之Ｂ型。用本组同源小鼠（ｉｓｏｇｅｎｅｉｃｍｉｃｅ）皮下移植已传到２７代。连续皮下移植成瘤率为１００％，未见自然消退；潜伏期４～７ｄ；肺转移瘤结多发而密集；最早转移时间，肉眼观察为接种后第３５天，镜检为第１０天。肺自发转移率，１１～２０代为１００％。皮下移植瘤、肺转移瘤之病理组织结构及其癌细胞形态与其原发瘤近似。带瘤鼠濒死时其皮下移植瘤体积平均值为４．９３ｃｍ３。７种抗癌药对皮下移植瘤抑制率，氟尿嘧啶为２９．７５％（Ｐ＜０．０５）、塞替派为４４．８８％（Ｐ＜０．０１）、环磷酰胺９５．３１％（Ｐ＜０．０１）、平阳霉素９６．７５％（Ｐ＜０．０１），其它三药抑制率均不足３０％。对肺转移瘤抑制率，平阳霉素为４２．５４％（Ｐ＜０．０１），余不足３０％。     

人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型的建立和改进

目的：建立人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型。方法：用人胃癌细胞SGC-7901悬液接种于裸鼠皮下，形成稳定传代的皮下移植瘤。将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆肌层，观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化等生物学特性。结果：肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特点，人胃癌裸鼠原位移植模型成瘤率为100％(20／20)，肝脏转移率为45％(9／20)。结论：人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似，为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型。     

PROPHYLACTIC EFFECT OF ACTIVE IMMUNIZATION WITH CURCUMA AROMATICA TREATED TUMOR CELLS——EXPLORATION OF MECHANISM OF ACTION OF CURCUMA AROMATICA

Immunization of inbred strain 615 mice with oleum curcuma aromatica treated L615 leukemic cells provided significant protection against subsequent challenge with alive L615 leukemic cells. It was found that such acquired antitumor immunity was apparently tumor specific, rather stable and could be passively transferred to recipient L615 mice by injection of spleen cell suspension of actively immunized mouse. Our study provided some experimental evidence for the possible mechanism of antitumor action of curcuma aromatica and also raised the possibility of using tumor cells pretreated with Chinese herbal antitumor agents in immunotherapy of cancer.     

CEA高表达人肺腺癌裸鼠移植瘤模型的建立

将1例人肺高分化腺癌手术标本直接移植于NIH裸小鼠皮下，建立了CEA高表达人肺高分化腺癌裸小鼠移植瘤模型（LAX-91），裸鼠间已传32代，历时2年余，LAX-91潜伏期短，生长稳定，移植成功率100%，各代移植瘤病理组织学观察均保持了原病人肿瘤的结构。并且有分泌功能，染色体分析显示人恶性肿瘤特征。血清CEA含量多次测定结果表明，LAX-91具有稳定高分泌CEA的生物学特性。该移植瘤模型的建立，为进一步研究人肺癌和癌胚抗原的关系提供了有用的手段。     

小鼠肝癌原位移植模型的建立及生物学特性

目的:探讨建立小鼠肝癌原位移植模型的可行性,并观察其生物学特性.方法:用肝癌细胞株H22接种于ICR小鼠皮下,建立异位移植模型,然后用此移植瘤组织再接种于小鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型.结果:小鼠肝癌原位移植模型成功率为95.6%,自发转移率为81.8%;大量腹水发生率为40.9%,自发消退率为0%.模型平均自然生存期为28 d,约移植14 d后进入快速增殖期.结论:小鼠肝癌原位移植模型成功率高,有高转移、无自发消退现象,可作为研究肝癌转移机制和药物筛选的理想模型.