胎脑黑质脑内移植对PD鼠纹状体内D_2RmRNA表达的影响

为了研究胎脑黑质脑内移植后对ＰＤ鼠纹状体神经元Ｄ２Ｒ基因表达的影响，采用核酸斑点杂交技术对纹状体内Ｄ２ＲｍＲＮＡ进行了连续定量观察，发现胎脑黑质移植物能够使ＰＤ鼠纹状体内过度表达的Ｄ２ＲｍＲＮＡ水平恢复正常。本研究结果提示：Ｄ２ＲｍＲＮＡ过度表达及ＰＤ鼠旋转行为被矫正的程度可能反映出胎脑黑质移植物对宿主形成神经再支配的程度。     

胎脑黑质脑内移植对PD鼠纹状体内D2RmRNA表达的影响

为了研究胎脑黑质脑内移植后对ＰＤ鼠纹状体神经元Ｄ２Ｒ基因表达的影响，采用核酸斑点杂交技术对太体内Ｄ２ＲｍＲＮＡ进行了连续定量观察，发现胎脑黑质移植物能够使ＰＤ鼠纹状体内过度表达的Ｄ２ＲｍＲＮＡ水平恢复正常。本研究结果提示，Ｄ２ＲｍＲＮＡ过度表达及ＰＤ鼠旋转行为被矫正的程度可能反映出胎脑黑持移植物对宿主形成神经再支配的程度。     

肾上腺髓质脑内移植后PD鼠纹状体内单胺类神经介质及D_2受体变化研究

肾上腺髓质脑内移植后ＰＤ鼠纹状体内单胺类神经介质及Ｄ２受体变化研究杨辉张可成蔡文琴一、材料与方法Ｗｉｓｔａｒ鼠２２只，雌雄不限，均重１４０±１０ｇ，以立体定向手术用６－ＯＨＤＡ损毁一侧黑质建立ＰＤ模型，动物随机分成三组，移植组：取出青年大鼠肾上腺，迅...     

基因修饰的神经干细胞脑内移植后TH表达和神经递质的变化

目的：探讨经TH基因修饰的神经干细胞脑内移植后，PD模型动物脑内TH表达和神经递质的变化。方法：构建pN2ATH逆转录病毒载体质粒，用PA317细胞包装，G418筛选阳性克隆，病毒上清感染神经干细胞，将神经干细胞和表达TH的神经干细胞植入PD大鼠纹状体内，观察移植后TH的表达情况以及DA和DOPAC含量变化。结果：TH基因修饰的神经干细胞移植2月内，TH在纹状体内的表达增加，纹状体DA和DOPAC含量增高，好于单纯神经干细胞移植组和对照组，但比正常水平低，结论：TH基因修饰的神经干细胞，脑内移植能增加纹状体内TH的表达以及DA和DOPAC含量，为其脑内移植治疗PD提供了理论基础。     

牛嗜铬细胞脑内移植可减少帕金森病样大鼠药物诱发的旋转行为

目的观察牛嗜铬细胞移植于PD样大鼠脑内的存活及功能。方法用6－OHDA损毁大鼠一侧黑质细胞制成偏侧PD样大鼠模型。在右侧纹状体内植入约2万个牛嗜铬细胞悬液。记录阿朴吗啡诱发大鼠的旋转行为。实验结束后取大鼠脑做组织形态学检查。结果大鼠在移植后阿朴吗啡诱发的旋转行为得到明显纠正（P<0．001）。移植后12周荧光组化显示移植区有大量SPG阳性细胞，其形态类似在正常肾上腺髓质内的嗜铬细胞的形态。结论脑内移植牛嗜铬细胞可改善PD样大鼠药物诱发的旋转行为；提示牛嗜铬细胞在移植12周后仍能在大鼠脑纹状体内存活。     

深部脑刺激丘脑底核治疗帕金森病大鼠脑中钙调蛋白的变化

目的 研究慢性高频电刺激帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠丘脑底核治疗PD的机制.方法 通过6-羟基多巴立体定向注射至大鼠中脑前脑束建立偏侧PD动物模型,对造模成功的PD大鼠模型丘脑底核进行高频电刺激,观察高频电刺激对PD大鼠行为的影响,并用蛋白印迹法检测纹状体酪氨酸羟化酶(TH)、钙调蛋白Calbindin-28和突触前膜囊泡蛋白(synaptophysin)的表达情况.此外,对接受慢性高频电刺激的6-羟基多巴损伤纹状体双侧PD大鼠的脑片进行免疫组化染色,检测黑质Calbindin-28和突触前膜囊泡蛋白的表达情况.结果 (1)高频电刺激偏侧PD大鼠丘脑底核可使阿朴吗啡诱导的旋转行为减少31%;(2)偏侧PD大鼠损伤侧纹状体内已无TH表达,慢性高频电刺激同侧丘脑底核对纹状体TH缺失无逆转,但增加健纹状体内TH表达量78.6%±9.5%;(3)偏侧PD大鼠损伤侧纹状体内Calbindin-28表达量增加75.4%±15.0%,慢性高频电刺激使其表达量减少43.0%±7.1%;(4)慢性高频电刺激亦显著抑制双侧PD大鼠黑质Calbindin-28表达:假手术大鼠、PD大鼠以及慢性高频电刺激后PD大鼠黑质致密部Calbindin-28阳性神经元分别为74.5±10.2、75.7±15.6和33.1±7.8;(5)慢性高频电刺激未影响黑质和纹状体内突触前膜囊泡蛋白的表达.结论 深部脑刺激治疗PD的机制与调节黑质和纹状体内钙调蛋白Calbindin-28和TH表达量有关.     

帕金森病大鼠黑质纹状体中氨基酸含量的变化

目的：观察帕金森病大鼠黑质纹状体中氨基酸神经递质的变化。方法：将６－羟多巴胺（６－ＯＨＤＡ）注入鼠右侧黑质内以建立偏侧帕金森病模型,检测其黑质和纹状体中四种氨基酸的含量。结果：帕金森病大鼠损毁侧谷氨酸（Ｇｌｕ）、天门冬氨酸（Ａｓｐ）、甘氨酸（Ｇｌｙ）、和ｒ－氨丁酸（ＧＡＢＡ）的含量较未损毁侧显著增加（Ｐ〈０．０１）。结论：兴奋性氨基酸可能参与了６－ＯＨＤＡ所致的黑质纹状体内神经元损伤。     

胎脑黑质移植治疗帕金森病的进展

胎脑黑质细胞移植作为一种治疗帕金森氏病(PD)的方法，在经历了近15年的发展之后，已经成为一种治疗PD有效的、具有发展前途的方法之一。特别是在近几年，在选择移植部位、改进移植方法、促进移植细胞生存方面取得了一定的突破性进展。固体组织较细胞悬液移植细胞易存活，移植物与宿主脑组织间能形成较好的突触联系，有利于改善患者的功能；丘脑纹状体及黑质内共同移植，比单纯纹状体内移植可以更加明显地改善PD患者的症状；神经生长因子在移植过程中，可以起到促进移植细胞生存、防止细胞凋亡的作用。     

脑内移植骨髓间质干细胞治疗帕金森病模型大鼠的实验研究

目的 探讨骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗帕金森病(parkinson's disease,PD)大鼠的可行性及可能的机制.方法 移植Brdu标记的MSCs到模型大鼠的纹状体内.术后4个月中,定期对大鼠进行旋转行为学实验测试.并分别在术后2周和4个月时进行脑内针道处及移植区免疫组化检测TH和Brdu的表达.结果 Brdu标记的MSCs移植到模型大鼠的纹状体内,术后2周时移植针道处及针道周围可见Brdu阳性外源MSCs,并有外源性细胞表达TH,术后4个月时移植针道内仍可以看到MSCs存活.MSCs移植的PD模型大鼠症状较PBS注射组行为学明显改善.结论 移植MSCs到大鼠PD模型的纹状体内能成活,且分化细胞能表达TH蛋白,大鼠PD模型行为学症状明显改善.     

脑源性神经营养因子基因工程细胞脑内移植治疗帕金森病大鼠的实验研究

目的观察脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）基因工程成肌细胞脑内纹状体移植对帕金森病大鼠的治疗作用。方法建立逆转录病毒介导的ＢＤＮＦ表达质粒并转染成肌细胞,筛选阳性细胞进行脑内移植。结果基因工程成肌细胞脑内移植可明显提高帕金森病大鼠黑质酪氨酸羟化酶（ＴＨ）阳性神经元的存活率,使纹状体多巴胺含量明显增加,动物的旋转行为改善约５０％,并持续２个月之久。结论脑源性神经营养因子基因工程成肌细胞脑内纹状体移植可明显改善动物的旋转行为并可促进黑质神经原的存活,为帕金森病的治疗提供了一种新的有效的治疗方法     

脑源性神经营养因子基因工程细胞脑内移植治疗帕金森病大鼠的实 …

目的观察脑源性神经营养因子基因工程成肌细胞脑内纹状体移植对帕金森病大鼠的治疗作用。方法 建立逆转录病毒介导的ＢＤＮＦ表达质粒并转染成肌细胞，筛选阳性细胞进行脑内移植。结果 基因工程成肌细胞脑内移植可明显提高帕金森病大鼠黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元的存活率，使纹状体多巴胺含量明显增加，动物的旋转行为改善约５０％，并持续２个月之久。结论脑源性神经营养因子基因工程成肌细胞脑内纹状体移植可明显改善动物的旋转     

脑源性神经营养因子基因治疗对大鼠脑内多巴胺含量的影响

采用脑源性神经营养因子（BDNF）基因工程成肌细胞纹状体内移植观察其对帕金森病（PD）大鼠脑内纹状体多巴胺含量的影响，结果发现：基因工程成肌细胞脑内移植可使纹状体多巴胺含量明显增加，并可维持达两月之久，这为帕金森病的治疗提供了一种新的有效的治疗方法。     

反复惊厥对P77PMC大鼠脑内BDNF蛋白表达的影响

采用免疫组织化学方法观察了反复听源性惊厥（ＡＣＳ）对遗传性癫痫易感大鼠Ｐ７７ＰＭＣ脑内脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）蛋白表达的影响。结果发现,在未发生ＡＣＳ的Ｐ７７ＰＭＣ大鼠脑内,ＢＤＮＦ蛋白的基础表达可见于海马齿状回门区神经元、ＣＡ３区锥体细胞及大脑皮质神经元的胞浆内,在经过３０次ＡＣＳ发作后,鼠脑内齿状回门区、ＣＡ１－ＣＡ３区以及皮质区免疫标记阳性的的神经元数目增多,标记强度增强。除了胞体,在神经元突起上也可见明显的免疫标记。这表明在Ｐ７７ＰＭＣ这种遗传性癫痫易感大鼠模型中,非人为伤害因素造成的惊厥反复发作能导致脑内ＢＤＮＦ表达显著增高。     

帕金森综合征的多巴胺能营养因子转基因治疗的展望

帕金森综合征（ＰＤ）作为一种多因素引起的中枢神经系统（ＣＮＳ）退行性疾病，其主要特征为中脑黑质多巴胺（ＤＡ）能神经通路的退化，纹状体内ＤＡ能神经减少，目前还没有很好的治疗措施。常用的药物治疗及脑移植方法均不能产久地减缓疾病的进程，并有不同程度的副作用，长期疗效不好，神经营养因子（ＮＴＦｓ）作为一类肽类活性物质除可促进神经的分化外，还能促进成年动物神经的存活和刺激神经的再生，ＮＴＦｓ中的许多成员如Ｂ     

胎脑黑质移植治疗帕金森氏病的进展

胎脑黑质细胞移植作为一种治疗帕金森氏病(PD)的方法,在经历了近15年的发展之后,已经成为一种治疗PD有效的、具有发展前途的方法之一。特别是在近几年,在选择移植部位、改进移植方法、促进移植细胞生存方面取得了一定的突破性进展。固体组织较细胞悬液移植细胞易存活,移植物与宿主脑组织间能形成较好的突触联系,有利于改善患者的功能;丘脑纹状体及黑质内共同移植,比单纯纹状体内移植可以更加明显地改善PD患者的症状;神经生长因子在移植过程中,可以起到促进移植细胞生存、防止细胞凋亡的作用。     

肾上腺髓质脑内移植模型动物旋转行为及神经生化研究

目的：观察肾上髓质脑内移植模型动物旋转行为及神经生化的改变。方法：将神经毒性剂６－ＯＨＤＡ注入大鼠左侧墨质部位造成ＰＤ模型后，取模型鼠自体左肾上腺髓质樾入左侧尾状核头部，术生６个月，经病理检查移植物在活并发发挥功能。结果；术后６人月受体动物由Ａｐｏｍｏｒｐｈｉｎ诱发的旋转行为获得了明显地改善。用ＨＰＬＣ－电化学分别检测了正常纹关体、肾上腺髓质及各移植组纹状体的ＣＡ含量，发现移植组纹状体ＣＡ的含量没     

肾上腺髓质脑内移植模型动物旋转行为及神经生化研究

目的：观察肾上腺髓质脑内移植模型动物旋转行为及神经生化的改变。方法：将神经毒性剂６－ＯＨＤＡ注入大鼠左侧黑质部位造成ＰＤ动物模型后，取模型鼠自体左肾上腺髓质植入左侧尾状核头部，术生６个月，经病理检查移植物成活并发挥功能。结果：术后６个月受体动物由Ａｐｏｍｏｒｐｈｉｎｅ诱发的旋转行为获得了明显地改善。用ＨＰＬＣ－电化学分别检测了正常纹状体、肾上腺髓质及各移植组纹状体的ＣＡ含量，发现移植组纹状体ＣＡ的含量没有增加，移植的肾上腺髓质并没有补足模型动物纹状体缺乏的ＤＡ。结论：移植的肾上腺髓质在生长环境发生改变之后合成ＣＡ的功能受到抑制。模型动物旋转行为的改善可能与移植物对宿主纹状体的神经再支配有关     

大鼠胎脑黑质细胞培养及PD鼠纹状体内悬液微移植研究

目的 探讨如何提高移植存活率和保存供体组织。方法：胎脑黑质细胞原代培养６天后，做免疫组化染色鉴定其生物活性，进行移植质量的人为控制，然后，比较各种移植技术对移植后细胞存活率、胶质细胞反应程度及功能改善的影响。实验动物分Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四组。Ａ组为假手术组，Ｂ组为立即单靶点移植组，Ｃ组为立即多靶点微移植组，Ｄ组为培养后多靶点微移植组。结果：Ｂ、Ｃ、Ｄ组术后均有功能改善。Ｃ组各时间点均比Ｂ组改善显著（Ｐ     

酪氨酸羟化酶cDNA移植治疗帕金森病的实验研究

帕金森病(PD)的主要病因是黑质多巴胺能神经元损伤,表达的酪氨酸羟化酶(TH)减少。本文在应用6-羟多巴胺(6-OHDA)制备偏侧PD大鼠模型的前提下,首次将TH cDNA移植到PD大鼠纹状体内,模型动物的旋转行为明显改善,用免疫组化法及PCR法证实了外源性THcDNA可以进入脑细胞内,并表达出有生物活性的TH。     

TH基因修饰的神经干细胞移植治疗帕金森病的实验研究

目的 探讨TH基因修饰的神经干细胞脑内移植对帕金森病(PD)的治疗作用。方法 构建pN：ATH逆转录病毒载体质粒，用PA317细胞包装，G418筛选阳性克隆，病毒上清感染神经干细胞，将表达TH的神经干细胞植入：PD大鼠纹状体内，测定：PD大鼠旋转行为改善，DA和DOPAC含量变化，以及TH在纹状体的表达。结果 TH基因修饰的神经干细胞移植8周时能显著降低PD大鼠旋转行为，增加纹状体DA和DOPAC含量，TH在纹状体内的表达增加，疗效好于单纯神经干细胞移植组。结论 TH基因修饰的神经干细胞移植对PD大鼠有明显的治疗作用，可望为PD治疗提供新的途径。