MRP1/MRP2与重金属转运的研究进展

多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associatedprotein,MRPs)是ATP结合盒式转运蛋白(ATP-binding cassette,ABC)家族中的一个亚群,1992年由Cole等[1]最初在耐阿霉素小细胞肺癌细胞株H69/AR的研究中发现,该耐药细胞株表达了一种不同于P糖蛋白(P-gp)的蛋白,此后命名为多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1/ABCC1)。随后人们又陆续发现多药耐药相关蛋白2(multidrugresistance-associated protein 2,MRP2/ABCC2)及MRPs的其他成员。MRP1和MRP2是细胞代谢产物、药物、     

48例非小细胞肺癌MDR1及MRP基因表达结果分析

目的：探讨多药耐药（MDR1）基因,多药耐药相关蛋白（MRP）基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况及其与组织类型的关系。方法：用逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）方法检测新鲜肺癌组织标本。结果：48例NSCLC标本MDR1,MRP基因阳性表达率分别为62．5％,66．7％,二种基因共同表达率为43．8％,肺鳞癌MRP基因表达明显高于腺癌（P＜0．01）,而鳞癌与腺癌之间MDR1基因表达无显著性差异（P＞0．05）,结论：MDR1,MRP基因可以共同或分别存在于肺癌组织中,肺鳞癌MRP基因表达率较腺癌高。     

肺癌化疗耐药分子标志及其逆转研究

目的:探讨肺癌化疗耐药分子标志及其逆转的临床与基础应用评价。方法:采用国内外相关文献,结合我们在这一领域长期研究,深入归纳与分析。结果与结论:肺癌化疗耐药主要分子标志有多药耐药基因(MDR1)表达增加,多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达增加,谷胱甘肽解毒酶系统活性增强和线粒体凋亡途径异常,综合采用逆转耐药分子,耐药基因siRNA和中医药结合的逆转耐药策略,为彻底攻克肺癌耐药奠定坚实研究基础。     

纤支镜下肺癌患者MDR1基因的表达

目的：研究原发性肺癌患者ＭＤＲ１基因的表达及其与病理组织分型的关系。方法：通过纤维支气管镜应用逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,对３３例未治、５例化疗后的原发性肺癌和１７例非癌组织ＭＤＲ１基因的表达进行分析。结果：在３８例癌标本中有１７例观察到ＭＤＲ１基因的表达,主要分布在非小细胞鳞癌中,而非癌组织仅有１例ＭＤＲ基因的表达。结论：在未治的原发性肺癌尤其是非小细胞肺癌中,可检测到ＭＤＲ１基因     

多药耐药相关蛋白1及其与肿瘤关系的研究进展

多药耐药（MDR）是导致临床肿瘤化疗失败的重要原因。多药耐药相关蛋白1（MRP1/ABCC1）被认为是介导肿瘤多药耐药的主要跨膜转运蛋白之一。 探究MRP1/ABCC1的结构、功能,以及与肿瘤的关系,有利于指导临床合理用药和肿瘤预后的评估。     

膀胱癌ras,MDR1基因表达及其相互关系的实验研究

应用免疫组化技术对３２例膀胱癌ｒａｓ基因，ＭＤＲ１基因的表达及其相互关系进行了研究。结果表明：３２例膀胱癌ｒａｓ基因，ＭＤＲ１基因的阳性表达率分别为３７．５％，６２．５％，初发膀胱癌ｒａｓ基因，ＭＤＲ１基因的阳性表达率分别为３５％，５０％，而化疗后复发的膀胱癌ｒａｓ基因、ＭＤＲ１基因的阳性表达率为４１．６％、８３．３％。随着肿瘤病理分级的升高，ｒａｓ基因及ＭＤＲ１基因的阳性表达率也随之增高，结果证     

探析多药耐药基因MDR1在卵巢癌化疗中的价值

目的探析多药耐药基因MDR1在卵巢癌化疗中的价值。方法收集我院2012年2月至2014年2月收治的卵巢癌患者160例初治卵巢癌患者肿瘤组织标本,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MDR1基因表达情况,同时用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测肿瘤细胞对抗癌药的敏感性。结果 91例(56.875%)卵巢癌患者MDR1基因表达阳性;耐药组和敏感组与MDR1基因表达阳性和阴性的总符合率为81.08%(P>0.05);卵巢癌组织中的MDR1表达与年龄无关(P>0.05)。MDR1基因表达阳性和阴性与化疗预后有关(P<0.05)。结论 MDR1基因表达阴性患者应用MDR相关药物是有效的,阳性患者应避免应用MDR相关药物。MDR1的表达阴阳性的检测对临床用药有一定的指导价值,作为判断卵巢癌患者预后的一个指标。     

携带反义MDR1基因的逆转录病毒载体的构建和表达

目的　建立逆转录病毒介导的反义多药耐药MDR1基因转移体系 ,探讨反义RNA封闭白血病耐药细胞中MDR1基因表达的能力。方法　逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法从白血病耐药细胞株HL 6 0 /VCRmRNA中扩增出含有启始密码子ATG的 5 2 4bp的MDR1基因cDNA片段 ,反向插入逆转录病毒载体 pLXSN ,通过脂质体转和乒乓感染单、双噬型包装细胞GP +E86和GP +envAM 12 ,以双嗜型病毒上清感染白血病耐药细胞K5 6 2 /MDR ,半定量RT PCR和流式细胞术(FCM)分析MDR1基因转录和P 糖蛋白 (P gp)的表达。 结果　酶切、PCR和DNA测序证实反义MDR1基因重组逆转录病毒载体 pLASSN构建正确 ;双嗜型病毒生产细胞的滴度为 1 3× 10 5CFU/ml,巢式PCR和补救分析均未检测到辅助病毒存在 ;PCR和RT PCR分析证实病毒生产细胞和反义修饰的耐药细胞K5 6 2MDR/LASSN中均有反义MDR1基因整合和MDR1基因反义RNA的转录 ;FCM分析K5 6 2MDR/LASSN细胞中P gp表达强度和表达率比对照细胞均有明显下降。 结论　逆转录病毒介导的反义基因转移系统安全有效 ,可用于肿瘤耐药逆转的研究     

人类MRP1和MRP2基因多态性与功能的研究进展

ATP结合盒式（ATP-binding cassette，ABC）运载体是一个跨膜蛋白家族，它依靠ATP供能对许多种类的底物进行跨膜转运，这个家族包括MDR1／P—gP、MRPs、ALD、OABP等8个亚群49个成员，由不同染色体编码。在ABC转运蛋白中，有一些成员与肿瘤化疗药物的多药耐药性有关，其中研究最多的是P糖蛋白（PgP）。     

五味子醇甲逆转MRP1多药耐药机制的研究

肿瘤的多药抗药性（muhidrug resistance,MDR）是肿瘤化疗失败的主要原因之一。我们及他人的研究已证实五味子醇甲（Schisandrol A）可以逆转P—gP介导的耐药。本实验中,我们以MRP介导的白血病多药耐药细胞株HL-60／ADR和HL-60／MRP为研究对象,探讨了五味子醇甲逆转MRP耐药的作用机理,以进一步阐明耐药发生机制。     

WT1基因在造血系统恶性肿瘤中的表达

目的：研究WT1基因在造血系统恶性肿瘤中的表达。方法：采用逆转录酶链反应(RT—PCR)方法，测定158例血液系统恶性肿瘤患者及30例正常对照者WT1基因的表达。结果：急性白血病(AL)WT1基因阳性表达率为45．3％。慢性粒细胞白血病(CMI)慢性期及加速期无WT1基因表达，而急变期WT1基因表达阳性。骨髓增生异常综合征(MDS)WT1的阳性表达率为22．4％。淋巴瘤及恶性组织细胞病WT1的阳性表达率分别为39．1％和41．7％。而正常人无WT1基因的表达。结论：WT1基因在造血系统恶性肿瘤患者中高表达。随着疾病的的进展，WT1阳性表达率增高。     

RT—PCR方法检测结直肠癌组织中MTS1／p16基因的表达

目的：探讨人结直肠癌组织中MTS1/p16基因的缺失情况。方法：60例手术切除组织标本均取自结直肠癌患者,其中包括结直肠癌组织35例,癌旁组织15例及结直肠正常粘膜组织10例。所有组织标本均利用逆转录聚合酶链反应来检测MTS1/p16基因的等位缺失情况。结果：17.14%(6/35)的结直肠癌组织标本出现MTS1/p16基因的等位缺失,而癌旁组织及正常结直肠粘膜均未出现。结论：MTS1/p16基因的缺失对结直肠癌的进展可能起着一定促进作用。     

毛细管电泳检测nm23-H1基因在乳腺癌组织中的表达

目的:检测nm23-H1基因在乳腺癌中的表达与突变,寻找它们与淋巴结转移的关系。方法:用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测nm23-H1mRNA表达,毛细管聚丙烯酰胺凝胶电泳(CPAGE)行单链构象多态性分析(SSCP)检测DNA突变。结果:应用CPAGE可在30min内分离出nm23-H1基因RT-PCR产物的单链及双链峰。nm23-H1表达、突变在腋淋巴结有、无转移组均有差异;mRNA在有远处转移组呈现低表达;DNA突变率在肿瘤≤5cm和>5cm组间有差异。结论:nm23-H1表达和突变可以做为评估乳腺癌转移危险的指标;CPAGE技术用于肿瘤组织的PCR-SSCP分析具有快速灵敏、准确、重复性好的特点。     

Survivin基因在大肠癌中的表达及与端粒酶活性的关系

目的：探讨survivin基因在大肠癌中的表达及与端粒酶活性的关系。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)和端区重复扩增法酶联免疫吸附测定(TRAP—ELISA)方法检测大肠癌及其癌旁组织survivin mR—NA表达和端粒酶活性情况。结果：(1)65％大肠癌组织表达survivin mRNA，而癌旁组织25％表达。Survivin基因表达与肿瘤大小、侵袭深度、淋巴结转移及分化程度无明显关系。(2)大肠癌组织端粒酶活性阳性率为90％，明显高于癌旁组织的5％，端粒酶表达阳性与大肠癌淋巴结转移、分化不良程度显著相关。(3)Survivin mRNA表达与端粒酶活性明显相关。结论：Survivin基因在大肠癌发生发展中可能起作用。端粒酶可作为诊断大肠癌的标志物。Survivin表达上调和端粒酶激活可能通过各自不同的信号途径在大肠癌变中发挥协同作用。     

P16（CDKN2）,RB在喉癌组织中的表达

为探讨抑癌基因Ｐ１６及其相关基因ＲＢ在喉癌组织中表达的意义和其相互关系，应用免疫组化分析方法（ＳＰ法）对５４例喉癌石腊标本中Ｐ１６、ＲＢ蛋白产物进行检测。结果发现：Ｐ１６、ＲＢ的表达缺失率分别为５１．８％、１６．７％，二者在喉癌中的表达呈负相关关系。Ｐ１６蛋白的表达随肿瘤恶性程度的提高而降低。提示：Ｐ１６蛋白在抑制喉癌的恶性进展中具有重要作用。由Ｐ１６、ＲＢ、ＣＹＣＬＩＮ Ｄ１及ＣＤＫ４、ＣＤＫ６     

人nanog-delta48基因的克隆及其真核表达载体的构建

目的:构建pcDNA5/FRT-nanog-delta48真核表达载体,检测其在肝癌SMMC-7721细胞中的表达。方法:通过RT-PCR的方法克隆nanog基因的选择性剪接变异体nanog-delta48全长编码序列,连接入pMD18-T载体,经鉴定正确后亚克隆入pcDNA5/FRT,构建pcDNA5/FRT-nanog-delta48真核表达载体,测序无误后经脂质体介导转染到SMMC-7721细胞中,通过RT-PCR初步鉴定其在SMMC-7721细胞中的表达,并通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染前后的细胞增殖活力。结果:成功克隆nanog-delta48基因全长编码区,测序证明pcDNA5/FRT-nanog-delta48重组真核表达载体构建成功,使其在SMMC-7721细胞中过表达,MTT检测nanog-delta48转染入SMMC-7721细胞后,增殖能力增强。结论:剪接变异体nanog-delta48基因可能具有与nanog基因类似的活性。     

多药耐药基因与肺癌氨柔比星耐药的相关性

目的探讨肺癌氨柔比星耐药与多药耐药基因(MDR1)的相关性。方法收集本院近年的肺癌标本,荧光定量PCR检测肺癌组织中MDR1基因的表达,MTT细胞毒实验检测氨柔比星对肺癌耐药细胞的生长抑制率。结果 MDR1基因在肺癌标本中的阳性表达率为37.5%,其中MDR1基因的表达在鳞癌和腺癌中高于小细胞肺癌(P<0.05),鳞癌与腺癌之间没有统计学差异(P>0.05),MDR1的表达在临床病理分级之间没有显著性差异(P>0.05),肺癌MDR1的表达量与氨柔比星对肺癌细胞的半数生长抑制浓度呈正相关(r=0.91)。结论肺癌对氨柔比星的耐药与MDR1基因的表达密切相关,MDR1基因可作为氨柔比星疗效果评价的一个生物分子标记。