血红素氧合酶-1对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:SD大鼠30只,建立二套袖法原位肝移植模型。随机分为3组:对照组,无任何处理;CoPP处理组,供肝收获前24h供体腹腔注射HO-1诱导剂CoPP5mg/kg。;ZnPP处理组,腹腔注射抑制剂ZnPP20mg/kg。移植后第三天检测肝脏移植物肝功能,免疫组织化学方法检测肝脏移植物HO-1的表达情况。TUNEL法检测凋亡变化。以Suzuki标准评分来反映肝脏移植物的缺血再灌注损伤程度。结果:①CoPP组ALT,AST较对照组和ZnPP组明显降低(P<0.01)。②HO-1表达:CoPP组明显高于其他组(P<0.05)。③移植物凋亡阳性细胞百分率:CoPP组明显低于对照组和ZnPP组(P<0.05)。④肝脏移植物病理变化:CoPP组和与对照组,ZnPP组比较,炎症细胞浸润少,肝细胞损伤轻。肝脏移植物Suzuki评分,CoPP组(0.76±0.59)明显低于对照组(1.32±0.74)与ZnPP组(1.80±0.70),有显著统计学差异(P<0.05)。结论:HO-1对肝脏移植物缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与抗炎症与抗凋亡有关。     

血红素氧合酶-1的诱导对肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨血红素氧合酶-1的诱导对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法将40只健康Sprague-Dawley大鼠随机分为4组：假手术对照（sham）组、肺缺血再灌注（I／R）组（阻断左肺门30min再灌注2h）、氯化血红素（Hemin）组（给予血红素氧合酶-1的诱导剂）与锌原卟啉（ZnPP）组（给予血红素氧合酶-1的抑制剂）。检测各组肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性,血浆肿瘤坏死因子（TNF-α）含量,观察肺组织湿干重比（W／D）以及电镜下肺组织超微结构变化。结果Hemin组肺湿／干重比（5．92±0．66）低于I／R组（7．55±0．66）（P〈0．01）,SOD活性（9．2±0．5）高于I／R组（2．8±0．4）（P〈0．01）,TNF-α含量（60．37±8．25）低于I／R组（452．26±22．59）（P〈0．01）,电镜下肺组织超微结构损伤改变明显减轻;而给予ZnPP（ZnPP组）后使上述改变发生逆转。结论血红素氧合酶-1的诱导可有效保护肺缺血再灌注损伤。     

氯化亚锡对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用和血红素氧合酶-1表达的影响

目的：探讨氯化亚锡（SnCl2）对大鼠肾急性缺血再灌注损伤的改善作用和血红素氧合酶-1（HO-1）表达的影响。方法：建立大鼠肾缺血再灌注模型,随机将动物分为假手术组、对照组及实验组。实验组存肾脏缺血前24h皮下注射SnCl2 100mg／kg,肾脏缺血45min再灌注24h后切取肾脏,分别应用免疫组织化学及双抗夹心ELISA检测HO-1蛋白的表达,并测定肾组织中超氧化物岐化酶（SOD）的活性及丙二醛（MDA）的含量。同时测定血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）水平。结果：对照组缺血再灌注前后血Cr、BUN水平、SOD活性及MDA含量差异均有统计学意义（P〈0．05）,而假手术组、实验组差异均无统计学意义（P〉0．05）。假手术组、对照组及实验组大鼠肾组织匀浆中HO-1含量依次增高（P〈0．05）。结论：应用SnCl2预处理诱导HO-1的表达可通过清除氧自由基的毒性作用而减轻大鼠肾缺血再灌注损伤。     

诱导血红素氧合酶-1对大鼠肝脏缺血再灌注的影响

目的:探讨诱导血红素氧合酶-1(HO-1)是否可减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤及其机制。方法:SD大鼠随机分成5组:正常组(N),假手术组(S),手术组(I/R建立肝脏缺血再灌注损伤模型),手术给药组(I/R+hemin),手术给药组(I/R+ZnPP),手术后6h、12h下腔静脉取血分离血清检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、锰超氧化物歧化酶、丙二醛。免疫组化染色检测肝组织caspase-3的表达。结果:1hemin组ALT、AST较I/R组及ZnPP组明显降低(P<0.01);2hemin组MDA较I/R组降低(P<0.05),MnSOD较I/R组增高(P<0.05);ZnPP组MDA较I/R组增高(P<0.05),MnSOD较I/R组降低(P<0.05);3肝组织caspase-3:hemin组caspase-3表达减少(P<0.05),ZnPP组caspase-3表达明显增多(P<0.01)。结论:HO-1可能通过抗氧化损伤通路而抑制细胞凋亡来减轻肝脏缺血再灌注损伤。     

血红素氧合酶-1与肺缺血再灌注损伤的关系

血红素氧合酶(hemeoxygenase,HO)是哺乳动物组织细胞微粒体的一种蛋白酶,是降解血红素为一氧化碳(carbonmonoxide,CO)、铁(Fe)和胆红素的起始酶和限速酶,有3种同功酶[1]:HO-1、HO-2和HO-3。HO-2和HO-3为结构型;HO-1是诱导型,可在缺氧、缺血等多种应激状态下表达[2]。诱导的HO-1     

血红素氧合酶-1与大鼠肾缺血再灌注损伤关系的研究

目的 :探讨血红素氧合酶 -1(hemeoxygenase -1,HO -1)与大鼠急性肾缺血再灌注损伤 (IRI)的关系。方法 :建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型 ,分别检测48只大鼠缺血前及再灌注24h后肾IRI组织中HO -1的活性与含量 ,以及血尿素氮 (BUN)、肌酐 (Cr)、超氧化物岐化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)的水平。结果 :HO -1的活性与SOD呈正相关 (r=0.663 ,P<0.001),与BUN、Cr、MDA呈负相关 (r= -0.723 ,P<0.001 ;r= -0.630 ,P<0.005 ;r= -0.629,P<0.01) ;HO -1的含量与SOD呈正相关 (r=0.570,P<0.001),与BUN、Cr、MDA呈负相关 (r= -0.646,P<0.005;r= -0.577 ,P<0.001 ;r= -0.530 ,P<0.01)。结论 :HO -1与IRI关系密切 ,可通过清除氧自由基 (OFR)而减轻IRI及保护肾功能。     

血红素氧合酶-1与肝脏缺血再灌注损伤及凋亡的关系研究

1 血红素氧合酶-1概述 1968年,Tenhunen等[1]首次发现血红素氧合酶(hemeoxygenase,HO),HO广泛存在于人类及哺乳动物组织内,是生物体内催化血红素分解成胆绿素、一氧化碳(CO)和铁离子的生物酶,是一种关键的限速酶[2].近年来,发现HO除了有降解血红素功能外,还在许多生理和病理过程中起重要的调节作用,尤其是它还具有保护组织器官作用,现已逐渐成为一个研究热点[3].目前发现HO有3种亚型:诱导型HO-1、结构型HO-2、结构型HO-3.     

血红素氧合酶-1诱导对肺缺血/再灌注损伤保护作用的分子机制

目的探讨肺缺血/再灌注损伤时血红素氧合酶-1的诱导对JNK（c-Jun NH2-terminal protein ki-nase）蛋白激酶活性的影响及意义。方法40只健康SD大鼠随机分为4组：假手术对照（sham）组、阻断左肺门30 min再灌注2 h的肺缺血/再灌注（I/R）组、给予血红素氧合酶-1的诱导剂氯化血红素（Hemin）组和溶剂对照（vehicle）组。采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺组织中JNK蛋白激酶活性变化。结果与sham组相比,JNK的活性随缺血和再灌注时间的延长而逐渐升高直到再灌注120 min。在再灌注120 min,与vehicle组相比,Hemin组JNK的活性明显降低（P〈0.05）。缺血/再灌注各时点组间JNK蛋白水平没有显著性变化（P〉0.05）。结论血红素氧合酶-1的诱导可通过抑制JNK蛋白激酶的活性有效保护肺组织免于缺血/再灌注损伤。     

肺缺血再灌注损伤时血红素氧合酶-1的变化及意义

目的:探讨肺缺血再灌注损伤时血红素氧舍酶-1(HO-1)的变化规律及意义.方法:40只健康日本大耳白兔随机分成假手术对照(C)组、肺缺血再灌注(IR)组、肺缺血再灌注 氯铁血红素(H)组和肺缺血再灌注 锌原卟啉(Z)组.各组在缺血前后,再灌注1 h、2 h、3 h分别抽血检测一氧化碳血红蛋白(COHb)浓度,实验结束时取肺组织测湿/干重比(W/D)、肺泡损伤数(IAR)、HO酶活力并观察细胞超微结构的改变.结果:与C组相比,IR组COHb浓度随缺血和再灌注时间的延长而逐渐升高,H组这种趋势更加明显,Z组升高较缓和;IR组W/D、IAR升高,H组下降而Z组明显增加;IR组HO酶活力增加,H组上升更加显著而Z组明显降低;超微结构显示H组较IR组损伤减轻而Z组加重.结论:HO-1诱导可能通过一氧化碳(CO)介导减轻肺缺血再灌注损伤.     

血红素氧合酶-1抗大鼠肾缺血再灌注损伤细胞凋亡实验研究

目的 探讨血红素氧合酶-1（HO-1）对肾缺血再灌注（IR）损伤中细胞凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 24只雄性Wistar大鼠随机均分为单纯IR组、HO-1诱导组及HO-1抑制组,分别给予生理盐水、血晶素、锌原卟啉Ⅸ（ZnPPⅨ）腹腔内注射预处理.8h后行右肾切除用于检测HO-1蛋白表达及活性,左肾动脉夹闭缺血50min再灌注18h,检测血Cr、BUN及肾组织中丙二醛（MDA）浓度、髓过氧化物酶（MPO）活性及bcl-2蛋白表达与细胞凋亡指数（AI）.结果 血晶素与ZnPPⅨ预处理分别显著诱导与抑制了肾内HO-1蛋白表达及活性.与单纯IR组比较,HO-1诱导组Cr、BUN、MDA浓度及MPO活性显著降低,bcl-2蛋白表达升高伴AI明显下降,而HO-1抑制组Cr、BUN、MDA、MPO升高,HO-1表达降低伴AI显著升高.结论 HO-1可能通过抗炎、抗氧化、上调bcl-2蛋白表达等作用抑制肾IR损伤中的细胞凋亡.     

葛根素对兔肺缺血再灌注损伤中血红素加氧酶-1的影响

目的:观察葛根素对兔肺缺血再灌注损伤(IRI)中血红素加氧酶-1(HO-1)的影响.方法:30只健康日本大耳白兔随机分成假手术对照组(C组)、肺缺血再灌注组(IR组)和葛根素组(Pur组).复制兔单侧肺缺血再灌注损伤模型,对比观察各组肺湿干重比(W/D)、肺泡损伤数(IAR)、HO-1活性、HO-1mRNA及其蛋白的表达.结果:IR组与Pur组W/D、IQA均比C组为高(P＜0.01),但Pur组显著低于IR组(P＜0.01);与C组相比,IR组HO-1活性、HO-1mRNA及其蛋白表达增加(P＜0.01),Pur组上升更加显著(P＜0.01).结论:葛根素能增加HO-1的活性,上调HO-1mRNA及其蛋白的表达,对肺缺血再灌注损伤有明显的保护作用.     

Protective effect of heme oxygenase-1 on lung injury induced

Background Intratracheal instillation of blood induces self-repaired acute lung injury. However, the mechanism of repair has been unclear. Heme-oxygenase （HO）-1, which catalyzes heme breakdown, acts as an inducible defense against oxidative stress and plays an important role in inflammation. The objective of this study was to test the role of HO-1 in lung injury caused by intratracheal instillation of red cells. Methods Forty healthy, male Sprague-Dawley rats were randomly divided into five groups： normal group, saline group, erythrocyte group, erythrocyte＋zinc-protoporphyrin （ZnPP, HO-1 inhibitor） group and saline＋ZnPP group. At 2 days after intratracheal instillation of red cells, lung tissues and lavage samples were isolated for biochemical determinations and histological measurements. Results Histological analysis revealed that administration of ZnPP worsened the acute lung injury induced by instilled erythrocytes. HO-1 was over-expressed in the erythrocyte group and in the erythrocyte ＋ ZnPP group. Compared with the erythrocyte ＋ ZnPP group, the levels of total protein, lactate dehydrogenase and tumor necrosis factor-a in the lavage were lower （P 〈0.01）, while the level of interleukin-10 was higher in the erythrocyte group （P 〈0.01）. Conclusion HO-1 protects against erythrocyte-induced inflammatory injury in lung.     

HO-1抗大鼠肾缺血/再灌注损伤的实验研究

目的探讨诱导血红素氧合酶-1(HO-1)表达能否减轻随后的肾缺血/再灌注损伤(IRI)及其可能的机制。方法采用切除右肾,夹闭左肾动脉50min/再灌注24h的动物模型,30只雄性Wistar大鼠随机均分为3组:假手术组,缺血/再灌注(I/R)组,血晶素处理组(皮下注射血晶素30mg/(kg·d),连续2d),检测肾组织中HO-1蛋白表达及HO-1活力、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(TAOC)和血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量及组织形态学改变。结果血晶素明显诱导了肾内HO-1表达并使其活力增加,与I/R组比较,P<0.01;与假手术组比较,I/R组Cr,BUN,MDA升高(P<0.05),TAOC降低(P<0.05),组织学损伤严重。在I/R前血晶素诱导HO-1表达可逆转上述病理改变(P<0.05)。结论肾内HO-1的诱导表达可明显改善大鼠随后的I/R性肾损伤,作用机制与其增强机体抗氧化能力有关。     

血红素加氧酶-1在高氧肺损伤小鼠中的表达及作用

目的 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在高氧造成的肺损伤转基因小鼠和正常小鼠中的肺部表达水平及其作用.方法 把32只新生小鼠分成4组:野生型组(WT组),特异性转基因小鼠全身高水平表达HO-1组[HO-1-FL(H)组,细胞质]、特异性转基因小鼠全身低水平表达HO-1组[HO-1-FL(L)组,细胞质]和切去C末端HO-1(Nuc-HO-1-TR组,细胞核).把4组小鼠暴露在高氧环境中3d,然后放到正常空气环境中,通过免疫组织化学、免疫荧光等实验技术来观察小鼠3d、7d和14 d肺泡发育情况及HO-1在小鼠肺部表达情况.结果 HO-1在HO-1-FL(H)组小鼠肺部高表达,高氧暴露3d后4组小鼠肺部肺泡发育都受到了损害,在正常空气环境中7、14 d时HO-1-FL(H)组小鼠的肺泡发育恢复得最好.结论 小鼠肺部适度高水平的HO-1表达有助于高氧环境造成的小鼠肺损伤的恢复.     

重组腺相关病毒介导的HO-1基因转染对大鼠移植肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨重组血红素氧合酶-1基因（Heme oxygenase-1,HO-1）腺相关病毒（rAVV-HO-1）对大鼠自体移植肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法将48只雄性成年Lewis鼠随机分为两组。转染组（n=24）在供肾切取时应用rAVV-HO-1原位灌注;对照组（n=24）用磷酸盐缓冲溶液（PBS）原位灌注。所有供肾保存于4℃的UW液中24 h后行自体移植,同时切除对侧肾脏。留取术后3h、3d、7d的血清和尿标本以比较血肌酐、尿蛋白;取移植后3 h、3 d、7 d时的肾组织标本,以RT-PCR、免疫组化分析移植肾HO-1基因及蛋白的表达,间接法测定HO-1的活性。结果将rAVV-HO-1原位灌注后,转染组移植后3 h、3 d、7 d移植肾HO-1mRNA的表达强度分别为（0.55±0.13）,（0.82±0.19）和（0.39±0.09）,对照组移植后3 h、3 d、7 d的HO-1mRNA表达强度分别为（0.11±0.07）、（0.10±0.09）和（0.09±0.03）,转染组在各时间点的HO-1 mRNA表达都明显高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。免疫组化结果显示转染组移植后3 h可见HO-1蛋白表达,而对照组无表达。3 d、7 d后转染组移植肾可见HO-1蛋白强阳性表达,而对照组仅可见HO-1蛋白微弱表达,两组具有显著差异。转染组移植后7 d血肌酐水平为（2.14±0.87）mg/dL,明显低于对照组（7.33±2.31）mg/dL,移植后7 d治疗组尿蛋白为（5.10±1.23）μg/mL,明显少于对照组（11.61±3.39）μg/mL,差异均有统计学意义（P〈0.05）。移植后3 d、7 d治疗组胆红素浓度明显高于对照组（P〈0.05）。结论用rAVV-HO-1转染大鼠移植肾可以诱导移植肾中HO-1的稳定表达,并对移植肾缺血再灌注损伤具有保护作用。     

热休克处理诱导小鼠心脏HO-1表达并延长其移植至大鼠的存活时间

目的探索热休克诱导NIH小鼠心脏表达HO-1的方法及其对延迟性异种心脏移植排斥反应的影响.方法采用取暖器加热NIH小鼠,使其温度维持在42℃20 min,分别于加热后1、6、12、24、48、72 h切取心脏,应用RT-PCR、Western blot分别检测HO-1 mRNA、HO-1蛋白以及HO-1酶活性检测.借助NIH小鼠-Wistar大鼠颈部异位心脏移植模型,对热休克处理供体并结合CoPP(cobalt protoporphyrin,CoPP)、ZnPP(zinc protoporphyrin,ZnPP)了解热休克诱导HO-1对移植心脏存活时间的影响.结果热休克预处理6 h后心脏组织HO-1 mRNA、蛋白表达及酶活性开始增多,以24～48 h为高峰,24 h组和48 h组与其余任意组比较均有显著性差异(t=3.507,P＜0.05),72 h后开始下降.热休克组心脏存活时间明显长于空白对照组(t=5.703,P＜0.01)和ZnPP 热休克组(t=4.913,P＜0.001).而热休克 CoPP组移植心脏存活时间[(6.250±1.512)d]明显长于热休克组[(4.750±1.363)d](t=2.084,P＜0.01).当热休克与ZnPP和CoPP同时使用时,移植心脏存活时间略短于热休克组,但其差异无显著性(t=0.816,P＞0.05).结论取暖器加热NIH小鼠可诱导心脏HO-1的产生,能延长NIH小鼠-Wister大鼠心脏移植存活时间,推迟DXR的发生.     

转基因诱导人血红素加氧酶1过表达对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察转基因方法诱导人血红素加氧酶1(hHO-1)过表达对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用.方法 构建SD大鼠的肾脏缺血再灌注模型.治疗组(18只),经供肾动脉用负载人血红素加氧酶-1腺病毒(Ad-hHO-1)2.5×109pfu/只灌注保存1 h用以转染肾细胞.模型组(12只)和空载体组(18只)则分别用生理盐水1.0 ml和腺病毒空载体(Ad-EGFP)2.5×109pfu/只代替.检测各组大鼠外周血尿素氮和肌酐水平;HE染色和电镜观察缺血再灌注损伤后肾脏的组织形态变化;原位末端标记(TUNEL)法检测肾组织中细胞凋亡情况;免疫组化方法观察肾脏内hHO-1的表达;定量检测肾组织中hHO-1的酶活性.结果 经肾动脉灌注Ad-hHO-1可以成功转染大鼠肾脏细胞,治疗组肾组织中hHO-1的酶活性[(1.62±0.07)nmol·mg-1·min-1]明显高于模型组[(1.27±0.07)nmol·mg-1·min-1]和空载体组[(1.22±0.06)nmol·mg-1·min-1](P＜0.01).免疫组化证实治疗组的肾组织内有大量hHO-1表达,而凋亡细胞减少,相应的肾功能生化检查及肾组织形态变化较模型组和空载体组明显改善.结论 hHO-1在大鼠肾脏中的过表达可以显著减弱缺血再灌注对肾脏引起的损伤.     

姜黄素对肾脏缺血再灌注损伤大鼠模型保护作用的研究

目的:探讨姜黄素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、姜黄素+缺血再灌注组(C组)和姜黄素+缺血再灌注组+锌-原卟啉组(D组),各15只。C组和D组术前5 d腹腔注射姜黄素100 mg/kg,A、B组注射等量的0.9%氯化钠注射液。D组大鼠术前60 min腹腔注射锌-原卟啉20μmol/kg。手术游离并阻断双肾肾蒂血管,60 min后恢复灌注,分别于4 h、12 h、24 h取血检测血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血红素氧合酶-1(HO-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,24 h切除肾组织检测肾组织髓过氧化物酶(MPO)活性的表达水平。结果:C组和D组血清SCr、BUN、TNF-α、ICAM-1及肾组织MPO水平均高于A组,但低于B组(P<0.05~P<0.01);HO-1的表达低于A组,高于B组(P<0.05~P<0.01)。D组TNF-α和ICAM-1表达水平在各时间点均高于C组(P<0.05~P<0.01),SCr、BUN及肾组织MPO的表达在12 h和24 h高于C组(P<0.05~P<0.01),在4 h时差异无统计学意义(P>0.05);HO-1在各时间点表达均低于后者(P<0.05~P<0.01)。结论:姜黄素对肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用,能够有效减轻肾组织的炎性及氧化应激损害。HO-1可能参与姜黄素对肾脏的保护。