白藜芦醇通过激活PI3K/Akt通路抑制高糖致肾小管上皮细胞凋亡的研究

目的:白藜芦醇对高糖作用下肾小管上皮细胞(HK-2)氧化应激介导的凋亡影响及作用机制。方法:体外培养肾小管上皮细胞,高糖作用于肾小管上皮细胞诱导其凋亡,设置空白对照组、模型组(30 mmol·L~(-1)高糖处理)、不同浓度(5、10μmol·L~(-1))白藜芦醇组,LY294002(PI3K抑制剂)组(10μmol·L~(-1))。使用MTT法检测各组细胞活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;JC-1检测线粒体膜电位(MMP);DHE荧光探针检测ROS的变化;特定试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH-PX)含量;Western-blot法检测各组细胞色素C(CYT-C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平以及Akt的磷酸化情况。结果:与空白对照组相比高糖损伤组能够显著降低肾小管上皮细胞的活力,增加细胞中ROS的含量和凋亡率,LDH(细胞外)、MDA含量显著增加,SOD、GSH-PX活性显著下降,同时降低线粒体膜电位,增加了CYT-C、Caspase-3的表达,而p-Akt/Akt表达降低(P0.01)。不同浓度白藜芦醇(起效剂量5μmol·L~(-1),高剂量10μmol·L~(-1))和高糖同时作用肾小管上皮细胞时,细胞存活率逐渐上升,ROS含量及凋亡率逐渐下降,LDH、MDA含量逐渐下降,SOD、GSH-PX活性随之上升,线粒体膜电位提升,CYT-C、Caspase-3表达显著下降,p-Akt/Akt表达增加(P0.01)。LY294002(PI3K抑制剂)组上述指标的检测结果与白藜芦醇组相反。结论:白藜芦醇可能部分通过激活PI3K/Akt通路抑制氧化应激及其诱导的凋亡,从而对肾小管上皮细胞发挥保护作用。     

白黎芦醇对人口腔鳞癌KB细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的:探讨白藜芦醇对人口腔鳞癌KB细胞的增殖及凋亡影响。方法:应用MTT比色法检测Res对KB细胞体外生长的抑制作用;流式细胞仪测定细胞的周期和凋亡;Hoechst33258荧光染料染色,显示凋亡细胞形态;Western blot方法检测survivin、Caspase-3、Smac蛋白的表达。结果:Res能以剂量和时间依赖的方式抑制KB细胞生长,以剂量依赖的方式使KB细胞周期阻滞在S期、诱导细胞凋亡;Hoechst33258染色,可见细胞呈明显的凋亡特征;Western blot方法测得Res下调KB细胞的Survivin蛋白表达水平、增加KB细胞胞浆的Smac蛋白含量(P<0.01)、同时活化Caspase-3蛋白。结论:Res可抑制KB增殖,使细胞周期呈S阻滞并可诱导细胞发生凋亡,Survivin、Caspase-3和Smac基因参与了Res诱导KB细胞凋亡的作用。     

白藜芦醇对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察白藜芦醇(resveratrol,Res)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法利用ISO建立乳鼠心肌细胞凋亡模型,分为正常对照组(无血清DMEM培养液)、模型组(无血清DMEM培养液加入ISO 1μmol/L作用48 h),白藜芦醇干预组(分别向培养基中加入ISO 1μmol/L和Res 50μmol/L作用48 h)和白藜芦醇对照组(向无血清DMEM培养液中加入Res 50μmol/L)。Hochest33258染色检测细胞凋亡率;电镜观察心肌细胞超微结构;检测培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出量;Western blot检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果模型组心肌细胞数量减少,细胞核形态不规则,可见凋亡小体,细胞凋亡率增加。白藜芦醇干预组和白藜芦醇对照组细胞膜完整,核膜清晰,核内染色质浓缩,细胞损伤程度减轻。与正常对照组比较,模型组心肌细胞凋亡率和LDH漏出量均增加,Bcl-2蛋白水平下调,Bax蛋白水平上调,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);与模型组比较,白藜芦醇干预组和白藜芦醇对照组心肌细胞凋亡率和LDH漏出量均降低,Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 Res明显减轻ISO诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与逆转凋亡相关因子Bcl-2和Bax蛋白表达有关。     

白藜芦醇对TNF-α诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的影响

目的:观察白藜芦醇(Res)对TNF-α诱导类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖及凋亡的影响,探讨其对PI3K/Akt/BAD信号通路作用。方法:MTT比色法测定Res对TNF-α诱导RA FLS生长的抑制作用。流式细胞仪检测Res对RA FLS细胞周期及凋亡率的影响。Western-blot方法分析Res对TNF-α诱导RA FLS中磷酸化Akt蛋白及其下游效应分子磷酸化BAD蛋白表达的影响。结果:Res对TNF-α诱导RA FLS增殖具有抑制作用,呈时间剂量依赖性。随着Res浓度增加,RA FLS凋亡率增加,G0/G1期细胞增多,G2/M期及S期细胞减少,与TNF-α组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。Res可抑制TNF-α诱导RA FLS磷酸化Akt蛋白以及磷酸化BAD蛋白的表达。结论:Res通过阻滞RA FLS细胞周期、下调PI3K/Akt信号通路Akt磷酸化水平发挥抑制增殖、诱导凋亡作用,Res具有治疗RA的潜在价值。     

抗体芯片筛选黄芩苷诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用靶点

目的采用凋亡抗体芯片筛选黄芩苷诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用通路和靶点,探讨黄芩苷诱导胃癌细胞凋亡的相关机制。方法采用MTT法检测黄芩苷对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用人凋亡抗体芯片双抗体夹心检测法筛选出黄芩苷(120μmo L·L~(-1))组与对照组的差异表达蛋白;采用Western Blot法对筛选出的差异蛋白Caspase-3、Caspase-8、Fas L、XIAP进行验证,增加对Fas、Caspase-9、TRAIL蛋白的检测。结果与对照组比较,20~320μmo L·L~(-1)的黄芩苷在24~96 h不同时间点可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖(P0.05,P0.01,P0.001),且呈浓度和时间依赖性;80,120,160μmo L·L~(-1)黄芩苷均可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡(P0.01),且呈浓度依赖性;凋亡抗体芯片检测结果表明,120μmo L·L~(-1)黄芩苷组的bad、Caspase-3、Caspase-8、Fas L、HSP60、TRAIL R4、IGF-I、IGF-II、p21、p27、p53和SMAC等蛋白表达明显上调,而XIAP蛋白表达显著下调,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。Western Blot验证实验结果表明,160μmo L·L~(-1)浓度组的Fas L蛋白相对表达量显著上升(P0.001);120,160μmo L·L~(-1)浓度组的Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Fas、TRAIL蛋白相对表达量显著上升(P0.01,P0.001),XIAP蛋白相对表达量显著下调(P0.001)。结论黄芩苷诱导胃癌细胞凋亡的抗肿瘤作用机制与Fas L、TRAIL介导的死亡受体有关;抗体芯片是有效的靶点筛选手段,可用于药物作用靶点和药理机制研究。     

斑蝥素对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制

目的:探讨不同浓度斑蝥素(cantharidin,CTD)对肝癌细胞HepG2细胞增殖、凋亡以及其可能机制。方法:应用长时间细胞观察及功能分析系统(IncuCyte~(TM) ZOOM)以及克隆形成实验,分析药物处理后肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响。应用流式细胞术检测CTD对肝癌细胞HepG2凋亡的影响。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测技术,检测CTD处理后,HepG2细胞pro半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及聚二磷酸腺苷核糖多聚酶(PARP)蛋白表达的变化以及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2),蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平的变化。采用长时间细胞观察及功能分析系统检测ERK1/2抑制剂(PD98059),磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂(Wortmannin)与CTD共处理对HepG2细胞抑制作用的变化。结果:CTD在2.5μmol·L~(-1)时就能够明显抑制HepG2细胞的生长,但不出现明显凋亡。CTD 5μmol·L~(-1)时HepG2的生长几乎完全受到抑制,流式细胞术结果显示,HepG2细胞凋亡率达40.4%。同时Western blot结果显示CTD 5μmol·L~(-1)组细胞pro Caspase-3蛋白表达明显降低,Cleaved PARP蛋白表达明显上升,说明CTD 5μmol·L~(-1)组会出现细胞凋亡,与流式结果相符。CTD能够促进ERK磷酸化,但不能促进Akt磷酸化。结论:CTD 2.5μmol·L~(-1)具有抑制HepG2细胞生长的作用,5μmol·L~(-1)时能够促进HepG2细胞凋亡,提示CTD既具有抑制细胞生长作用,也具有一定的细胞毒作用。CTD能够促进ERK磷酸化,但不能促进Akt磷酸化。     

扶正抗癌方通过PTEN/PI3K/Bad通路调控肺癌A549细胞增殖与凋亡

目的:观察扶正抗癌(FZKA)方对肺癌细胞A549增殖的调控作用,探讨其作用的分子机制。方法:以非小细胞肺癌细胞A549为研究对象,以FAKA方0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2 g·L~(-1)干预,空白组,分别孵育24,48,72 h后,设立采用噻唑蓝(MTT)比色法检测FZKA方对A549细胞活力的影响;以FAKA方1.2,1.6,2.0 g·L~(-1)干预,设立空白组,培养24 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测FZKA方对A549细胞人第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)mRNA水平的影响;孵育24 h后,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析FZKA方对PTEN,磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K),磷酸化的促凋亡蛋白Bad(Phospho-Bad,p-Bad)表达的影响并探讨其相关性。结果:与空白组比较,FZKA方能明显抑制A549细胞增殖,处理24 h后,FZKA从0.8 g·L~(-1)开始,处理48,72 h后,FZKA方从0.4 g·L~(-1)开始,细胞存活率明显降低(P0.05,P0.01);与空白组比较,处理24 h后,FZKA方从0.8 g·L~(-1)开始以浓度依赖性上调PTEN mRNA和蛋白的表达(P0.05,P0.01),FZKA方从1.6 g·L~(-1)开始以浓度依赖性下调PI3K蛋白表达(P0.05,P0.01),从2 h开始以时间依赖性上调p-Bad蛋白的表达(P0.05,P0.01)。结论:FZKA方可通过上调PTEN来调控下游PI3K/Akt/Bad通路相关蛋白的表达进而抑制A549的增殖,促进肺癌细胞凋亡。     

天花粉蛋白抑制胃癌细胞生长及其分子机制研究

目的观察天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)对人胃癌细胞SGC7901诱导凋亡的作用及机制。方法应用荧光显微镜观察0、7、14、28μmol/L TCS对SGC7901细胞形态学的影响及细胞计数。应用流式细胞仪测定各浓度TCS对SGC7901细胞周期及凋亡的作用。应用Western Blot法观察SGC7901Caspase-9、Caspase-3、PARP、pERK、ERK蛋白表达。结果 TCS处理后的SGC7901出现了皱缩、变形,对SGC7901细胞的生长有明显的抑制作用,并且阻滞于S期。TCS诱导SGC7901发生凋亡,呈浓度依赖性(r=0.901,P0.05)。Caspase-9、Caspase-3、PARP蛋白表达降低,呈浓度依赖性(r=-0.984,r=-0.991,r=-0.951,P0.05)。并且随着TCS浓度的升高,ERK表达降低,呈药物浓度依赖性(r=-0.957,P0.05),TCS处理(7μmol/L和14μmol/L)激活ERK,磷酸化ERK升高(P0.05)。结论 TCS可以抑制SGC7901细胞的生长,诱导细胞凋亡,其机制与ERK信号通路有关。     

虎杖提取物白藜芦醇对人胃癌7901细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨虎杖提取物白藜芦醇(Resveratrol,Res)对人胃癌SGC 7901细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 给予人胃癌SGC 7901细胞Res(10.0,25.0,50.0和100.0μmol/L)处理不同时间后,分别采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、流式细胞仪检测SGC 7901细胞的增殖和凋亡情况;同时采用免疫印记法检测促凋亡基因(Bax和Caspase-3)、抑制凋亡基因(Bcl-2)、Akt及其磷酸化形式(p-Akt)的蛋白水平.结果 Res可抑制SGC 7901胃癌细胞的增殖,且抑制作用呈时间和剂量依赖.4种浓度的Res处理SGC 7901细胞24h后的凋亡率随着浓度的升高增加,分别为(17.53±2.24)％、(26.37±4.58)％、(45.74±9.52)％和(71.83±12.95)％,均高于溶剂对照组(P＜0.05).Res可呈浓度依赖的方式上调Bax和Caspase-3的蛋白水平,降低Bcl-2和p-Akt蛋白水平.结论 虎杖提取物白藜芦醇可抑制人胃癌SGC 7901细胞的增殖并促进其凋亡,可能的机制是通过抑制PI3K/Akt信号通路来实现的.     

三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究三氧化二砷联合双氢青蒿素对人急性单核细胞白血病(AML)细胞株THP-1细胞增殖、周期及凋亡的影响并探究其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测三氧化二砷、双氢青蒿素、三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞增殖的影响,流式细胞术AnnexinV/碘化丙啶(PI)双染实验检测细胞周期和凋亡的变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),裂解半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达,在高内涵显微镜下观察药物作用后细胞形态的变化。结果:与空白组比较,不同浓度的三氧化二砷、双氢青蒿素对THP-1细胞的增殖均具有显著抑制作用(P0.01),且成剂量和时间依懒性;作用48 h,与同等剂量的三氧化二砷或双氢青蒿素单独应用比较,1μmol·L~(-1)三氧化二砷与2μmol·L~(-1)双氢青蒿素联合应用对THP-1细胞增殖的抑制作用显著增强(P0.01),且细胞阻滞在G1期(P0.01),并显著下调Bcl-2和Caspase-3的表达(P0.01),同时明显上调cleaved Caspase-3的表达水平(P0.05)。结论:三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞具有明显抑制增殖和诱导凋亡的作用,其作用机制可能与阻滞细胞G1期,下调Bcl-2和Caspase-3蛋白表达,上调cleaved Caspase-3蛋白表达有关。     

PTEN和Bcl-2基因在骨肉瘤组织中的表达及意义

目的:探讨PTEN,Bcl-2基因在骨肉瘤组织中表达的意义和和临床价值.方法:用SP免疫组化方法检测PTEN和Bcl-2在62例骨肉瘤及20例骨软骨瘤表达情况结果PTEN的阳性表达率在骨肉瘤中为58.1%(36/62),在骨软骨瘤中为85%(17/20),两者差异显著(P＜0.05);Bcl-2的阳性表达率在骨肉瘤中为51.6%(32/62),在骨软骨瘤中为20%(4/20),两者差异显著(P＜0.05).PTEN的低表达与分化程度无关与肺转移有关,Bcl-2的高表达与分化程度有关.术后生存5年以上者的PTEN蛋白阳性率(66.7%)较生存时间不超过5年者(28.1%)高(P＜0.05).骨肉瘤组织中Bcl-2与PTEN基因的表达未见显著性相关(P＞0.05).结论:骨肉瘤中存在PTEN呈低表达而Bcl-2高表达,PTEN低表达和Bcl-2高表达于骨肉瘤侵袭、转移有关.     

子宫内膜癌中PTEN蛋白、HER-2蛋白的表达及意义

目的检测子宫内膜癌组织中PTEN蛋白及HER-2蛋白表达并探讨其意义。方法采用免疫组织化学法检测60例子宫内膜癌、32例正常子宫内膜组织中PTEN蛋白及HER-2的表达。结果子宫内膜癌组织中PTEN蛋白为缺失表达,高于正常子宫内膜组织(P<0.05),而且PTEN表达在G1级肿瘤高于G2、G3级(P均<0.05),PTEN蛋白缺失率与肿瘤组织类型有关(P<0.05),与肌层浸润、淋巴结转移及病理分期无明显关系(P均>0.05)。子宫内膜癌组织中HER-2蛋白表达为高表达,HER-2的表达与肿瘤组织学分级、病理学分期以及肿瘤浸润子宫肌层深度均显著相关(P均<0.05),其表达与组织学类型、有无淋巴结转移均无关(P均>0.05)。HER-2与PTEN的表达呈明显负相关。结论 PTEN表达缺失与临床病理参数无关,蛋白表达缺失常发生于细胞分化较差的子宫内膜癌。PTEN蛋白表达缺失与HER-2表达水平有关。     

子宫内膜癌中PTEN蛋白、HER-2蛋白的表达及意义

目的检测子宫内膜癌组织中PTEN蛋白及HER-2蛋白表达并探讨其意义。方法采用免疫组织化学法检测60例子宫内膜癌、32例正常子宫内膜组织中PTEN蛋白及HER-2的表达。结果子宫内膜癌组织中PTEN蛋白为缺失表达,高于正常子宫内膜组织（P〈0.05）,而且PTEN表达在G1级肿瘤高于G2、G3级（P均〈0.05）,PTEN蛋白缺失率与肿瘤组织类型有关（P〈0.05）,与肌层浸润、淋巴结转移及病理分期无明显关系（P均〉0.05）。子宫内膜癌组织中HER-2蛋白表达为高表达,HER-2的表达与肿瘤组织学分级、病理学分期以及肿瘤浸润子宫肌层深度均显著相关（P均〈0.05）,其表达与组织学类型、有无淋巴结转移均无关（P均〉0.05）。HER-2与PTEN的表达呈明显负相关。结论 PTEN表达缺失与临床病理参数无关,蛋白表达缺失常发生于细胞分化较差的子宫内膜癌。PTEN蛋白表达缺失与HER-2表达水平有关。     

AG372对重组人蛋白激酶CK2全酶的抑制动力学研究

目的　观察Tyrphostin中的AG372对重组人蛋白激酶CK2全酶的直接作用及其酶动力学机制。 方法　利用基因工程克隆、表达和纯化获得重组人蛋白激酶CK2α和 β亚基 ,在体外等摩尔数混合构成有最大生物活性的重组CK2全酶 ,在不同条件下测定CK2的活性。CK2活性通过测定转移到CK2底物上的 [γ 3 2 P]ATP或 [γ 3 2 P]GTP的 [3 2 P]放射活度来检测。结果　重组人CK2是一种Ca2 + ,cAMP和cGMP等第二信使非依赖性蛋白激酶 ,与天然CK2的性质一致。AG372对重组人CK2全酶具有很强的抑制作用 ,IC50 为 6 2 7.1nmol·L-1,抑制作用远大于已知CK2抑制剂DRB和A3。AG372对重组人CK2的动力学研究表明 :它与GTP呈竞争性抑制作用 ,与酪蛋白呈非竞争性抑制作用。结论　AG372是一种很强的重组人CK2抑制剂。重组人蛋白激酶CK2可作为一种较为简便筛选和开发有效的CK2抑制剂的分子靶点。     

应用m2-Gi1α融合蛋白鉴别M2受体的特异性药物

 目的表达m2-Gilα融合蛋白,通过检测GDP与m2-Gilα融合蛋白的亲和力大小来鉴别m2受体的特异性激动剂、拮抗剂和反向激动剂。方法用两步PCR反应重组m2-Gilα融合蛋白cDNAs,并插入到pBacPAK9病毒载体中,利用Sf9细胞表达M2受体蛋白和m2-Gilα融合蛋白,通过[³H]QNB结合饱和实验及[³⁵S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测受体表达水平及GDP 与m2-Gilα融合蛋白的亲和力。结果m2-Gilα融合蛋白表达水平是(18.14±0.17)pmol·mg(膜蛋白)^-1。M2-Gilα融合蛋白与[³H]QNB的结合量随着[³H]QNB浓度的升高而增加,10μmol·L^-1GTDγS使m2-Gilα融合蛋白与[³H]QNB的饱和结合曲线明显下移。Ach使m2-Gilα融合蛋白与[³⁵S]GTPγS竞争性替代结合曲线明显右移,Pilo稍次之,alcuronium,AF—DX116,Iso及atropine 则使曲线左移,GDP的IC₅₀值分别是168.4,152.3,6.84,6.12,5.59,4.52μmol·L^-1,无配体存在时为14.7μmol·L^-1。结论表达的m2-Gilα融合蛋白具备M2配体结合的特性及G蛋白耦联受体的信号转导功能,对于有基础活性的m2-Gilα融合蛋白,Ach, Pilo是完全激动剂;atropine,alcuronium,Iso和AF-DX116为拮抗剂。     

禾肾丸对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及肾组织nephrin蛋白表达影响

目的:研究禾肾丸对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及肾组织足细胞裂孔膜蛋白nephrin表达的影响,为其治疗肾病蛋白尿提供实验依据。方法:SPF级雄性Wistar大鼠随机分为模型组,禾肾丸组(1.8 g·kg~(-1)),贝那普利组(1 mg·kg~(-1))及空白组。采用一次性尾静脉注射阿霉素6 mg·kg~(-1)复制阿霉素肾病大鼠模型。造模成功后,禾肾丸组及贝那普利组分别给予相应药液,模型组及空白组给予等体积蒸馏水,1次/d,连续28 d。给药结束后,收集24 h尿液,检测尿蛋白,腹主动脉采血,检测血中白蛋白(albumin,Alb),血肌酐(serum creatine,SCr),血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)。苏木素-伊红(HE)检查肾脏组织形态变化,透射电镜观察肾小球足细胞足突及基底膜改变,免疫组化及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肾组织nephrin表达。结果:经禾肾丸治疗后,24 h蛋白尿较模型组显著下降(P0.01),血清SCr,BUN显著降低(P0.01),Alb显著升高(P0.01)。组织病理学检查显示,禾肾丸组肾小球上皮细胞肿胀明显减轻,部分肾小球体积略增大,系膜细胞及系膜基质仅见轻微增生,管腔内未见小管有蛋白管型。超微结构研究显示,禾肾丸组肾小球基底膜光滑均匀,略见增厚,足突清晰完整、偶见融合。免疫组化结果显示,禾肾丸组nephrin蛋白阳性面积率显著高于模型组(P0.01)。Western blot结果显示,nephrin蛋白表达量较模型组显著升高(P0.01)。结论:禾肾丸可能通过上调nephrin表达水平,修复受损足细胞而减少蛋白尿、保护肾脏。     

中药蛋白质组学研究策略

蛋白质组学在中药研究中的应用已十分广泛,有许多较为成功的实例。作者回顾了前人应用蛋白质组学技术对中药复杂体系的研究工作,并提出建立一门专门针对中药研究的蛋白组学,即中药蛋白质组学。该文对中药蛋白质组学的研究策略及未来的研究方向进行了综述和思考,希望为从事中药蛋白质组学研究者提供一点思路。     

川芎嗪对缺氧缺血大鼠脑组织Bc1-2及Bax蛋白表达的影响

目的通过观察川芎嗪注射液对缺血缺氧性脑病脑组织神经细胞形态及凋亡相关基因Bc1-2、Bax蛋白表达的影响,探讨其脑保护作用及其机制。方法将50只幼鼠分为3组,假手术组(A组)10只,模型组(B组)20只,川芎嗪注射液组(C组)20只,均于造模前腹腔注射液相应药物。应用右侧颈总动脉结扎并6%氧、94%氮混合气体处理4 h的方法制备缺氧缺血模型。3组大鼠均于脑缺氧缺血后24 h取脑组织标本检测Bc1-2、Bax蛋白表达及神经细胞凋亡情况。结果①HE染色结果显示A组海马区神经元分布均匀,形态无异常;B组海马区神经元排列紊乱,神经元肿胀变性;C组神经元镜下改变较B组明显减轻。②尼氏染色结果显示A组的海马区细胞层次清晰;B组海马区细胞数减少,神经元排列疏松;C组较B组神经元丢失明显减轻。③A组未见Bc l-2和Bax阳性细胞数增多;B组海马区Bc1-2及Bax蛋白阳性细胞数目均增多(P0.01);与B组比较,C组海马区Bc1-2蛋白阳性细胞数目增多,Bax蛋白阳性细胞数目降低(P0.01)。结论川芎嗪注射液可通过上调缺氧缺血大鼠脑组织中的Bc1-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,从而抑制神经细胞凋亡,减轻缺氧缺血所致的脑组织损伤。     

冠心病不同阶段血清的差异蛋白质组学研究

目的通过比较冠心病4个不同阶段的血清蛋白质表达的差异,寻找与冠心病的发生发展相关的特异蛋白质。方法采用蛋白质组学双向凝胶电泳联合质谱的技术方法对正常健康人、冠心病中高危人群、冠心病急性期患者及冠心病稳定期患者蛋白质组学比较研究。结果通过鉴定得到了7种差异蛋白质：视黄醇结合蛋白4（RBP4）、载脂蛋白E（ApoE）、载脂蛋白A1（ApoA1）、CD5抗原样蛋白（CD5L）、结合珠蛋白（Hp）、血清白蛋白（ALB）、簇连蛋白（CLU）。结论这些与冠心病相关的差异蛋白质主要通过参与脂质代谢、炎症反应以及氧化损伤等过程而导致动脉粥样硬化的发生。     

动态监测C-反应蛋白水平在创伤手术中的应用价值

目的动态监测血清中C-反应蛋白（C-reactive protein，CRP）水平，探讨其在创伤手术患者抗感染治疗中的临床应用价值。方法随机选择100例创伤手术患者，用NycoCard ReaderⅡ定量金标检测仪，检测患者在创伤手术后1d内、3d、5d、7d血清CRP水平的变化。结果100例患者手术后1d内血清CRP水平均〉8．0mg／L；手术后3d单纯机体损伤与合并感染组，两者血清CRP水平相比较有显著性差异（P〈0．01）；手术后5d合并感染组由于应用抗生素的不同，有好转与无好转组CRP相比较也有显著性差异（P〈0．01）；手术后7d100例创伤手术患者CRP趋于正常。结论由于血清CRP的灵敏度高，在创伤患者合并感染时，有助于临床早期的鉴别诊断；同时动态检测CRP水平还有助于指导抗生素的使用及疗效观察，从而降低由于抗生素的应用而引起细菌变异及耐药性的产生。