耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的了解医院耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶(MBL)情况及其对临床常用抗菌药物的耐药性,为临床抗感染治疗提供依据。方法采用E-test检测铜绿假单胞菌是否产生MBL,用BD Phoenix 100全自动微生物测定铜绿假单胞菌对常用15种抗菌药物的耐药性。结果在分离的189株铜绿假单胞菌中耐碳青霉烯类的有54株(28.6%),其中产MBL的有13株(24.1%);耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌与碳青霉烯类敏感铜绿假单胞菌对大多数常用抗菌药物的敏感性差异有统计学意义。结论医院耐碳青霉烯类的铜绿假单胞菌检出率较高,多药耐药现象较严重,产MBL是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物耐药的主要原因之一,临床医师应参考微生物实验室的药敏结果,合理选用抗菌药物。     

β-内酰胺酶基因与铜绿假单胞菌耐碳青霉烯类药物的关系研究

目的探讨β-内酰胺酶基因与铜绿假单胞菌耐碳青霉烯类药物的关系,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对临床分离的690株铜绿假单胞菌进行回顾性分析;并选取52株耐碳青霉烯类抗生素的铜绿假单胞菌,利用PCR法检测其中8种主要β-内酰胺酶编码基因的分布情况。结果690株铜绿假单胞菌中,临床分布以痰标本为主,占56.52%（390/690）,其次为伤口分泌物,占11.88%（82/690）;病区分布以ICU检出率最高,占16.23%（112/690）,其次为神经外科和呼吸内科,分别占13.91%（96/690）和10.58%（73/690）;在检测的15种抗生素中,耐药率超过50%的达9种（60%）,耐药率最高为氨苄西林/舒巴坦（98.00%）,其次为复方新诺明（93.00%）和替卡西林（92.00%）,耐药率最低为多粘菌素E（6.00%）;β-内酰胺酶基因的PCR结果显示,IMP阳性25份,VIM阳性17份,IMP 和 VIM均阳性7份,OXA阳性3份,其它β-内酰胺酶耐药基因（SPM,TEM,PER,GES,SHV）均阴性。结论临床分离铜绿假单胞菌主要来自呼吸道标本,科室分布以ICU、神经外科和呼吸科为主,其耐药情况非常严重;本地区铜绿假单胞对碳青霉烯类抗生素耐药可能主要与β-内酰胺酶基因IMP和VIM相关。     

铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶研究进展

铜绿假单胞菌产β_内酰胺酶是其对β_内酰胺类抗生素耐药的主要机制,所产β_内酰胺酶种类繁多、特性各异,并在β_内酰胺类抗生素广泛应用的选择压力下,不断有新的β_内酰胺酶产生。文中对铜绿假单胞菌产β_内酰胺酶(ESBL、AmpC、金属酶)耐药机制的研究进展作了简要综述。     

分离产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌

目的检测我院内科某病区产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌及其对抗菌药物的耐药性. 方法纸片法测定产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌;微量稀释法测定其对抗菌药物的耐药性. 结果该病区产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌占同期分离铜绿假单胞菌的32.3%,产酶菌株对替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、奈替米星,复方增效磺胺耐药;对阿米卡星敏感;对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星、洛美沙星部分敏感. 结论产生金属β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对头孢类及碳青酶烯类耐药的机制之一,实验室对其正确检测可帮助临床合理选用抗菌药物并减少耐药性的扩散.     

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的药物敏感性与耐药机制研究

目的 研究耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的药物敏感性及铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制,为指导临床用药提供试验依据.方法 应用琼脂稀释法检测耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的药物敏感性,采用重复序列聚合酶链反应进行菌株同源性分析;应用纸片增敏协同试验筛选产金属酶的菌株,设计外排泵抑制试验对耐药菌株的外排泵进行检测.结果 耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的耐药率以环丙沙星、多黏菌素E较低;同源性研究结果显示,共有8个型别;75株碳青霉烯类耐药株中,13株为金属酶阳性;外排泵抑制剂可以使34株美罗培南耐药株的MIC值较单药时降低≥4倍.结论 该院分离的耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌以A、B型为主;严重感染患者可以考虑使用环丙沙星等抗菌药物;产金属酶和外排泵等耐药外排系统可能是导致铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药的主要原因.     

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的了解医院耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。方法统计分析2010年1月-2011年1月30例耐碳青霉烯类铜绿假单胞感染患者感染部位、科室分布及耐药性;细菌鉴定采用VITEK-32细菌鉴定系统,药敏试验采用纸片扩散(K-B)法,采用WHO细菌耐药监测网提供的WHONET5.4软件进行统计分析。结果全年共分离出铜绿假单胞菌1 144株,其中耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌30株,检出率为2.6%;30株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌以痰液检出率最高,占66.6%;科室分布以重症监护病房为主,其次是神经内科,分别占50.0%、26.7%;耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌仅对多黏菌素B的耐药率为0,对阿米卡星耐药率为17.7%,对其他抗菌药物耐药率均>80.0%。结论耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌临床分布比较集中,对常用抗菌药物呈高度耐药,给临床治疗带来严重挑战,提示临床加强抗菌药物的管理和对耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌感染病例的实时监控,防止和减少此类耐药菌在医院内传播。     

铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的：探讨铜绿假单胞菌的β-内酰胺酶检测及耐药性。方法：采用全自动微生物分析系统对我院2013年度院内感染铜绿假单胞菌130株对15种抗生素药敏谱的检测,同时采用双纸片协同试进行金属β-内酰胺酶的检测。结果：IPM耐药菌18株,占1385％;AMP、CZO、CTT、SAM的耐药率分别为99．23％、96．92％、95．38％、94．62％,均显著高于其他药物,具有高度统计意义（P〈0．05）。TOB、AMK、GEN、TZP的敏感率分别为93．08％、92．31％、9077％、88．46％;经协同试验,共检出MBL菌株7株,占5．38％,占IPM耐药菌的38．89％（7／18）。产MBL菌株对15种抗生素的耐药性均比较高;其中,TOB、AMK、GEN、TZP的耐药性分别为23．1％、23．1％、30．8％、30．8％。结论：分析铜绿假单胞菌的耐药性及检测β-内酰胺酶,能更好地指导临床用药,对控制耐药菌株的播散及流行具有重要的临床价值。     

铜绿假单胞菌β-内酰胺酶基因的检测与分布

目的了解中山地区铜绿假单胞菌β-内酰胺酶类药物的耐药表型和基因分布及其基因型与表型的相关性。方法采用VITEK-2Compact高级专家系统判定2010年1-9月分离的896株铜绿假单胞菌对β-内酰胺酶类药物的耐药表型,用PCR方法检测25株铜绿假单胞菌的13种β-内酰胺酶基因。结果 896株铜绿假单胞菌对β-内酰胺酶类药物的耐药表型共有9种,主要表型为高水平耐药+碳青霉烯酶(不渗透性)占47.3%;连续分离的25株铜绿假单胞菌中耐药表型共有4种,主要表型为高水平耐药+碳青霉烯酶12株占48.0%;检出阳性耐药基因9种:blaOXA-10、blaDHA基因阳性率均为4.0%,blaSHV20.0%,blaCARB12.0%,blaGIM 8.0%,blaGES8.0%,blaTEM16.0%,oprD2基因缺失率60.0%,未检出blaIMP,blaVIM,blaPER,blaVEB,blaSPM。结论临床分离的铜绿假单胞菌β-内酰胺酶类药物耐药表型和基因型基本相符,推测该地区β-内酰胺酶类药物耐药的主要原因是β-内酰胺酶基因的存在导致。     

铜绿假单胞菌耐药与高活性β内酰胺酶

目的了解铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性及其AmpC酶、超广谱β内酰胺酶（ESBLs）和金属β内酰胺酶（MBLs）的产生情况，指导临床合理选用抗生素。方法采用K-B纸片扩散法检测药物敏感性，通过改良酶提取物头孢西丁和头孢曲松三维试验检测AmpC酶和ESBLs，E试验MBL试条检测MBLs。结果186株临床分离铜绿假单胞菌对亚胺培南的敏感率最高，达82．3％，对环丙沙星、哌拉西林／他唑巴坦、头孢他啶、阿米卡星、头孢哌酮／舒巴坦的敏感率依次为75．3％，74．2％，72．6％，71．0％，70．4％，对替卡西林、头孢哌酮、氨曲南的敏感率均〈60％，对头孢噻肟和头孢曲松的耐药率分别为61．8％和55．9％。单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs、单产ESBLs和单产MBLs检出率分别为8、6％（16／186），2．7％（5／186），14．5％（27／186），4．8％（9／186）。结论临床分离铜绿假单胞菌的耐药现象不容忽视，产生高活性β内酰胺酶是导致其耐药的机制之一，亚胺培南仍是治疗铜绿假单胞菌感染最有效的药物。     

铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶耐药机制的研究进展

铜绿假单胞菌是重要的条件致病菌之一,其耐药机制较为复杂,主要包括外膜通透性降低,外膜蛋白D2缺失,外膜存在独特的药物主动泵出系统、β-内酰胺酶的产生、氨基糖苷类钝化酶的产生、药物作用靶位的改变以及细菌生物被膜形成,本文就其产β-内酰胺酶耐药机制方面的国内外近期研究进展进行综述.     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性与金属β-内酰胺酶的关系

目的 了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性与金属β-内酰胺酶（MBLs）的关系.方法 2-巯基丙酸协同试验筛选产MBLs菌株;PCR扩增和克隆含有MBLs基因的Ⅰ型整合子,Southern印迹分析MBLs基因的定位;随机引物多态性DNA（RAPD）分析分离株的同源性.结果 128株亚胺培南耐药株对阿米卡星、头孢他啶和环丙沙星的耐药率（31.9%、43.6%和61.0%）,显著高于亚胺培南敏感株（9.8%、13.9%和24.3%）（P＜0.01）;分别有6株（4.7%）或9株（7.1%）产VIM-2或IMP-1型MBLs;VIM-2基因位于染色体上的Ⅰ型整合子结构,而IMP-1基因位于23kb的质粒上;RAPD显示8株产IMP-1型MBLs菌株有相同的带谱.结论 产VIM-2和IMP-1型MBLs铜绿假单胞菌可导致医院感染.     

铜绿假单胞菌的耐药性分析与金属β-内酰胺酶检测

目的 了解住院患者送检标本中分离出的铜绿假单胞菌的耐药特点及其产金属β-内酰胺酶(MBLs)情况.方法 收集2005年7月-2008年8月住院患者送检的临床标本中,共分离出的铜绿假单胞菌95株,采用德灵公司生产的NC21鉴定药敏板及配套试剂和VITEK-32进行鉴定和测定药物敏感性,并对耐亚胺培南的30株菌用K-B法确认亚胺培南的敏感性和检测美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦和多黏菌素E的敏感性,其中19株经K-B法确认为哑胺培南耐药的菌株用Etest法检测MBLs.结果 95株铜绿假单胞菌的耐药率结果显示,以阿米卡星的耐药率最低,为15.4%,对其他抗菌药物的耐药率为26.7%～100.0%;经仪器检测耐亚胺培南的30株菌中,对美罗培南和亚胺培南的敏感性差异无统计学意义(u值1.04,P>0.05),头孢哌酮/舒巴坦的敏感性高于亚胺培南(u值2.6,P<0.05),多黏菌素E的敏感性高于亚胺培南(u值527.5,P<0.05);Etest从19株(经K-B法确认为亚胺培南耐药的菌株)菌中检出12株产金属β-内酰胺酶,亚胺培南耐药株金属β-内酰胺酶检出率为63.2%.结论 临床标本中分离出铜绿假单胞的多药耐药现象十分严重,亚胺培南耐药株产MBLs比例较高;多黏菌素E、头孢哌酮/舒巴坦对耐亚胺培南铜绿假单胞菌治疗可能有效,产MBLs铜绿假单胞菌有院内间歇流行趋势.     

铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶基因检测研究

目的研究医院临床分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的产生及类型。方法收集2012年1-12月医院3 472份临床标本进行培养,采用VITEK-2Compact系统进行菌株鉴定和药敏试验,分离出耐亚胺培南铜绿假单胞菌,使用PCR技术扩增blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaGIM、blaSIM和blaSPM基因,并测序明确基因型。结果 3 472份标本共培养出铜绿假单胞菌547株,其中检出耐亚胺培南铜绿假单胞菌190株,检出率为34.73%;铜绿假单胞菌对替卡西林/克拉维酸和哌拉西林的耐药率最高,分别为55.03%和30.53%,对多黏菌素B的耐药率最低为2.19%;190株耐亚胺培南铜绿假单胞菌有46株扩增出blaIMP阳性条带,阳性率为24.21%,PCR产物回收后经测序后证实为IMP-1型,未发现携带blaVIM、blaGIM、blaNDM-1,blaSIM和blaSPM基因的菌株。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌以携带blaIMP为主,耐药机制可能与IMP-1有关。     

产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的检出率与药敏分析

目的 探讨铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶检出率并分析其药敏谱.方法 收集深圳南山区2007年6月-2008年6月共323株铜绿假单胞菌,采用法国生物梅里埃公司ATB-Expression细菌鉴定;药敏试验采用ATBPSE5药敏试剂条测试;对亚胺培南和美罗培南同时耐药菌株用改良纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶.结果 共分离出323株铜绿假单胞菌,产金属β-内酰胺酶46株(14.3%);铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率高达45.4%和26.3%,多黏菌素E对产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌依然有非常好的效果,敏感率达到96.9%;铜绿假单胞菌泛耐状况不容忽视.结论 加强金属β-内酰胺酶检测,按照药敏试验选择治疗药物,以防止菌株扩散是非常重要的.     

青岛地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 了解青岛地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的产生及耐药特性,为临床抗感染治疗提供依据.方法 采用亚胺培南纸片法检测铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶,K-B法测定铜绿假单胞菌对15种抗菌药物的耐药性.结果 在286株铜绿假单胞菌中,有93株对亚胺培南耐药,耐药率为32.5%,在93株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中,产金属β-内酰胺酶15株,产酶率为16.1%;286株铜绿假单胞菌对15种抗菌药物耐药率较低的抗菌药物有头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦,分别为16.8%、24.8%、26.6%,对环丙沙星和头孢他啶的耐药率相对较低,分别为43.7%和33.6%,耐药率＞90.0%的抗菌药物有氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、头孢泊肟和头孢呋肟等.结论 耐亚胺培南铜绿假单胞菌的检出率较高,多药耐药现象较严重,产金属β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南及头孢类抗菌药物耐药的主要原因之一,应参考实验室的药敏结果,合理选用抗菌药物.     

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌耐药基因与药敏分析

目的调查医院耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(Carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa,CRPA)的耐药特性,为指导临床抗菌药物应用、降低细菌耐药性和防控医院感染提供参考。方法收集2017年3-12月在南昌大学第一附属医院分离的CRPA 95株,检测其耐药性;聚合酶链式反应(PCR)检测碳青霉烯类相关基因及外膜蛋白基因OprD2的携带情况。结果测试菌株对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为97.89%和95.79%,对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率最低为50.53%,对阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、左氧氟沙星的耐药率在51%～60%间,对氨曲南、环丙沙星、哌拉西林、庆大霉素、妥布霉素、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率均≥60%。PCR法检测出67株(70.53%)OprD2基因缺失菌株,12株(12.63%)bla_(GES)阳性菌,10株(10.53%)bla_(VIM)阳性菌,bla_(IMP)、bla_(GIM)、bla_(SIM)、bla_(TEM)、bla_(PER)、bla_(VEB)、bla_(OXA-10)阳性菌均未检出。结论 CRPA的耐药形势严峻,其耐药主要与细菌产生bla_(GES)基因、bla_(VIM)基因和缺失OprD2基因相关。临床应加强对CRPA的监测,合理使用抗菌药物,最大限度地降低细菌耐药。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药性及β-内酰胺酶研究

目的分析本院耐亚胺培南铜绿似单胞菌（（imipenem resistant Pseudomonas aemginosa, IRPA）对临床常用抗菌药物的耐药性及所产β-内酰胺酶类型，用以指导临床更有效地使用抗生素。方法按2005年NCCIS的标准用纸片扩散（K—B）法测定美洛培南等12种临床常见抗菌药物对32株耐亚胺培南铜绿假单胞菌的体外抗菌活性，三维试验、改良三维试验、2-巯基丙酸抑制试验分析β-内酰胺酶类型。结果32株细菌均为多重耐药株，敏感率属前三位的分别是头孢他啶（42．2％），头孢吡肟（36．5％）、哌拉西林（33．5％）、其次为哌拉西林／三唑巴坦、头孢哌利，舒巴坦，头孢哌酮，敏感牢依次为333％、31．2％、24．6％。美洛培南敏感率为9．3％，中介率为23．2％。三维试验结果表明6株产碳青霉烯酶，其中1株产金属酶，2-巯基丙酸抑制试验筛选金属酶仪1株阳性，与三维试验结果一致，2株能被氯唑西林抑制，可能是AmpC酶的变异子，另3株均不能被克拉维酸、氯唑西林、EDTA抑制，其余菌株中有2株产Ampc酶，3株产超广谱β-内酰胺酶（ESBLa），4株同时产AmpC酶和ESBLs。结论我院铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制可能以外膜孔蛋白丢失或主动泵出系统过度表达为主，不是以产碳青霉烯酶为主。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌β-内酰胺酶分布分析

目的研究耐亚胺培南(IMP)铜绿假单胞菌(PAE)对常用抗菌药物的耐药情况与β-内酰胺酶携带情况。方法采用琼脂稀释法、K-B纸片法进行药物敏感试验,用双纸片协同(DDST)法筛选产金属酶的菌株,用聚合酶链(PCR)法进行基因型检测和分析。结果 2008年68株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中,DDST阳性12株;2009年50株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中,DDST阳性11株;2008年465株PAE中K-B法对IMP不敏感率为14.8%、MIC法为14.6%,2009年285株PAE中K-B法对IPM不敏感率为18.9%,MIC法为17.5%;基因检测,各基因型的分布比例为IMP 2.5%、VIM 5.9%、GIM 0.8%、KPC 4.2%、OXA-10 28.8%、OXA-2 7.6%、OXA-1 1.6%。结论临床常用抗铜绿假单胞菌药物耐药比例升高,IMP耐药的PAE多为多药耐药株和泛耐药株,OXA型ESBLs基因携带率较高。     

纸片法检测铜绿假单胞菌β-内酰胺酶探讨

目的探讨用纸片法检测铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的可行性,建立适用于临床微生物实验室对β-内酰胺酶的常规过筛检测方法。方法用纸片法(扩散法,协同法)进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、金属β-内酰胺酶(BLA)、AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)检测。用三维试验作对照。结果纸片法检出产ESBLs阳性菌株19株,产金属β-内酰胺酶菌株7株,AmpC酶阳性菌株10株,三维试验则分别检出21、7、9株,符合率在90%以上。结论纸片法检测β-内酰胺酶操作简便,与三维试验符合率高(P>0.05),适合临床实验室常规检测。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的研究

目的 检测耐亚胺培南铜绿假单胞菌产生金属β-内酰胺酶的情况,对金属β-内酰胺酶进行分型.方法 收集天津医科大学总医院2005-2006年耐亚胺培南并对所有受试抗菌药物均耐药的铜绿假单胞菌16株,应用聚合酶链反应扩增金属β-内酰胺酶基因;应用限制性内切酶特异的酶切位点对聚合酶链反应产物进行酶切反应,确定金属β-内酰胺酶亚型.结果 16株铜绿假单胞菌有2株产生IMP型金属β-内酰胺酶,限制性酶切反应证实为IMP-1型金属β-内酰胺酶基因.结论 临床分离的产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌以IMP-1型为主,在碳青酶烯类抗菌药物的耐药因素中金属β-内酰胺酶的水解作用并非主要机制.