大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产ESBLs表型与基因型分析

目的 了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌发生率及主要基因型分布特点.方法 采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法对临床标本中分离的110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌进行ESBLs的表型确定试验,同时分别用聚合酶链反应(PCR)扩增法检测TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9耐药基因,并对其产物进行序列分析.结果 产ESBLs阳性菌株的检出率分别为:肺炎克雷伯菌占36.2%,大肠埃希菌占42.7%,总检出率为39.7%;ESBLs检出模式以头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸单组为底物阳性率最高,占阳性菌株的66.7%;单用头孢他啶,头孢他啶/克拉维酸一组为底物,会造成大肠埃希菌68.1%和肺炎克雷伯菌64.7%的漏检;耐药基因型分析显示,TEM、SHV、CTX-M-I、CTX-M-2、CTX-M-9基因检出率分别为54.3%、38.3%、21.O%、24.7%、70.4%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均以CTX-M型为主要基因型,占91.4%;同时携带>2种耐药基因菌株占71.6%.结论 医院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株携带多种耐药基因严重,需引起临床的高度重视.     

天津地区医院产ESBLs菌株基因型研究

目的 了解天津产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌基因型及耐药情况.方法 收集部分医院临床分离218株产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌,利用实时荧光定量PCR方法检测CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、TEM、SHV、OXA-1、OXA-2、OXA-10耐药基因,结合Tm值将其分型.结果 109株产ESBLs大肠埃希菌耐药基因CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、TEM、SHV、OXA-1分别为32.1%、0.9%、0.9%、33.9%、73.4%、27.5%、15.6%,携带>2种基因菌株达66.1%;109株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9,TEM、SHV、OXA-1、OXA-10分别为49.5%、2.8%,1.8%、22.9%、78.9%、76.1%、33.0%、9.0%,携带>2种基因达82.2%;检测菌株对亚胺培南保持高度敏感.结论 天津市肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌ESBLs的基因型以SHV型、TEM型、CTX-M-1型、CTX-M-9型为主,OXA呈上升趋势,各医院肺炎克雷伯菌耐药基因型存在一定差异.     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌相关耐药基因监测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌中常见的β-内酰胺酶基因的分布情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测了77株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中TEM、SHV和CTX-M等三种β-内酰胺酶基因,并进行了DNA测序。结果 50株产ESBLs的大肠埃希菌中,41株TEM基因阳性(82.0%),7株SHV基因阳性(14.0%),16株CTX-M基因阳性(32.0%),21株菌两种以上基因型同时阳性。27株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中,21株TEM基因阳性(77.8%),24株SHV基因阳性(88.9%),3株CTX-M基因阳性(11.1%),16株菌两种以上基因型同时阳性。结论产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中携带多种β-内酰胺酶基因,且以TEM和SHV型较为流行。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药及TEM与SHV基因型分析

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在医院的耐药情况,并分析其TEM与SHV基因型的分布,为制定合理的治疗方案提供参考。方法收集医院2012年2月-2014年1月分离的214株大肠埃希菌和186株肺炎克雷伯菌,用双纸片协同试验确定产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,同时提取产ESBLs菌株DNA,用PCR扩增技术及电泳进行基因分型,K-B法比较产ESBLs阳性株与阴性株耐药率。结果 214株大肠埃希菌中检出产ESBLs菌株51株,检出率为23.83%;186株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs菌株48株,检出率为25.81%;两种菌种产ESBLs与非产ESBLs的耐药情况均较相似,产ESBLs菌株对氨苄西林、哌拉西林、头孢呋辛等的耐药性均90%,且明显高于非产ESBLs菌株,且对庆大霉素及左氧氟沙星、环丙沙星有部分耐药性,耐药率均50%,具有明显的多重耐药性;产ESBLs与非产ESBLs均对碳青霉烯类抗菌药物耐药性较差,耐药率5%;大肠埃希菌TEM基因型31株,检出率为60.78%,SHV基因型27株,检出率为52.94%;肺炎克雷伯菌检出TEM基因型35株,检出率为72.92%,SHV基因型31株,检出率为64.58%。结论本地具有较高的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发生率,耐药形势严峻,TEM、SHV是其重要的基因分型。     

ICU肺部感染患者分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因亚型及同源性

目的 分析重症监护病房(ICU)肺部感染患者分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因亚型及同源性。方法 选取2018年12月-2020年12月从南通大学第二附属医院ICU收治的96例肺部感染患者。检测痰液标本中病原菌特征,聚合酶链式反应(PCR)分析产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因亚型,重复序列PCR(Rep-PCR)和多位点序列分型(MLST)分析同源性。结果 96例患者痰液标本中共分离134株病原菌,其中33株大肠埃希菌中产ESBLs菌株检出率为48.48%,42株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株检出率为40.48%;产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对哌拉西林、头孢唑林、头孢他啶等常用抗菌药物的耐药性均高于非产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌(P<0.05);16株产ESBLs大肠埃希菌基因型共检出1种TEM-1、3种CTX-M和3种SHV,以CTX-M-14亚型和SHV-77亚型最为多见,且属于8种不同ST型,以ST131型为主;17株产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型共检出1种TEM-1、3种CTX-M亚型和4种SHV亚型,以SHV-1...     

产超广谱β-内酰胺酶菌的耐药性与基因型分析

目的 分析医院急诊科3年内产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型,以指导临床用药.方法 采用ESBLs表型确证试验筛选产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌,提取产ESBLs菌的质粒DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增产ESBLs株质粒TEM、SHV、CTX-M1、CTX-M9和OXA5种基因,并对其扩增物进行DNA序列分析,测定大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对17种抗菌药物的耐药性.结果 共检出143株大肠埃希菌与77株肺炎克雷伯菌,其中84株为产ESBLs菌,占38.2％;ESBLs研究菌株全部携带TEM型、77.4％携带CTX-M9型基因;同一菌株携带2、3、4个基因的菌株比例分别为44.8％、33.3％和7.1％;产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌为多药耐药菌,其中对青霉素类、第一、二、三代头孢菌素类、磺胺类和氟喹诺酮类耐药率高达80.0％～100.0％;碳青霉烯类对产ESBLs细菌仍保持较高的抗菌效果.结论 产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药基因,以TEM型和CTX-M9型为主,携带＞2个耐药基因的产ESBLs菌株比例较高;产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对含酶抑制剂的抗菌药物、碳青霉烯类抗菌药物仍保持较高的敏感性,研究中发现美罗培南耐药菌株,应引起临床重视.     

多药耐药肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的研究医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的主要耐药基因型并进行序列分析。方法收集临床住院患者产ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和变形菌属,通过改良Hodge试验、EDTA双纸片增效试验、分别测定KPC、金属酶;聚合酶链反应(PCR)检测其耐药基因、分析PCR产物序列并在GenBank中比对分析,总结产ESBLs细菌同源性的和变异情况。结果肺炎克雷伯菌中CTX型占85.0%,TEM型占77.0%,SHV型占15.0%;大肠埃希菌中3种基因型比较均衡,其中CTX占100.0%,SHV型和TEM型均为83.0%;变形菌属中TEM型占100.0%,CTX型占40.0%,未检出SHV型;同时还有携带金属酶和碳青酶烯酶的细菌检出。结论医院多药耐药肠杆菌科细菌产ESBLs耐药基因主要以CTX和TEM为主。     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型和耐药性。方法收集产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床菌株30株,应用PCR基因扩增技术及DNA测序方法,分别对其TEM、SHV、CTX-M、VEB、PER编码基因进行分析。结果在30株菌株中有26株为CTX-M型,占86.67%;其中CTX-M-9型共计16株占61.5%,CTX-M-1型8株占30.8%,CTX-M-2型7株占26.9%;同时产CTX-M-1型及CTX-M-2型共4株占15.4%,产CTX-M-2型及CTX-M-9型1株占3.8%,产CTX-M-1型及CTX-M-9型1株占3.8%。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的主要临床流行基因型是CTX-M-9型。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性及基因分型 FREE

目的了解某院临床分离的产超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型。方法收集临床分离的肺炎克雷伯菌,采用美国临床实验室标准化委员会2005年推荐的方法进行ESBLs初筛及表型确证试验;K B纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验;聚合酶链反应（PCR）法分析产ESBLs菌株的基因类型。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的检出率为62.22%（56/90）。产ESBLs菌仅对第三代头孢菌素与β 内酰胺酶抑制剂合剂、碳青霉烯类抗生素较敏感。基因型分析结果显示,产ESBLs肺炎克雷伯菌中SHV型、CTX M 1型、TEM型、CTX M 9型的检出率分别为69.64%、51.79%、37.50%、0.00%,同时携带2种、3种耐药基因的菌株分别占35.71%和14.28%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药严重,基因型以SHV、CTX M 1为主     

产超广谱β-内酰胺酶表型及基因型分布

目的了解淮北地区3所医院,临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs表型和基因分布. 方法用1999年NCCLS推荐的初筛试验,从 147株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认,然后用PCR的方法扩增其基因型. 结果116株大肠埃希菌和31株肺炎克雷伯菌中,共检出69株产ESBLs(46.9%),其中大肠埃希菌51株(42.2%),肺炎克雷伯菌18株(58.1%);将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散确证法,头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,检出69株产ESBLs细菌,而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为32株;PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 119株、SHV型10株、CTX-M型68株、OXA型18株. 结论淮北地区ESBLs的检出率为46.9%,头孢噻肟检测ESBLs的敏感性明显高于头孢他啶;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带≥2种耐药基因.     

产ESBLs大肠埃希菌CTX—M型耐药基因分析

目的了解某院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希菌中的检出率，并确定其基因型。方法对该院2005年1—12月临床送检标本中分离的197株大肠埃希菌进行ESBLs表型确证试验和接合试验；采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX-M酶基因型，对PCR产物测序并确定其基因型。结果197株大肠埃希菌中有104株（52．79％）ESBLs表型检测阳性，其中91株符合供体菌标准，64株（70．33％）接合成功，接合子均确证产ESBLS。PCR扩增结果示104株产ESBLs大肠埃希菌中共有98株（94．23％）携带CTX-M型基因，其中38株（36．54％）检出blaCTX-M-1组基因，69株（66．35％）检出blaCTX-M-9组基因。64株接合子中共有51株（79．69％）携带CTX-M型基因，其中18株（28．13％）检出blaCTX-M-1组基因，35株（54．69％）检出blaCTX-M-9组基因。基因测序确定存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15、CTX-M-14、CTX-M-27五种基因亚型，以CTX-M-14为主。结论该院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重，产ESBLs细菌基因型以CTX-M-9组的CTX-M-14亚型为主，同时存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15和CTX-M-27等多种亚型。     

新生儿大肠埃希菌败血症的药敏分析及ESBLs基因分型

目的 探讨医院新生儿大肠埃希菌败血症的耐药性,并对产ESBLs大肠埃希菌进行基因分型.方法 采用MicroScanWalkaway 96SI全自动微生物分析仪对45株新生儿败血症分离的大肠埃希菌进行鉴定及药敏试验,PCR检测大肠埃希菌的ESBLs基因分型,并采用SPSS13.O进行统计分析.结果 45株大肠埃希菌对亚胺培南敏感性最高,为100.O％,产ESBLs检出率高达57.8％,产ESBLs的大肠埃希菌对氨曲南、头孢菌素类几乎全部耐药,对含酶抑制剂类药物、碳青霉烯类和头霉素类抗菌药物敏感率较高(73.1％～92.3％);对26株产ESBLs菌株进行基因分型,发现11株携带有TEM基因,12株CTX-M- 14基因型,两株CTX-M-1基因型,5株SHV基因型,同时部分菌株携带有≥2种β内酰胺酶基因.结论 医院新生儿败血症分离大肠埃希菌耐药性严重,以产ESBLs株为主,其主要基因型为CTX-M基因,但也存在TEM、SHV等多种基因型.     

肠杆菌科耐第三代头孢菌素临床株中ISCR1元件与ESBLs基因的关系

目的了解某地区肠杆菌科耐第三代头孢菌素临床株中携带新型可移动遗传元件插入序列共同区域(ISCR1)的情况及其与超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）基因的关系。方法以最低抑菌浓度（MIC）法检测细菌耐药表型;双纸片扩散法进行ESBLs确证试验;聚合酶链反应（PCR）、单链PCR构象的多态性（PCR SSCP）、DNA序列分析检测ISCR1基因和SHV、TEM、CTX M ESBLs基因;PCR mapping检测ISCR1与ESBLs基因的关系。结果83株肠杆菌科耐第三代头孢菌素临床株中,17株携带ISCR1元件。携带ISCR1元件的菌株中,2株大肠埃希菌（EA791、EA1367）、3株阴沟肠杆菌（EC1322、EC1342、EC553）及1株产酸克雷伯菌K386临床株ESBLs确证试验阳性,其中EA791、EC553及K386携带CTX M 1组ESBLs基因;EA1367同时携带CTX M 1组和CTX M 9组ESBLs基因;EC1322、EC1342携带SHV 12型 ESBLs基因;6株细菌均携带TEM型基因,经PCR SSCP分析显示均为TEM 1,但经PCR mapping显示其ISCR1元件下游未连接ESBLs基因。结论该地区耐第三代头孢菌素临床株中存在ISCR1元件,尚未发现菌株携带的ISCR1元件与ESBLs 基因的直接联系,此元件可能参与其他耐药基因的水平传播。     

Prevalence and diversity of blaTEM,blaSHV and blaCTX-M variants among multidrug resistant Klebsiella spp. from an urban riverine environment in India

In the present study, we have investigated prevalence and diversity of ESBL genes among Klebsiella isolates obtained from highly polluted stretch of river Yamuna, India. Phenotypic screenings of 116 Klebsiella isolates revealed ~30% were positive for ESBL production. Antibiotic profiling showed multidrug resistance phenotype among 90% isolates. Prevalence of blaTEM, blaSHV and blaCTX-M genes were found to be 57, 54 and 48% respectively. Furthermore, we identified eight variants of blaSHV (SHV-1, SHV-11, SHV-27, SHV-28, SHV-38, SHV-61, SHV-144, SHV-148), three each of blaTEM (TEM-1, TEM-116, TEM-206) and blaCTX-M (CTX-M-15, CTX-M-55, CTX-M-188) among Klebsiella spp. Co-occurrence of blaTEM, blaSHV and blaCTX-M (any two or all three) was observed among 45% Klebsiella isolates. Occurrence of blaCTX-M-188 and blaTEM-206 in environmental isolates of K. pneumoniae has not been reported earlier. Identification of blaTEM-206, blaSHV-27 and blaSHV-144 from Klebsiella spp. and blaTEM-116 from K. quasipneumoniae and K. variicola is the first report from India.     

乌鲁木齐地区135株志贺氏菌耐药性调查

目的了解乌鲁木齐地区临床分离肠道致病菌中志贺氏茵的流行趋势及耐药情况,分析产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的流行特征及耐药表型和基因型别,为临床合理使用抗生素提供依据。方法志贺氏菌选择培养基采用四区划线法分离培养出135株志贺氏茵,参照Kirby—Bauer纸片扩散法检测其对23种抗生素的耐药性：采用纸片确认试验对多重耐药菌株进行ESBLs表型确证检测;采用聚合酶链式反应（PCR）检测CTX—M、SHV、TEM等耐药基因,对PCR产物测序,通过与美国GenBank核酸库已登录的序列作比对确定基因亚型。结果135株志贺氏菌感染患者中,男性占53．3％（72／135）,女性占46．7％（63／135）;高发季节为6—8月;25岁以下发病人数占总发病人数的71．9％（97／135）;对氨苄西林、氯霉素和复方磺胺甲噫唑的耐药率较高,分别达91．1％、68．1％、70．4％。有43株（31．9％）ESBLs表型检测阳性。PCR扩增结果表明,共有19株携带CTX．M基因,其中CTX．M．1群6株,CTX．M-9群13株;4株携带SHV基因;6株携带TEM基因。基因测序确定各基因型存在多种亚型。结论福氏志贺氏茵为本地区优势志贺氏茵。对某些抗生素存在高度耐药性。应引起临床重视。ESBLs耐药菌株以CTX．M型为主,流行亚型为CTX．M．14、CTX—M．15和TEM-1。产CTX．M-24志贺茵在乌鲁木齐属首次报告检出。     

泌尿系感染产ESBLs株耐药基因分型及药敏试验

目的了解泌尿系感染产超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)菌株的主要基因型分布特点及其耐药性. 方法用表型确证试验确定临床尿液标本中,产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌54株,分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR),用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC),并对结果进行分析. 结果 PCR扩增结果显示:CTX-M、TEM和SHV的检出率分别为85.2%、37.0%和9.3%,42.6%的菌株同时携带≥2个基因;MIC测定结果显示:产ESBLs株对亚胺培南的敏感率为100%;对阿米卡星的敏感率高达98.1%;对哌拉西林/他唑巴坦和头孢西丁的敏感率也较高,分别为88.9%和70.4%;其对环丙沙星和氨苄西林/舒巴坦的敏感率则低,分别为25.9%和1.9%. 结论我院泌尿系感染产ESBLs株对亚胺培南的敏感性最高,接近半数菌株同时携带≥2个基因,产ESBLs菌株的主要基因型为CTX-M.     

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因分型及药敏试验结果分析

目的 了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法 用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌64株，用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)，分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR)，并对结果进行分析。结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高(100％)；其次为头孢吡肟(84．4％)，哌拉西林／他唑巴坦和环丙沙星的敏感率则分别为71．9％和70．3％。PCR扩增结果显示SHV、CTX-M和TEM基因的阳性率分别为81．3％、65．6％和18．8％；53．1％的菌株同时携带多个基因。结论 该院医院感染产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高；最常见的基因型是SHV，其次为CTX-M。     

腹腔和胆道分离产ESBLs大肠埃希菌的酶基因型及分子流行病学检测

目的了解腹腔和胆道分离的大肠埃希菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型及产酶菌株的流行情况。方法采用聚合酶链反应扩增TEM、SHV、CTX-M型ESBLs基因并测序,用ERIC-PCR方法进行分子流行病学研究。结果产ESBLs大肠埃细菌中,TEM-1+CTX-M-1组+CTX-M-8组、CTX-M-2组+CTX-M-9组各3株,CTX-M-8组+CTX-M-9组2株,TEM-1型为5株,TEM-1+CTX-M-1组、TEM-1+CTX-M-8组、TEM-1+CTX-M-9组、CTX-M-2组+CTX-M-9组、CTX-M-8组、SHV-5+TEM-1、SHV-1、TEM-1+CTX-M-2组+CTX-M-8组+CTX-M-9组各1株,4株细菌PCR检测为阴性,3株产CTX-M-2组+CTX-M-9菌株中,两株ERIC-PCR谱型相近。结论腹腔和胆道分离的大肠埃希菌中,ESBLs基因型以CTX-M型为主;少数产酶菌株间存在克隆传播现象。