金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药情况调查

目的调查金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)对万古霉素的耐药情况,并对敏感性降低菌株进行基因分型。方法对132株临床分离的金黄色葡萄球菌分别进行2μg/ml、4μg/ml万古霉素脑心浸液琼脂生长试验,4μg/ml生长试验阳性菌株用随机引物聚合酶链反应进行基因分型。并用菌群分析法筛查对万古霉素异质性耐药金黄色葡萄球菌。结果62株(47.0%)金黄色葡萄球菌能在含2μg/ml万古霉素的脑心浸液琼脂上生长,9株(6.8%)金黄色葡萄球菌能在含4μg/ml万古霉素的脑心浸液琼脂上生长,但其MIC皆≤2μg/ml。9株菌株都能产生独特稳定的AP-PCR谱型。有1株金黄色葡萄球菌对万古霉素异质性耐药。结论未发现对万古霉素完全耐药或中介耐药的金黄色葡萄球菌,异质性耐药金黄色葡萄球菌分离率为0.75%;在本地区尚无对万古霉素敏感性降低的同源株的流行趋势。     

鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药性分析

目的对多重耐药的鲍曼不动杆菌进行β-内酰胺类抗生素耐药性分析。方法K-B法、琼脂稀释法检测35株鲍曼不动杆菌对14种β-内酰胺类抗生素的敏感性;碘—淀粉测定法、三维试验、协同法、纸片扩散确证试验检测青霉素酶、头孢菌素酶(AmpCs)、金属β-内酰胺酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);PCR扩增β-内酰胺类抗生素耐药基因Tem-1。结果35株菌株有28株表现为对β-内酰胺类抗生素多重耐药,其中产青霉素酶的菌株16株,产AmpCs的菌株10株,产金属β-内酰胺酶的菌株2株,产ESBLs的菌株3株;9株同时产青霉素酶和AmpCs,2株同时产金属β-内酰胺酶和ESBLs。多数耐药菌株均扩增出Tem-1基因。结论鲍曼不动杆菌产生β-内酰胺酶是其对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因。     

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌药敏和耐药基因检测

为了解鄂尔多斯市及周边地区耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)生物学特征 ,我们对 55株MRCNS菌做了药敏和β内酰胺类药物耐药基因TEM、mecA ;糖肽类药物耐药基因vanA、vanB、vanC检测 ,报道如下。一、材料和方法1.菌株来源 :55株MRCNS菌均来自我院感染者的多种标本。其中伤口分泌物分离到 2 1株 ,尿液 12株 ,血液 1株 ,痰液 10株 ,前列腺液 9株 ,脑脊液 2株。2 .试剂 :血琼脂培养基购自天津金章公司 ,mueller hinton(MH)琼脂采用英国OXOID公司产品。苯唑西林及其他药敏纸片购自北京天坛药品鉴定所 ,血浆凝固酶试剂(兔血浆 …     

两种方法对流感嗜血杆菌的体外抗菌活性比较

为了解流感嗜血杆菌(Ｈｉ)对临床常用抗生素的耐药状况,我们对近两年临床分离的Ｈｉ耐药情况进行了统计分析,并对部分菌株进行了最低抑菌浓度(ＭＩＣ)测定,结果如下。一、材料和方法1试验菌株:1996～1998年临床分离Ｈｉ共252株(β内酰胺酶阳性23株占9.1%)。2试剂:分离培养基(含50μｇｍｌ万古霉素的巧克力琼脂)由本实验室自制,ＨＴＭ琼脂、Ｘ.Ｖ因子及15种抗生素纸片购自法国生物梅里埃公司,抗生素标准品购自卫生部药品生物制品检定所,标准菌株(金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ25923、ＡＴＣＣ29213,流感嗜血杆菌ＡＴＣＣ49247)本实验室菌库保存。3…     

我国28家医院中铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及同源性分析

目的 调查中国16个城市28家医院铜绿假单胞菌碳青霉烯类抗牛素耐药情况、产金属酶情况及同源性.方法 收集中国16个城市28家医院2006年7月到2007年7月临床分离的我国医院内病原菌耐药监测(NPRS)所保留的铜绿假单胞菌菌株654株.采用琼脂稀释法测定亚胺培南、美罗培南的MIC,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析碳青霉烯类耐药菌株同源性;Etest法进行金属酶表型筛选;PCR扩增及克隆测序分析金属酶基因型,实时荧光定量逆转录PCR(real time RT-PCR)检测金属酶的转录水平.结果 共筛选出275株碳青霉烯类抗生素不敏感株,其中259株为耐药株,亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为37.5%(245/654)和28.0%(183/654).275株碳青霉烯类抗生素不敏感菌株中金属酶表型阳性率6.55%(18/275),金属酶基因型阳性率8.73%(24/275).6株金属酶基因型阳性而表型阴性菌株的金属酶相对表达量显著低于18株金属酶表型阳性菌株(Z=-2.335,P＜0.05).259株碳青霉烯类抗生素耐药菌株PFGE分属89个型,24株金属酶基因型阳性菌株来自6个城市,分为9个PFGE克隆型.结论 我国铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药率高;未发现铜绿假单胞菌大范围单克隆株流行.产金属酶不是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制.     

2001～2003年上海地区淋病奈瑟菌对抗生素的敏感性测定及质粒分析

目的了解上海地区2001～2003年淋病奈瑟菌(NG)对抗生素的敏感性情况及变化趋势。方法采用琼脂稀释法测定青霉素、头孢曲松、大观霉素、环丙沙星、四环素对742株NG的最小抑菌浓度(MIC)。用纸片酸度法检测β内酰胺酶菌株。用碱裂解方法抽提质粒。结果742株NG检出产青霉素酶菌(PPNG)342株(46.09%);质粒介导高度耐四环素(TRNG)166株(22.37%);耐环丙沙星718株(96.77%);耐大观霉素1株;未发现对头孢曲松耐药菌株;超过20%的菌株同时对青霉素、四环素和环丙沙星耐药;对35株菌株作了质粒分型,含耐药质粒检出率97%,分别带有5.4和7.4kb耐药性质粒。结论淋球菌对青霉素、四环素和环丙沙星3种药物分别有较高比例的耐药率。上海地区治疗淋病应首选大观霉素和头孢曲松。     

耐万古霉素肠球菌两种筛选方法的比较及耐药性分析

目的提高耐万古霉素肠球菌的检出率,为临床选药治疗提供依据。方法将粪便直接接种在含万古霉素琼脂平板(VAP)和含万古霉素肉汤(VB)培养基中,分离菌株用Vitek-AMS仪器鉴定,根据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)指南做药敏试验。结果VAP培养基筛选出耐万古霉素肠球菌38株(13.1%),VB培养基筛选出49株(16.9%)。从住院病人粪便中分离出31株,其中22株VRE为屎肠球菌,9株VIE为鹑鸡肠球菌;从正常成人粪便分离出25株VIE,其中17为株鹑鸡肠球菌,8株为铅黄肠球菌;22株VRE对万古霉素的MIC>512μg/ml,36株VIE对万古霉素的MIC值为8~16μg/ml。56株(VRE VIE)对环丙沙星、红霉素耐药率均为75.0%,氨苄西林为80.4%,左氧氟沙星为71.4%,高水平庆大霉素为69.6%,呋喃妥因为57.1%,高水平链霉素为41.1%,氯霉素耐药率较低为3.6%。结论VB培养基对耐万古霉素肠球菌的检出率高于VAP培养基。耐万古霉素肠球菌对多种抗菌药物耐药。     

女性患者淋球菌对抗生素的多重耐药性分析

目的了解本地区女性淋球菌感染患者对抗生素的多重耐药状况,为临床合理用药提供实验依据。方法应用K-B琼脂扩散法分析女性感染淋球菌对不同类别抗生素的敏感性,筛选出多重耐药菌株;用琼脂稀释法测定青霉素、四环素、环丙沙星对淋球菌的最小抑菌浓度(MIC);碘量法检测产青霉素酶淋球菌(PPNG)。结果112例女性患者标本经分离、培养、鉴定的淋球菌为86株。从86株淋球菌中筛选出58株(67.44%)多重耐药株。青霉素耐药率为51.16%(44/86),四环素耐药率61.25%(49/80),其中质粒介导的PPNG和高度耐四环素(TRNG)菌株的阳性率分别为18.60%(16/86)和12.50%(10/80);环丙沙星耐药率92.94%(79/85)。结论本地区女性感染淋球菌出现的多重耐药状况较为严重,有必要持续监测淋球菌的耐药性。     

我国607株不同宿主来源弯曲菌耐药基因簇aadE-sat4-aphA-3分布分析

目的 了解不同宿主来源弯曲菌对氨基糖苷类抗生素的耐药现状,确定耐药菌株中氨基糖苷类耐药基因簇aadE-sat4-aphA-3的分布,并初步了解耐药菌株的菌型特征。方法 利用琼脂稀释法分析不同宿主来源菌株针对链霉素最小抑菌浓度(MIC),对耐药的221株菌通过聚合酶链反应筛查氨基糖苷类耐药基因簇aadE-sat4-aphA-3的分布情况。选取不同来源共100株耐药菌株进行多位点序列分型分析并进行聚类分析,获得耐药菌株的菌型特征及遗传相关性。结果 607株弯曲菌中共筛查到221株(36.41%)链霉素耐药株(MIC4 g/ml),其中腹泻患者来源菌株耐药率33.33%(78/234)、鸡来源菌株耐药率35.14%(123/350)、猪来源菌株耐药率86.96%(20/23)。空肠弯曲菌耐药率14.37%(51/355),结肠弯曲菌耐药率67.46%(170/252)。24株(10.86%)链霉素耐药弯曲菌中筛查到aadE-sat4-aphA-3耐药基因簇,分别来自腹泻患者14株、鸡4株、猪6株。100株耐药菌株共分为58种ST序列型。结论 结肠弯曲菌链霉素耐药率明显高于空肠弯曲菌,猪源弯曲菌耐药率显著高于人源和鸡源,空肠弯曲菌与结肠弯曲菌中均筛查到aadE-sat4-aphA-3耐药基因簇。     

惠州地区淋球菌对抗菌药物的耐药性分析

目的了解惠州地区淋球菌对于6种抗菌药物的耐药性以及产β-内酰胺酶的淋球菌(PPNG)和质粒介导的高度耐四环素的淋球菌(TRNG)的流行情况。方法用琼脂稀释法测定青霉素、四环素、阿奇霉素、环丙沙星、头孢曲松钠及壮观霉素的最低抑菌浓度;用纸片碘法检测β-内酰胺酶。结果 137株淋球菌检出PPNG 51株(37.2%)、TRNG 82株(59.9%)、环丙沙星耐药菌株137株(100.0%)、阿奇霉素耐药菌株41株(29.9%),未发现头孢曲松钠、壮观霉素的耐药菌株。结论推荐壮观霉素和头孢曲松钠作为惠州地区治疗淋病的首选药物,同时定期监测淋球菌的耐药性。     

中国大陆地区肠杆菌科细菌aac(6')-Ib-cr基因检出率与常见药物不同耐药水平关系的研究

目的 研究中国大陆地区质粒介导的耐药基因aac(6')-Ib-cr在肠杆菌科细菌环丙沙星和阿米卡星敏感株与耐药株中及在ESBL阳性株和阴性株中的分布状况和比较分析.方法 从2006年全国美平耐药监测网点中收集241株非重复的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,用琼脂对倍稀释法测定所有菌株对环丙沙星等药物的MIC值.采用PCR检测所有菌株的aac(6')-Ib基因;并以内切酶BtsCI酶切消化aac(6')-Ib的PCR阳性产物和/或DNA测序以确定aac(6')-Ib-cr.结果 在241株筛选出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,环丙沙星的耐药率为61.4%(148/241);阿米卡星的耐药率为10.0%(24/241);ESBL阳性株占56.8%(137/241).aac(6')-Ib-cr的总阳性率为12.4%(30/241).经χ2检验,aac(6')-Ib-cr基因在环丙沙星敏感菌株与耐药菌株中的检出率差异具有统计学意义(0.0%和20.3%,χ2=20.655,P<0.05);在阿米卡星敏感菌株与耐药菌株中的检出率差异无统计学意义(12.0%和16.7%,χ2=0.112,P>0.05);在ESBL阳性株与ESBL阴性株中的检出率差异无统计学意义(16.1%和7.7%,χ2=3.797,P>0.05).结论 质粒介导喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的分布广泛,而且该基因在环丙沙星敏感菌株与耐药菌株的检出率差异具有统计学意义,而在阿米卡星敏感菌株与耐药菌株中的检出率差异无统计学意义,在ESBL阳性株与阴性株中的检出率亦无统计学意义.     

2001～2003年上海地区淋病奈瑟菌对抗生素的敏感性测定及质粒分析

目的 了解上海地区2001～2003年淋病奈瑟菌(NG)对抗生素的敏感性情况及变化趋势。方法 采用琼脂稀释法测定青霉素、头孢曲松、大观霉素、环丙沙星、四环素对742株NG的最小抑菌浓度(MIC)。用纸片酸度法检测β-内酰胺酶菌株。用碱裂解方法抽提质粒。结果 742株NG检出产青霉素酶菌(PPNG)342株(46．09％);质粒介导高度耐四环素(TRNG)166株(22．37％);耐环丙沙星718株(96．77％);耐大观霉素1株;未发现对头孢曲松耐药菌株;超过20％的菌株同时对青霉素、四环素和环丙沙星耐药;对35株菌株作了质粒分型,含耐药质粒检出率97％,分别带有5．4和7．4kb耐药性质粒。结论 淋球菌对青霉素、四环素和环丙沙星3种药物分别有较高比例的耐药率。上海地区治疗淋病应首选大观霉素和头孢曲松。     

淋球菌临床分离株药敏分析

目的明确本院淋球菌的耐药情况及产青霉素酶的淋球菌(PPNG)和质粒介导的耐四环素淋球菌(TRNG)流行现状,为临床防治方案的制定提供依据。方法运用VITEK2 Compact全自动微生物鉴定仪对2014年1月至2015年12月本院临床分离菌株进行菌种鉴定,采用琼脂微稀释法测定青霉素、四环素、环丙沙星、头孢曲松和大观霉素5种抗菌药物对淋球菌进行药敏实验,用纸片酸度定量法测定淋球菌株的β-内酰胺酶。结果 183株受试淋球菌中检出PPNG 57株(31.1%),质粒介导的TRNG 59株(32.2%);青霉素、四环素、环丙沙星耐药率分别为91.8%、75.4%和97.3%;未检出头孢曲松耐药菌株,低敏菌株检出率为11.5%;未检出大观霉素耐药及低敏菌株;青霉素、四环素和环丙沙星50%最低抑菌浓度(MIC50)及90%最低抑菌浓度(MIC90)值均已超过耐药标准;淋球菌多重耐药菌株检出率为91.8%(168/183)。结论佛山地区淋球菌临床分离株对青霉素和环丙沙星呈现高耐药率,多重耐药现状严峻。     

医院内感染碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药基因及同源性分析

目的分析引起院内感染的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)耐药基因及同源性。方法收集CRAB 40株,采用琼脂稀释法检测最低抑菌浓度(MIC);PCR检测主要的碳青霉烯酶基因,PCR产物进行DNA测序分析;肠杆菌科基因间重复一致性序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)对耐药菌株进行基因分型及同源性分析,质粒接合试验探讨耐药基因的可传递性。结果40株CRAB仅对多黏菌素B(100%)和头孢哌酮/舒巴坦保持良好的敏感性(57.5%),对其他药物均产生不同程度耐药;全部菌株均检测出OXA-23和OXA-51基因;同源性分析显示,按80%的聚类相似系数可将40株菌株分为4个型,A1型为主要流行株(19株),且各科室存在交叉感染;质粒接合试验未获成功。结论该院存在CRAB的流行传播,其耐药机制主要与OXA-23基因的表达有关;在合理使用抗菌药物的同时,应做好隔离及防护措施,尽量避免医院内交叉感染。     

肠杆菌科细菌对阿米卡星双圈耐药机制探讨

摘要：目的：探讨肠杆菌科细菌K-B法检测结果对阿米卡星（AMK）呈双圈耐药的相关机制。 方法：收集K-B法对AMK呈双圈耐药的临床分离大肠埃希菌（E.coli）5株和肺炎克雷伯菌（Kpn）2株作为实验菌株,同期分离对AMK完全耐药的E.coli和Kpn各2株作为对照菌株;分别采用Vitek 2 Compact药敏卡和琼脂稀释法复核菌株对AMK的药物敏感性;用PCR及DNA测序检测氨基糖苷类修饰酶基因、整合子及16S rRNA甲基化酶相关基因;用基因外重复回文序列（REP）-PCR法分析菌株的同源性。 结果：Vitek 2 Compact药敏卡结果显示,7株实验菌中3株对AMK为敏感,4株为中介;对照菌株均对AMK耐药。琼脂稀释法结果显示所测菌株均对AMK耐药,MIC均>512 mg/L。所测菌株携带不同的氨基糖苷类修饰酶基因,主要为aac(6)-Ⅰ基因;整合子可变区携带基因盒为aadA5-dfrA17的菌株8株,为aadA2-dfrA12的菌株3株。双圈耐药表型菌株均扩增出armA基因,而对照菌株未扩增出该基因。REP-PCR结果显示双圈耐药菌株同源性较高,与同期分离的对照菌株差异较大。 结论：AMK双圈耐药表型的出现与16S rRNA甲基化酶armA基因的表达相关;Vitek 2 Compact药敏系统对K-B法中对AMK呈双圈耐药的肠杆菌科细菌药敏结果可能发生偏差。     

聊城地区淋球菌流行株耐药性研究及质粒谱型分析

目的 了解聊城地区淋球菌流行株对常用抗生素的耐药性,分析当地淋球菌耐药质粒谱特点.方法 采用琼脂稀释法检测淋球菌对四环素、环丙沙星、头孢曲松、大观霉素的最小抑菌浓度(MIC);纸片碘量法测定菌株的β-内酰胺酶;用小量碱裂解法,对淋球菌进行质粒抽提,对提取质粒进行琼脂糖凝胶电泳分析;探讨耐药谱与质粒谱之间的关系及与其他地区间的差异.结果 52株淋球菌检测出产青霉素酶淋球菌(PPNG)菌株17株(32.69%),高度耐四环素(TRNG)菌株15株(28.85%),环丙沙星耐药51株(98.08%),大观霉素耐药1株(1.92%)、头孢曲松未发现耐药菌株;质粒检出率86.54%(45/52),共检测到4种分子量质粒,6种质粒谱型,以2.6+4.5,2.6+4.5+25.2和4.5+25.2+24.5为主,分别占30.77%,25.00%和15.38%.结论 聊城地区淋球菌耐药情况与国内其他地区比较基本相类似,大观霉素和头孢曲松仍为临床首选;聊城地区淋球菌耐药与多数地区耐药质粒谱有差异,聊城地区淋球菌流行株耐药主要以高水平的质粒耐药为主.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的选择性培基

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)很易在医院和病人中传播,传统的检测方法是用非选择性培养基分离,挑取少数菌落进行检查,这样易漏检只有少量的MRSA 或混有对甲氧西林敏感菌株的标本。作者等用甲氧苯青霉素—甘露醇琼脂(OM-SA)选择鉴别培养基,其组成为酚红肉汤基础(16g),NaCl(60g),甘露醇(10g),琼脂(15g),甲氧苯青霉素(6mg),和多粘菌素B(10mg)。经对936份呼吸道标本进行检查,结果显示105株发酵甘露醇。经鉴定103株葡萄球菌中,29株为金黄色葡萄球菌。在此选择培养基上17株(59%)MR-SA 可在24小时内检出,28株(97%)在48小时内检出。凝固酶阴性葡萄球菌则需较长时间培养。作     

多重耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物耐药机制分析

目的了解本院多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)分子流行病学特征和氨基糖苷类耐药机制,为临床合理用药及控制院内感染提供依据。方法用纸片扩散法和琼脂稀释法检测泛耐药株对抗菌药物的敏感性,特异性PCR检测氨基糖苷类耐药基因、intI 1、intI 2基因及可变区。基因外重复回文序列(REP)-PCR分析菌株同源性。结果 67株MDRAB对多种抗菌药物广泛耐药,对阿米卡星100%耐药。PCR检测结果显示64株分离菌株携带Ⅰ类整合酶基因,其中61株可变区扩增阳性,分别为携带aacA4-catB-aadA1(2 300 bp)基因盒44株和携带aacC1-orfX-orfX-orfX’-aadA1基因盒(3 000 bp)17株;59株携带armA甲基化酶基因。REP-PCR分析显示耐药菌株属于6个克隆型,主要为A1～A3和B2型。结论甲基化酶介导本院鲍曼不动杆菌临床分离株对氨基糖苷类药物耐药。本院存在以A型和B型克隆株为主的感染流行,必须加强院内感染防控,切断克隆菌株的传播。     

南疆地区结核分枝杆菌复合群耐药性及同源性分析

目的了解新疆南疆地区的结核分枝杆菌复合群耐药情况及各菌株间的同源性。方法用改良罗氏培养基培养分离菌株及初步鉴定菌种;用比例法对分离菌株进行药物敏感实验;随机抽取50株耐药结核分枝杆菌复合群菌株,用DiversiLab系统进行分型及同源性分析。结果共分离出371株分枝杆菌,结核分枝杆菌314株,牛型结核分枝杆菌55株,非结核分枝杆菌2株。371株中119株(32.1%)有耐药性。根据DiversiLab系统同源性的判断,以相似性95%为分割点,50株耐药结核分枝杆菌复合群分成27个群。其中,初治患者耐药菌同源率为41.2%(7/17),复治患者耐药菌同源率为18.8%(3/16);喀什市的耐药菌同源率为33.3%(5/15),莎车县的耐药菌同源率为41.2%(7/17)。结论南疆地区结核分枝杆菌获得性耐药仍处于较高水平,不同患者群分离的耐药菌均有一定的同源性。     

克林霉素诱导型耐药葡萄球菌的检测与分析

目的了解本地区葡萄球菌诱导型克林霉素的耐药率。方法用K-B琼脂扩散法检测葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,用D-试验检测克林霉素诱导型耐药。结果61株耐红霉素的金黄色葡萄球菌对克林霉素耐药40株,敏感21株,其中克林霉素诱导型耐药8株;106株耐红霉素的凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)对克林霉素耐药62株,敏感44株,其中克林霉素诱导型耐药27株。结论对克林霉素敏感的菌株,应加做D-试验以免造成错误判断导致临床治疗失败。