芪蛭胶囊对缺血性中风大鼠豆蔻酰化蛋白激酶C表达的影响

目的观察芪蛭胶囊对缺血性中风大鼠PKC-MARCKS信号通路豆蔻酰化蛋白激酶C(MARCKS)表达的影响,探讨其相关作用机制。方法采用线栓法制作SD大鼠大脑中动脉闭塞脑缺血再灌注模型,缺血2 h后行再灌注。实验大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组和阳性药组,各给药组给予相应药物干预,连续8 d,第8日给药1 h后造模,除假手术组外,其余3组分为4个亚组,即再灌注后6、24、72 h和7 d组。应用ZeaLonga5分制评分标准对大鼠进行神经功能缺损评分,之后取大鼠脑组织缺血部分,HE染色观察细胞形态,Western blot检测MARCKS及p-MARCKS蛋白的表达,RT-PCR检测MARCKS mRNA的表达。结果模型组大鼠神经功能较假手术组损伤明显(P0.05),中药组和阳性药组大鼠脑组织再灌注后72h神经功能评分较模型组明显降低(P0.05);HE染色结果显示,假手术组大鼠脑组织神经细胞无明显变化,模型组大鼠脑组织神经细胞受损严重,中药组和阳性药组大鼠脑组织神经细胞损伤程度较模型组轻;Westernblot和RT-PCR检测结果显示,模型组较假手术组大鼠脑组织MARCKS蛋白和m RNA及p-MARCKS蛋白均呈高表达(P0.05),阳性药组和中药组大鼠脑组织MARCKS蛋白、m RNA及p-MARCKS蛋白表达明显下调(P0.05)。结论芪蛭胶囊可下调模型大鼠脑组织MARCKS蛋白及m RNA的高表达,进而缓解脑缺血再灌注损伤。     

芪蛭胶囊对缺血性中风大鼠脑组织超微结构的影响

目的:观察缺血性中风大鼠脑组织缺血再灌注后不同时间点缺血区脑组织的超微结构变化,研究芪蛭胶囊对缺血性中风模型大鼠脑组织的超微结构的影响,并探讨其可能的作用机制,为临床上芪蛭胶囊治疗缺血性中风提供实验依据。方法:采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉(MCAO),制备缺血性中风模型,缺血2 h后再灌注。通过透射电镜观察芪蛭胶囊对缺血性中风大鼠脑缺血再灌注后不同时间点的脑组织病理学超微结构改变。结果:芪蛭胶囊能有效改善缺血性中风大鼠脑组织的病理形态学变化。结论:芪蛭胶囊对缺血性中风大鼠所致的局灶性脑缺血具有保护作用。     

金蛭方对缺血性中风大鼠caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:通过观察金蛭方对缺血性中风大鼠缺血侧大脑皮质区细胞调亡相关因子Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白含量的影响,探讨金蛭方治疗缺血性中风的作用机制。方法:采用线栓法复制缺血性中风大鼠模型,随机分为假手术组、模型对照组、金蛭方高剂量组、金蛭方低剂量组、阳性药尼莫地平片对照组。应用western-blot技术检测caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白含量变化。结果:模型组大鼠缺血侧皮质区Bcl-2蛋白表达较假手术组明显降低(P0.01);caspase-3、Bax蛋白表达较假手术组明显升高(P0.01)。用药后各治疗组大鼠缺血侧皮质区Bcl-2蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01);caspase-3、Bax蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01)。高、低剂量组在增强Bcl-2蛋白表达和降低caspase-3、Bax蛋白表达方面的作用优于对照组。结论:金蛭方通过调节缺血性中风大鼠caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达达到拮抗缺血性中风作用。     

清脑滴丸对急性脑缺血海马MARCKS mRNA 表达变化的调节作用

目的：观察清脑滴丸对急性脑缺血海马MARCKS mRNA表达变化的影响，探讨其对急性脑缺血损害(PKC-MARCKS)的调节作用。方法：采用同种系体外微栓子注入法复制急性多发脑梗死大鼠模型，将大鼠随机分为5组，正常组、假手术组、模型组、中药组、西药组，每组12只。正常组、假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃，中药组和西药组分别给予清脑滴丸133.28 mg·kg-1，尼莫地平7.25 mg·kg-1。各组于造模前3 d开始灌胃给药，每日1次。应用光学显微镜(HE染色)和透射电子显微镜观察急性脑缺血大鼠脑组织形态学改变，应用半定量PCR法检测各组患侧海马MARCKS mRNA表达水平。结果：正常组海马神经细胞紧密整齐，模型组、中药组和西药组神经细胞分别有不同程度受损，但中药组损伤程度相对较轻；模型组、中药组和西药组海马MARCKS mRNA均过高表达，但中药组明显低于模型组(P＜0.01)。结论：清脑滴丸可以减轻急性脑缺血时海马组织损伤，下调MARCKS mRNA的过高表达，其机制可能是通过调节PKC-MARCKS信号转导系统而起到神经保护作用。     

芎芪合剂对大鼠脑缺血再灌注后病理形态及免疫炎症损伤的影响

目的:探讨芎芪合剂对局灶性脑缺血—再灌注损伤的保护作用及机制。方法:30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、芎芪合剂组,除假手术组外建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,对各组大鼠脑组织进行HE染色,并测定脑组织中细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达的情况。结果:HE染色显示芎芪合剂组缺血侧脑组织白细胞黏附及浸润的程度较模型组明显减轻。大鼠脑组织中细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达的情况,模型组明显高于假手术组,芎芪合剂组明显低于模型组。结论:芎芪合剂能减轻大鼠脑缺血再灌注引起的白细胞黏附及浸润的程度,抑制ICAM-1蛋白表达的增高,提示芎芪合剂能够通过减轻免疫炎症损伤的程度达到抗脑缺血—再灌注损伤的作用,从而对缺血—再灌注脑组织产生一定的保护作用。     

苦碟子注射液对缺血性脑卒中火毒证大鼠作用的差异蛋白质研究

探讨中药苦碟子注射液对缺血性脑卒中火毒证大鼠脑组织蛋白质表达的调控作用。采用角叉菜胶复合大脑中动脉阻塞（MCAO）方法制备缺血性脑卒中火毒证大鼠模型,按随机数字表法将SD大鼠分为药物组、模型组和假手术组。采用TTC染色法和HE染色法对脑组织进行大体观察和病理形态学观察;利用双向凝胶电泳技术寻找缺血性脑卒中火毒证大鼠和假手术大鼠之间与疾病相关的差异表达蛋白,并观察应用苦碟子注射液连续干预72 h后,对差异蛋白表达水平的影响。结果显示,缺血性脑卒中火毒证大鼠与假手术大鼠间有差异表达蛋白,连续给予具有清热解毒通络作用的苦碟子注射液能够减轻脑组织缺血形态学改变,调节部分差异蛋白表达水平。     

芪蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬相关因子LC3、p62表达水平的影响

目的 通过研究益气活血通络中药芪蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬相关因子LC3、p62表达的影响，阐明该方拮抗脑缺血再灌注损伤的可能分子机制。方法 将大鼠随机分为sham组、I/R组、3-MA组、中药组。中药及3-MA抑制剂干预后，复制MCAO/R模型，再灌注24 h后进行神经功能评分；TTC染色评定脑梗死体积；免疫荧光、Western-Blot及电镜检测自噬发生水平、自噬相关蛋白表达水平、细胞损伤程度。结果 与I/R组相比，中药组大鼠神经功能损伤显著减轻，脑梗死体积显著缩小，LC3BⅡ/Ⅰ比值明显升高，p62蛋白表达量显著降低，中药组细胞形态及细胞器保留较完整，有较多自噬小体及自噬溶酶体出现。结论 芪蛭胶囊可有效缓解脑梗死及神经功能损伤，提高LC3,降低p62的表达，进一步激活细胞自噬，从而有效拮抗CIRI,保护神经元。     

僵蚕天南星方对急性缺血性脑水肿大鼠水通道蛋白4表达的影响

目的:探讨僵蚕天南星方对急性缺血性脑水肿大鼠水通道蛋白4(AQP4)表达的影响及其作用机制。方法:将大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、僵蚕天南星方组,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,观察缺血2 h再灌注24 h、48 h、72 h、96 h 4个不同时间点,采用Zausinger评分法观察大鼠神经功能改变,干湿重法测定脑组织含水量,HE染色观察脑组织病理学变化,免疫组织化学法观察大鼠大脑皮层AQP4的表达情况。结果:与模型组比较,僵蚕天南星方组神经功能评分较高(P0.01),脑组织缺血性病理学损伤均明显改善,脑含水量降低(P0.01),AQP4蛋白表达量减少(P0.05)。结论:僵蚕天南星方能够改善脑缺血-再灌注损伤大鼠的神经功能缺损,可减轻脑缺血损伤引起的脑水肿,其机制可能与降低AQP4蛋白的表达有关。     

中风芪红利水胶囊对脑缺血大鼠脑组织的影响

目的 评价中风芪红利水胶囊对急性脑缺血大鼠脑组织中兴奋性氨基酸及水含量的影响.方法 采用左侧大脑中动脉阻塞模型,72只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,对照组(步长脑心通胶囊组),中风芪红利水胶囊高、中、低剂量组.造模成功12 h后处死.采用高效液相色谱法测量脑组织中的谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)含量.通过脑组织干重与湿重之比,算出含水量.结果 芪红利水胶囊各剂量组脑组织中Glu含量较缺血组显著降低(P<0.05);芪红利水胶囊高、中、低剂量治疗组脑组织中天门冬氨酸含量较缺血模型组下降显著(P=0.000,P=0.031,P=0.05),芪红利水胶囊各剂量组脑组织含水量较缺血模型组下降显著(P<0.01).结论 中风芪红利水胶囊具有抗大鼠急性脑缺血损伤的作用.其作用机制与降低脑组织中谷氨基酸、天门冬氨酸及脑组织含水量有关.     

金蛭方对缺血性中风大鼠血清及脑组织IL-1β、TNF-α的影响

目的:通过观察金蛭方对缺血性中风大鼠白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨其治疗缺血性中风的作用机制。方法:采用线栓法复制缺血性中风大鼠模型,随机分为假手术组、模型对照组、金蛭方高剂量组、金蛭方低剂量组、阳性药尼莫地平片对照组。测定大鼠血清和脑组织IL-1β、TNF-α的含量。结果:与假手术组比较,缺血性中风大鼠血清及脑组织IL-1β、TNF-α的含量均显著降低(P0.01)。与模型组比较,各治疗组均能降低IL-1β、TNF-α的含量(P0.01)。结论:金蛭方通过调节缺血性中风大鼠IL-1β、TNF-α的分泌和释放以达到拮抗缺血性中风作用。     

骨边刺电针干预对骨癌痛吗啡耐受大鼠蓝斑核的影响

目的:观察骨边刺电针对骨癌痛吗啡耐受大鼠蓝斑核G蛋白耦联受体激酶5(GRK5)、β-抑制蛋白2(β-arrestin2)、蛋白激酶Cα(PKCα)及其磷酸化(p-PKCα)表达的影响,部分揭示骨边刺电针干预骨癌痛吗啡耐受的中枢机制。方法:SD大鼠随机分为假骨癌痛组、骨癌痛组、吗啡耐受组、骨边刺电针组和假电针组,每组8只。采用胫骨骨髓腔内注射3μL MRMT-1大鼠乳腺癌细胞建立骨癌痛模型,在此基础上通过腹腔多次注射盐酸吗啡注射液(10 mg/kg)建立骨癌痛吗啡耐受模型。骨边刺电针组于成功建立骨癌痛吗啡耐受模型后,开始介入骨边刺电针干预,每日1次,持续7 d。动态观察各组大鼠患侧足跖机械痛阈。采用免疫印迹法观察各组大鼠患侧蓝斑核GRK5、β-arrestin2、PKCα、p-PKCα蛋白表达。结果:与假骨癌痛组比较,癌细胞接种后10 d骨癌痛组大鼠患侧足跖机械痛阈显著降低(P<0.01);吗啡注射后,与骨癌痛组比较,吗啡耐受组、骨边刺电针组和假电针组大鼠患侧足跖机械痛阈显著升高(P<0.01),而吗啡注射11 d后,吗啡耐受组机械痛阈显著降低,与骨癌痛组比较差异无统计学意义(P>0.05),出现耐受现象;与吗啡耐受组、假电针组比较,骨边刺电针组干预后机械痛阈明显升高(P<0.01)。与假骨癌痛组比较,吗啡耐受组大鼠蓝斑核GRK5蛋白表达显著降低(P<0.01);与吗啡耐受组和假电针组比较,骨边刺电针组蓝斑核GRK5蛋白表达显著升高(P<0.01)。与假骨癌痛组比较,骨癌痛组大鼠蓝斑核β-arrestin2、p-PKCα蛋白表达显著增多(P<0.01);与吗啡耐受组和假电针组比较,骨边刺电针组蓝斑核β-arrestin2、p-PKCα蛋白表达显著降低(P<0.01)。与吗啡耐受组和假电针组比较,骨边刺电针组蓝斑核PKCα蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:骨边刺电针可有效干预骨癌痛吗啡耐受现象,其机制可能与增加蓝斑核GRK5,抑制β-arrestin2、PKCα及其磷酸化水平有关。     

头针对脑缺血再灌注大鼠脑微血管Ⅳ型胶原蛋白影响的动态研究

目的:观察头针对脑缺血再灌注大鼠脑微血管Ⅳ型胶原蛋白的动态影响,以探讨头针抗脑缺血再灌注损伤的可能作用机制.方法:SD大鼠130只,随机分为假手术组、模型组和针刺组.采用改良的Zea Longa线栓法复制脑缺血再灌注模型,应用免疫组化和ELISA测定,比较各组在不同时点脑微血管基底膜Ⅳ型胶原蛋白阳性表达与含量的变化.结果:头针组大鼠再灌注4h、12 h,梗死灶周围区的Ⅳ型胶原阳性表达及含量均与模型组相似(P＞0.05);再灌注24 h、48 h、72 h较模型组有所增加(P＜0.05),但仍低于假手术组(P＜0.05).结论:早期头针治疗能上调缺血侧脑组织中Ⅳ型胶原蛋白的表达,并随着针刺治疗时间的延长,其效果明显提高.通过上调Ⅳ型胶原蛋白的表达,有助于保护血脑屏障,可能是头针拮抗脑缺血再灌注损伤的作用途径之一.     

参芎化瘀胶囊预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察参芎化瘀胶囊预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨参芎化瘀胶囊对大鼠急性脑缺血再灌注损伤保护作用的机制.方法:实验大鼠随机分为:假手术组、缺血再灌注组、参芎化瘀胶囊高、中、低剂量预处理组(480,240,120 mg·kg-1).各组又分为缺血2h再灌注后3,6,12,24,48,72 h组,每组6只.ig给药7d,每天1次,第7天ig2 h后线栓法制作大脑中动脉阻断(MCAO)再灌注模型.免疫组化法检测VEGF的表达,同时评价大鼠的神经功能缺失程度.结果:与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠出现严重的神经功能缺失症状,各时间点(3,6,12,24,48,72 h)VEGF表达增强(P ＜0.05,P＜0.01);与缺血再灌注组比较,参芎化瘀胶囊预处理组能显著改善大鼠神经功能缺失症状,各时间点(3,6,12,24,48,72 h)VEGF表达均明显增强(P ＜0.05,P＜0.01),其中以高剂量组效果最为显著.结论:参芎化瘀胶囊预处理对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与增加VEGF的表达有关.     

田黄冲剂对急性脑出血模型大鼠相关炎性细胞因子的干预作用

目的 通过对脑出血模型大鼠炎性细胞因子（IL-1,IL-6、TNF-α）表达的观察,评价田黄冲剂对脑出血模型大鼠脑损伤的干预作用.方法 选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为模型组、中药组、西药组、中西药组和盐水组.制作脑缺血大鼠模型,对造模成功大鼠除模型组只常规进食水外,其余各组按人与动物等效剂量,分别给予中药（田黄冲剂）、西药（环磷酰胺）、中西药和生理盐水灌胃;并于大鼠清醒后0h（即刻）、6h、24 h 、48 h和72h 5个时间段进行行为学观察和神经功能评分;后断头取脑测定炎性细胞因子IL-1,IL-6和TNF-α.结果 盐水组Zea-Longa评分与模型组分值相近;中药组和西药组评分均下降,且分值相当;中西药组评分分值下降的最明显.与模型组0时段比较,6h、24 h、48 h各治疗组IL-6、IL-1均升高（P＜ 0.05或P＜0.01）;与盐水组比较,大多治疗组IL-6、IL-1均水平较低（P＜ 0.05或P＜0.01）.中西药组TNF指标在48、72 h与模型组相近,与盐水组比较大多治疗组TNF均水平较低（P＜ 0.05或P＜ 0.01）.结论 田黄冲剂对脑出血模型大鼠炎性细胞因子具有抑制作用,但起效时间较慢多在6h以后;田黄冲剂与环磷酰胺在24 h以后各时段对炎性细胞因子的抑制作用相当;两药合用各时段对炎性细胞因子的抑制作用明显优于中药组和西药组.说明田黄冲剂可有效抑制脑出血大鼠炎性细胞因子的表达,进而起到脑保护作用.     

强脾补精化瘀益智胶囊对多发梗塞性痴呆大鼠自由基的影响

目的：探讨强脾补精化瘀益智胶囊治疗多发梗塞性痴呆（MID）的作用机制。方法：通过灌服小承气汤以及栓子注入的方法制作复合型MID大鼠模型，分为假手术组、模型组、中药组和西药组，应用光化学法检测大鼠血清和脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果：中药组SOD活性明显增高，MDA含量明显降低，与模型组及西药组比较差异非常显著（P〈0．01），与假手术组比较差异显著（P〈0．05）。结论：强脾补精化瘀益智胶囊可以明显提高大鼠SOD活性，降低MDA含量，从而增强机体对自由基的清除能力，改善缺血造成的脑损伤，起到治疗MID的目的。     

芪蛭通络胶囊辅助阿司匹林对脑缺血再灌注损伤大鼠的影响

目的:探讨芪蛭通络胶囊辅助阿司匹林对实验性脑缺血再灌注损伤大鼠的作用及作用机制。方法:采用大脑中动脉阻断(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,观察芪蛭通络胶囊辅助阿司匹林对模型大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶及血清NO、神经生长因子(NGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量的影响,并对海马组织行病理学观察。结果:辅助用药较单纯阿司匹林治疗组能显著升高脑组织SOD活性,降低脑组织MDA含量,降低脑组织和血清NO含量(P0.05或P0.01),增加脑组织Ca2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶的含量及血清NGF和VEGF含量(P0.05或P0.01)。结论:芪蛭通络胶囊可有效促进脑缺血再灌注模型大鼠的恢复帮助阿司匹林减少缺血造成的损害,是一种有效的辅助药物。     

化瘀解毒中药对梗阻性肾病大鼠肾脏类肝素酶表达的调控作用

目的:观察化瘀解毒中药对梗阻性肾病大鼠肾脏类肝素酶(Hpa)表达的影响,以探索其拮抗炎症损伤的机制。方法:采用单侧输尿管结扎手术复制梗阻性肾病模型;采用real-time PCR技术检测肾组织Hpa mRNA的表达;采用SABC法检测肾组织Hpa蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肾组织Hpa mRNA及蛋白表达上调(P0.01);与模型组比较,中药组肾组织Hpa表达下降(P0.01)。结论:化瘀解毒中药可下调梗阻性肾病大鼠肾脏Hpa表达从而减轻炎症损伤。     

中药健骨胶囊对原发性骨质疏松大鼠的防治作用

目的:研究中药健骨胶囊对大鼠原发性骨质疏松的影响及防治作用。方法:通过去势术建立骨质疏松大鼠模型,将大鼠随机分为空白组,模型组,阳性药组,高、中、低剂量组,6组,每组10只。应用GE双能窄角扇形骨密度仪分别测大鼠脊柱及全身的骨密度;用Leica生物显微镜、Leica-DMLB图象分析软件分析大鼠双侧股骨组织病理形态,观察健骨胶囊对雌激素缺乏引起的骨质疏松模型大鼠的骨质的影响及药效作用。结果:去势大鼠雌激素缺乏引起骨质疏松明显,给药后骨量增加明显,骨结构明显改善。结论:中药健骨胶囊可促进去势大鼠骨组织生长,促进骨形成,治疗原发性骨质疏松。     

复方水蛭胶囊对实验性高脂血症大鼠的防治研究

目的：观察复方水蛭胶囊对高脂血症大鼠血脂的调节作用。方法：将60只大鼠随机分为6组(除空白组外，其余5组均饲高脂饲料)，即空白组、模型组、阳性药对照组及复方水蛭胶囊高、中、低剂量组，观察28d。结果：用药各组均有明显降低TC、TG、LDL-C及升高HDL-C作用，以复方水蛭胶囊高剂量组为优。结论：复方水蛭胶囊有较好的调节血脂作用。