纤维蛋白胶／BMP-2复合物促进骨缺损早期修复的实验研究

目的 探讨纤维蛋白胶复合骨形态发生蛋白-2(BMP-2)修复家兔桡骨缺损,扫描电镜观察新骨形成并用X线衍射能谱分析新骨形成界面钙、磷、硫元素含量的动态变化.方法 将36只健康成年家兔随机分成3组,均造成双侧桡骨外侧中1/3段长8 mm,宽2 mm,深1 mm的骨缺损.实验组:植入纤维蛋白胶与BMP-2的复合物对骨缺损进行修复;对照组:在骨缺损区单独植入纤维蛋白胶进行修复;空白组:骨缺损区不植入任何材料,骨缺损自然愈合.于术后2周、4周、8周分期处死动物,进行扫描电镜观察和X线衍射能谱分析钙、磷、硫含量.结果 扫描电镜显示,实验组成骨活跃程度、骨愈合速度明显优于对照组和空白组.X线衍射能谱分析显示,随着时间的增加,新骨生成界面的Ca、P含量旱增加趋势,S含量旱减少趋势.术后第2、4周各组的Ca、P和S元素的含量差异非常显著(P<0.01),第8周差异不显著(P>0.05).结论 纤维蛋白胶/BMP-2复合物能够促进早期成骨,促进骨缺损区骨组织的再生和钙化,加速骨缺损的愈合.钙、磷、硫元素的动态变化基本可反映出新骨形成界面愈合的基本进程.     

金葡液以纤维蛋白胶为载体修复大鼠颅骨缺损

目的 初步探讨金葡液以纤维蛋白胶为载体修复骨缺损的可行性. 方法 选用Wistar大鼠30只在颅顶骨两侧对称各制造直径为5 mm的圆形骨缺损模型后分为实验组、对照组及空白组,将纤维蛋白胶-金葡液复合物植入骨缺损处作为实验组,单纯纤维蛋白胶植入作为对照组,空白组不植入任何物质.于术后4,6周行大体观察,X线拍片,组织学检查,修复骨灰重与湿重测定. 结果 术后4,6周, X线片显示实验组缺损区的成骨面积百分比明显大于对照组及空白组,三组两两比较差异均有统计学意义(P<0.01);术后6周,组织学检查,实验组骨缺损内可见纤维蛋白胶已完全吸收,缺损已骨性愈合,对照组缺损内纤维蛋白胶已降解吸收,缺损边缘有大量新生骨质,空白组缺损边缘亦可见到少量新生骨质,其他部分为致密纤维结缔组织覆盖;修复骨湿重/灰重比值低于对照组与空白组,三组比值两两比较差异均有统计学意义(P<0.01). 结论 金葡液以纤维蛋白胶为载体修复骨缺损是可行的,能减少金葡液局部注射的缺陷,提高其药物疗效.     

骨形态形成蛋白和纤维蛋白粘合剂复合物修复骨缺损的放射性核素骨显像研究

在家兔桡骨中段造成１５ｍｍ骨缺损，分别植入骨形态形成蛋白和纤维蛋白粘合剂及二者复合物，并设空白对照。术后第二、四、八周分别行Ｘ线及核素骨显像检查，发现复合物和骨形态形成蛋白组缺损均骨性愈合，纤维蛋白粘合剂和空白组则形成骨不连，两周时含Ｆ５组缺损区血流量大于其它组。定量分析表明，复合物组缺损区新骨量大于骨形态形成蛋白组（Ｐ＜０．０５），说明ＦＳ与ＢＭＰ复合后可增强ＢＭＰ修复骨缺损的能力，骨显像检查可定量观察修复过程中缺损区血流量及成骨活动。     

骨形态形成蛋白和纤维蛋白粘合剂复合物修复骨缺损的放射性核…

在家兔桡骨中段造成１５ｍｍ骨缺损，分别植入骨形态形成蛋白和纤维蛋白粘合剂及二者复合物，并设空白对照。术后第二、四、八周分别行Ｘ线及核素骨显像检查，发现复合物和骨形态形成蛋白组缺损均骨性愈合，纤维蛋白粘合剂和空白则形成骨不连，两周时含ＦＳ组缺损区血流量大于其它组。     

纳米羟基磷灰石／聚酰胺66／富血小板血浆复合物修复兔股骨中段骨缺损的实验研究

目的：探讨纳米羟基磷灰石／聚酰胺66／富血小板血浆（n-HA／PA66／PRP）复合物修复兔股骨中段骨缺损的疗效。方法新西兰大白兔共40只,切除左股骨中段1 cm 连同骨膜的骨质造成骨缺损模型后随机分为两组,实验组植入 n-HA／PA66／PRP 复合物后予以钢板固定;对照组植入 n-HA／PA66后予以钢板固定。术后2、4、8、12周每时间点处死5只兔子,进行 X 线片、大体标本观察、组织学、免疫组织化学染色等观察股骨骨缺损愈合情况。结果术后所有动物无感染、死亡及植入物脱落,大体标本及组织学结果显示术后2周内实验组开始有新生骨组织,随着时间的延长,实验组新骨生长速度和数量明显优于对照组;术后12周 Lane-Sandhu 法 X 线片评分显示实验组（6．80±2．05）分,对照组（4．20±1．30）分,二者比较差异有统计学意义（P ＜0．05）;免疫组织化学染色结果显示实验组血管内皮细胞生长因子表达强度在术后第2、4周时与对照组比较,差异有统计学意义（P ＜0．05）,在术后第8、12周时与对照组比较差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论n-HA／PA66／PRP 复合物具有促进骨质愈合的作用,尤其在早期修复骨缺损的效果优于 n-HA／PA66。     

局部应用辛伐他汀对拔牙窝内BMP-2 mRNA表达的影响及意义

目的：探讨局部应用辛伐他汀对拔牙窝内骨形成蛋白(BMP)〖KG-*3〗-2　mRNA表达的影响,阐明其作用机制。方法：选用健康雄性 Wistar大鼠56只,随机分为实验组28只和对照组28只,拔除右下颌中切牙后,实验组即刻植入载辛伐他汀聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)支架材料,对照组植入单纯 PLGA支架材料作为对照,于术后5 d、1周、2周和4周分别处死大鼠,设计针对BMP-2 mRNA的寡核苷酸探针,采用原位杂交技术检测拔牙窝 BMP-2 mRNA的表达。结果：术后5 d,实验组和照组均未见有BMP-2 mRNA阳性表达细胞;术后1周,实验组植入材料和牙槽窝骨壁之间的间充质细胞内可见染色较深的阳性细胞,而对照组偶见染色较浅的阳性细胞;术后2周,实验组在植入材料和牙槽窝骨壁之间的间充质细胞内可见较多颗粒清晰的阳性细胞,新形成的类骨质表面成骨细胞内也有BMP-2 mRNA阳性表达,阳性细胞数明显多于对照组;术后4周,实验组和对照组均可见BMP-2 mRNA阳性表达细胞。术后1周、2周、4周实验组BMP-2 mRNA阳性细胞数明显多于对照组（P<0.05）。结论：局部应用辛伐他汀可通过增加BMP-2 mRNA的表达促进拔牙窝骨损伤的愈合。     

rhBMP-2/20%-β-TCP/SF复合物植入兔股骨缺损的实验研究

目的探讨rhBMP-2/20%-β-TCP/SF复合物的生物相容性及其作为骨替代材料的可行性。方法将12只健康雄性新西兰兔随机分为实验组和对照组,每组6只,按Thomas方法,在其左侧股骨内侧髁作9 mm×4 mm×5 mm的骨缺损区模型,然后将rhBMP-2/20%-β-TCP/SF复合物材料植入实验组,对照组植入自体骨碎片。分别于术后4周、8周、12周各处死2只动物模型进行大体观察,以及进行X线、人工骨降解情况及早期骨组织学切片分析。结果术后12周实验组植入材料基本完全溶解,并形成典型的骨小梁及髓腔结构,成骨面积为50.45%,大于对照组的42.17%。结论 rhBMP-2/20%-β-TCP/SF复合物具有良好的生物相容性,能有效促进骨缺损的修复愈合,有望成为修补股骨缺损的人工骨移植材料。     

同种异体骨脱钙骨基质联合BMP修复兔桡骨骨缺损的实验研究

目的：探讨异体脱钙骨基质（DBM）骨泥复合骨形态发生蛋白（BMP）修复家兔桡骨节段性骨缺损的作用。方法：日本大耳白兔54只,雌雄不限,随机分为3组,A组：空白组（缺损区不植入任何材料）,B组：对照组（缺损区植入金世植骨灵）,C组：实验组（缺损区植入DBM骨泥）。建立家兔单侧桡骨骨缺损模型,采用同种异体骨DBM骨泥复合BMP进行修复,复合骨泥中加入骨胶原作为塑形剂,术后4、8、12周观察新骨生成情况,通过形态学、X线、组织学及计算机图像分析等观察指标,并与对照组及空白组进行比较,客观评价骨泥诱导成骨及骨缺损修复能力。结果：DBM与BMP复合骨泥易根据骨缺损大小塑形,术中操作简单。术后A组骨缺损未获骨性修复,B、C组骨缺损均获得骨性愈合,且新骨面积测定显示B、C组间成骨速度无明显差异（P〉0．05）,比A组快（P〈O．01）。结论：异体DBM骨泥复合BMP具有良好的骨修复作用。     

糖尿病对大鼠骨缺损愈合影响的实验研究

目的初步探讨糖尿病对大鼠骨缺损愈合的影响。方法雄性Wistar大鼠90只随机分为实验组(n=54)和正常对照组(n=36)。实验组腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病动物模型,然后在各组鼠胫骨处用手术方法制成骨缺损模型,每周分别处死4只大鼠,取出骨标本,脱钙后制成切片,采用免疫组化方法进行染色,光镜下观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的表达强度。并于术后4周、5周、6周进行生物力学检测。结果糖尿病组与正常组相比,糖尿病鼠骨缺损处机械力量降低。免疫组化显示:在骨缺损愈合早期,BMP-2在骨痂内广泛表达,而糖尿病组骨痂组织中表达比正常组低得多。结论实验结果表明糖尿病明显影响大鼠骨缺损处骨痂形成,降低BMP-2表达,糖尿病可能通过降低骨缺损处细胞因子的合成,影响骨缺损的愈合。     

雷尼酸锶对骨质疏松股骨折愈合影响的实验研究

目的探讨雷尼酸锶对骨质疏松股骨折愈合的影响。方法选用成年雌性SD大鼠40只,采用双侧卵巢切除和骨折手术方法建立骨质疏松股骨折(OPF)模型。将大鼠分为对照组和实验组,实验组给予雷尼酸锶(Strontium ranelate,SR),对照组给予同体积生理盐水。X线观察骨折断端愈合情况,检测二组大鼠股骨骨密度(BMD),HE染色观察骨痂组织,免疫组织化学方法检测骨形态发生蛋白-2(BMP-2),抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞数。结果①OPF术后6周实验组骨折断端骨痂较大,有连续骨痂通过骨折断端;对照组骨折断端骨痂较小;②OPF术后2周,实验组BMP-2表达阳性细胞数高于对照组(P<0.05)。术后6周,实验组较对照组骨折愈合明显,BMP-2表达高于对照组(P<0.05);③OPF术后6周时,实验组骨小梁面积比和骨小梁平均宽度高于对照组,骨小梁平均间隔小于对照组(P<0.05)。④实验组破骨细胞数量减少(P<0.05)。⑤OPF术后2、6周,实验组BMD高于对照组(P<0.05)。结论研究结果提示雷尼酸锶可促进骨质疏松股骨折愈合,增加骨密度,抑制破骨细胞。     

缓释微囊化杜仲提取物复合钙磷骨水泥修复兔骨缺损

目的 探讨磷酸钙骨水泥（CPC）/杜仲微囊复合材料修复骨缺损的效果和最佳比例.方法 在新西兰兔双侧股骨髁部形成洞型骨缺损,实验侧骨缺损分为A、B组,分别置入含0.304、0.608mg/ml微囊杜仲提取物的CPC复合材料,对照侧置入CPC为C组,空白侧不填充为D组.在术后2、4、8、12周时取出股骨,进行大体观察、X线摄片、病理学观察及骨形成蛋白-2（BMP-2）和血管内皮生长因子（VEGF）免疫组化染色.结果 X线摄片提示术后12周B组植入材料无残留,A组有少量材料存留,C组材料明显存在.病理学观察术后4周B组骨水泥材料中成骨细胞生长活跃,A、C组仅在宿主骨表面有成骨细胞和新生血管 12周时A、B组髓腔贯通,C组髓腔未贯通,同时B组材料完全降解,A、C组材料未完全降解.统计学分析术后4周BMP-2因子实验组明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 杜仲提取物给微囊包裹,以0.608mg/ml比例与CPC复合修复兔股骨髁缺损使杜仲有效成分缓释,诱导新骨形成作用强、降解时间快、优于CPC且比例较适宜.     

续断对兔骨缺损修复中BMP-2基因表达的影响

[目的]观察续断在兔桡骨骨缺损修复过程中对BMP-2基因表达的影响.[方法]取30只家兔随机分成5个组,在双侧桡骨中段制作20mm长骨缺损模型.取自体松质骨颗粒,植骨于骨缺损处.实验组用续断按照20g/kg剂量混合于饲料中喂养,对照组单纯喂养饲料.于术后1,2,4,6,8周行X线检查后取骨痂用免疫组织化学及Real Time RT-PCR方法检测BMP-2基因的表达变化.[结果]实验组1周时BMP-2呈弱阳性表达,2周时呈阳性表达,4周时呈强阳性表达,6周及8周时呈阳性表达.对照组4周时呈阳性表达外1,2,6,8周时均呈弱阳性表达.实验组1周时较对照组BMP-2基因表达量无明显差异,2,4,6,8周时实验组BMP-2基因表达量均较对照组明显增加(P<0.05),4周时表达量增加最明显.[结论]续断在骨缺损修复过程中有明显的增加BMP-2基因表达的作用,可促进骨缺损的修复.     

骨痛膏对家兔骨愈合过程中骨形态发生蛋白表达的影响

目的观察骨痛膏对实验性家兔骨愈合过程中骨形态发生蛋白(BMP-2mRNA)表达的影响。方法将30只日本大耳白兔随机分成骨痛膏外用药组和空白对照组,再将每组15只随机分成3个亚组,即第1周取标本组(A组)、第2周取标本组(B组)、第4周取标本组(C组),均以手术造成双桡骨中段宽约3 mm、深达髓腔的骨缺损模型,空白对照组以石膏固定,用药组外敷骨痛膏后以石膏固定,用药组每2 d换1次药,1周处死A组,2周处死B组,4周处死C组。原位杂交法检测BMP-2mRNA。结果骨痛膏可以明显促进家兔骨愈合过程中BMP-2mRNA的表达。结论骨痛膏具有明显促进骨愈合作用。     

自体骨复合骨形态发生蛋白2和(或)血管内皮生长因子修复海水浸泡开放性骨缺损的实验研究

目的初步探讨骨形态发生蛋白2（BMP-2）和血管内皮生长因子（VEGF）单独及联合应用修复海水浸泡开放性骨缺损的疗效。方法将60只新西兰兔双侧桡骨中段制作1.5 cm骨缺损,海水浸泡3 h,随机分为A、B、C、D四组,每组15只兔。A组为对照组,植入自体髂骨;B、C、D三组为实验组,B组植入自体髂骨/可吸收胶原海绵（ACS）/BMP-2;C组植入自体髂骨/ACS/VEGF;D组植入自体髂骨/ACS/BMP-2/VEGF。分别于术后1、2、4、8及12周切取标本,每组每个时相点根据随机原则取6个标本,通过X线摄片、骨痂灰度值、组织形态学观察、免疫组织化学及环境扫描电镜观察各时相点骨缺损修复情况。结果①1、2周时,四组X线差异不明显,4、8、12周时B、C、D三组与A组的骨痂灰度值比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;D组与B、C两组平均骨痂灰度值比较差异有统计学意义（P〈0.05）;B、C、两组平均骨痂灰度值比较差异无统计学意义（P〉0.05）。②免疫组织化学结果表明：骨缺损修复早期BMP-2、VEGF二者相互促进,联合应用具有协同效应。结论①BMP-2、VEGF单独应用均能促进海水浸泡兔桡骨开放性骨缺损的修复。②BMP-2和VEGF联合应用能显著促进海水浸泡开放性骨缺损修复,两者联合应用具有协同效应。     

脱钙骨基质／纤维蛋白凝胶复合体在兔骨关节软骨损伤修复中的作用

目的 探讨脱钙骨基质／纤维蛋白凝胶复合体在新西兰大白兔骨关节软骨损伤修复中的意义。方法 12只兔随机分为两组,每组6只,观察组兔膝关节内植入复合支架材料,另对照组6只体内注射等量生理盐水。结果 实验组兔软骨缺损区充填充分,修复后的软骨组织呈现半透明、乳白色,色泽圆润、表面光滑,且Wa-kitani评分显著优于对照组（P〈0．05）。结论 脱钙骨基质／纤维蛋白凝胶复合支架可用于关节软骨缺损的修复。     

纤维蛋白凝胶／血管内皮生长因子复合体在兔坐骨神经损伤恢复中的作用

目的 探讨纤维蛋白凝胶／血管内皮生长因子复合体在新西兰兔坐骨神经损伤后的功能恢复中的作用。方法 将12只新西兰兔分成两组,每组6只,实验组给予纤维蛋白凝胶／血管内皮生长因子复合体治疗,对照组给予血管内皮生长因子基因转染治疗,分别于治疗后第3、6、9周比较两组大体观察、坐骨神经功能指数、微血管计数等指标改善情况。结果连续观察9周后,实验组新西兰兔大体观察、坐骨神经功能指数、微血管计数等指标均明显优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论纤维蛋白凝胶／血管内皮生长因子复合体能够有效促进新西兰兔坐骨神经损伤后的功能修复。     

自体骨髓间充质干细胞移植促进交叉韧带重建后腱骨愈合的研究

目的探讨自体骨髓间充质干细胞对促进兔前交叉韧带重建后腱骨愈合的影响。方法采用骨髓穿刺法获取兔骨髓,体外分离、培养、扩增获得骨髓间充质干细胞。18只成年新西兰大白兔随机分为两组,每组9只,每只兔行双侧前交叉韧带重建手术,实验组将骨髓间充质干细胞和生物蛋白胶混合注入兔前交叉韧带重建模型的肌腱和骨道间隙内,对照组只注射生物蛋白胶,分别在2、4、8周各时间点每组处死3只兔子取材。组织学观察腱骨界面的愈合情况。结果对照组,术后8周在腱骨界面之间为瘢痕组织,腱-骨结合较紧密,有类Sharpey纤维成分。实验组,术后2周腱骨结合部位已经出现未成熟的类软骨细胞,术后8周为较成熟的软骨细胞,排列较整齐,从肌腱向骨道逐渐移行,类似于正常前交叉韧带的止点结构。结论前交叉韧带重建后,自体骨髓间充质干细胞移植于腱骨界面,形成类似正常前交叉韧带止点样结构,有利于促进腱骨愈合。     

牙周膜干细胞BMP-2-PSH复合膜修复新西兰兔牙槽骨缺损

  目的  拟构建新西兰兔牙周缺损模型，确定hPDLSCs-BMP-2-PSH膜的生物安全性和其体内成骨修复作用。  方法  在确定BMP-2-PSH膜没有细胞毒性后将培养好的hPDLSCs细胞膜片复合至BMP-2-PSH膜上。分别在每只新西兰兔下颌左中切牙牙槽骨缺损内植入hPDLSCs/PSH复合膜作为实验组，右中切牙牙槽骨缺损内植入对照性多孔纤维膜材料作为对照组（或不植入任何材料作为对照），然后全瓣复位，缝合。术后即刻和每3周（连续观察12周）进行影像学（CT）检查，观察骨缺损愈合情况；同时，分别在术后第4、8、12周观察PDLSCs/BMP-2双膜材料的吸收度和各组样本新骨形成量和新骨形态。  结果  不同浓度PSH膜和BMP-2-PSH膜浸提液对hPDLSCs细胞不具有细胞毒性，hPDLSCs细胞能够成功复合到BMP-2-PSH膜上；CBCT及组织形态学分析显示，hPDLSCs/PSH复合膜能够有效促进牙槽骨缺损修复再生。  结论  hPDLSCs/PSH复合膜具有良好生物安全性，有利于修复新西兰兔牙周缺损。     

血小板胶-胶原复合膜修复大鼠牙周组织缺损的疗效观察

目的探讨血小板胶（APG）．胶原（co）复合膜对大鼠牙周组织缺损的修复作用。方法将co分别裁成5mm×2mm及7mmx4mm大小,抽取大鼠全血10rnl制作富血小板血浆（PRP）,再将5mm×2mmCo浸润于PRP中制备APG-Co复合膜。将16只成年雄性Wistar大鼠随机平均分为实验组和对照组,分别制作大鼠下颌牙周骨缺损模型（缺损大小为5mm×2mm,磨除牙根面牙骨质）。实验组置APG-Co复合膜于缺损内,并于缺损表面覆盖7mm×4mm的Co。对照组仅用7mm×4mmCo覆盖缺损表面。术后4、6周每组分别处死4只,HE染色观察牙周组织缺损修复效果,Image-ProPlus对术后6周HE染色结果进行分析,计算出新生牙周骨面积,应用SPSS13．0软件对新生牙周骨面积进行统计学分析。结果实验组新生牙槽骨和牙骨质样组织的生成量和成熟度均优于对照组,术后6周实验组新生牙周骨面积显著高于对照组[（56533．04±2673．61）傩（23006．05±2198．10）μm^2,P〈0．05]。结论APG-Co复合膜有显著的促进牙周骨组织缺损修复的作用。     

富血小板纤维蛋白对兔牙槽骨的修复作用

[目的]观察富血小板纤维蛋白（PRF）对兔牙槽骨的修复作用．[方法]将白兔分为4个组,将每只白兔的双侧下颌同名牙拔除,将左侧拔牙窝作为实验组,拔牙后即刻充填PRF;右侧拔牙窝作为对照组,拔牙后以明胶海绵填充．每组白兔均分别在术后第2,4,8,12周处死,观察牙槽骨的修复情况．[结果]术后2,4周实验组牙槽嵴高度与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．01）．实验组拔牙创区牙槽骨骨密度与对照组相比较差异具有统计学意义（P〈0．01）．[结论]PRF对牙槽骨缺损有明显的促进愈合作用,可减少牙槽嵴的吸收,维持牙槽嵴的高度,尤其在修复早期这种效果更明显,提高新生骨组织的骨密度．