Nanog在多种癌组织中的表达及临床意义

  目的   分析Nanog在非小细胞肺癌（NSCLC）、胃腺癌、食管鳞状细胞癌中的表达特点及规律,探讨Nanog的表达在肿瘤发生、发展中的意义及其与肿瘤干细胞的关系。   方法   采用实时荧光定量PCR法分别检测78例NSCLC及其中10例肺癌患者的癌旁组织、39例胃腺癌及其中10例胃腺癌患者的癌旁组织和35例食管鳞癌及其中10例食管鳞癌患者的癌旁组织中Nanog的相对表达情况。   结果   NSCLC、胃腺癌和食管鳞癌组织中Nanog相对表达量明显高于对应的癌旁组织,且肺癌和胃腺癌与其对应的癌旁组织之间差异具有统计学意义（P < 0.05）。肺癌中Nanog的相对表达量与患者的临床分期和肿瘤组织学类型有关（P < 0.05）;胃腺癌组织中,Nanog的相对表达量与胃腺癌的临床分期、性别有关（P < 0.05）;食管鳞癌组织中,Nanog的相对表达量与淋巴结转移、临床分期有关（P < 0.05）。   结论   在肿瘤进展过程中,Nanog的表达与肿瘤的临床分期和淋巴结转移有关,提示Nanog的表达在腺癌的发生、发展中可能具有一定意义。      

VEGF-D及其受体VEGFR-3在非小细胞肺癌中的表达与淋巴结转移的关系

  目的   对VEGF-D及其受体VEGFR-3在良性疾病肺组织和非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达进行研究,探寻其相互之间的关系,从而进一步探讨VEGF-D、VEGFR-3在肺癌发生及NSCLC淋巴管生成和淋巴结早期转移中的作用。   方法   收集非小细胞肺癌患者术后肺组织标本52例,良性疾病肺组织30例,应用半定量逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测良性疾病肺组织及肺癌组织中VEGF-D、VEGFR-3 mRNA的表达量。   结果   VEGF-D mRNA、VEGFR-3 mRNA在肺癌组织中的表达水平较良性疾病肺组织表达水平明显升高（P < 0.05）。VEGF-D、VEGFR-3 mRNA在肺癌组织中的表达与淋巴结转移无显著相关。   结论   VEGF-D、VEGFR-3 mRNA的表达与肺癌发生有显著的相关性。      

非小细胞肺癌组织中P-ACC及COX-2的相关性研究

  目的   探讨非小细胞肺癌组织中乙酰辅酶A羧化酶磷酸化后的产物（P-ACC）与环氧合酶-2（COX-2）的表达及其与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及病理类型的关系,并研究两者的相关性。   方法   以62例非小细胞肺癌患者的肺癌组织作为研究组,20例因其他它原因行肺叶切除患者的正常肺组织作为对照组。应用免疫组织化学SP法检测肺癌组织及正常肺组织中P-ACC、COX-2的表达情况。   结果   P-ACC、COX-2在非小细胞肺癌和正常肺组织中的阳性表达差异有统计学意义（P < 0.05）。在非小细胞肺癌中,P-ACC的阳性表达与肿瘤大小显著相关（P < 0.05）,而与淋巴结转移、临床分期及病理类型无关;COX-2的阳性表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及病理类型无关。P-ACC与COX-2的阳性表达之间呈显著负相关（r=-2.37,P=0.032）。   结论   P-ACC在非小细胞肺癌组织中的阳性表达降低;COX-2在非小细胞肺癌组织中阳性高表达,二者呈显著负相关,提示P-ACC阳性表达降低可能激活COX-2阳性表达,可促进非小细胞肺癌的发生、发展及侵袭转移。      

Survivin与XIAP mRNA在非小细胞肺癌组织中的表达及相关性

[目的]研究survivin基因表达与非小细胞肺癌（NSCLC）生物学行为及与XIAP表达的关系。[方法]采用RT—PCR技术检测49例NSCLC患者癌组织及相应的癌旁正常肺组织中survivin和XIAPmRNA的表达水平。[结果]49例NSCLC组织中smwivin与XIAP mRNA的阳性表达率分别为79．6％（39／49）和57．1％（28／49）,在癌旁正常肺组织中的阳性表达率分别为12．2％（6／49）和14.3％（7／49）．差异均有统计学意义（P〈0．01）。NSCLC组织中survivin和XIAP mRNA表达与肿瘤的病理组织类型、细胞分化程度、临床分期及淋巴结转移均无相关性（P〉0．05）。NSCLC组织中survivin与XIAP mRNA表达呈正相关（P=0．021）。[结论]Survivin与XIAP在抑制NSCLC细胞凋亡过程中可能起协同作用,以促进肿瘤发生发展。     

肺癌患者柯萨奇病毒和腺病毒受体的表达及其临床意义

  目的   探索柯萨奇病毒和腺病毒受体（Coxsackie and adenovirus receptor,CAR）与肺癌的关系,为使用基于腺病毒载体的基因治疗方案提供依据。   方法   运用免疫组织化学法检测112例肺癌患者肿瘤组织、癌旁组织以及正常组织中CAR的表达;通过RT-PCR和Western blot法检测32例患者CAR mRNA及CAR蛋白的表达。   结果   在正常肺组织中未见CAR表达,癌旁组织中可见少量的CAR表达。鳞状细胞癌和腺癌中CAR阳性表达比率分别为43%和70%,均较癌旁组织明显升高。同时,腺癌中CAR的表达也显著高于鳞状细胞癌,RT-PCR和Western blot法进一步证实免疫组织化学法检测结果。   结论   肺癌中CAR过表达,在腺癌中尤为明显,提示CAR可能参与了肺癌的发生发展,这可能对基因治疗肺癌的研究提供了较好的理论基础。      

NPRAP蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

  目的  探讨NPRAP在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与患者预后的关系。  方法  本文应用免疫组化检测70例NSCLC标本(其中35例具有配对的淋巴结转移标本)中NPRAP的表达及其与临床病理因素之间的关系。另选30例新鲜肺癌及癌旁正常肺组织用于NPRAP的mRNA和蛋白检测。  结果  与正常肺组织相比, NPRAP的mRNA和蛋白在肺癌组织中表达显著增高, 且NPRAP的高表达与肺癌的高分期及淋巴结转移密切相关(P < 0.05)。  结论  NPRAP的阳性表达与非小细胞肺癌患者的不良预后显著相关, NPRAP在肿瘤的发生发展过程中可能具有重要作用。      

miR-200a抑制YAP1基因表达对肺癌细胞增殖的影响

  目的   研究微小RNA-200a（miR-200a）对肺癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制。   方法   采用Real-time PCR检测15例非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织、人肺癌细胞株（A549、NCI-H520、SK-MES-1）及人正常肺支气管上皮细胞株16HBE中miR-200a的表达水平。用CCK-8法检测miR-200a对A549肺癌细胞增殖活性的影响。通过生物信息学方法预测miR-200a可能的靶基因,双荧光素酶报告基因实验结合Real-time PCR和Western blot验证miR-200a对靶基因YAP1的调控作用。CCK-8法检测下调靶基因YAP1对A549肺癌细胞株增殖活性的影响。   结果   miR-200a在非小细胞肺癌组织和肺癌细胞系中表达明显降低（P < 0.01）。上调miR-200a表达后明显抑制A549肺癌细胞的增殖活力（P < 0.01）。双荧光素酶报告基因显示miR-200a可以直接作用于靶基因YAP1的3'-UTR区域抑制荧光素酶活性（P < 0.01）,Real-time PCR和Western blot检测显示上调miR-200a的表达能够明显下调A549肺癌细胞YAP1 mRNA和蛋白的表达水平（P < 0.01）。CCK-8法显示下调YAP1的表达能够明显抑制A549肺癌细胞的增殖活性（P < 0.01）。   结论   miR-200a通过靶向作用于YAP1基因来抑制肺癌细胞的增殖,从而在肺癌中发挥抑癌基因的功能。      

iASPP蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中iASPP蛋白表达规律及其与p53表达状态的相关性。方法：收集NSCLC术后同一患者的新鲜肺癌组织、癌旁组织、肺组织共54例用于试验研究。采用免疫组织化学方法检测肺癌组织、正常肺组织中iASPP蛋白表达及癌组织中p53表达以确定各病例的p53表达状态;Western blot方法检测肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织中iASPP蛋白表达。结果：p53阴性状态：免疫组织化学检测结果显示癌组织中iASPP蛋白表达阳性率为71％,显著高于肺组织的21％（P=0．001）。Western blot显示癌组织、癌旁组织、正常肺组织中表达量逐渐降低（P=0．020）;相互间比较发现癌组织iASPP蛋白表达水平显著高于肺组织（P=0．007）、与免疫组织化学检测结果相一致。p53阳性状态下：免疫组织化学与Western blot检测结果均显示iASPP蛋白在癌组织、癌旁组织、肺组织中表达元显著性差异。癌组织iASPP蛋白表达在p53阴性时显著高于p53阳性,p53阴性癌旁组织、肺组织iASPP表达与p53阳性比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：p53阴性状态下,NSCLC癌组织iASPP高表达,iASPP高表达可能与NSCLC的发生密切相关。     

非小细胞肺癌中ASPP1、ASPP2蛋白的不同表达状态及其意义

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中ASPPl、ASPP2蛋白表达规律及其与p53表达状态的相关性。方法：收集NSCLC术后同一病人的新鲜肺癌组织、癌旁组织、肺组织共54例用于试验研究。采用免疫组织化学Envision法检测肺癌组织、正常肺组织中ASPPl、ASPP2蛋白表达及癌组织中p53表达以确定各病例的p53表达状态;Western blot方法检测肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织中ASPPl、ASPP2蛋白表达。结果：p63阴性状态：Westernblot显示癌组织、癌旁组织、正常肺组织中ASPPl表达量逐渐升高（P=0．012）,比较发现癌组织ASPPl蛋白表达水平显著高于肺组织（P=0．029）;ASPP2表达在癌组织、癌旁组织、正常肺组织中表达无显著性差异。r63阳性状态下,免疫组织化学与Western blot检测结果均显示ASPPl、AS—PP2蛋白在癌组织、癌旁组织、肺组织中表达比较无显著性差异。癌组织ASPPl蛋白表达在p53阴性时显著低于p53阳性;癌组织ASPP2表达在p63阴性时与r63阳性无统计学意义。癌旁组织、肺组织中ASPPl、ASPP2表达与p63表达状态无相关性。结论：p53阴性状态下。NSCLC癌组织ASPPl表达降低,ASPP2表达无明显变化。ASPPl表达降低与NSCLC的发生密切相关。     

膜联蛋白A1在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

  目的  检测膜联蛋白A1（annexin A1,ANXA1）在人非小细胞肺癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。  方法  通过实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹和免疫组织化学技术检测非小细胞肺癌患者肺癌组织和癌旁组织（距肿瘤边缘>5 cm）中膜联蛋白A1的表达水平,并分析其与临床病理参数之间的关系。  结果  实时荧光定量PCR显示,膜联蛋白A1 mRNA在肺癌组织中的表达水平（0.574±1.403）高于癌旁组织（0.240±0.893）,差异具有统计学意义（t=2.060,P=0.045）。肺癌组织中膜联蛋白A1的表达与其分化程度、淋巴结转移、TNM分期相关（P < 0.05）;与性别、年龄、吸烟史、肿瘤直径、组织学类型无关（P > 0.05）。蛋白免疫印迹和免疫组织化学结果均显示,膜联蛋白A1蛋白在肺癌组织中的表达高于癌旁组织。  结论  ANXA1在非小细胞肺癌患者肺癌组织中呈高表达,可能与其发生发展和侵袭转移有一定关系。      

长链非编码RNA SPRY4-IT1在食管鳞癌中的表达及对细胞生长的影响

  目的  探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1与食管鳞状细胞癌（ESCC）的临床病理及预后的相关性,以及对细胞生长的影响。   方法  收集2008年1月至2009年12月南京医科大学附属南京医院肿瘤外科50例ESCC手术切除标本（包括癌组织和癌旁组织）,荧光实时定量PCR（qRT-PCR）检测50例ESCC中SPRY4-IT1的表达情况,分析其与临床病理及预后的关系,用小干扰RNA（siRNA）干扰SPRY4-IT1后MTT法检测其对细胞生长的影响,流式细胞检测对细胞凋亡和周期的影响。  结果  45例（90%）标本中SPRY4-IT1呈阳性表达,SPRY4-IT1在癌组织中的表达量显著高于癌旁组织（t=5.377,P < 0.01）。SPRY4-IT1的相对表达水平与肿瘤大小、临床分期相关（P均 < 0.05）。SPRY4-IT1在ESCC细胞株中表达量高于正常食管上皮细胞。KYSE30细胞中干扰SPRY4-IT1的表达后可明显减慢细胞生长,阻滞细胞周期并促进细胞凋亡（P < 0.01）。  结论   SPRY4-IT1在ESCC组织中显著高表达,并且能促进ESCC细胞生长,可能成为ESCC诊断和判断预后的重要分子标记物。      

Cdc42和WAVE1在非小细胞肺癌中的表达及临床病理意义

  目的  探讨Cdc42和WAVE1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其临床意义。  方法  采用免疫组织化学法检测106例经石蜡包埋的NSCLC组织及46例癌旁正常肺组织中Cdc42和WAVE1的表达情况。  结果  Cdc42和WAVE1在NSCLC组织中的表达明显高于正常肺组织。Cdc42的表达强度与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况之间差异有统计学意义（P < 0.05）;WAVE1的表达强度与TNM分期及淋巴结转移情况之间差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）。NSCLC组织中Cdc42和WAVE1的表达呈正相关（r=0.469,P < 0.01）。Cdc42高表达组的3年生存率（44.16%）低于低表达组（72.41%）,WAVE1高表达组的3年生存率（39.44%）亦低于低表达组（77.14%）,且差异均有统计学意义（P < 0.01）。淋巴结转移、Cdc42和WAVE1共同高表达是影响NSCLC患者预后的独立因素。  结论  Cdc42和WAVE1在NSCLC组织中异常高表达,且呈现较好的相关性,可能共同参与并促进NSCLC的恶性进程,检测两者的表达会对NSCLC患者的临床病理学特征及预后起一定的提示作用。      

长链非编码RNA BC200在非小细胞肺癌患者组织中的表达及作用

  目的  分析长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）BC200在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）组织中的表达情况，并探讨其临床意义及其与上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）相关蛋白E-cadherin、N-cadherin及Snail之间的关系。  方法  采用实时荧光定量PCR（QPCR）法检测2014年1月至2018年6月天津市胸科医院60例癌组织及60例对应的正常肺组织中BC200表达情况，40例癌组织及40例正常肺组织中E-cadherin、N-cadherin及Snail mRNA表达水平，统计分析NSCLC中BC200与E-cadherin、N-cadherin及Snail mRNA表达水平以及两者的相关性，分析BC200与临床病理特征（性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移及病理类型水平）的关系，应用受试者工作特征（receiver operating characteristic curve，ROC）曲线鉴别诊断NSCLC的效能；采用免疫组织化学法检测E-cadherin、N-cadherin及Snail蛋白在40例NSCLC组织及20例正常肺组织中表达情况，分析其与BC200表达情况的关系。  结果  1）肺癌组织中的BC200、N-cadherin及Snail mRNA的表达水平显著高于正常肺组织中的表达水平（P < 0.05），E-cadherin mRNA的表达量低于正常肺组织（P < 0.05）；2）E-cadherin、N-cadherin及Snail在NSCLC组织中阳性表达率分别为40.0%（16/40）、57.5%（23/40）、57.5%（23/40），在正常肺组织中的阳性表达率为95%（19/20）、5%（1/20）、10%（2/20），表达差异具有统计学意义（P < 0.05）；3）肺癌组织中BC200的高表达与淋巴结转移、临床分期、E-cadherin、N-cadherin及Snail阳性率相关（P < 0.05），BC200的表达与E-cadherin mRNA的表达呈负相关（r=-0.31，P < 0.05），与Snail、N-cadherin mRNA的表达呈正相关（r=0.305、r=0.257，P < 0.05）；4）ROC曲线分析表明，组织lncRNA表达水平对NSCLC的诊断敏感度和特异度均较满意。  结论  BC200在NSCLC组织中高表达，且与淋巴结转移、临床分期、E-cadherin、N-cadherin及Snail阳性率相关，BC200的表达与E-cadherin mRNA的表达呈负相关，与Snail、N-cadherin mRNA的表达呈正相关，提示BC200可能通过上皮间质转化调节肺癌细胞侵袭和迁移能力。在NSCLC诊断上，lncRNA BC200水平有较高的价值，可考虑作为NSCLC诊断的潜在标记物。