结肠腺癌伴神经内分泌分化的临床病理学意义

目的探讨伴有神经内分泌分化(NED)结肠腺癌的临床病理学意义.方法通过光镜观察伴NED结肠腺癌的细胞形态、组织结构,采用免疫组织化学Elivision法检测神经内分泌标志物Syn、CgA、NSE及CEA、COX2、CDX2PAS染色情况.结果 86例结肠腺癌中神经内分泌阳性表达35例(40.70%).PAS染色阳性,结肠腺癌伴NED在不同年龄、性别、肿瘤大小、不同部位、浸润深度、组织学分级及CDX2之间的表达均无明显相关性(P>0.05),而与转移能力、CEA及COX2表达具有相关性(P<0.05).NED肿瘤细胞呈现一般腺癌细胞及神经内分泌细胞的一些特点.NED肿瘤细胞极少见核分裂或病理性核分裂,而周围一般腺癌细胞相对增生活跃,核分裂多见.结论结肠腺癌细胞具有双向分化功能,即为双向分泌细胞(amphicrine cel)l.NED细胞可能是一种处于静止状态或增殖能力低下,但可能直接或通过分泌相关因子对周边肿瘤细胞分化程度及增殖状况产生作用的细胞.结肠腺癌伴NED时具有一般结肠腺癌不完全一致的生物学特点.     

恶性肿瘤神经内分泌分化

恶性肿瘤有着许多特征，但基本特征之一是细胞的异常分化。在肿瘤细胞向不成熟方向退行性发育的过程中，可出现原来组织或器官中的正常细胞所没有的新的分化特征或原有一些特征的丢失，这种分化不仅给肿瘤的诊断带来困难，同时也给肿瘤治疗造成了许多障碍。     

胃神经内分泌癌和胃癌伴神经内分泌分化的临床病理研究

目的：探讨胃神经内分泌癌和胃癌伴神经内分泌分化的临床病理特征。方法：回顾12例胃神经内分泌癌和8例胃癌伴神经内分泌分化的临床病理资料及苏木精-伊红染色切片，并作神经内分泌标记物(CgA、syn、NSE等)的免疫组化染色和AB/PAS组化染色。结果：两组患者均以老年男性为主，肿块大多为溃疡型，多位于胃贲门部或胃窦部。12例胃神经内分泌癌中，典型类癌2例、不典型类癌9例、低分化神经内分泌癌1例，大部分癌细胞均表达神经内分泌标记物，其中7例不典型类癌内见少数腺癌或粘液细胞癌成分，后二者阳性表达CEA和PAS。8例胃癌伴神经内分泌分化者见少数神经内分泌标记物阳性的细胞散在分布于胃癌组织内。结论：胃神经内分泌癌和胃癌伴神经内分泌分化属不同的组织学类型，免疫组化染色可明确区分二者。     

胃腺癌伴低分化神经内分泌癌临床病理分析

目的探讨胃癌伴低分化神经内分泌癌的临床病理特征。方法回顾我院收治的1例胃腺癌伴低分化神经内分泌癌的临床病理资料及苏木精伊红染色切片,并做神经内分泌标记物（CgA、Syn等）的免疫组化染色。结果免疫组化Syn（＋）,CgA（＋）,AE,／AE3（灶性＋）,Ki-67（＋约70％）。经免疫组化确诊为腺癌伴低分化神经内分泌癌。结论胃腺癌和低分化神经内分泌癌可同时存在,属不同的组织学类型,免疫组化染色可明确区分二者。胃低分化神经内分泌癌是胃恶性肿瘤中的少见病理类型,恶性程度高,预后差,准确分型对其治疗有指导意义。     

胆囊神经内分泌癌伴乳头状腺癌分化1例报告

<正>1病历摘要患者女,59岁,右上腹疼痛2年,加重半个月。体检:右上腹压痛,无反跳痛及肌紧张,肝脾未触及。B超:胆囊大小形态正常,囊壁毛糙,囊内胆汁透声差,囊内见中等回声,范围约27 mm×24 mm×18 mm,囊底部见强回声,直径约3 mm。胆总管内径约7 mm,显示长度18 mm,目前显示段內未见明显异     

肺腺癌神经内分泌分化对预后的影响

肺腺癌的发病率正在不断增加，完全切除肿瘤组织患者就有治愈的可能。但是一些患者术后复发，这影响了患者的长期生存。所以正确判断预后对治疗方式的选择十分重要。一些学者认为神经内分泌细胞不仅存在于胃癌、大肠癌等消化道肿瘤中，而且存在于非小细胞肺癌等胃肠外非内分泌肿瘤组织中。荷兰学者De Brine等认为嗜铬蛋白A(CGA)、突轴素(SYN)，     

钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的实验研究

目的 探讨钩吻素子(Kou)体外能否诱导LoVo细胞凋亡。方法 以Kou(50μmol／L)作用于LoVo细胞，经光镜、电镜和荧光显微镜观察细胞凋亡情况，并用流式细胞仪检测细胞增殖周期状态。结果 通过光镜、电镜和荧光显微镜观察均证实Kou可诱导LoVo细胞凋亡，且凋亡百分率随Kou作用时间的延长而升高。经Kou作用后的肿瘤细胞，细胞周期状态发生明显变化，G0／G1期细胞从31．3％上升到42.3％，S期细胞从62．0％下降到38．7％。结论 Kou可诱导LoVo细胞凋亡，且存在时间依赖关系，Kou可抑制细胞DNA的合成，阻止细胞由G1期向S期转化。     

卵巢浆液性囊腺癌神经内分泌分化的胚性重演

目的研究卵巢神经内分泌细胞(neuroendocrine cells,NECs)在浆液性囊腺癌的"胚性重演",探讨其生物学意义。方法采用免疫组化SP法检测嗜铬素A(CgA)、突触素(Syn)在40例卵巢浆液性囊腺癌、20例正常卵巢和6例胎儿卵巢中的表达,图像定量分析其表达情况;应用透射电子显微镜分别观察三者组织中NECs的超微结构特征。结果卵巢浆液性囊腺癌组织NECs分布范围及染色强度高于胎儿卵巢,均明显高于正常卵巢组(P<0.05),随组织分化程度下降,NECs的表达增强,其超微结构特征亦与胎儿卵巢有相似之处。结论 NECs在卵巢浆液性囊腺癌和胎儿卵巢有相似的细胞结构特征,提示它们在胎儿卵巢发育和浆液性囊腺癌组织发生中可能存在相同的调节因素。     

肾上腺皮质腺瘤的神经内分泌分化

目的 探讨肾上腺皮质腺瘤发生学，为临床治疗方式的改进提供实验依据。方法 通过免疫组化方法观察了39例肾上腺皮质腺瘤（20例醛固酮症，10例库欣综合征，9例无功能腺瘤），10例正常肾上腺皮质的3种神经内分泌指标：神经丝蛋白（NF）、神经特异性烯化酶（NSE）、突触胞蛋白（SYN）的阳性表达。结果 10例正常肾上腺皮质仅2例NSE在肾上腺皮质球状带有少量阳性表达。39例肾上腺皮质腺瘤NF阳性14例（35．89％）。NSE阳性26例（66．66％）。SYN阳性24例（61．53％）。以3种不同临床表现形式的肾上腺皮质腺瘤的神经内分泌指标阳性表达率差异无显性意义（P＞0．05）。结论 肾上腺皮质腺瘤相对正常肾上腺皮质有神经内分泌分化；3种不同临床表现形式的肾上腺皮质腺瘤，其神经内分泌蛋白表达差异无显性变化。     

神经干细胞的诱导分化

受传统的影响,以前人们一般不认为中枢神经系统有干细胞,这是因为人们长期形成的中枢神经系统不可再生的观念。1992年,Reynolds和Weiss从成年小鼠纹状体分离了能在体外不断分裂增殖,具有多种分化潜能的细胞群,并明确地提出了神经干细胞的概念。目前已经证实,这种具有自我更新、自我维持、多潜能的神经干细胞确实存在于发育中的神经系统,并     

澳洲茄胺诱导肠癌HCT-116细胞凋亡的实验研究

目的?通过研究中药灌肠方中的有效成分澳洲茄胺对肠癌HCT-116细胞凋亡及相关基因表达的影响,探讨澳洲茄胺抑制肠癌细胞增殖的作用机制。方法?通过实时无标记细胞分析仪检测澳洲茄胺对HCT-116细胞增殖的影响;流式细胞仪检测HCT-116细胞凋亡;qPCR法检测凋亡相关基因Bax、Survivin的mRNA表达水平;Western blot实验检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Bcl-xl、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、PARP以及PI3K/Akt信号通路蛋白PI3K、Akt表达情况。结果?实时无标记细胞分析检测法证实澳洲茄胺对肠癌HCT-116细胞的生长有抑制作用,且随药物浓度、给药时间的增加而增强;流式检测发现随药物浓度的增加,其凋亡增多;qPCR法证实澳洲茄胺能上调Bax、下调Survivin的mRNA表达;Western blot法检测证实澳洲茄胺上调Bax蛋白,促进Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、PARP蛋白活化,下调Bcl-2、Bcl-xl蛋白表达,升高Bax/Bcl-2表达比值,并且抑制PI3K、Akt蛋白活化。结论?澳洲茄胺抑制肠癌HCT-116细胞增殖,通过抑制PI3K/Akt信号通路及调控Caspase家族、Bcl-2家族、Survivin、PARP的表达,诱导细胞凋亡,对凋亡的2条途径均有作用,即线粒体途径和死亡受体途径。      

雷公藤红素对结肠癌细胞株HCT-116生长的影响及其作用机制

目的探讨雷公藤红素（CSL）对人结肠癌细胞株HCT-116生长的影响及可能的作用机制。方法采用不同浓度的CSL处理HCT-116细胞,MTT法检测细胞生长的抑制率;流式细胞术（FCM）检测细胞周期;透射电镜观察细胞凋亡形态变化;荧光底物法检测细胞蛋白酶体活性;Westernblot检测p27、Bax的表达变化。结果CSL明显抑制HCT-116细胞生长,呈现时间、剂量依赖性;流式细胞术显示CSL可阻止细胞周期于G0/G1期;电镜下观察部分细胞具有典型的凋亡细胞形态特征;CSL对HCT-116细胞糜蛋白酶活性具有明显的抑制作用,其效应呈现浓度依赖性;CSL干预后细胞内p27、Bax蛋白表达明显增加。结论CSL具有抑制结肠癌HCT-116细胞的生长、阻滞细胞周期、诱导凋亡的作用,其分子机制可能与其抑制细胞内蛋白酶体活性,导致p27、Bax蛋白降解受阻有关。     

Runt相关转录因子3在人结肠癌HCT-116/5-FU耐药细胞株中的表达及其与耐药的相关性

目的 建立耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的人结肠癌细胞株HCT-116/5-FU,初步探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)与结直肠癌耐药的关系。方法 采用低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击法建立人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,CCK-8法检测5-FU对亲本株HCT-116及耐药株HCT-116/5-FU的半数抑制浓度(IC₅₀值),绘制细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间(TD);qRT-PCR和Western blot法检测亲本株HCT-116细胞及耐药株HCT-116/5-FU细胞中RUNX3、P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药蛋白(LRP)的mRNA和蛋白表达。采用siRNA技术敲低HCT-116细胞中RUNX3的表达,分为RUNX3敲低组(si-RUNX3-1组、si-RUNX3-2组)和阴性对照组(si-NC组),qRT-PCR和Western blot法分别在mRNA水平和蛋白水平验证RUNX3的敲低效率;CCK-8法测定si-RUNX3组和si-NC组的IC₅₀值,Western blot法测定两组中P-gp、MRP1和LRP的表达情况。结果 成功构建稳定的人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,耐药倍数为7.7倍;HCT-116/5-FU耐药细胞株群体TD较HCT-116亲本株明显延长(P<0.001),耐药细胞群体TD是亲本细胞的1.38倍(P=0.002),耐药株细胞形态发生变化。耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3 mRNA表达水平较亲本细胞株HCT-116明显降低(P=0.048),P-gp(P=0.008)、MRP1(P=0.001)和LRP mRNA(P=0.001)表达水平较亲本细胞株HCT-116明显升高;耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3蛋白质相对表达量较亲本细胞株HCT-116明显降低(P<0.001),P-gp、MRP1、LRP蛋白的相对表达量较亲本细胞株明显升高(P均<0.001)。成功构建了RUNX3低表达的HCT-116细胞模型,si-RUNX3-1组RUNX3 mRNA的表达与si-NC组相比差异无统计学意义(P=0.064),si-RUNX3-2组明显低于si-NC组(P=0.034);si-RUNX3-1组和si-RUNX3-2组RUNX3蛋白的表达量均明显低于si-NC组(P均<0.001),si-RUNX3-2组的敲低效率更高。选用si-RUNX3-2组完成后续实验,si-RUNX3组的IC₅₀值较si-NC组明显升高,下调RUNX3的表达能明显降低HCT-116细胞对5-FU的敏感性(P<0.001);si-RUNX3组的P-gp、MRP1和LRP蛋白相对表达量均明显高于si-NC组(P均<0.001)。结论 RUNX3表达下调能降低人结肠癌HCT-116细胞对5-FU的敏感性,可能与RUNX3表达的降低上调P-gp、MRP1和LRP等耐药蛋白表达,从而增加细胞的耐药性有关。     

维甲酸诱导黑色素瘤分化的实验研究

我们应用维甲酸对人黑色素瘤细胞系的分化进行了实验研究。实验结果显示:维甲酸对黑色素瘤细也有一定的生长抑制作用,使瘤细胞倍增时间延长,裸鼠皮下移植瘤生长速度减缓,细胞形态亦随之发生变化,由上皮样细胞向梭形或树突状细胞转化。电镜下,诱导后的细胞细胞器较丰富.黑色素小体增多。免疫组化HLA-DR染色在未诱导细胞阳性,诱导后转阴。酪氨酸酶活性在诱导后呈增高趋势,r-src癌基因表达减少。上述结果支持维甲酸通过改变细胞表面的抗原性、癌基因及细胞内酶活性等多种途径发挥诱导分化作用。     

TOFA协同柔红霉素诱导肠癌细胞株HCT-8细胞凋亡

目的研究TOFA及柔红霉素（DNR）联合应用对肠癌细胞株HCT-8的作用,探讨其联合应用于临床的可能性。方法将1×10^4个HCT-8细胞种植于96孔板,采用MTT比色法测定不同浓度TOFA或／和DNR对同步化处理后的HCT-8细胞的生长抑制效果;DNA降解分析法（DNA Fragmemation）检测TOFA与DNR联合使用对HCT-8细胞DNA的损伤。Westernh10t检测TOFA与DNR联合使用对凋亡蛋白p53以及PARP的水解作用。结果单用TOFA或DNR均可呈浓度依赖性抑制肠癌细胞HCT-8的生长,其IC50值分别为7．5μg／mL和0．18μmoL／L;当用20μg/mLTOFA或0．6μmol／LDNR处理时,活性细胞只有正常对照组（无药物处理组）的26．2％±5．1％或22．3％±4．5％。当用20μg/mLTOFA和0．6μmol/LDNR两药联合应用时,活性细胞只有正常值的10．4％±3．0％。同时联合应用可显著增加肿瘤细胞DNA的降解;并显著诱导凋亡蛋白p53表达,促进PARP的水解。结论TOFA与DNR联合应用可协同抑制肠癌细胞株HCT-8细胞的生长,其效应与药物诱导细胞凋亡有关。     

β-榄香烯诱导结肠癌Lovo细胞凋亡的作用

目的　研究 β 榄香烯诱导结肠癌细胞的凋亡作用 ,探讨其治疗结肠癌的作用机制。 方法　选择 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡 ,采用光镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡及细胞周期。Fura 2荧光复合技术测结肠癌细胞内 [Ca2 +]i浓度。结果　β 榄香烯对结肠癌细胞增殖具有很强的抑制作用。β 榄香烯能够诱导结肠癌凋亡。在结肠癌细胞凋亡过程中 ,胞内 [Ca2 +]i明显升高 ,以凋亡早期更为明显。 1h时为 ( 2 5 6.18± 8.85 )nmol/L ,明显高于对照组 ( 12 7.81± 5 .18)nmol/L(P <0 .0 1)。结论　β 榄香烯对结肠癌细胞生长具有很强的抑制作用 ,与诱导凋亡有关。Ca2 +在 β 榄香烯诱导结肠癌细胞凋亡过程中有一定的作用     

痛泻要方对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜ERK1、ERK2基因表达的影响

目的 观察痛泻要方对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠黏膜ERK1、ERK2基因表达的影响,探讨其作用机制.方法 将实验动物分为6组,采用TNBS/乙醇灌肠法造模,肉眼观察结肠大体形态损伤并进行评分,以大鼠结肠黏膜ERK1、ERK2为观察指标,采用RT-PCR法检测ERK1、ERK2基因表达水平.结果 肉眼观察模型组大鼠结肠组织黏膜层可见炎症和溃疡形成,与空白组比较,P＜0.05,证实模型成功.模型组大鼠结肠组织ERK1、ERK2基因的相对表达量均高于空白组(P＜0.05);治疗后,痛泻要方高剂量组、中剂量组ERK1、ERK2基因的相对表达量均较模型组升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 痛泻要方对TNBS/乙醇法UC大鼠模型结肠黏膜ERK1、ERK2基因的相对表达量有上调作用,提示痛泻要方治疗作用可能与ERK信号转导途径被激活有关.     

GSTθ转染对HCT116细胞系的影响

目的观察转染了GSTθ后HCT116细胞系的生长、细胞周期的变化,以及HCT116细胞系生长对血清浓度的依赖性。方法通过脂质体Lipofectamine将质粒载体pcDNA3及pcDNA3-GSTθ分别转染HCT116细胞获得稳定转染株,通过RT-PCR检测GSTθ的表达,细胞计数绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期变化,MTT法检测细胞生长对血清浓度的依赖。结果GSTθ转染后抑制了HCT116细胞的生长,并且是通过G2/M和S期阻滞而导致的,GSTθ还增加了HCT116细胞对血清的依赖性。结论GSTθ可降低HCT116细胞的恶性程度,使其对血清及营养物质的需求增加。     

白花蛇舌草提取液诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的实验研究

目的:探讨中药白花蛇舌草提取液(HDE)诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的作用及初步作用机制。方法:MTT法检测HDE对人肺癌SPC-A-1细胞生长的影响;采用倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态变化;用DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂的情况(DNA梯状条带);用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用免疫组化分析bcl-2基因在SPC-A-1细胞中的表达。结果:HDE抑制SPC-A-1细胞的生长,其效果与白花蛇舌草的浓度和作用时间相关;倒置、荧光镜下SPC-A-1细胞出现细胞凋亡早期形态学改变;琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“ladder”;流式检测到凋亡峰,且凋亡率呈浓度依赖性;免疫组化结果提示HDE能使SPC-A-1细胞bcl-2蛋白表达降低。结论:一定浓度的HDE对SPC-A-1细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与相关基因bcl-2的调控有关。     

蛇莓对人结肠癌RKO细胞失巢凋亡作用的实验研究

目的观察蛇莓对人结肠癌RKO细胞悬浮生长及失巢凋亡作用。方法不同浓度蛇莓作用RKO细胞,CCK-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）法检测蛇莓对RKO细胞悬浮生长作用,双嵌入剂乙锭均二聚物（Ethidium homodimer-1,EthD-1）染色检测失巢凋亡,比色法检测半胱天冬酶-3（Caspase-3）活性,二氯氢化荧光素二酯染色法结合荧光酶标仪检测细胞内活性氧的产生。结果蛇莓可显著抑制RKO悬浮生长,呈剂量依赖性。蛇莓作用后悬浮生长RKO细胞吸收EthD-1散发红色荧光,部分细胞可见核碎裂,呈现凋亡形态改变;蛇莓同时可显著增强RKO细胞Caspase-3活性,升高细胞内活性氧水平。结论蛇莓可抑制RKO细胞悬浮生长,促使RKO细胞发生失巢凋亡,可能与活化Caspase-3以及升高细胞内活性氧水平相关。