炎症积水的输卵管上皮组织中Toll样受体及信号转导通路的表达

目的 分析炎症积水的输卵管上皮组织中Toll样受体(TLR)基因和关键信号转导分子的表达格局.方法 根据沙眼衣原体IgG检测(CAT)结果,将输卵管炎症积水患者分为CAT阳性组(n=20)和CAT阴性组(n=8);另设正常对照组(n=13).运用实时定量PCR方法.分析输卵管上皮组织中TLR1～10及NF-KB、MyD88、TRAF、IRAK mRNA的表达.结果 CAT阳性组和阴性组TLR2 mRNA表达均显著低于对照组(P<0.001);而CAT阳性组与阴性组比较,差异无统计学意义(P>0.05).CAT阳性组TLR4 mRNA表达显著低于对照组(P<0.001)和CAT阴性组(P<0.05);而CAT阴性组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).对照组MyD88 mRNA表达明显高于CAT阳性组(P<0.01)和CAT阴性组(P<0.05);而CAT阳性组与阴性组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 输卵管炎症积水可能与既往输卵管感染后机体自身免疫损伤及感染局部TLR2、4介导的免疫反应不足有关.     

子宫内膜异位症患者内膜组织中TLR4及MyD88的表达

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)介导的髓样分化因子88(MyD88)通路在正常子宫内膜、子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜及异位内膜组织中的表达及其临床意义。方法:选取EMs患者(EMs组)45例(Ⅰ、Ⅱ期15例,Ⅲ、Ⅳ期30例),取其异位内膜组织45例(异位内膜组)、在位内膜组织30例(在位内膜组),另取同期因子宫纵隔行宫腔镜手术患者的正常内膜组织30例(对照组)。采用半定量RT-PCR及免疫组化SP法检测TLR4及MyD88 mRNA和蛋白在上述组织中的表达情况。结果:异位内膜组、在位内膜组及对照组TLR4与MyD88 mRNA和蛋白的表达水平比较,差异有统计学意义(FmRNA=37.541、38.669,F蛋白=46.707、31.046,P均<0.001),且异位内膜组和在位内膜组均高于对照组,异位内膜组高于在位内膜组(P均<0.01)。EMsⅠ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期患者异位内膜组织中TLR4与MyD88 mRNA及蛋白的表达水平比较,差异均无统计学意义(tmRNA=1.373、1.574,t蛋白=0.299、0.066,P均>0.05)。在位内膜组中TLR4与MyD88 mRNA及蛋白的表达均呈正相关(r分别为0.594和0.560,P均<0.001),异位内膜组中TLR4与MyD88 mRNA及蛋白的表达均呈正相关(r分别为0.812和0.639,P均<0.001)。结论:TLR4及MyD88的高表达可能在EMs的发病机制中起着重要作用。     

高糖对肾小管上皮细胞Toll样受体4表达及其信号通路的影响

目的:通过研究高糖对肾小管上皮细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)表达及其信号通路的影响,初步探讨TLR4与高糖促进肾脏细胞分泌炎症因子的关系.方法:小鼠近曲肾小管上皮细胞(MCT细胞)在高糖环境下培养后,用Westrn Blot分析TLR4蛋白的表达,Western Blot和免疫沉淀法分析TLR4与髓样细胞分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)的相互作用,以了解TLR4信号通路是否被激活.结果:高糖可使MCT细胞TLR4蛋白的表达上调,高糖环境下MyD88依赖的TLR4信号通路被激活.结论:TLR4与高糖促进肾脏细胞分泌炎症因子有关,TLR4参与糖尿病肾病的发病.     

TLR4、MyD88和ERK1/2表达与EB病毒感染结肠癌的相关性

目的 探讨TLR4、MyD88和ERK1/2的表达与EB病毒感染结直肠癌的相关性。 方法 通过336例结直肠癌和103例正常肠黏膜组织制备组织芯片,运用原位分子杂交检测EBER表达,分析EBER表达与结肠癌患者临床病理参数及预后的相关性,并用免疫组化SP法检测TLR4、MyD88和ERK1/2表达,分析三因子与EB病毒感染结直肠癌的相关性。 结果 在336例结直肠癌患者中,TLR4、 MyD88、ERK1/2、EBER阳性均较正常黏膜组(对照组)升高(P<0.05)。EBER阳性与女性、浸润浆膜、有淋巴结转移和临床TNM Ⅲ、Ⅳ 分期呈正相关(P<0.05)。对336例结直肠癌患者预后分析发现EBER阳性与患者无病生存率和总生存率低水平密切相关(P<0.05)。同时,在25例EBER阳性结直肠癌组织中,TLR4、MyD88、ERK1/2分别在22例(P=0.025)、25例(P=0.028)、19例(P=0.092)中阳性表达。 结论 EB病毒感染阳性与结直肠癌进展密切相关,特别是女性患者是影响患者预后的独立危险因素。TLR4、MyD88表达上调可能在EB病毒感染结直肠癌中发挥重要作用。     

三阴性乳腺癌(TNBC)组织中CCR4和CCR7的表达及意义

 目的 探讨三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)组织中CC族趋化因子受体4 (cc chemokine receptor 4,CCR4)和CCR7的表达意义及其与临床病理特征和预后之间的相关性。方法 应用免疫组织化学染色SP法检测TNBC、HER 2过表达型乳腺癌、TNBC癌旁组织及乳腺良性肿瘤(3组,各38例)和管腔型乳腺癌组织(40例)中CCR4和CCR7的表达。结果 在TNBC组织中,CCR4和CCR7的表达率分别为47.4%(18/38)和50%(19/38),与非TNBC组相比,差异有统计学意义(P值分别为0.001和0.004)。CCR4表达与TNBC肿瘤直径(P=0.023)、腋窝淋巴结转移(P=0.006)、肿瘤分期(P=0.016)和远处转移(P=0.028)相关。Kaplan Meier生存分析显示CCR4表达与TNBC患者总生存率(overall survival,OS)相关(P=0.018)。CCR7表达和TNBC患者的腋窝淋巴结转移相关(P=0.038),而与TNBC患者无病生存率(disease free survival,DFS)和OS无关。多因素分析显示腋窝淋巴结转移是TNBC患者DFS的独立预测因素(P=0.025),而CCR4是TNBC患者OS的独立预测因素(P=0.022)。结论 TNBC中CCR4和CCR7的表达与腋窝淋巴结转移相关;CCR4可作为TNBC患者预后的独立预测指标。     

结直肠癌组织Toll样受体4和髓系分化蛋白88mRNA检测

目的 通过检测结直肠癌组织Toll样受体4(TLR4)mRNA和髓系分化蛋白88(MyD88)mRNA,并分析其与分化、分期、转移的相关性,阐明TLR4和MyD88在结直肠癌发生发展中的作用.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测62例结直肠癌和25例癌旁正常组织TLR4mRNA和MyD88mRNA.结果 结肠...     

激素受体阳性/人表皮生长因子受体2阴性乳腺癌临床病理特征及预后

目的: 探讨激素受体阳性/人表皮生长因子受体2阴性(hormone receptor-positive/human epidermal growth factor receptor 2-negative, HR +/HER2 -)乳腺癌患者临床病理特征及预后。方法: 收集2008年1月至2017年12月北京大学第一医院乳腺疾病中心连续诊治的3 035例浸润性乳腺癌患者,对临床病理信息完善的HR +/HER2 -患者的重要临床病理参数及其预后意义进行分析。结果: 1 920例(63.26%)HR +/HER2 -乳腺癌患者中资料完善者1 624例,其中124例(7.64%)出现复发转移,63例死于该病,5年总生存率和无病生存率分别为93.0%及92.6%。pT1及2期占92.80%,pN0期占69.03%;组织学非特殊型占89.66%,分级1、2、3级分别为30.11%、55.60%和14.29%;ER阴性、低表达、高表达患者分别占1.60%、2.09%、96.31%,PR阴性、低表达、高表达分别占6.83%、10.47%、82.70%;Ki67指数＜10%、≥10%且 < 20%、≥20%者分别占19.52%、32.02%和48.46%。预后及生存分析显示, pT1期复发转移风险较pT3组低,pT2和pT3组较pT1组无病生存期(disease-free survival,DFS)短,易复发转移;pN0、pN1及pN2期复发转移风险均较pN3期低,与DFS呈负相关;组织学1及2级复发转移风险较3级低,与DFS呈负相关;Ki67指数≥20%更易复发转移。ER在HR +/HER2 -乳腺癌中预后意义不明显,但PR阴性和低表达更易复发转移,生存分析显示,PR表达水平＜10%患者的DFS及总生存期(overall survival,OS)最短,10%~60%次之,＞60%最长。124例复发转移者以骨转移多见(55例,44.35%),而肝转移者(30例,24.20%)预后最差。结论: 本研究表明,pT分期、pN分期、组织学分级、HR表达水平、Ki67指数等临床病理参数是HR +/HER2 -乳腺癌的重要预后因素,但意义有所不同,其中pN分期和组织学分级有独立预后价值,PR阳性表达水平具有重要预后和风险预测价值,随PR表达水平升高(＜10%、10%~60%、＞60%),DFS及OS递增,复发转移风险递减,PR表达＞60%者DFS及OS最长,复发转移风险最低,PR危险性分层具有独立预后意义。     

白细胞介素18经toll样受体4/髓样细胞分化因子88/核转录因子-κB通路促进支气管平滑肌细胞增殖与迁移

目的 探讨白细胞介素18 (IL-18)经toll样受体4 (TLR4)/髓样细胞分化因子88 (MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路促进支气管平滑肌细胞(BSMC)增殖与迁移。方法 采用不同浓度IL-18、不同时间处理BSMC,确定实验条件。细胞计数试剂盒(CCK-8)测定细胞活性,Transwell小室检测细胞迁移,Western blot法检测相关蛋白的表达。抑制剂Eritoran特异性阻断TLR4/MyD88/NF-κB通路,检测TLR4/MyD88/NF-κB通路阻断后对细胞周期、细胞增殖、细胞迁移及TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白的表达的影响。结果 IL-18可促进支气管平滑肌细胞细胞增殖,提高细胞迁移能力,上调TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平(P<0.05)。Eritoran可抑制IL-18引起的BSMC细胞增殖,上调G1期细胞百分比,下调S期、G2期细胞百分比,抑制细胞迁移,降低TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平(P<0.05)。结论 IL-18可能通过上调TLR4/MyD88/NF-κB通路中信号分子的表达,促进了平滑肌细胞增殖和迁移。     

阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞TLR4及下游MyD88依赖性信号转导通路的影响

目的研究阿托伐他汀(ATV)对Toll样受体4(TLR4)及其下游信号转导通路主要元件下游髓样分化因子88(MyD88)及肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)表达的影响,探讨ATV防治动脉粥样硬化(AS)的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,用脂多糖(LPS)刺激并加入ATV干预24h,收集细胞,用荧光定量PCR方法测定TLR4、MyD88及TRAF-6mRNA表达;用Western blotting法测定TLR4、MyD88及TRAF-6蛋白表达。结果用LPS刺激人脐静脉内皮细胞后,引起TLR4、MyD88和TRAF-6的高表达(与空白对照组比较差异有统计学意义,P<0.01),用ATV干预以后显著抑制TLR4、MyD88及TRAF-6的表达(与模型组比较差异有统计学意义,P<0.01)。结论 ATV可阻断TLR4高表达,同时阻断TLR4胞内信号转导的MyD88依赖性途径,这可能是ATV抗AS的作用机制之一。     

miR-210高表达与乳腺癌预后关系的meta分析

目的:探讨miR-210高表达与乳腺癌患者预后的关系?方法:检索PubMed?EMBASE?Web of Science和CNKI等数据库中关于miR-210高表达与乳腺癌预后关系的文献资料,按纳入标准筛选出相关文献,提取总生存率 (overall survival,OS)?无复发生存率(recurrence-free survival,RFS)和无病生存率(disease-free survival,DFS)的风险比(hazard ratio,HR)及其95%可信区间(CI),用Stata软件进行分析合并?结果:按标准共纳入文献6篇,病例数585例,meta分析显示:和低表达组相比,miR-210高表达组OS的合并HR值为2.29(95%CI:0.89~5.91,P=0.086);miR-210高表达组DFS/RFS的合并HR值为2.81(95%CI:1.35~5.87,P=0.006)?结论:以现有相关研究结果的meta分析显示,miR-210的高表达是乳腺癌临床预后的不良因素?     

TLR4-MyD88-NF-kB信号通路与肝炎-肝纤维化-肝癌轴相关性研究进展

Toll样受体4(TLR4)-髓样分化因子88(MyD88)-核转录因子κB(NF-κB)信号通路是疾病理变反应中的关键通路,广泛存在于各组织细胞中,是介导炎性因子在细胞内与细胞之间相互表达的重要信号通路之一.研究发现TLR4-MyD88-NF-κB信号通路在肝免疫异常、炎症反应触发的肝损伤、肝星状细胞的活化及肝纤维化恶化与肝癌的发展中均有重要调节作用.该信号通路在"肝炎-肝纤维化-肝癌轴"(IFC轴)的动态变化与肝癌的转移中可能是一个关键的调节点.本文就TLR4-MyD88-NF-κB信号通路参与IFC轴疾病病理机制的最新研究进展作一综述,为以后相关研究提供参考.     

Toll样受体4活化增强乳腺癌细胞株MCF-7侵袭力的研究

目的:研究Toll样受体4(TLR4)在人类乳腺癌MCF-7细胞株中的表达及在肿瘤增殖和转移中的作用?方法:脂多糖(LPS) 刺激MCF-7细胞株,RT-PCR?Real-time PCR?FCS 和 Western blotting 检测TLR4在mRNA和蛋白水平表达变化;MTT检测细胞增殖;RT-PCR 和 real-time PCR检测基质金属蛋白酶(MMP-2)?MMP-9 和血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA表达并用ELISA检测培养上清中其蛋白表达水平;Western blot检测TLR4信号传导通路下游蛋白MyD88的表达;CBA测定细胞培养上清的炎性细胞因子;划痕实验检测癌细胞的生物学侵袭力?结果:实验表明,LPS刺激MCF-7细胞株能明显上调TLR4 mRNA和蛋白表达(P < 0.05)?MTT结果显示,LPS对癌细胞增殖没有影响?LPS激活TLR4后,MMP-2?MMP-9和VEGF在mRNA和蛋白水平的表达均明显上调 (P < 0.05)?划痕实验表明,LPS能显著增强MCF-7细胞株的划痕愈合能力?此外,LPS能诱导TLR4信号通路下游MyD88蛋白表达的显著上调(P < 0.05),IL-6的分泌增多(P < 0.05)?结论:LPS能明显增强MCF-7细胞株TLR4的表达,增强癌细胞的侵袭力?     

肝豆状核变性蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与预后的关系

目的研究肝豆状核变性蛋白(W ilson d isease prote in),也称P型铜转运ATP酶(Copper-trans-porting P-type adenosine triphosphatese,ATP7B),在乳腺癌组织中的表达,评估其对预测乳腺癌预后的意义。方法采用免疫组织化学方法(immunoh istochem istry,IHC)检测60例乳腺癌患者手术切除的乳腺癌组织中ATP7B的表达,并分析其与临床、病理特征的关系及对预后的影响。结果(1)ATP7B在乳腺癌组织中的阳性表达率为36.7%(22/60);(2)组织学低分化者ATP7B表达水平明显高于中高分化患者(P<0.01),ATP7B表达与月经状况、肿瘤大小、腋淋巴结转移和激素受体状况均无关(P>0.05);(3)Kap lan-M e ier生存分析结果表明ATP7B和无病生存期和总生存期均密切相关(P<0.05);(4)在COX多因素分析中ATP7B表达、肿瘤大小、腋淋巴结转移、组织学分级和雌激素受体状况与无病生存期和总生存期均明显相关(P<0.01)。结论ATP7B在乳腺癌组织中具有一定的表达水平,可能是预测乳腺癌患者预后的独立因素。     

肝细胞癌组织中TLR4、MyD88、NF-kB表达量及其与临床病理特征的相关性分析

目的  研究肝细胞癌组织中TLR4、MyD88、NF-κB表达量及其与临床病理特征的相关性。方法  选择肝细胞癌患者并采集血清、肝细胞癌组织、癌旁组织,选择健康志愿者并采集血清,检测肝脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA含量及血清中AFP、TK1、GP73、ASPH的含量。结果  肝细胞癌组织中TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA含量均高于癌旁组织;TNM III-IV期、低未分化、淋巴结转移的肝细胞癌组织中,TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA含量均高于TNM I～II期、高中分化、无淋巴结转移的肝细胞癌组织;肝细胞癌患者血清中AFP、TK1、GP73、ASPH的含量高于健康对照组,且与肝细胞癌组织中TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA含量呈正相关。结论  肝细胞癌组织中TLR4通路功能增强且与肝细胞癌的临床病理分期、血清肿瘤标志物含量密切相关。

     

乳腺癌临床病理特征对预后判断的价值

目的:分析乳腺癌患者术后临床病理学特征、治疗以及预后,探讨其预后的影响因素。方法:收集338例可手术的经病理证实的乳腺癌患者的临床及病理学资料,回顾性分析其临床及病理学特征、复发转移及生存情况,通过生存分析研究预后相关因素。结果:患者的随访时间为4～115个月,中位随访时间42个月,患者术后5年无病生存（DFS）率为77.46%,5年总生存（OS）率为81.69%。单因素分析结果显示,影响患者DFS及OS的因素包括:肿瘤大小、淋巴结转移数目以及放疗（P<0.01）,多因素分析结果显示肿瘤大小以及淋巴结转移数目是乳腺癌患DFS和OS的独立影响因素（P<0.01）。结论:肿瘤大小和淋巴结转移数目是影响乳腺癌患者预后的独立危险因素。     

三磷酸腺苷对脂多糖诱导内皮祖细胞表达炎症因子的影响及其机制

目的：分析三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导内皮祖细胞 (endothelial progenitor cells,EPCs)表达炎症细胞因子的影响,并探讨其机制。方法：采用密度梯度离心法分离人脐 血单个核细胞,用RT-PCR检测LPS(1 mg/mL)诱导EPCs表达炎症细胞因子的情况,低浓度的ATP(5 μmol/L)对LPS诱 导EPCs表达细胞炎症因子的影响,不同浓度(5,50 μmol/L)的ATP对EPCs中TLR4,MyD88和CD14 mRNA表达的影 响;Western印迹检测LPS(1 mg/mL)对EPCs表达TLR4调节蛋白MyD88和CD14的影响以及信号通路的活化情况,低浓 度ATP(1,5 μmol/L)对LPS诱导EPCs表达TLR4,MyD88和CD14的影响以及信号通路的活化情况。结果：EPCs高表达 TLR4,其配体LPS(1 mg/mL)显著上调IL-1β,MCP-1和ICAM-1的mRNA表达(均P<0.01),并呈时间依赖性上调MyD88和 CD14蛋白的表达,同时活化ERK和NF-κB信号通路。低浓度ATP抑制LPS诱导的IL-1β,MCP-1和ICAM-1 mRNA的表达 (均P<0.05),同时也下调LPS诱导的TLR4,MyD88和CD14蛋白的表达(P<0.01或P<0.05),并抑制LPS诱导的NF-κB信号 通路的活化(P<0.05)。结论：ATP在低浓度时通过负性调节TLR4信号通路而抑制LPS诱导的炎症细胞因子在EPCs中的 表达。     

髓样分化因子88在结直肠癌患者癌组织中的表达及其临床意义

目的：分析髓样分化因子88（MyD88）在结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中的表达,探讨其表达与结直肠癌患者临床病理参数和预后的关系,阐明MyD88表达的临床意义。方法：收集90例结直肠癌患者的癌组织及其相对应的癌远旁组织标本并分析其临床病理资料,免疫组织化学法检测MyD88在结直肠癌及癌远旁组织中的表达,应用Image-Pro Plus 6.0软件半定量分析MyD88在不同组织中的表达水平,采用Kaplan-Meier法对90例结直肠癌患者进行生存分析。结果：MyD88在结直肠癌组织中的表达水平明显高于癌远旁组织（P<0.01）;MyD88表达水平与结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤大小和组织学分化无明显关联（P>0.05）,MyD88表达水平与结直肠癌患者临床分期、T分期、M分期和淋巴结转移状态有关联（P<0.05）;MyD88高表达组结直肠癌患者生存率明显低于MyD88低表达组（P<0.05）。结论：MyD88在结直肠癌患者癌组织中高表达,且与患者的临床分期、T分期、M分期和淋巴结转移状态有关联。     

慢性胰腺炎患者胰腺和血清中TLR4信号通路关键因子 的检测及其意义

目的：检测慢性胰腺炎(CP)患者胰腺和血清中Toll样受体4(TLR4)信号通路关键应答基因的表达,阐明TLR4信号通路在CP发生发展过程中的意义。方法：收集24例CP和6例胰腺正常的良性病变患者的手术胰腺组织标本,分别进行TLR4 mRNA原位杂交和髓样分化蛋白88（MyD-88）、肿瘤坏死因子α（TNF-ɑ）免疫组织化学染色,利用电脑分析系统测量各个指标的积分光密度(IA)值。 采集84例CP患者及30例正常成人的空腹静脉血,ELISA法检测血清可溶性TLR4（sTLR4）、TNF-α、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素12（IL-12）的水平,分光光度法检测血浆内毒素脂多糖（LPS）的水平。分析血浆LPS水平与各细胞因子的相关性。结果：与正常对照组比较,CP组患者胰腺组织TLR4 mRNA、MyD-88、TNF-ɑ表达水平均显著增加(P<0.01), 分别是正常对照的4.2、6.1及10.2倍;末梢血LPS、sTLR4、TNF-ɑ、IL-6和IL-12水平与正常对照组比较均升高(P<0.05或P<0.01);Bivariate 相关分伴有内毒素血症的CP患者血浆LPS水平与血清TNF-α、IL-6、IL-12水平呈正相关关系(r=0.859,P<0.01;r=0.688,P<0.01;r=0.539,P<0.05)。结论：LPS-TLR4信号通路及应答基因产物在CP患者胰腺及外周血中均上调,其在CP急性发作期和炎症进展过程中发挥重要作用。