胃癌组织中miR-200a、miR-200b和miR-429的表达及临床意义北大核心CSCD

0 引言 胃癌是消化系统常见恶性肿瘤之一,2006年中国肿瘤发病和死亡资料分析显示,无论城市还是农村,胃癌的发病率和死亡率均居恶性肿瘤第二位,已成为我国今后恶性肿瘤防控的重点[1]。目前,胃癌的病因尚不明确,加之滞后的临床表现和诊断,以手术为主、放化疗为辅的综合治疗手段亦未能显著提高患者的5年生存率[2]。所以,探寻胃癌新特异性的分子标志物,为其早期诊断开辟新途径具有重要意义。     

血清miR-135及miR-601在胃癌患者中的表达及其诊断价值

背景与目的：胃癌是消化内科常见的恶性肿瘤。探讨血清miR-135及miR-601在胃癌患者中的表达及其诊断价值。方法：选取2016年1月1日—2019年9月30日三亚中心医院收治的胃癌患者152例,根据胃癌病情进展及临床病理学分期分为早期胃癌组（n=62）和进展期胃癌组（n=90）,Ⅰ～Ⅱ期（n=65）和Ⅲ～Ⅳ期（n=87）,无淋巴结转移组（n=73）和淋巴结转移组（n=79）。另选择96例非胃癌患者作为非胃癌组,60例健康体检正常者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）检测各组血清miR-135及miR-601表达水平,化学发光法测定糖类抗原72-4（carbohydrate antigen 72-4,CA72-4）及糖类抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9,CA19-9）水平,分析其对早期胃癌的诊断价值。采用Pearson相关分析来分析胃癌患者血清miR-135、miR-601水平与CA72-4及CA19-9的相关性。结果：与非胃癌组和对照组比较,胃癌组血清miR-135、miR-601、CA72-4及CA19-9水平均明显升高（P均<0.001）。进展期胃癌组血清miR-135（5.70±1.84 vs 3.83±1.12）、miR-601（11.28±3.73 vs 7.36±2.15）、CA72-4［（41.75±10.14）U/mL vs（17.82±4.93）U/mL］及CA19-9［（63.72±17.50）U/mL vs （35.84±10.36）U/mL］水平均明显高于早期胃癌组（均P<0.001）。Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者血清miR-135（6.10±1.90 vs 3.74±1.08）、miR-601（12.14±3.92 vs 7.05±2.04）、CA72-4［（44.68±12.35）U/mL vs（16.40±4.52）U/mL］和CA19-9［（68.53±19.13）U/mL vs（33.75±10.60）U/mL］水平均明显高于Ⅰ～Ⅱ期（均P<0.001）,而且Ⅱ期胃癌患者血清miR-135、miR-601、CA72-4及CA19-9水平均明显高于对照组（P<0.05）。淋巴结转移组血清miR-135（6.24±1.95 vs 3.65±0.97）、miR-601（12.60±4.13 vs 6.84±1.92）、CA72-4［（48.70±12.37）U/mL vs （14.85±4.20）U/mL］和CA19-9［（72.36±20.25）U/mL vs（31.60±10.17）U/mL］水平均明显高于无淋巴结转移组（均P<0.001）。受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线分析结果显示,血清miR-135、miR-601、CA72-4及CA19-9水平诊断早期胃癌的最佳截断值分别为3.78、7.14、17.63 U/mL、35.70 U/mL,四项联合诊断早期胃癌的 曲线下面积（area under curve,AUC）（0.920,95% CI：0.860～0.978）最大,其灵敏度和特异度分别为98.6%和77.4%。相关分析显示,胃癌患者血清miR-135、miR-601水平与CA72-4及CA19-9均呈正相关（r=0.748,P<0.001,r=0.694,P<0.001;r=0.815,P<0.001;r=0.716,P<0.001）。结论：胃癌患者血清miR-135、miR-601、CA72-4及CA19-9水平明显升高,四项联合检测有助于提高早期胃癌的诊断价值。     

胃癌患者血清中miR-106a的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌患者血清miR 106a表达及其与临床病理特征之间的关系。方法采用实时定量RT-PCR方法检测21例胃癌患者及10例健康人血清中miR-106a表达的水平。结果 实时定量RT-PCR方法能够检测到血清样本中微量miRNA的表达。21例胃癌患者miR-106a表达水平的中位数为0.34（0.17～0.69）,10例健康人为0.63（0.27～1.0）,两者差异有统计学意义（P=0.002）。在21例胃癌患者中,血清miR-106a表达水平与肿瘤分化程度有关,在低分化胃癌中的表达水平明显高于中分化胃癌（P=0.01）;血清miR-106a表达水平亦与血清CA724相关（P=0.03）,而与分期、性别、年龄无关（P＞0.05）。结论 采用实时定量RT PCR方法检测血清中miR-106a的表达敏感可靠。血清miR-106a作为新的生物学指标对于胃癌的诊断具有一定的价值。     

结肠癌患者血清中miR-30a、miR-106b的表达及其临床意义

目的:探讨结肠癌患者血清miR-30a、miR-106b的表达及其在结肠癌进展及预测患者预后中的价值.方法:选取2012年06月至2013年02月本院收治的接受结肠癌手术治疗的患者80例为研究对象,20例同期健康人群作为对照组.逆转录PCR法检测外周血血清中miR-30a、miR-106b的表达水平,分析患者血清miR...     

胃癌患者血清中miR-133a 水平及其与病理特征的相关性

目的：探讨血清中miR-133a 水平对胃癌的诊断价值及其与病理特征的相关性。方法：取2010 年3 月至2011 年4 月于南京医科大学附属常州市第二附属医院胃肠外科住院的胃癌手术患者94 例（胃癌组）,其中男64 例、女30 例,年龄32~82 岁,平均（61.72±8.59）岁;取30 例健康体检者作为对照组。实时荧光定量PCR法检测两组血清中miR-133a 水平,应用SPSS 22.0 和Graphpad 5.0 统计软件进行统计学分析。结果：胃癌患者血清中miR-133a 水平明显低于正常对照组（1.95±1.51 vs 4.47±0.56,P<0.01）。患者miR-133a 水平与其年龄、性别、肿瘤大小无明显相关性（P>0.05）,与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（均P<0.05）。受试者工作特征曲线（ROC）分析结果显示,miR-133a 在预测胃癌发生和淋巴结转移时具有较好的敏感性和特异性[ROC曲线下面积（AUC）分别为0.883(95% CI：0.8257~0.9402)和0.984（95% CI：0.9633~1.005）,均P<0.01]。miR-133a 高表达组患者5 年生存率显著高于miR-133a 低表达组（40.49% vs 19.37%,P<0.05）。结论：胃癌患者血清miR-133a 表达水平改变与胃癌的发生发展、临床病理特征及临床预后密切相关,miR-133a可能成为胃癌诊断及预后判断的液体活检标志物。     

HPV阳性宫颈癌组织中miR-34b的表达水平及其临床意义

目的:探讨miR-34b在HPV阳性宫颈癌组织中的表达水平及其对患者的临床意义.方法:收集65例HPV阳性宫颈癌组织标本和35例正常宫颈组织标本,采用Real-time PCR法测定miR-34b的相对表达水平,分析其与患者临床病理特征的关系以及对患者诊断、预后的价值.结果:miR-34b在HPV阳性宫颈癌组织中的相对...     

miR-200c在胃癌中的表达水平与患者临床病理特征的关系

目的:探讨miR-200c在胃癌组织中的表达水平与胃癌患者临床病理特征及无病生存期(diease free survial,DFS)的关系.方法:收集河北医科大学第四医院普外科2012年5月至2013年1月64例胃癌手术切除的标本及相关临床资料,采用实时荧光定量PCR技术检测miR-200c在胃癌组织和配对癌旁非癌组织中的表达.回顾性分析miR-200c表达水平与胃癌患者的临床病理特征及DFS相关性.结果:胃癌组织中miR-200c的表达水平显著低于癌旁非癌组织(3.29vs5.91,P＜0.01).miR-200c的表达水平与肿瘤TNM分期、浸润深度、转移和脉管瘤栓呈显著负相关(均P＜0.01).miR-200c高表达组患者中位DFS明显长于低表达组患者(22.0 vs 13.5个月,P＜0.01),其表达水平与患者DFS呈正相关(P＜0.01).结论:miR-200c在胃癌组织中低表达,其表达水平与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度和脉管瘤栓呈负相关,与DFS呈正相关,在胃癌的发生发展及预后中具有重要作用.     

miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨miR-19a和miR-19b在骨肉瘤组织及配对瘤旁组织中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法：收集32对骨肉瘤和配对的瘤旁组织,运用实时荧光定量PCR（qPCR）检测骨肉瘤组织及其瘤旁组织中miR-19a和miR-19b的表达,分析其与骨肉瘤临床病理特征的相关性及其临床意义。结果：qPCR结果显示骨肉瘤组织中miR-19a和miR-19b的平均表达量较瘤旁组织中均明显上调（P均 < 0.05）。二者的表达水平呈正相关（r=0.685,P=0.000）。miR-19a和miR-19b的表达与骨肉瘤病理分级之间存在正相关（r=0.478,P=0.027）;miR-19a的表达与临床分期呈正相关（r=0.365,P=0.031）且与预后相关。Cox回归多因素分析发现miR-19a可作为骨肉瘤患者预后的影响因子（P=0.037）。结论：miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中表达上调,在骨肉瘤的发生发展中可能发挥重要的作用,其中miR-19a可能作为骨肉瘤独立的预后标志物。     

肝细胞癌患者外周血中miR-30a、miR-106b的表达及其与预后的关系

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清miR-30a、miR-106b的表达及其与 预后的关系。方法:选取2015年6月-2017年2月本院收治的HCC患者80例为研究对象,20例同期健康人群作为对照组。荧光定量PCR检测外周血中miR-30a、miR-106b的表达水平,分析患者血清miR-30a、miR-106b水平与HCC临床病理的关系。分析HCC患者预后的影响因素以及血清miR-30a、miR-106b水平与HCC患者预后的相关性。结果:HCC患者血清miR-30a表达水平（1.03±0.02）低于正常人群（5.15±0.06）（P=0.00）;血清miR-106b表达水平（2.62±0.35）高于正常人群（1.15±0.06）（P=0.00）。miR-30a、miR-106b表达与患者肿瘤直径、组织分化类程度、肝内转移、淋巴结转移、甲胎蛋白（AFP）水平、门静脉癌栓、肿瘤数目及TNM分期有显著相关性(P＜0.05) 。miR-30a低表达组患者3年总生存率（39.8%）低于miR-30a高表达组（64.6%）（P=0.002）;miR-106b低表达组患者3年总生存率（75.8%）高于miR-106b高表达组（51.2%）（P=0.003）。二元Logistic回归分析提示,淋巴结转移、TNM分期、miR-106b及miR-30a水平是患者预后的重要影响因素。结论:miR-30a在HCC患者血清中低表达,miR-106b在HCC患者血清中高表达,与肿瘤的进展、预后不良有关。     

子宫内膜癌组织和血清中的CD26表达及其诊断价值

  目的  探讨人正常子宫内膜增生期、分泌期和子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)的病理不同分级组织中的CD26表达及血液中可溶性CD26(soluble CD26,sCD26)表达对EC发生、发展的诊断价值。  方法  收集2014年1月至2015年12月南通大学附属医院行诊断性刮宫或行手术治疗患者的子宫内膜组织标本,其中正常子宫内膜增生期和分泌期标本各30例、Ⅰ型EC的G1、G2、G3级组织标本各40例。应用免疫组织化学法检测组织中的CD26表达和验证其表达水平后,采集2016年1月至2017年9月经门诊体检的健康育龄女性和住院治疗Ⅰ型EC患者的血液标本,其中增生期及分泌期各20例、Ⅰ型EC的G1、G2级各20例、G3级15例。ELISA法检测其血清中sCD26表达。  结果  免疫组织化学法检测结果显示正常子宫内膜组织中分泌期的CD26表达水平>增生期(P < 0.05);Ⅰ型EC的G3级组织中的CD26表达水平>G2级>G1级(P < 0.05)。ELISA结果显示sCD26与Ⅰ型EC病理分级呈正相关(P < 0.05)。  结论  Ⅰ型EC组织及血清中的CD26表达水平与疾病进展呈正相关,血清中sCD26表达可作为EC诊断的标记物。      

miR-221在胃癌中的表达及临床诊断意义

目的:研究微小RNA-221（microRNA-221,miR-221）在胃癌中的表达及应用于胃癌临床诊断的潜在可能。方法:收集原发性胃癌患者及健康对照组血清标本各30例;miRNA 表达谱分析确定miR-221的差异化表达;利用多元线性回归模型分析miR-221与胃癌临床病理因素(性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、肿瘤部位、淋巴结转移及组织类型等)之间的关系。利用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-221诊断胃癌的敏感性及特异性;通过约登指数(Youden index)确定其最佳诊断截断值(cut-off value)。结果:miR-221在胃癌标本中的表达水平（4.52±1.78）显著高于健康对照组（2.38±1.37）,差异有显著统计学意义（P＜0.01）。miR-221的表达与胃癌患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位及组织类型等因素无明显相关性;而与TNM分期和淋巴结转移有显著相关性。miR-221诊断胃癌的截断值为4.214,诊断敏感性为76.3%,特异性为87.6%。结论:miR-221在胃癌中存在显著异常高表达,在诊断胃癌方面具有潜在临床应用价值。     

血清中microRNA-210表达水平对胃癌的诊断价值

目的:microRNA-210(miRNA-210)在胃癌组织中表达上调,血液中也能检测到miRNA-210的表达,本研究旨在探索血清中miRNA-210的表达水平对胃癌的诊断价值.方法:选取100例胃癌患者和100例健康成人,血清中miR-210的表达检测采用实时定量PCR法.评估循环血中miR-210用于胃癌诊断的敏感性、特异性,分析血清中miR-210对不同分期胃癌的诊断价值.结果:胃癌患者血清中miR-210较健康对照组显著升高,血清中miR-210对胃癌诊断的敏感性和特异性分别为85.6％和82.4％,血清miR-210对胃癌Ⅰ到Ⅳ期的阳性预测值分别为89.95％,90.31％,90.45％和91.21％.结论:血清miR-210可作为胃癌诊断的生物标志物.     

Novel diagnostic value of circulating miR-18a in plasma of patients with pancreatic cancer

Background:

Several recent studies have demonstrated that microRNAs (miRNAs) are stably detectable in the plasma/serum. We hypothesised that miR-18a in the plasma is a potential biomarker in patients with pancreatic cancer.

Methods:

miR-18a is located in the miR-17–92 cluster and reported to be highly expressed in pancreatic cancer tissues. This study was divided into three parts: (1) Confirmation of higher miR-18a levels in primary pancreatic cancer tissues and cell lines than in normal pancreatic tissues and a human fibroblast cell line. (2) Evaluation of the plasma miR-18a assay using quantitative RT–PCR by comparing plasma results obtained from 36 patients with pancreatic cancer and from 30 healthy volunteers. (3) Evaluation of the assay for monitoring tumour dynamics in patients with pancreatic cancer.

Results:

(1) The expression of miR-18a was significantly higher in pancreatic cancer tissues (P=0.012) and pancreatic cancer cell lines (P=0.015) than in normal tissues and fibroblasts. (2) Plasma concentrations of miR-18a were significantly higher in pancreatic cancer patients than in controls (P<0.0001). The value of the area under the receiver-operating characteristic curve (AUC) was 0.9369. (3) Plasma levels of miR-18a were significantly lower in postoperative samples than in preoperative samples (P=0.0077).

Conclusion:

Circulating miR-18a might provide new complementary tumour markers for pancreatic cancer.     

miR-26a/b调控p53/MDM2通路对胃癌细胞凋亡的影响

目的 探讨miR-26a/b调控p53/MDM2通路对胃癌细胞凋亡的影响。方法 实时荧光定量PCR检测胃癌细胞系MGC803、MKN-45和MKN-28中miR-26a/b的表达水平,荧光素酶报告系统分析miR-26a/b与MDM2 3’非翻译区（3’UTR）的结合情况;将化学合成miR-26a/b前体分子mimics和无关序列转染胃癌细胞MKN-45,化学合成miR-26a/b inhibitor转染胃上皮细胞GES-1后,Western blotting检测MDM2、p53及其下游分子p21和Bcl-2的表达,MTT法检测转染24、48、72 和96 h的细胞增殖情况;通过Annexin Ⅴ/PI双染检测miR-26a/b对MKN-45细胞凋亡情况。结果 与永生化胃上皮细胞GES-1相比,miR-26a/b在肿瘤细胞系MGC803、MKN-45和MKN-28中的表达均下调,在MKN-45中表达水平最低;荧光素酶活性检测显示,miR-26a/b过表达抑制MDM2 3’UTR报告载体（Wild）的荧光素酶活性,而对3’UTR突变型报告载体（Mutation）荧光素酶活性无明显影响。miR-26a/b抑制MKN-45细胞中MDM2表达并增强p53及下游分子表达,而在GES-1细胞中抑制miR-26a/b可以增强MDM2表达,降低p53及下游分子表达。MTT结果显示,miR-26a/b抑制MKN-45细胞的增殖,miR-26a/b inhibitor则明显促进GES-1细胞的增殖。通过AnnexinⅤ/PI检测细胞凋亡发现,miR-26a/b过表达的MKN-45细胞的凋亡率高于对照细胞（P＜0.01）。结论 miR-26a/b 能与MDM2 3’UTR 特异结合,调控p53/MDM2通路影响胃癌细胞的增殖及凋亡。     

癌胚抗原糖链抗原CA199和CA724联合检测在胃癌诊断中的价值

目的分析血清癌胚抗原(CEA)、糖链抗原CA199和CA724联合检测在胃癌诊断中的价值。方法选取2011年2月到2013年2月间收治的、经临床检查确诊为胃癌的84例患者,胃良性病变者80例,另选取80例健康人作为对照组。采用电化学发光法检测患者血清中CEA、CA199和CA724含量,分析CEA+CA199、CEA+CA724、CA199+CA724及CEA+CA199+CA724等不同组合联合方式的胃癌诊断价值。结果胃癌组患者血清中CEA、CA199和CA724含量分别为(48.1±21.2)ng/ml、(98.4±12.2)U/ml和(39.8±19.6)U/ml,均明显高于胃良性病变组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。3项指标联合检测诊断胃癌的准确率为86.2%,特异度为88.9%,敏感度为84.1%,准确率和敏感度明显高于两种肿瘤标志物联合检测,差异有统计学意义(P<0.05)。3项指标不同组合方式联合检测的特异度无明显差异(P>0.05)。结论 CEA、CA199和CA724联合检测对胃癌诊断具有优越性,而对胃良性病变仅有一定的指导意义。     

Embryonal serum alpha-globulin in cancer patients: diagnostic value

Sera of 308 patients, of whom 242 were suffering from various types of tumours and 66 from non-cancerous diseases, were tested for the presence of αf-globulin. The reaction was positive in 17 out of 28 patients with primary cancer of the liver. Among these there were 18 cases with tumours of the hepatocellular type, and 14 of these gave a positive αf-globulin reaction. The test was negative in 67 patients with metastatic liver tumours. This confirms Tatarinov's (1964) findings indicating that αf-globulin is detected in sera of patients with primary hepatocellular carcinoma. In addition, αf-globulin was found in some patients with mixed hepatocellular and cholangiocellular carcinoma. The fact that the αf-globulin test is usually positive in hepatocellular and mixed liver carcinomas and negative in metastatic liver tumours makes it potentially useful for the differential diagnosis of liver tumours. αf-globulin was found also in the blood of patients with testicular teratoblastoma, which exhibited some elements of embryonal carcinoma. This novel finding cannot be interpreted as yet. The test was negative in other types of testicular tumours.