TFF1和TFF3在结直肠癌中的表达与临床病理特点及预后的关系

  目的  检测三叶因子1（trefoil factor,TFF1）和三叶因子3（TFF3）在结直肠癌组织、癌旁组织及转移淋巴结中的表达,评价其与肿瘤发生、转移和预后的关系。  方法  采用免疫组织化学SP法检测65例结直肠癌、30例癌旁组织、25例转移淋巴结中TFF1和TFF3的表达,分析二者表达的差异及其与临床病理特征和预后的关系。  结果  TFF1在癌旁组织、癌组织和转移淋巴结中表达逐渐增高（26.7%,70.8%,96%,两两比较均P < 0.05）。癌组织和转移淋巴结与癌旁组织比较,TFF3表达率均有降低（100% vs. 84.6%或80%,均P < 0.05）,癌组织和转移淋巴结之间差异无统计学意义（P>0.05）。TFF1在结直肠癌中的表达仅与肿瘤分化程度相关（P < 0.05）;TFF3表达与淋巴结转移及TNM分期有关（均P < 0.05）。TFF1在结直肠癌中的表达与TFF3呈负相关（P=0.014,r=-0.291）。TFF1表达水平与总生存率无相关性（P=0.639）,而TFF3表达水平与总生存率有关（P=0.045）。Cox比例风险模型单因素分析显示,浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期等为影响预后的相关因素。多因素分析显示,淋巴结转移、远处转移、TNM分期和TFF3为预后的影响因素。  结论  TFF1和TFF3表达率与结直肠癌的发生、转移和预后密切相关。两者可能在结直肠癌的侵袭、转移中存在共同作用,相互影响。      

非小细胞肺癌中lncRNA DLEU1的表达对肿瘤细胞转移的影响

  目的  研究长片段非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）淋巴细胞白血病缺失基因1（deleted in lymphocytic leukemia 1,DLEU1）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中的表达模式和临床意义,并进一步评估其对肿瘤转移的影响。  方法  42例NSCLC患者配对的癌组织和癌旁组织于2008年1月至2012年12月在中南大学湘雅三医院经手术切除获得。采用实时定量聚合酶链反应检测NSCLC组织和细胞中DLEU1的表达特征。运用统计学方法分析DLEU1的表达与NSCLC患者临床病理特征及生存时间的关系。通过体外伤口愈合和细胞侵袭试验分析DLEU1对NSCLC细胞迁移及侵袭的影响。运用蛋白质印迹法检测DLEU1对NSCLC细胞上皮间质转化（EMT）的标志物（E-钙粘蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白）表达量的影响。  结果  42例NSCLC样本中,DLEU1的表达在35例中表现出上调（83.33%）,而在7例中表现出下调（16.67%）。DLEU1在NSCLC癌组织的表达量是癌旁组织的2.11倍（P < 0.05）。DLEU1在4种NSCLC细胞系（A549、H1299、SPCA1和H358）的表达量均高于正常肺16HBE上皮细胞,其中,A549细胞中DLEU1表达量最高（P < 0.05）。高表达的DLEU1与淋巴结转移呈正相关（P < 0.05）,但与其他参数无显著相关性,包括患者性别、年龄、吸烟史、原发肿瘤大小、组织学分级和TNM分期。与低DLEU1表达组患者相比,高表达组患者生存时间显著缩短（P < 0.05）。与对照组相比,体外干扰DLEU1的表达可显著抑制A549和SPCA1细胞的迁移和侵袭能力（P < 0.05）。与对照组相比,体外干扰DLEU1可显著增加A549细胞中E-钙黏蛋白表达量,而降低N-钙黏蛋白和波形蛋白表达量（P < 0.05）。  结论  DLEU1在NSCLC组织和细胞系中表达上调,并与患者淋巴结转移和生存时间相关,且具有通过EMT促进肿瘤细胞迁移和侵袭的功能,表明DLEU1可能作为NSCLC的潜在治疗靶点。      

ALC1蛋白在食管鳞癌中的表达及其对细胞增殖?侵袭?迁移的影响

  目的  探讨ALC1（amplified in liver cancer 1）在食管鳞癌组织中的表达及与临床病理特征及总生存率关系,检测过表达ALC1基因对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。  方法  采用免疫组织化学方法检测245例食管鳞癌组织及癌旁组织中ALC1蛋白的表达,并探讨其与食管鳞癌患者性别、年龄、分化程度、浸润深度、TNM分期、远处淋巴结转移关系及总生存率关系;采用MTT法、克隆形成实验、Transwell实验及细胞划痕实验等观察高表达ALC1基因在食管癌细胞中的增殖、侵袭及迁移作用。  结果  ALC1蛋白在食管癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织（41.6% vs. 21.2%,P < 0.05）;ALC1的高表达与肿瘤的浸润深度、TNM分期和淋巴结转移明显相关（P < 0.05）。ALC1高表达的食管鳞癌患者总生存率低。ALC1基因能够促进KYSE30食管癌细胞过度增殖、侵袭和迁移。  结论  ALC1表达升高可能与食管鳞癌的发生、发展相关,导致总生存率下降,高表达的ALC1基因增强KYSE30食管癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,检测ALC1可能为食管癌预后判断提供依据。      

半胱氨酰白三烯受体在乳腺癌组织中的表达及意义

  目的  通过临床病例的研究, 检测CysLT1R和CysLT2R在乳腺癌中的表达情况, 并分析CysLT1R和CysLT2R与乳腺癌患者病理特征及预后的关系。  方法  采用实时荧光定量PCR方法, 从mRNA水平上检测90例原发乳腺癌组织和30例匹配的癌旁组织中CysLT1R和CysLT2R基因的表达量, 分析二者与临床病理学参数之间的关系, 以及与乳腺癌患者预后的关系。  结果  乳腺癌组织CysLT1R基因的表达明显高于癌旁组织, 乳腺癌组织CysLT2R基因的表达明显低于癌旁组织, 两者差异具有统计学意义（P < 0.01）。乳腺癌组织中CysLT1R的表达程度与肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移、TNM分期的表达呈正相关（P < 0.05）, CysLT2R的表达程度与肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移的表达呈负相关（P < 0.05）。Kaplan-Meier生存分析结果显示, CysLT1R mRNA高表达者的总的5年生存率显著低于低表达水平者（P=0.035）, CysLT2R mRNA高表达者的总的5年生存率显著高于低表达水平者（P=0.025）。  结论  CysLT1R和CysLT2R可作为乳腺癌判断预后的分子标志物。      

胃癌组织中SNCG和CXCR4 mRNA的表达及临床意义

  目的  研究SNCG和CXCR4在胃癌和正常胃黏膜组织中的表达,探讨其在胃癌发生、发展、浸润转移中的作用。  方法  应用RT-PCR法检测不同组织中SNCG和CXCR4 mRNA的表达情况。  结果  SNCG和CXCR4 mRNA在胃癌组织中的表达量明显高于正常胃黏膜组织（P < 0.01）;胃癌组织中SNCG mRNA的表达量与癌组织的浸润深度和淋巴结转移有关（P < 0.05,P < 0.01）,CXCR4mRNA的表达量与淋巴结转移有关（P < 0.01）;胃癌组织中SNCG mRNA与CXCR4 mRNA的表达量呈正相关（r=0.346,P < 0.05）。  结论  SNCG和CXCR4在胃癌组织中高表达,可能与胃癌的发生、发展、浸润、转移密切相关。      

凝血因子Ⅲ在非小细胞肺癌高凝状态患者外周血中的表达及其临床意义

  目的  研究凝血因子Ⅲ在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）高凝状态患者外周血中的表达水平,并探讨其表达水平与临床病理特征和生存期的关系。  方法  选取2013年1月至2014年10月云南省肿瘤医院病理和生化检测证实为NSCLC高凝状态患者74例,NSCLC无高凝状态患者42例作为研究对象,酶联免疫法检测血清凝血因子Ⅲ的表达水平,分析其与NSCLC临床病理特征和预后的关系。  结果  化疗前NSCLC高凝状态患者血清凝血因子Ⅲ为（560.32~200.34）ng/L,显著高于无高凝状态患者（463.29~159.22）ng/L的表达水平（P=0.008）,且显著高于化疗后凝血因子Ⅲ（471.39±160.31）ng/L的血清表达水平（P & #60;0.001）;凝血因子Ⅲ在NSCLC高凝状态患者血清中的表达水平与淋巴结转移（P=0.026）、远端转移（P=0.025）和TNM分期（P= 0.007）有关,且与凝血酶原时间（PT）（r=-0.638,P=0.032）、活化部分凝血酶时间（APTT）（r=-0.702,P=0.028）呈负相关,与纤维蛋白原（FIB）（r=0.715,P=0.008）、血小板（PLT）（r=0.597,P=0.007）呈正相关;凝血因子Ⅲ高表达水平的NSCLC高凝状态患者1~3年总生存期显著低于低表达患者（P & #60;0.05）。  结论  NSCLC高凝状态患者血清凝血因子Ⅲ表达水平与淋巴结转移和TNM分期有关,对患者生存期具有预测的指导意义。      

胰腺癌组织中PSAT1表达及其介导的细胞增殖侵袭作用机制研究

  目的  探讨胰腺癌磷酸丝氨酸转氨酶1（phosphoserine aminotransferase 1,PSAT1）表达及其介导的增殖、侵袭作用机制。  方法  采用免疫组织化学染色检测2013年7月至2017年7月98例胰腺癌组织和癌旁组织PSAT1表达,分析PSAT1表达与胰腺癌临床资料、总体生存率、无病生存率的关系。分别向胰腺癌细胞BxPC-3、SW1990转染PSAT1-siRNA,研究敲低PSAT1表达对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,Western blot检测敲低PSAT1对胰腺癌细胞PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达的影响。  结果  PSAT1在胰腺癌组织中阳性表达率为69.4%（68/98）,明显高于癌旁组织的阳性表达率5.0%（5/98）,两者比较差异具有统计学意义（χ2= 86.638,P < 0.001）。PSAT1表达阳性率与淋巴结转移、TNM分期有关（P < 0.05）;PSAT1高表达的胰腺癌患者总生存期和无病生存期明显低于PSAT1低表达患者（P < 0.05）。Cox多因素结果显示,PSAT1表达是影响胰腺癌总体生存率和无病生存率的危险因素（均P < 0.05）。在胰腺癌BxPC-3和SW1990细胞中,与NC-siRNA组比较,PSAT1-siRNA组细胞增殖能力、迁移能力和细胞侵袭能力明显减弱,差异具有统计学意义（P < 0.05）。同时PSAT1-siRNA组p-Akt、p-mTOR蛋白表达明显低于NC-siRNA组,差异具有统计学意义（P < 0.05）。  结论  PSAT1在胰腺癌组织和细胞中呈高表达,PSAT1可能通过调节PI3K/Akt/mTOR通路参与胰腺癌细胞的增殖和侵袭。      

IL-23和IL-17在结直肠癌患者中的表达及意义

  目的  检测结直肠癌患者外周血和肿瘤组织中IL-23、IL-17的含量,探讨其与临床病理特征的相关性。  方法  24例对照组和56例结直肠癌患者组。用ELISA法检测患者和对照组外周血及患者正常黏膜组织与肿瘤组织培养液中的IL-23、IL-17水平。  结果  结直肠癌患者外周血和肿瘤组织培养液中IL-23和IL-17水平分别高于相应的对照组（P < 0.01）和正常黏膜组（P < 0.05）。结直肠癌患者外周血中IL-17水平与淋巴结转移情况及TNM分期相关（P < 0.05）,但IL-23水平与患者各项临床病理参数无相关性（P>0.05）。肿瘤组织培养液中IL-17水平与肿瘤分化程度、淋巴结转移情况及TNM分期相关（P < 0.05）,而IL-23水平仅与TNM分期相关（P < 0.05）。  结论  IL-23和IL-17可能参与了结直肠癌进展的免疫病理过程。      

HDAC6与P21WAF1在胃癌组织中表达及意义

  目的   探讨HDAC6与P21WAF1在胃癌发生、发展中的作用及其相关性，为胃癌的早期诊断、治疗和判断预后提供依据。  方法   应用SP免疫组化法分别检测40例胃癌、30例癌前病变组及32例正常胃黏膜组中HDAC6及P21WAF1蛋白的阳性表达情况。  结果   HDAC6组织表达阳性率在胃癌，癌前病变及正常对照组依次降低，分别为65.0%，43.3%，15.6%（P < 0.01），P21WAF1组织表达阳性率在胃癌，癌前病变及正常对照组依次升高，分别为45.0%，63.3%和81.3%（P < 0.01）。HDAC6的表达在分化程度越低、分期越高和淋巴结转移胃癌组织中显著升高（P < 0.05）；P21WAF1蛋白阳性表达则相反，在分化程度越低、分期越高和淋巴结转移胃癌组织中显著降低（P < 0.05）。胃癌组织中HDAC6与P21WAF1的表达呈负相关（r=-0.495，P < 0.01）；癌前病变黏膜组织中HDAC6与P21WAF1的表达呈负相关（r=-0.451，P < 0.05）。  结论   HDAC6与P21WAF1的异常表达可能与促进胃癌的发生、发展和浸润转移有关。HDAC6可能通过下调P21WAF1的表达，导致并促进胃癌的发生发展。HDAC6和P21WAF1可能作为胃癌诊断和预后判断的指标及胃癌治疗的新靶点。      

NSCLC中SSTR2和SSTR5的表达与微血管密度及预后的相关性

  目的  检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)组织生长抑素受体(somastostatin receptor, SSTR)亚型SSTR2、SSTR5的表达, 探讨其与肿瘤新生血管程度的关系及对临床预后判断的价值。  方法  免疫组织化学S-P法检测54例NSCLC组织标本和21例肺癌旁组织标本中SSTR2和SSTR5蛋白表达情况; CD34抗体标记血管内皮细胞, 计算MVD。  结果  在NSCLC组织中, SSTR2和SSTR5的阳性表达率分别51.9%(28/54)和55.6%(30/54), 与肺癌旁组织中的表达率14.3%(3/21)和19.0%(4/21)相比, 差异有统计学意义(P < 0.05)。SSTR2、SSTR5表达与NSCLC的TNM分期密切相关(P < 0.05), 与年龄、性别、吸烟与否、肿瘤组织类型、分化程度、肿瘤大小和淋巴结转移均无明显相关(P > 0.05)。本研究中, 有淋巴结转移者MVD高于无淋巴结转移者(P < 0.05)、中晚期患者(Ⅲ~Ⅳ期)MVD高于早期患者(Ⅰ~Ⅱ期)(P < 0.05);不同年龄、性别、吸烟与否、肿瘤组织类型、分化程度和肿瘤大小之间MVD无显著性差异(P > 0.05)。SSTR2、SSTR5表达阳性者3年生存率分别为70.4%、66.1%;表达阴性者3年生存率分别为35.3%、37.3%。SSTR2、SSTR5的表达与MVD值呈负相关(P < 0.05)。  结论  NSCLC中新生血管的程度与其发生、发展和转移密切相关。SSTR2、SSTR5阳性表达者肿瘤新生血管程度较低, 预后较好。      

Cdc42EP3对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响

目的：探讨Cdc42EP3在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）转移中的作用及相关作用机制。方法：回顾性收集2010年12月至2011年12月于南京医科大学附属淮安第一医院诊治的97例CRC患者的术后病理蜡块,同时收集相关临床病理资料。采用免疫组织化学法检测Cdc42EP3在癌组织与相应正常组织中的表达,随后通过统计学方法分析差异表达,并评估表达水平与临床病理学参数及生存预后之间的相关性。干扰CRC细胞Cdc42EP3的表达后,应用Transwell技术检测Cdc42EP3对CRC细胞的迁移及侵袭能力的影响,并使用Western blot技术检测EMT相关蛋白的表达。通过基因芯片技术及生物信息学分析预测Cdc42EP3的下游靶点STAT1,并通过回复实验验证。结果：Cdc42EP3在癌组织中的表达水平显著高于相应正常组织（P<0.001）,并与肿瘤的淋巴结转移（P=0.011）、TNM分期（P=0.008）及患者生存预后（P<0.001）之间呈显著相关性。干扰Cdc42EP3表达后,CRC细胞的迁移及侵袭能力均明显减弱（P<0.01）。预测出Cdc4...     

胃癌组织中CD1a+树突状细胞密度和血管内皮生长因子表达及其相关性

  目的  探讨胃癌组织中CD1a+树突状细胞密度和VEGF表达及其与胃癌临床病理特征间的关系, 并探究其在胃癌组织中表达的相关性。  方法  采用免疫组织化学双染法检测60例胃癌组织及相应癌旁组织中CD1a+DCs、VEGF的表达。  结果  胃癌组织中CD1a+DCs浸润密度略低于癌旁组织(P > 0.05), 但差异无统计学意义; 胃癌中CD1a+DCs密度与浸润深度、肿瘤分化、TNM分期程度有关(P < 0.05)。胃癌组织VEGF的阳性表达率明显高于癌旁组织(P < 0.01), 胃癌中VEGF的表达与肿块大小(P < 0.05)、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期程度有关(P < 0.01)。CD1a+DCs与VEGF表达呈负相关(r=-3.08, P < 0.01)。  结论  CD1a+DCs随着胃癌恶性程度增加和肿瘤的进展而减少; VEGF在胃癌组织中高表达, VEGF的表达随着胃癌的进展而增高, 对其表达与检测有助于判断胃癌的预后。      

长链非编码RNA BC200在非小细胞肺癌患者组织中的表达及作用

  目的  分析长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）BC200在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）组织中的表达情况，并探讨其临床意义及其与上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）相关蛋白E-cadherin、N-cadherin及Snail之间的关系。  方法  采用实时荧光定量PCR（QPCR）法检测2014年1月至2018年6月天津市胸科医院60例癌组织及60例对应的正常肺组织中BC200表达情况，40例癌组织及40例正常肺组织中E-cadherin、N-cadherin及Snail mRNA表达水平，统计分析NSCLC中BC200与E-cadherin、N-cadherin及Snail mRNA表达水平以及两者的相关性，分析BC200与临床病理特征（性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移及病理类型水平）的关系，应用受试者工作特征（receiver operating characteristic curve，ROC）曲线鉴别诊断NSCLC的效能；采用免疫组织化学法检测E-cadherin、N-cadherin及Snail蛋白在40例NSCLC组织及20例正常肺组织中表达情况，分析其与BC200表达情况的关系。  结果  1）肺癌组织中的BC200、N-cadherin及Snail mRNA的表达水平显著高于正常肺组织中的表达水平（P < 0.05），E-cadherin mRNA的表达量低于正常肺组织（P < 0.05）；2）E-cadherin、N-cadherin及Snail在NSCLC组织中阳性表达率分别为40.0%（16/40）、57.5%（23/40）、57.5%（23/40），在正常肺组织中的阳性表达率为95%（19/20）、5%（1/20）、10%（2/20），表达差异具有统计学意义（P < 0.05）；3）肺癌组织中BC200的高表达与淋巴结转移、临床分期、E-cadherin、N-cadherin及Snail阳性率相关（P < 0.05），BC200的表达与E-cadherin mRNA的表达呈负相关（r=-0.31，P < 0.05），与Snail、N-cadherin mRNA的表达呈正相关（r=0.305、r=0.257，P < 0.05）；4）ROC曲线分析表明，组织lncRNA表达水平对NSCLC的诊断敏感度和特异度均较满意。  结论  BC200在NSCLC组织中高表达，且与淋巴结转移、临床分期、E-cadherin、N-cadherin及Snail阳性率相关，BC200的表达与E-cadherin mRNA的表达呈负相关，与Snail、N-cadherin mRNA的表达呈正相关，提示BC200可能通过上皮间质转化调节肺癌细胞侵袭和迁移能力。在NSCLC诊断上，lncRNA BC200水平有较高的价值，可考虑作为NSCLC诊断的潜在标记物。      

S100A9蛋白在胃癌中的表达及其临床病理意义

  目的  探讨胃癌(GC)中S100A9的表达及临床病理意义。  方法  蛋白质组织学定量鉴定GC和癌旁胃黏膜(GM)组织的差异表达蛋白质; Western-blot验证蛋白S100A9的表达; 免疫组织化学检测S100A9蛋白在GC、GM和原发性胃癌转移的淋巴结(LN)的表达; 分析S100A9表达与GC临床病理参数的关系。  结果  蛋白质组织学筛选的78个差异蛋白中, S100A9表达在GC中较正常GM中明显上调(1∶0.09), Western-blot验证S100A9蛋白在GC表达上调(P < 0.01);免疫组织化学显示: 70例正常GM中S100A9阳性表达23例(32.86%); 118例GC中S100A9阳性表达72例(61.02%); 35例LN中S100A9阳性表达29例(82.86%), 与正常GM相比, GC和LN中S100A9的表达明显升高(P < 0.01);S100A9在LN的GC中上调(P < 0.05);S100A9表达与GC的淋巴结转移、分化程度、浸润深度和TNM分期相关(P < 0.01或P < 0.05), 而与患者的年龄和性别无关(P < 0.05)。  结论  S100A9高表达与GC发生发展、侵袭转移有关, 可能是GC的一个促癌因子。      

口腔鳞状细胞癌中SOCS3及其DNA甲基化的表达及生物学意义

  目的  研究口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)的DNA甲基化及蛋白表达水平, 探讨其在OSCC发生、发展、浸润和转移中的作用。  方法  采用甲基化特异性焦磷酸测序技术(Pyrosequencing)和Western blot法分别检测100例口腔鳞状细胞癌组织中SOCS3的DNA甲基化及蛋白表达水平, 并与20例正常口腔黏膜组织进行对照研究, 分析其与OSCC临床病理参数的关系。  结果  1) OSCC组织SOCS3 DNA甲基化的阳性率为85%, 显著高于正常口腔黏膜组织的20%(P < 0.05);2)OSCC组织中SOCS3蛋白表达(1.76±0.12)明显低于正常口腔黏膜组(1.93±0.25), 差异有统计学意义(P < 0.01)。口腔鳞状细胞癌组织中甲基化组SOCS3蛋白表达(1.72±0.21)显著低于非甲基化组(1.92±0.23), 差异有统计学意义(P < 0.01);3)在TNM分期中Ⅲ期组表达均低于Ⅰ~Ⅱ期组(P < 0.05), 伴有淋巴结转移组表达也低于无淋巴结转移组(P < 0.05);4)口腔鳞状细胞癌组织中SOCS3蛋白表达水平与肿瘤分化级别呈正相关(r=0.416, P < 0.05), 与TNM分期、淋巴结转移呈负相关(r=-0.357, P < 0.05)。  结论  口腔鳞状细胞癌组织中SOCS3 DNA甲基化阳性率高, 导致SOCS3基因表达下调, 与口腔鳞状细胞癌的分化、浸润和转移密切相关。