漆树酸对人前列腺癌细胞 LNCaP 细胞周期的影响及机制

目的：观察漆树酸对人前列腺癌细胞 LNCaP 细胞周期的影响并分析其机制。方法人前列腺癌细胞 LNCaP 经漆树酸处理后,MTS 法观察不同时间、不同浓度的漆树酸对细胞增殖率的影响,流式细胞术分析细胞周期变化,Western blot 方法观察漆树酸作用后细胞周期相关因子 CDK4、CDK6、cyclin D1和 P27蛋白水平的表达变化。结果（1）漆树酸时间和浓度依赖性地抑制细胞增殖;（2）经漆树酸处理后的细胞出现生长抑制,细胞主要阻滞在 G0／G1期;（3）漆树酸作用细胞后,CDK4、CDK6、cyclin D1蛋白表达水平低于溶剂对照组,而 P27蛋白表达水平高于溶剂对照组。结论漆树酸可抑制 LNCaP 细胞增殖,其机制可能是与细胞周期相关蛋白 P27的上调, CDK4、CDK6、cyclin D1表达下调有关,导致细胞阻滞在 G0／G1期。     

E6-AP对前列腺癌细胞株LNCaP细胞增殖和细胞周期的影响

目的:研究E6相关蛋白(E6-AP)对前列腺癌细胞增殖和细胞周期的影响,阐明E6-AP在雄激素受体通路中的作用机制及在前列腺癌发生发展中的作用.方法:采用电穿孔方法制备tTA及E6-AP稳定转染细胞株;利用强力霉素(DOX)的调节作用,通过MTT实验观察E6-AP过表达及低表达对LNCaP细胞增殖的影响;利用流式细胞仪...     

大蒜素对前列腺癌 DU145细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探索大蒜素对体外培养的前列腺癌D U 145细胞增殖及细胞周期的影响。方法采用不同浓度的大蒜素分别处理DU145细胞24、48、72h ,M T T比色法检测细胞存活率;流式细胞仪检测大蒜素处理后细胞周期的变化。结果与对照组相比,大蒜素处理显著降低DU145细胞存活率,并对细胞周期产生影响,阻止在G2／M期。结论大蒜素可以抑制前列腺癌DU145细胞的增殖,抑制细胞周期。     

microRNA-145对人结肠癌Caco-2细胞生物学行为的影响

目的探讨微小核糖核酸-145(miRNA-145)对人结肠癌细胞系Caco-2细胞迁移、增殖及细胞周期等生物学行为的影响。方法选用Caco-2细胞并进行培养,用脂质体转染法分别将miRNA-145及阴性对照miRNA过表达的质粒转入Caco-2细胞,分为对照组和miRNA-145组进行实验。在倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率;采用划痕试验检测miRNA-145对Caco-2细胞迁移的影响;噻唑蓝法检测miRNA-145对Caco-2细胞增殖的影响;流式细胞术检测miRNA-145对Caco-2细胞周期的影响。结果与对照组相比,Caco-2细胞过表达miRNA-145后,细胞迁移速度减慢,生长活力明显受到抑制(P<0.05),G1期细胞百分比增高(P<0.05),而G2期及S期细胞百分比则无明显改变(P>0.05)。结论miRNA-145可抑制Caco-2细胞的迁移和增殖,同时可使Caco-2细胞发生G1期阻滞,减慢细胞周期进程。     

miR-144对甲状腺乳头状癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的：研究甲状腺乳头状癌（PTC）细胞株中miR-144的表达水平,探讨miR-144不同表达水平对甲状腺癌细胞增殖能力及细胞周期的影响。方法：通过qPCR检测人PTC细胞K1、TPC-1和人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1中miR-144的表达水平。K1细胞分别转染miR-144 mimics、miR-144 inhibitor及阴性对照（NC）。应用MTT增殖实验、克隆形成实验和流式细胞术分别检测miR-144不同表达水平对K1细胞生物学功能的影响。Western blot检测细胞周期蛋白Cyclin D1的表达情况。结果：PTC细胞中miR-144相对表达量与正常甲状腺细胞相比显著降低（P＜0.05）,其中K1细胞中miR-144的表达量最低。在K1细胞株中过表达miR-144后,细胞的增殖能力、单克隆形成能力显著下降,并且Cyclin D1表达水平降低,细胞被阻滞在G0/G1期（P＜0.05）。而miR-144表达下调则得到相反的结果。结论：miR-144在PTC细胞中低表达。通过抑制PTC细胞增殖、阻滞细胞周期,miR-144可能在PTC的发生发展中扮演抑癌基因的角色。     

靶向抑制Fbxw8对前列腺癌细胞增殖能力的影响

目的 探讨Fbxw8对人前列腺癌DU145细胞增殖及对增殖相关基因cyclinA、cyclinB、CDK1、p21和p27表达的影响.方法 RT-PCR和Western blot法验证Fbxw8 siRNAs的干扰效率;利用CCK-8检测法检测细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期分布情况;Western blot法检测细胞增殖相关蛋白CDK1、CDK2、cyclinA、cyclinB、P21、P27的表达.结果 Fbxw8 siRNAs显著下调DU145细胞中Fbxw8mRNA及蛋白水平的表达(P＜0.01);Fbxw8 siRNAs显著抑制DU145细胞增殖活力,其中72 h抑制最明显(P＜0.05);流式细胞术分析显示,Fbxw8 siRNAs可阻滞细胞于G2/M期,G2/M期细胞百分数由15.32％ (control siRNA)增加到29.03％(Fbxw8 siRNA 1)和28.39％(Fbxw8 siRNA 2);Western blot结果显示,Fbxw8 siRNAs可促进周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21、p27的表达,同时下调G2/M期调控蛋白CDK1、CDK2、cyclin A及cyclin B1的表达.结论 靶向抑制DU145细胞中Fbxw8的表达可显著抑制细胞的增殖,使阻滞细胞于G2/M期,并且可能是通过下调CDK1、CDK2、cyclin A及cyclin B1的表达,上调P21、P27的表达实现的.     

Propachlor 对前列腺癌细胞 PC3及 LNCaP 的作用及其可能机制

目的：探讨化合物 Propachlor 对前列腺癌的作用及可能的分子机制。方法用梯度浓度的化合物 Propachlor处理前列腺癌 PC3及 LNCaP 细胞株;使用 CellTiter 方法检测肿瘤细胞的存活率,Western blot 法检测细胞自噬蛋白LC3-Ⅱ的转变情况,荧光显微镜检测细胞中诱导 LC3质粒标记绿色荧光蛋白(GFP-LC3)的表达情况。结果 Propachlor可以抑制前列腺癌 PC3及 LNCaP 细胞的存活率,同时剂量越大肿瘤细胞存活率抑制越明显;Propachlor 可以诱导 PC3及 LNCaP 肿瘤细胞自噬蛋白 LC3-Ⅱ及自噬小体 GFP-LC3的表达,诱导自噬效应同 Propachlor 的剂量正相关。结论化合物 Propachlor 具有抗前列腺癌的生物学效应,同时该抗肿瘤效应是通过激活细胞内自噬效应产生的。     

番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞周期的阻滞作用

目的:研究番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞周期的阻滞作用及分子机制.方法 体外培养PC-3细胞,采用MTT、细胞计数法、流式细胞仪和Western blotting方法分析番茄红素对PC-3细胞增殖的抑制作用、对细胞周期分布的影响及细胞周期相关蛋白的表达.结果 不同浓度番茄红素(1.5、3.0、6.0和12.0μmol/L)处理PC-3细胞48 h后,生长抑制率分别为11.34%、19.59%、30.92%、52.58%;常规培养PC-3细胞群体倍增时间为29.04 h,番茄红素浓度由1.5 μmol/L增加到12.0 μmoL/L时,其细胞群体倍增时间由36.58 h延长到88.32 h;流式细胞仪分析显示,番茄红素呈浓度依赖性将PC-3细胞阻滞在G0/G1期;在细胞周期阻滞的同时有P21 WAF1蛋白表达上调.结论 番茄红素对PC-3细胞的抑制增殖作用与G0/G1期阻滞有关,其分子机制可能与调节P21 WAF1表达有关.     

PKCzeta在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞增殖的影响

目的 检测PKCzeta在不同分级前列腺癌(PCa)组织的表达情况,并探究PKCzeta的表达对前列腺癌细胞系增殖的影响.方法 采用免疫组织化学染色法检测19例前列腺癌组织和4例正常前列腺组织的PKC-zeta表达情况,并按肿瘤分级分为3组,进行PKCzeta表达的差异性分析;应用Hilymax试剂转染PKCzeta质粒(CA-PKCzeta)过表达前列腺癌细胞PKCzeta;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot分别检测PC3和DU145细胞内PKCzeta的mRNA和蛋白水平;利用平板克隆形成试验和CCK-8试剂盒检测PC3和DU145细胞增殖能力的差异以及转染PKCzeta质粒后细胞增殖的变化.结果 PKCzeta在前列腺癌组织中的表达高于正常前列腺组织(P＜0.05),而且低分级(1级)前列腺癌PKCzeta的表达高于高分级(2～3级)前列腺癌(P＜0.05).DU145细胞的PKCzeta表达高于PC3细胞,而其增殖速度较PC3细胞低;过表达PKCzeta使前列腺癌细胞系的增殖受抑.结论PKCzeta与肿瘤分级存在负相关关系,在癌症早期可能有一定的保护作用,且过表达PKCzeta能抑制前列腺癌细胞的增殖.     

吗啡对胃癌细胞系HGC27细胞增殖的影响及其机制

目的探讨吗啡对人胃癌细胞系HGC27细胞增殖的影响及其机制。方法体外培养的HGC27细胞,用不同浓度吗啡处理24、48、72 h,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定其对HGC27细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;实验组用吗啡（浓度分别为0.05、0.1、0.2μmol/L）处理HGC27细胞48 h,对照组加入不含药物的培养基,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡、分光光度计检测细胞凋亡蛋白酶-3（Casepase-3）相对活性、western blot法检p16、bcl-2、bax基因表达情况。结果吗啡（浓度0.025～0.4μmol/L）能抑制HGC27细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;吗啡（浓度分别为0.05、0.1、0.2μmol/L）作用HGC27细胞48 h后,细胞凋亡率分别为9.4%、11.5%、21.4%,而对照组凋亡率仅为2.2%;Casepase-3相对活性显著增加,处理后Casepase-3相对活性分别为（1.32±0.08）、（1.85±0.06）和（2.45±0.07）,对照组为（0.92±0.07）;p16和bax蛋白表达量升高,而bcl-2蛋白表达量降低,呈剂量依赖性。结论吗啡能抑制HGC27细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与上调p16表达,进而引起bax蛋白表达量升高,而bcl-2蛋白表达量降低,并增加细胞Casepase-3活性有关。     

草分枝杆菌制剂对人结肠癌细胞周期动力学的调控

目的：探讨草分枝杆菌制剂对人结肠癌细胞周期动力学的影响。方法：以不同浓度的草分枝杆菌制剂（商品名乌体林斯,Utilin S）体外处理人结肠癌细胞株Lovo,48h后以流式细胞仪检测细胞周期动力学指标的变化。结果：4种不同浓度的药物均能调控Lovo细胞的细胞周期,使G0－G1期细胞数率非常显著地上升（P＜0．01）,G2－M期细胞数率显著地上升（P＜0．05）,同时使S期细胞数率非常显著地下降（P＜0．01）。结论：乌体林斯能直接抑制结肠癌细胞株Lovo增殖,并可能通过G2－M期细胞阻滞而促进Lovo癌细胞凋亡的发生。     

双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞UCHL1基因转录调节的影响及机制

目的：探讨双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）对前列腺癌PC-3细胞泛素羧基末端水解酶1（ubiquitin carboxyl-ter－minal hydrolase L1,UCHL1）基因转录调节的影响及机制。方法：将PC-3细胞分为空白组、DHA组及5-杂氮-2’脱氧胞苷（5-Aza-2’-deoxycytidine,５-Aza-CdR）组（2.5 μmol/L 5-Aza-CdR）。空白组为不加药物;DHA组根据浓度的不同再分为DHA1、DHA2、DHA3、DHA4组,DHA终浓度分别为12.5、25、50、100 μmol/L。培养48 h后,收集细胞。应用real-time PCR检测 UCHL1及 DNA甲基化转移酶（DNA methyltransferase,DNMTs）的mRNA表达;亚硫酸氢盐基因组测序法（bisulfite genomic sequencing,BGS）检测UCHL1 CpG岛的甲基化状态;Western blot法检测 UCHL1蛋白的表达。结果：DHA和５-Aza-CdR分别处理细胞后,UCHL1的启动子甲基化水平明显降低（χ2=150.1,P=0.000; χ2=127.7,P=0.000）;UCHL1 mRNA表达水平明显上调（P均<0.05）;UCHL1蛋白表达水平上升（P均 <0.05）,双氢青蒿素处理后甲基化转移酶的 mRNA表达减少（P均<0.05）。结论：DHA可逆转 PC-3细胞 UCHL1基因的甲基化状态,其可能通过下调DNMTs的表达而影响 DNA的甲基化过程。     

胡桃醌对宫颈癌SiHa细胞增殖及细胞周期的影响

目的: 探讨胡桃醌对人宫颈癌SiHa细胞增殖及细胞周期的影响,阐明胡桃醌在宫颈癌治疗中的作用。方法: 选取处于对数生长期的SiHa细胞,随机分为对照组和10、20、40、60、80和100 μmol·L^-1胡桃醌处理组。倒置显微镜下观察细胞的形态学变化,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性和细胞生长抑制率,流式细胞术检测SiHa细胞的细胞周期。结果: 与对照组比较,胡桃醌处理组SiHa细胞体积缩小,连接消失,与周围细胞脱离。与对照组比较,胡桃醌处理组细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞生长抑制率升高(P<0.05),且呈剂量依赖性,半数抑制浓度(IC₅₀)为20.7 μmol·L^-1;流式细胞术检测,与对照组比较,10和100 μmol·L^-1胡桃醌处理组SiHa细胞的亚二倍体峰(SubG₁)比率增加,G₀/G₁和S期细胞比率降低,G₂/M期细胞比率先升高后降低。结论: 胡桃醌对SiHa细胞增殖具有抑制作用,并可使细胞周期SubG₁比率增加。     

川陈皮素对人前列腺癌DU145细胞生长的抑制作用及其机制

检测川陈皮素对人前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响,探讨其作用机制。     

富含半胱氨酸蛋白61对子宫内膜癌细胞增殖及细胞周期的影响及其机制研究

目的 研究富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)对子宫内膜癌(EC)细胞株HEC-1B增殖及细胞周期的影响,并探讨其机制。方法 取对数生长期HEC-1B细胞,随机分为Control组(不处理)、pcDNA3.1-NC 组(转染 pcDNA3.1-NC)、pcDNA3.1 CYR61组(转染 pcDNA3.1 CYR61)、pcDNA3.1 CYR61+ LiCl(Wnt/β-catenin 通路激活剂)组(转染 pcDNA3.1 CYR61,并加入 LiCl 使其终浓度为 60 mmol/L)。转染48 h后采用MTT法检测增殖抑制率,PI染色法检测细胞周期占比,Western blotting检测细胞β-catenin、Caspase-3、Cyclin D1蛋白的表达。结果 与Control组、pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1 CYR61组CYR61、β-catenin、Caspase-3、Cyclin D1 蛋白相对表达量、G₀/G₁期占比升高(P <0.05),S、G₂/M 期占比降低(P <...     

Disabled-1在人乳腺癌细胞中的表达及其对细胞周期的影响

目的：探讨Disabled-1（Dab1）基因在乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞中的表达情况,并阐明Dab1对乳腺癌细胞周期的影响。方法：体外培养永生化的乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞MCF-7、BT-549和MDA-MB-231,实时荧光定量（Real-time PCR）法检测MCF-10A、MCF-7、BT-549和MDA-MB-231细胞中Dab1 mRNA的表达水平,Western blotting法检测Dab1蛋白的表达水平。取对数生长期的BT-549细胞,分为对照组、转染pKH3组和转染pKH3-Dab1组,采用流式细胞术检测各组细胞周期的变化情况。结果：Real-time PCR法检测,与MCF-10A细胞（0.998±0.020）比较,乳腺癌细胞MCF-7（0.504±0.037）、BT-549（0.302±0.027）和MDA-MB-231（0.330±0.031）中Dab1 mRNA相对表达水平明显下降（P<0.05）。Western blotting法检测,与MCF-10A细胞（0.227±0.021）比较,乳腺癌细胞MCF-7（0.134±0.014）、BT-549（0.076±0.01）和MDA-MB-231（0.074±0.005）中Dab1蛋白表达水平明显下调（P<0.05）。流式细胞术检测,与对照组和转染pKH3组比较,转染pHK3-Dab1组BT-549细胞出现细胞周期G₁期阻滞。结论：Dab1在体外培养乳腺癌细胞系中表达下调,Dab1过表达可阻滞乳腺癌细胞G₁细胞周期进展。     

泰山照山白金丝桃苷诱导人乳腺癌细胞的细胞周期阻和凋亡的机制研究

目的 观察泰山照山白金丝桃苷（Hyperin）对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞周期及凋亡影响及其机制.方法 体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,加入不同金丝桃苷浓度处理,运用MTT法检测细胞生长、流式细胞术PI染色检测细胞周期,western blot检测细胞周期蛋白依赖性激酶2（cyclin-dependent kinase 2,CDK2）、细胞周期蛋白A （Cyclin A）及caspase3的表达.结果 与对照组相比,经金丝桃苷处理后细胞生长呈时间及浓度依赖性抑制;MCF-7细胞周期阻滞在G2/M期,该期细胞比例增多;CDK2、Cyclin A蛋白水平的表达与对照组相比明显下降而caspase3蛋白水平的表达明显升高.结论 通过细胞周期的G2/M期阻滞诱导细胞凋亡可能是金丝桃苷发挥抗肿瘤作用的可能机制之一.