MiR-10b及其前体和Dicer在乳腺癌中的表达

［摘要］目的　比较癌组织与正常组织中miR-10b及其前体和Dicer表达的差异,了解乳腺癌与其表达的关系．方法　通过SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌组织和正常乳腺组织中miR-10b及其前体的含量． 结果 （1）miR-10b和Dicer在乳腺癌组织中的表达均显著低于癌旁正常组织中的表达（P＜0.05）;（2）正常组织中的miR-10b的表达与C-erbB-2成负相关相关 （rs＝-0.42 ,P＜0.05）,正常组织中的Dicer与C-erbB-2的表达与成正相关 （ rs＝0.60,P＜0.05）．结论　miR-10b和Dicer在乳腺癌组织中处于低表达状态,可能在乳腺癌的发生发展中起到抑制作用.     

P27和PCNA在儿童脑胶质瘤中的表达及其意义

目的：探讨P27、PCNA在儿童脑胶质瘤中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学S－P法，检测48例儿童脑胶质瘤和9例正常脑组织中P27、PCNA蛋白的表达。结果：27在儿童脑胶质瘤阳性表达（58．3％）明显低于正常组（100％，P＜0．05）；P27表达与儿童脑胶质瘤病理分级有关（r＝0．515，P＜0．01），随着肿瘤恶性程度的增高P27表达呈降低态势；低度恶性组与高度恶性组之间比较有明显差异（P＜0．05）。PCNA表达与儿童脑胶质瘤病理分级有关（r＝0．452，P＜0．01），随肿瘤恶性程度增高，PCNA表达强度增高。P27与PCNA表达之间相关分析无显著意义（r＝0．022，P＞0．05）。结论：P27和PCNA可作为判断儿童脑胶质瘤恶性程度的重要指标。     

乳腺癌 GPR30、HRG1和 HER2表达与淋巴结转移关系的研究

目的：探讨乳腺浸润性导管癌中 G 蛋白偶联受体30（GPR30）、HRG1和 HER2及其激活状态磷酸化 HER2（pHER2）的表达与淋巴结转移的关系。方法采用免疫组织化学方法检测72例乳腺浸润性导管癌组织样本中 GPR30、HRG1、HER2和 pHER2的表达。结果GPR30与 HRG1表达呈中度相关性（r ＝0．597，P ＝0．000）；pHER2与 GPR30或 HRG1的表达呈强相关性（r＝0．742，P ＝0．000；r＝0．615，P ＝0．000）；GPR30和 pHER2表达在淋巴结转移组明显高于淋巴结未转移组，差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论GPR30与 HRG1-HER2信号途径存在相互联系，可能共同促进乳腺癌淋巴结转移，联合抑制这两条途径有望成为乳腺癌治疗的新策略。     

乳腺癌中PCNA和BCA-225蛋白表达与预后相关性研究

目的：检测PCNA和BCA-225蛋白在乳腺癌组织中的表达,并探讨两者与病理特征和预后的关系。方法：采用免疫组化SP法检测PCNA和BCA-225蛋白在70例原发性乳腺浸润性导管癌及10例乳腺良性病变中的表达,分析其与组织病理分级、淋巴结转移个数、临床TNM分期和癌基因Her-2等因素及预后的关系。结果：乳腺癌组织中PCNA和BCA-225高表达率分别为64.29%和55.71%,均显著高于乳腺良性病变组织,差异均有统计学意义（P均＜0.01）。乳腺癌中PCNA表达与组织病理分级、淋巴结转移个数、临床TNM分期及癌基因Her-2相关（P＜0.05）,而BCA-225表达与病理分级和Her-2相关（P＜0.05）,PCNA与BCA-225表达呈正相关（r=0.2685,P＜0.05）。乳腺癌生存组PCNA蛋白表达明显低于死亡组,差异有统计学意义（P＜0.05）。Kaplan-Meier生存曲线分析表明PCNA低表达患者生存期明显长于高表达患者,差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox多因素回归分析显示PCNA蛋白为乳腺癌患者独立有效的预后指标,风险度exp为1.819224（P＜0.05）。结论：乳腺癌PCNA高表达与肿瘤的侵袭转移、增殖、发展及预后紧密相关,PCNA 低表达患者的生存状况好于高表达患者,是评价乳腺癌患者预后的独立有效指标。BCA-225对判断乳腺癌患者的预后可能有一定的参考价值。     

大肠癌组织胃泌素与P53蛋白表达及PCNA的相关性研究

目的：探讨大肠癌组织胃泌素与P53蛋白表达的关系及其对肿瘤增殖活性的影响。方法：放免法检测32例大肠癌血清及癌组织胃泌素含量。免疫组化标记癌组织有癌近旁黏膜胃泌素、P53蛋白、PCNA表达。结果：癌组织胃泌素与P53蛋白表达强度呈正相关（r＝0．4666，P＜0．01），且二者均与肿瘤PCNA表达强度呈正相关（r＝0．8483，r＝0．5668，P＜0．025）。二者共同表达肿瘤PCNA较各自增高。P53蛋白表达与血清、癌组织胃泌素水平升高有关。癌近旁黏膜P53蛋白表达组较未表达组PCNA表达强度增高（P＜0．05），但与血清胃泌素水平无关。结论：大肠癌胃泌素、P53蛋白独自或共同表达均可提高大肠癌增殖活性；癌近旁黏膜增殖状态与P53基因突变有关，但与胃泌素表达及血清胃泌素水平无关。     

C—rbB—2,PCNA和Ki67在乳腺癌中的表达及临床意义

目的：研究乳腺癌中原癌蛋白C－erbB-2，细胞增殖标志物PCNA和Ki67的表达与临床病理参数（癌组织大小，淋巴结转移，年龄，雌，孕激素受体ER，PR表达）之间的关系。方法：免疫组化SP法，结果：54例乳腺癌中，C－erbB-2,PCNA和Ki67阳性表达率分别为51．9％，68．5％和48．1％，C－erbB-2,PCNA和Ki67表达之间显著正相关（P＜0．01），C－erbB-2,及其和PCNA共同高表达与癌组织大，淋巴结转移＋，ER－和PR－，PCNA高表达与癌组织大，ER－和PR－，Ki67及其和C－erbB-2共同高表达与癌组织大，淋巴结转移＋和ER－这些不良预后因素分别显著相关（P＜0．05或P＜0．01），结论：C－erbB-2,PCNA和Ki67高表达是乳腺癌预后不良的指标，PCNA与Ki67是独立的乳腺癌细胞增殖的指标。     

CCND1、MDM2在乳腺癌中的表达及其对于淋巴结转移和预后的意义

目的探讨CCND1、MDM2在乳腺癌中的表达特点及其表达与预后的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测CCND1、MDM2在58例乳腺癌及19例正常乳腺组织中的表达,分析两者的表达情况与疾病的临床病理特征之间的关系及蛋白间的相关性,并分析58例乳腺癌患者的随访资料,判断CCND1、MDM2的表达与患者淋巴结转移情况及预后的关系。结果在乳腺癌和正常乳腺组织中,CCND1蛋白的阳性表达率分别为56.9%（33/58）、15.8%（3/19）;MDM2蛋白的阳性表达率分别为81.0%（47/58）、21.1%（4/19）。两组中CCND1和MDM2蛋白的阳性表达率均有统计学意义（P〈0.05）。CCND1和MDM2蛋白的表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移相关（P〈0.05）,与年龄、肿瘤大小、TNM分期无关（P〉0.05）。在淋巴结转移病例中,CCND1蛋白表达与生存期显著相关（P〈0.05）;在无淋巴结转移的病例中,MDM2蛋白的表达与生存期显著相关（P〈0.05）。CCND1蛋白表达与MDM2蛋白的表达相关且具有一致性（χ2=17.918,P〈0.05,Kappa=0.472）。结论 CCND1与MDM2蛋白在乳腺癌组织中的异常表达,说明其可能共同参与了乳腺癌的发生、发展和转移,并与患者预后密切相关。     

乳腺癌细胞凋亡与HIF-1α的相关性研究

目的：探讨乳腺癌组织中HIF-1α、P53蛋白的表达及与凋亡的关系。方法：采用免疫组化S-P法检测58例乳腺癌中HIF-1α、P53、MDM2蛋白的表达,用末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法（TU-NEI法）检测凋亡。结果：乳腺癌组织中HIF-1α、P53、MDM2蛋白阳性率分别为46.6%,61.1%和27.6%。癌组织HIF-1α阳性表达组的凋亡指数（AI）显著高于HIF-la阴性组（P〈0.01）;P53阴性组AI显著高于P53阳性组（P〈0.05）。HIF-la阳性P53阴性表达组AI显著高于HIF-1α阴性P53阳性组（P〈0.01）,HIF-1α与P53表达呈显著负相关（r=-0.33,P〈0.01）。MDM2阳性表达组AI显著低于其阴性组（P〈0.01）。MDM2阳性HIF-1α阴性组AI显著低于MDM2阴性HIF-1α阳性组（P〈0.05）,MDM2与HIF-1α负相关（r=-0.26,P〈0.05）。结论：HIF-1α可诱导乳腺癌肿瘤细胞凋亡,其机制可能与P53和MDM2有关,作为肿瘤早期新标志。     

Let-7在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达

［摘要］目的　研究Let-7基因在乳腺癌中的表达特征．方法　随机抽取28例乳腺癌患者收集其癌组织和癌旁正常组织，利用TRIzol提取总RNA，实时荧光定量PCR检测基因表达量．结果　Let-7前体在癌组织中的相对表达量（9.65±2.31），低于癌旁正常组织（10.0±52.81），P＝0.048，而Let-7基因则无显著变化．前体Let-7与最长行经（日）之间有依存关系（b＝0.875，P＝0.020）；初潮年龄与前体Let-7的表达在癌组织中的呈负相关（r＝-0.484，P＝0.049）， 在正常组织中呈正相关（r＝0.502，P＝0.048）．结论　Let-7前体在癌组织中的表达低于正常组织， 最长行经天数越长则Let-7表达越高．     

大肠癌中OCT4基因表达与CD44的关系

目的：探讨大肠癌中OCT4基因与CD44的关系。方法：收集2011年7月～2012年5月的32例大肠癌患者的癌组织和正常组织，采用qRT-PCR和Western blot的方法检测癌和正常肠上皮组织的OCT4和CD44的表达，并作相关性分析。结果：qRT-PCR检测癌组织中的OCT4的 mR-NA表达量为0．065±0．01，明显高于正常肠上皮组织的0．012±0．008（P＜0．05）；CD44s在癌组织中的表达也明显高于正常组织（0．023±0．008 vs 0．009±0．002（P＜0．05），经过spearman相关分析发现OCT4和CD44的mRNA表达存在正相关关系，r＝0．587，P＜0．05）。 Western blot检测了其中2例患者的癌和正常组织的OCT4和 CD44的蛋白表达，发现癌组织中两者的表达均较正常肠上皮表达高。结论：大肠癌中 OCT4和CD44均呈高表达，两者呈正相关关系。     

LncRNA HOTAIR、HOTTIP及其下游HOXD10、HOXA13基因在肺癌中的表达研究

目的探讨HOTAIR和HOTTIP及其下游HOXD10和HOXA13基因在肺癌中的表达特征以及相互调控的关系.方法选择47例肺癌患者并收集癌组织和癌旁正常组织,利用TRIzol提取总RNA,实时荧光定量PCR检测基因相对表达量.结果 HOTAIR在癌组织中的相对表达量（4.12±4.58）,显著低于癌旁正常组织（7.43±4.20）,（P〈0.01）,HOXA13在癌组织中的相对表达量（8.64±1.21）,显著降低低于癌旁正常组织（9.43±1.58）,（P〈0.01）,其他两个基因表达无显著变化.在有淋巴转移的个体中,癌组织中HOXD10 mRNA表达为（9.01±1.22）,显著高于无转移的患者（7.81±2.15）,（P=0.02）.HOTTIP与下游HOXA13基因RNA在癌组织（r=0.78,P=0.00）和癌旁正常组织（r=0.70,P〈0.01）中均存在正相关关系;HOTAIR与下游HOXD10基因mRNA在癌旁正常组织中成正相关（r=0.37,P〈0.01）,在癌组织中却不存在相关关系（r=0.12,P=0.47）.结论提示在肺癌中HOTTIP与HOXA13调控关系正常;HOTAIR在癌组织中表达降低,且可能丧失对下游基因HOXD10的正常调控.     

抑癌基因PTEN和FHIT在乳腺癌中的表达及意义

目的检测抑癌基因PTEN与FHIT蛋白在乳腺癌和癌旁组织中的表达,分析其与临床病理特征的联系。方法应用免疫组化法检测68例乳腺癌,20例癌旁组织中PTEN和FHIT蛋白表达,分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果在乳癌组织中,PTEN（X2=8．351,P〈0．01）与FHIT（x2=9．748,P〈0．01）均低表达,差异有统计学意义;淋巴结转移组标本,FFEN（x2=6．338,P〈0．05）与FHIT（x2=7．215,P〈0．05）均低表达,差异有统计学意义;分期较晚的标本中,PTEN（x2=13．388,P〈0．05）与FHIT（x2=11．045,P〈0．05）均低表达,差异有统计学意义。但二者在乳腺癌中表达无相关性。结论PTEN和FHIT在乳腺癌中有较低的表达,显著低于癌旁乳腺组织。它们的低表达与乳腺癌的发生发展有一定生物学意义。它们在乳癌中表达无相关,提示这两种蛋白表达可能是相对独立的事件。二者可作为判断乳腺癌生物学行为和临床预后的参考指标。     

乳腺癌中α-1,6岩藻糖基转移酶表达的相关性研究及其临床意义

目的探讨乳腺癌组织中α-1,6岩藻糖基转移酶mRNA和蛋白的表达水平及其临床意义。方法应用蛋白免疫印迹法、实时荧光定量PCR法检测40例乳腺癌患者术后的癌组织、癌旁组织以及40名健康者的正常乳腺组织中α-1,6岩藻糖基转移酶在的表达情况,并分析其与乳腺癌之间的关系。结果 FUT8 mRNA和蛋白在乳腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织和正常乳腺组织,差异有统计学意义（P〈0.05）;Ⅲ期乳腺癌组织中FUT8蛋白表达水平明显高于Ⅰ-Ⅱ期,差异有统计学意义（P〈0.001）;有淋巴结转移的乳腺癌组织中FUT8蛋白表达水平明显高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义（P〈0.001）。结论高FUT8蛋白的表达与乳腺癌密切相关,其可能的调控机制及生物学效应有待进一步研究。     

乳腺癌组织中Livin蛋白的表达及其与患者临床病理特征和细胞增殖的关系

目的探讨乳腺癌组织中Livin蛋白的表达及其与患者临床病理特征和细胞增殖的关系。方法采用免疫组化S-P法检测乳腺癌组织中Livin蛋白表达,并探讨其与患者年龄、组织学分级、临床分期和淋巴结转移等临床病理特征和细胞增殖的关系。另选择20例癌旁正常组织和10例正常乳腺组织作对照。结果 Livin蛋白在正常乳腺、癌旁正常组织及乳腺癌组织中的表达呈逐渐增高趋势(χ2=18.28,P<0.01)。乳腺癌组织中Livin蛋白表达与临床分期和淋巴结转移密切相关(χ2=4.19和7.73,P<0.05或P<0.01)。Livin表达阴性乳腺癌组织中PCNA增殖指数明显低于Livin表达阳性乳腺癌组织(t=2.37,P<0.05)。结论 Livin蛋白在乳腺癌发生和发展不同阶段的表达呈进行性上升趋势,Livin蛋白在乳腺癌细胞的增殖、侵袭、转移等活动中可起到促进作用,可作为预后评估的指标。     

肝细胞性肝癌中Caspase-3和PCNA的表达

目的探讨Caspase-3和PCNA在肝细胞肝癌的表达及其在肝细胞肝癌发生、发展中的作用。方法应用组织芯片技术和免疫组化方法（sP法）检测95例肝细胞肝癌组织、68例癌旁组织和19例正常肝组织中Caspase-3和PCNA的表达。结果Caspase-3在肝细胞肝癌中表达阳性率（34．7％）显著低于癌旁组织（79．4％，P〈0．01）和正常肝组织（84．2％，P〈0．01）；Caspase-3的表达与肝细胞肝癌的组织分级和HBsAg有关（P〈0．01，P〈0．05），与患者年龄、性别、肿瘤大小和转移无关（P〉0．05）。PCNA在肝细胞肝癌中的表达阳性率（68．4％）显著高于癌旁组织（26．5％，P〈0．01）和正常肝组织（15．8％，P〈0．01）；PCNA的表达与患者组织分级、转移有关（P〈0．01，P〈0．05），与年龄、性别、肿瘤大小、和HBsAg无关（P〉0．05）。在肝癌组织中Caspase-3与PCNA的表达呈显著负相关（r=-0．598，P〈0．001）。结论肝细胞肝癌中Caspase-3的低表达与PCNA的高表达在肿瘤的发生、发展过程中可能起重要作用。     

Smad2和Smad4蛋白在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的：研究细胞信号传导分子Smad2和Smad4蛋白在乳腺癌组织中的表达,阐明其与乳腺癌发生发展的关系及意义。方法：选取53例乳腺导管癌和50例癌周正常组织标本,应用免疫组织化学SP法检测乳腺癌组织和癌周正常组织中Smad2和Smad4蛋白的表达水平,并评估二者的表达与乳腺癌临床病理参数间的关系。结果：乳腺癌组织中Smad2蛋白表达水平明显高于癌周正常组织（Z=-2.08,P < 0.05）;乳腺癌组织中Smad4蛋白表达水平明显低于癌周正常组织（Z=-5.01,P < 0.01）。乳腺癌组织中Smad2和Smad4蛋白的阳性表达率与患者年龄无关（r=0.035,P > 0.05;r=-0.077,P > 0.05）,与肿瘤大小无关（r= 0.128,P > 0.05;r=0.133,P > 0.05）,与淋巴结转移无关（r=0.163,P > 0.05;r=0.006,P > 0.05）,与是否有远处转移无关（r=0.113,P > 0.05;r=0.126,P > 0.05）,与ER的表达无关（r=0.056,P > 0.05;r=0.047,P > 0.05）,与PR的表达无关（r=0.129,P > 0.05;r=0.107,P > 0.05）;但与HER2的阳性表达率呈负相关关系（r=-0.388,P < 0.01;r=-0.360,P < 0.01）,与乳腺癌病理分级呈负相关关系（r=-0.331,P < 0.05;r=-0.388,P < 0.01）;乳腺癌组织中Smad2与Smad4的表达呈正相关关系（r= 0.830,P < 0.01）。结论：Smad2和Smad4蛋白在乳腺癌的发生发展过程中起重要作用,可能成为评估乳腺癌恶性程度及预后的重要生物学指标。     

乳腺浸润性导管癌中miR-125b的表达及其临床意义

目的：探讨miR-125b在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法：应用Realtime RT—PCR方法检测42例乳腺浸润性导管癌及癌旁非肿瘤乳腺组织中miR-125b的表达,分析miR-125b表达与乳腺癌常用的临床病理指标的关系。结果：miR-125b在癌组织中的表达低于非肿瘤组织,差异有显著性（P〈0．01）;miR-125b的表达与乳腺癌的淋巴结转移状态及Her-2的表达相关（P=0．019和P=0．033）,miR-125b的表达与年龄、肿块大小、临床病理分期及雌、孕激素状态未见显著相关性。结论：miR-125b在乳腺浸润性导管癌中的表达异常,可能和乳腺癌的侵袭转移等恶性生物学行为有关,有望成为判断乳腺癌预后的指标及治疗靶点。     

乳腺癌组织内NF-κB p65、PCNA的表达及其相关性分析

目的研究乳腺癌组织内细胞核因子-κB（NF-κB）p65与增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及意义。方法采用SABC免疫组化染色法检测135例乳腺癌组织内NF-κB p65与PCNA蛋白的表达,并分析二者的相关性及与临床病理因素的关系。结果乳腺癌组织内NF-κB p65蛋白表达阳性率为52.6%,PCNA表达阳性率为58.5%。乳腺癌组织内NF-κB p65蛋白与PCNA蛋白的表达呈正相关（r=0.55,P〈0.05）;NF-κB p65与肿瘤大小呈正相关（r=0.401,P〈0.05）,与淋巴结转移呈正相关（r=0.432,P〈0.05）,与患者年龄无明显相关性（r=-0.233,P〉0.05）。PCNA与肿瘤大小呈正相关（r=0.403,P〈0.05）,与淋巴结转移呈正相关（r=0.467,P〈0.05）,与患者年龄无明显相关性（r=0.222,P〉0.05）。结论 NF-κB p65、PCNA可以作为判断乳腺癌患者预后的有效指标,乳腺癌组织内NF-κB p65和PCNA的高表达可导致肿瘤侵袭性增加,促进肿瘤细胞向区域淋巴结转移。