支气管哮喘的抗炎症介质治疗

支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞(EOS)肥大细胞和T细胞等多种炎症细胞参与的慢性气道炎症。炎症细胞可分泌释放众多的炎症介质．如组胺、前列腺素、白三烯、血小板活化因子、神经肽、阳离子蛋白、细胞间粘附因子及致炎细胞因子．如IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、GM-CSF、TNF-α等。随着对哮喘发病机制，尤其是气道慢性炎症机制的深入了解，哮喘治疗已取得很     

免疫抑制小鼠内毒素血症时免疫细胞功能紊乱的实验观察

目的:本研究在建立免疫抑制小鼠内毒素血症模型的基础上,观察机体免疫紊乱状态。方法:选取Blbc/c小鼠,连续3d腹腔内注射甲基强的松龙30mg/kg,建立免疫抑制小鼠模型,3d后静脉注射10mg/kg剂量内毒素,于2,6h时点取血浆,分别采用化学比色法检测一氧化氮(NO)、TNF-α、INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-18等细胞因子水平,以反映TH1、TH2以及巨噬细胞等免疫细胞的功能与状态。在此基础上,50只小鼠分为免疫抑制内毒素血症模型组(模型组)以及甲基强的松龙对照组(激素组)与空白对照组。此外,还观察其肺部病理学改变。结果:在激素组,与正常组小鼠比较,各时点的血浆NO变化不大,TNF-α有降低的趋势,而IL-18则明显降低;INF-γ、IL-2的水平降低明显,IL-4、IL-10的水平则处于正常水平,其中IL-10还稍有升高趋势。在内毒素组的各时点,与正常组比较,模型小鼠肺组织有出血、水肿和炎细胞浸润等急性肺损伤等病理改变,而且INF-γ、IL-2水平明显降低,IL-4水平有升高趋势,IL-10水平升高明显;此外,在注射LPS后2h时点,NO与TNF-α水平明显升高,在注射LPS后6h时点,而NO、TNF-α以及IL-18水平均显著升高。结论:免疫抑制内毒素血症模型小鼠的TH1细胞功能低下,而TH2细胞与巨噬细胞处于活化状态,机体炎症反应则类似MARS的特点。     

树突状细胞在细菌、原虫感染免疫中的作用

树突状细胞(DC)是专职抗原提呈细胞(APC)，广泛分布于全身各个组织器官。微生物感染机体后，不成熟DC经模式识别受体(如Toll样受体，TLR)识别微生物抗原并成熟，其吞噬活性下降，而细胞表面分子(如MHC．Ⅰ、Ⅱ类分子)、共刺激分子(CD40、CD80、CD86、CD54)、黏附分子以及细胞因子(IL-12、IL-10、IFN-α)表达增强，能有效地刺激初始性T细胞的     

肺癌患者外周血Th1/Th2细胞因子及IL-18水平变化与肿瘤分期的关系

目的 探讨肺癌患者血清IL-18及TH细胞因子水平与临床肿瘤分期以及与病理分期之间的关系.方法 应用ELISA法检测 109例肺癌患者血清细胞因子IL-18、Th1( IL-2、TNF-α) 及Th2(IL-4、IL-10)水平. 30例正常人外周血细胞因子作对照.结果 肺癌组IL-18、Th1( IL-2、TNF-α)水平明显低于正常组,Th2(IL-4、IL-10)水平高于正常组(P＜0.05);小细胞癌患者的外周血IL-18水平比鳞状细胞癌及肺腺癌水平明显降低(P＜0.01);随着肺癌(分期)的加重,其外周血IL-18及Th1细胞因子(IL-2、TNF-α)水平逐渐下降.结论 外周血IL-18及TH细胞因子水平能反映患者的免疫功能状态,并可能做为提示预后的指标之一.     

RESEARCH ON IMMUNOLOGIC DISORDER IN THE IMMUNITY IMMUNODEPRESSION AND ENDOTOXEMIA MICE

目的:本研究在建立免疫抑制小鼠内毒素血症模型的基础上,观察机体免疫紊乱状态.方法:选取Blbc/c小鼠,连续3 d腹腔内注射甲基强的松龙30 mg/kg,建立免疫抑制小鼠模型,3 d后静脉注射10 mg/kg剂量内毒素,于2,6 h时点取血浆,分别采用化学比色法检测一氧化氮(NO)、TNF-α、INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-18等细胞因子水平,以反映TH1、TH2以及巨噬细胞等免疫细胞的功能与状态.在此基础上,50只小鼠分为免疫抑制内毒素血症模型组(模型组)以及甲基强的松龙对照组(激素组)与空白对照组.此外,还观察其肺部病理学改变.结果:在激素组,与正常组小鼠比较,各时点的血浆NO变化不大,TNF-α有降低的趋势,而IL-18则明显降低; INF-γ、IL-2的水平降低明显,IL-4、IL-10的水平则处于正常水平,其中IL-10还稍有升高趋势.在内毒素组的各时点,与正常组比较,模型小鼠肺组织有出血、水肿和炎细胞浸润等急性肺损伤等病理改变,而且INF-γ、IL-2水平明显降低,IL-4水平有升高趋势,IL-10水平升高明显;此外,在注射LPS后2 h时点,NO与TNF-α水平明显升高,在注射LPS后6 h时点,而NO、TNF-α 以及IL-18水平均显著升高.结论:免疫抑制内毒素血症模型小鼠的TH1细胞功能低下,而TH2细胞与巨噬细胞处于活化状态,机体炎症反应则类似MARS的特点.     

淋巴瘤相关基因的功能及临床意义

淋巴瘤的发生、发展和其他恶性肿瘤一样,有众多的基因参与其中。某些基因与淋巴瘤的发生有关,如间变性大细胞淋巴瘤中PRF1基因突变,套细胞淋巴瘤中SOCS3基因缺失及甲基化等与淋巴细胞的恶性增殖有关;某些基因与淋巴瘤的诊断有关,如检测BCL10基因突变、CDH1基因甲基化、MALT1基因重组等有助于淋巴瘤的临床诊断或者类型的鉴别;某些基因与淋巴瘤的治疗有关,如治疗前后PIG-3基因表达出现改变,IL-10基因的不同基因型患者对同种治疗的反应不同等;某些基因与淋巴瘤的预后有关,如P15启动子甲基化、CDKN2A缺失等与生存指标有关,可作为淋巴瘤的预后指标。     

白细胞介素10与感染性休克

白细胞介素10(IL-10)由T细胞、巨噬细胞等细胞产生，具有抗炎和抑制机体免疫力双重属性的细胞因子之一。人们早已知道它对巨噬细胞具有很强的抑制作用，能抑制其他细胞因子如TNF-α、IL-1、IL-6等的产生，显著的阻滞了LPS(脂多糖)诱导的炎症介质／细胞因子血症的生成，是机体的保护性细胞因子之一。随着对感染性休克的研究，IL-10成为感染性休克中备受关注的细胞因子之一。     

薯蓣皂苷元对脂多糖诱导的BV2小胶质细胞极化状态的影响

目的探讨薯蓣皂苷元(diosgenin)对脂多糖(LPS)诱导下BV2小胶质细胞极化状态的影响。方法将BV2细胞根据不同的处理方法分为对照组,LPS组,LPS+薯蓣皂苷元组。使用MTT法检测BV2细胞的增殖能力,使用ELISA法检测BV2细胞表达肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素10(IL-10)水平,使用实时荧光定量(RT-PCR)法检测BV2细胞IL-10,诱导型一氧化氮合酶(i NOS)以及精氨酸酶(Arg-1)mRNA水平。结果使用不同浓度的薯蓣皂苷元处理BV2细胞后,各浓度的薯蓣皂苷元对BV2细胞的增殖影响无统计学意义(P0.05),而加入LPS刺激后,发现25μg/ml薯蓣皂苷元为最适浓度,且其最佳作用时间点为24 h(P0.05);薯蓣皂苷元可以抑制在LPS诱导下BV2细胞TNF-α水平以及i NOS表达,同时提高IL-10水平以及Arg-1表达(P0.05)。结论薯蓣皂苷元可以通过抑制M1型小胶质细胞极化以及促进M2型小胶质细胞极化进而发挥抗炎的作用。     

环孢素A对正常人早孕滋养层细胞IL-10和IFN-γ分泌的影响

目的探讨环孢素A(CsA)在体外对早孕期滋养细胞产生白细胞介素10(IL-10)和干扰素Y(IFN-γ)的影响。方法采用酶消化法分离绒毛滋养细胞，加入不同浓度的CsA进行体外培养。计算机图像分析系统及半定量逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测滋养细胞上IL-10和IFN-γ蛋白及mRNA的表达。结果CsA在0．1umol／L、1umol／L时较对照组对滋养细胞的IL-10的蛋白分泌和mRNA表达均有明显促进作用(P＜0．05)；不同浓度的CsA对IFN-γ蛋白分泌和mRNA表达均无明显作用(P＞0．05)。结论CsA在合适浓度范围内对滋养细胞的IL-10、IFN-γ分泌有良性调控作用。     

皮肌炎患者外周血CD4~+ T细胞中TGF-β_1、IL-10 mRNA的表达及临床意义

目的:检测活动期皮肌炎(DM)患者外周血CD4+T细胞转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素10(IL-10)的表达以及血清肌酸激酶(CK)含量。初步探讨CD4+T细胞TGF-β1、IL-10在DM发病机制中的作用。方法:收集15例活动期DM患者和15例健康对照者外周血,采用免疫磁珠分离获得CD4+T细胞,通过逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测出各组TGF-β1、IL-10表达水平。观察CD4+T细胞中TGF-β1、IL-10表达与血清CK含量的相关性。结果:活动期DM患者外周血CD4+T细胞中TGF-β1和IL-10表达量显著高于健康对照,血清CK含量与CD4+T细胞TGF-β1表达量呈中度正相关。结论:活动期DM患者外周血CD4+T细胞中TGF-β1和IL-10 mRNA表达显著升高,可能与DM疾病发生有关。     

胶质细胞与细胞因子在帕金森病病理变化中的作用

帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是一种以中脑黑质多巴胺能神经元进行性变性丧失为特征，同时伴随有小胶质细胞与星形胶质细胞的增生。目前许多研究证明胶质细胞增生的同时，会产生许多炎症原细胞因子，如：IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ、IL-10、iNOS以及一些神经营养因子等。而这些细胞因子在帕金森病中可能促进神经变性，而神经营养因子可能对神经元起着保护作用。     

LPS 对肝癌细胞株 HepG2增殖、凋亡及分泌炎症因子的影响

目的：体外观察不同浓度细菌内毒素脂多糖(LPS)对肝癌 HepG2细胞增殖、凋亡以及分泌炎症因子的影响,并探讨可能的机制。方法按照随机数字法将细胞分为对照组及1、10、50、100μg/ ml LPS 处理组。用 MTT 检测刺激24、48、72和96 h 后细胞的增殖能力;用流式细胞术检测刺激24 h 后细胞的凋亡情况;用 RT-PCR 法检测刺激24 h 后白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8) mRNA 的表达含量;用化学发光法检测刺激24 h 后 IL-6和 IL-8的表达量,最后用 SPSS 19．0对数据进行统计学分析。结果与对照组比较,各处理组刺激24 h 和48 h 后细胞增殖活性明显升高(P <0．05),而在72、96 h 差异无统计学意义(P >0．05);刺激24 h 后,1、10、50和100μg/ ml LPS 处理组以及对照组之间的细胞凋亡率差异无统计学意义(P >0．05);刺激24 h 后,与对照组比较,随着刺激浓度的升高,IL-6和 IL-8的表达量明显升高(P <0．05)。结论 LPS 可以在48 h 内促进 HepG2的增殖,对HepG2细胞的凋亡没有影响,并且 LPS 作用可以上调 IL-6和 IL-8水平。     

1型糖尿病免疫治疗研究进展

1型糖尿病(T1DM)是遗传易感个体在环境因素影响下发生的慢性自身免疫紊乱.胰岛β细胞在丧失免疫耐受性后,免疫调节功能失调,刺激辅助性T细胞1(Th1)分泌白介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-β(TNF-β)等细胞因子;同时,抑制Th2细胞分泌IL-4、IL-10,从而导致细胞因子不平衡,致使自身β细胞成为靶细胞,其细胞膜成分成为自身免疫应答的杀伤目标,进而激活细胞毒性T细胞、巨噬细胞(Mφ)和自然杀伤细胞(NK),产生氧自由基、一氧化氮和一些细胞因子(如IL-1、TNF-α、TNF-β、IFN-γ),最终对胰岛β细胞产生直接毒性.     

治疗类风湿关节炎中药对白细胞介素的影响研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)主要是机体对自身滑膜发生免疫反应的疾病,以慢性进行性关节损害为特点,是一种伴有炎性细胞浸润和骨组织侵蚀的滑膜组织增生性疾病。在炎性滑膜组织中,巨噬细胞、成纤维细胞和淋巴细胞在抗原的不断刺激下增生并分泌多种细胞因子,如白细胞介素(interleukin,IL,以下简称白介素)等,IL-1,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12等在介导炎症反应、促进免疫应答的过程中起着非常重要的作用,如IL-1能够诱发炎症反应和细胞的增生、溶解与破坏,还能够刺激RA滑膜细胞浸润,血管增生,血管翳形成,软骨破坏和纤维组织…     

肺癌Th1/Th2反应状态及黄芪的调节作用

目的探讨肺癌细胞株以及荷瘤机体外周血单个核细胞(PBMC)Th1/Th2免疫反应状态,观察中药黄芪(AG)对两者Th1/Th2状态的作用.方法①3种人肺癌细胞株(鳞、腺、小细胞癌)各分为5组,其中1组即刻冻存待测,其余4组分别为不加药对照组、加5%AG、10%AG、20%AG组,培养48h,收集细胞;②采集并分离肺癌患者和健康志愿者的PBMCs,各分为4组其中1组即刻冻存待测,其余3组分别为不加药对照组、加10%AG、20%AG组,培养48h,收集细胞.以II-2,IFN-γ代表Th1型细胞因子,II-4,IL-6,IL-10代表Th2型细胞因子,用RT-PCR方法检测各组肺癌细胞株和肺癌患者PBMC中Th1/Th2型细胞因子m-RNA的表达.结果①3种肺癌细胞株的Th1型因子IFN-γ和IL-2均无表达,Th2型因子IL-4、IL-6、IL-10则均表达;经与黄芪培养后,小细胞肺癌株在3种不同浓度AG存在时均可出现IFN-γ表达,在5%AG时可同时出现IL-2的表达,IL-4、IL-6的表达被抑制;鳞癌和腺癌细胞株经黄芪培养后,其Th1/Th2型细胞因子的m-RNA表达与培养前差异无显著性(P>0.05);②肺癌患者PBMC中,II-4、IL-6和II-10表达阳性率显著高于正常对照(P均<0.05),而IL-2无1例表达(0/23),IFN-γ仅1例表达;经与黄芪培养后(两种浓度),肺癌患者Th2型因子与未加AG培养组相比,IL-4、IL-6和IL-10的表达率下降(P均<0.05);而IL-2的表达率显著提高(P<0.05).结论无论肺癌细胞株还是荷瘤机体外周血的免疫细胞均呈现Th2型免疫反应的优势状态;黄芪对于肺癌细胞株和宿主PBMCsTh1/Th2的状态有良好的调节作用,可使肺癌细胞株和肺癌患者PBMCs的Th2型优势免疫反应向TM方向逆转.     

IL-1β对小鼠垂体正常细胞和ACTH瘤细胞生长的影响

目的探讨垂体内自分泌、旁分泌因子IL1β是否参与垂体细胞和垂体瘤细胞的生长增殖过程.方法以体外原代培养的小鼠垂体正常细胞为对照,采用噻唑蓝(MTT)法观察10-9mol/L～10-13mol/LIL-1β对小鼠垂体ACTH瘤细胞(AtT20)生长增殖的影响.结果(1)IL1β刺激垂体原代培养细胞4～72h,不同浓度的IL-1β各组(n=9)与对照组(n=9)间的差异无显著性(P＞0.05),实验中培养细胞处于对数生长期状态.(2)IL-1S刺激AtT20细胞48、72h,IL-1β各浓度组(n=9)细胞生长分裂的增加与对照组(n=9)相比差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01).结论IL-1β参与了AtT20细胞生长增殖的调节,提示IL-18可能是参与垂体ACTH瘤发病的因素之一.     

阿魏酸钠抑制脂多糖引起的星形胶质细胞IL-1β的表达

目的 研究阿魏酸钠(SF)对脂多糖(LPS)引起的培养星形胶质细胞(AC)白细胞介素-1β (IL-1β)表达的抑制作用及机制.方法 将培养星形胶质细胞分为对照组、LPS组、SF(50,100,200μmol·L-1)组.细胞成熟后分组给药处理,ELISA法测定培养液中IL-1β表达,Western蛋白印迹法检测细胞IL-13、磷酸化JNK1和磷酸化C-Jun蛋白表达.结果 星形胶质细胞在LPS (10 mg·L“)刺激下IL-1β的释放量、IL-1β蛋白以及磷酸化JNK1、磷酸化C-Jun蛋白表达水平较对照组明显增高(P＜0.01).应用SF(50,100,200 μmol·L-1)预处理6h明显降低培养液中IL-1β含量,抑制星形胶质细胞IL-1β、磷酸化JNK1和磷酸化C-Jun蛋白表达水平.结论 SF可能通过下调JNK信号通路抑制星形胶质细胞IL-1β表达.     

IL-10?IL-4及其受体启动子在人类单纯疱疹病毒1型激活卡波济肉瘤相关疱疹病毒复制过程中的启动活性分析

目的:分离和鉴定人类IL-10、IL-10受体(IL-10Rα)、IL-4及其受体IL-4Rα启动子序列,并分析IL-10、IL-4以及其受体的启动子在人类单纯疱疹病毒1型(HSV-1)激活卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)过程中的启动活性.方法:以人类基因组DNA为模板,PCR扩增IL-10、IL-10Rα、IL-4Rα启动子区序列,并分别克隆载入pGL-3基本载体中虫荧光素酶(Luciferase)报告基因的上游.进一步将上述构建的重组质粒与本室保存的含IL-4启动子重组质粒分别转染HSV-1感染的BCBL-1细胞,并作Luciferase活性检测.结果:分离了IL-10、IL-10Rα和IL-4Rα的启动子区域序列,并成功克隆了含启动子序列重组报告质粒;HSV-1感染的BCBL-1细胞在进一步转染了IL-10、IL-10Rα、IL-4和IL-4Rα启动子重组报告质粒后,其Luciferase值与相应的对照比较显著升高(P＜0.05).结论:在BCBL-1细胞中,HSV-1可通过直接激活IL-10、IL-4以及相应受体的启动子来上调它们的表达;在HSV-1感染的BCBL-1细胞中,IL-10和IL-4可能对KSHV的裂解复制起到促进作用.     

白细胞介素6对人单核/巨噬细胞系细胞表面Toll样受体4表达的影响

目的:观察白细胞介素6(IL-6)对人单核/巨噬细胞系(THP-1)细胞表面Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:流式细胞仪检测不同浓度IL-6(0ng/L、10ng/L、100ng/L、1μg/L、10μg/L、100μg/L)干预THP-1细胞24h,以及10μg/L的IL-6干预THP-1细胞不同的时间(0、3、6、12、24、48h)后细胞表面TLR4的表达水平。结果:各浓度IL-6均能不同程度的促进细胞表面TLR4的表达(P<0.05),以10μg/L组干预最为显著(P<0.01);10μg/LIL-6干预不同的时间后均可促进其表达,以干预24h后的差异最显著(P<0.01)。结论:IL-6可以促进人THP-1细胞表面TLR4表达,且具有一定的浓度和时间依赖性。     

肺癌患者的Th1/Th2免疫反应状态

目的 了解不同病理类型肺癌患者辅助性T细胞亚群(Th1/Th2)的反应状态,探讨肺癌发生发展的免疫机制.方法 收集不同病理类型肺癌患者77例(腺癌30例,鳞癌28例,小细胞肺癌19例)、肺部良性疾病患者33例、健康志愿者45例的血清,分成肺癌组、良性组和正常组,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组外周血中Th1型细胞因子白细胞介素2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的浓度.结果 3种不同病理类型肺癌患者外周血中IL-2、IFN-γ浓度均显著低于正常组,IL-4、IL-10浓度显著高于正常组(P＜0.05).良性组外周血Th1/Th2型细胞因子浓度与正常组比较差别无统计学意义(P＞0.05).结论 腺癌、鳞癌、小细胞肺癌等3种不同病理类型的肺癌患者外周血中的免疫细胞均呈现Th2型免疫反应优势状态,使肺癌逃逸免疫,是肺癌发生发展的可能免疫机制.