血管紧张素Ⅱ与心肌纤维化

心肌纤维化（myocardial fibrosis，MF）主要表现为心脏成纤维细胞数量增加，心肌细胞外间质胶原过度沉积，各型胶原比率失调（Ⅰ／Ⅲ型胶原比率增高）和排列紊乱。在MF的发生、发展过程中，血管紧张索Ⅱ（angiotensin Ⅱ，Ang Ⅱ）起着非常重要的作用。近年来对二者关系的研究，已取得了一系列成果，综述如下。     

血府逐瘀汤对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖及细胞外基质的影响

目的：研究血府逐瘀汤对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞增殖及细胞外基质合成的影响,探讨其抑制心肌纤维化可能的作用机制。方法：采用胰酶消化法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞（cardiac fibroblast,CF）,建立AngⅡ诱导的心肌纤维化模型。实验分组为：空白对照组,AngⅡ组,5%、10%、15%血府逐瘀汤组和缬沙坦组。空白对照组以对照组鼠血清温育,其余各组先以AngⅡ10-6mol/L刺激24h后,再分别以对照组鼠血清,5%、10%、15%血府逐瘀汤含药血清,缬沙坦含药血清温育24h。采用四氮唑蓝比色法检测CF增殖,羟脯氨酸法检测胶原含量,放射免疫法检测细胞培养上清中透明质酸（hy-aluronic acid,HA）和Ⅲ型前胶原（procollagenⅢ,PCⅢ）水平,酶联免疫吸附测定法检测上清中纤维连接蛋白（fibronectin,FN）表达。结果：与空白对照组比较,AngⅡ10-6mol/L作用CF24h显著上调CF增殖指数和DNA合成（P〈0.01）,增加胶原含量（P〈0.01）,增加上清液中FN、HA和PCⅢ含量（P〈0.01）。与AngⅡ10-6mol/L相比,血府逐瘀汤含药血清下调CF增殖指数和DNA合成,降低胶原含量（P〈0.05）,减少上清液中FN、HA和PCⅢ含量（P〈0.01）。结论：AngⅡ能够促进CF增殖及细胞外基质合成,具有促进心肌纤维化作用;血府逐瘀汤能改善心肌纤维化,机制可能与抑制AngⅡ诱导CF增殖,抑制细胞外基质胶原蛋白、HA、PCⅢ及FN合成有关。     

血管紧张素Ⅱ致小鼠心肌肥厚、心肌纤维化模型的建立

目的 探索在较短时间内建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致小鼠心肌肥厚、心肌纤维化模型,为深入研究心力衰竭提供可靠的实验对象.方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为两组(AngⅡ组、对照组),AngⅡ组背部皮下手术置入预装AngⅡ微量泵,经微量泵持续释放AngⅡ1.6 mg/(kg·d)2周(AngⅡ负荷),对照组背部皮下手术置入预装蒸馏水微量泵2周.观察术前术后不同时间两组小鼠体重、尾动脉压等变化.放射免疫法测定术后2周两组血中脑钠肽(BNP)含量.超声心动图测定术前术后两组左室心肌厚度、左室腔大小、心功能等参数.观察术后2周两组心肌肥厚(心脏/体重)的变化.苏木素-伊红和Masson染色分别观察术后2周两组左室心肌细胞内径大小、心肌纤维化程度.结果 两组手术成活率100%.AngⅡ组术后3 d血压开始上升,1、2周达到较高水平,明显高于对照组.AngⅡ负荷2周后BNP明显高于对照组.AngⅡ负荷2周后左室心肌厚度明显大于术前及对照组术后,左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)明显低于术前.AngⅡ负荷2周后心肌肥厚程度(心脏/体重)、心肌细胞横径、心肌纤维化程度[心肌血管周围胶原面积(PVF)/血管腔面积(VA)]均明显高于对照组.结论 通过置入微量泵体内缓慢释放血管紧张素Ⅱ可以较短时间内成功地模拟慢性压力负荷心肌肥厚、心肌纤维化模型,重复性好,为心力衰竭的深入研究提供了可靠的实验对象.     

血管紧张素Ⅱ与高血压心肌纤维化关系的研究进展

心肌纤维化 (myocardialfibrosis,MF)以成纤维细胞数目增多和心肌细胞外间质胶原过度沉积为特征 ,可发生于许多心血管疾病 ,在高血压性心脏病中同样存在。心肌纤维化可导致心肌僵硬度增加 ,心室舒张功能下降 ,并影响心肌电生理 ,引起猝死。其重要性备受广大医务工作者关注。血管紧张素Ⅱ (angiotensinⅡ ,AngⅡ )在高血压心肌纤维化的发生、发展过程中起着非常重要的作用。现将研究现状综述如下。1　心肌胶原的产生及其功能正常心肌组织是由心肌细胞和间质所构成。间质包括成纤维细胞 (FBC)及其合成的胶原。心肌细胞仅占心脏总细胞数的 1…     

血管紧张素Ⅱ致心肌纤维化及其信号转导机制研究进展

心脏重构包括心脏肥厚和心肌纤维化（myocardial fibrosis,MF）两个方面,MF主要是在各种病理生理因素作用下,心脏局部的成纤维细胞过度增殖,细胞外基质沉积及Ⅰ、Ⅲ型胶原不成比例增加.肾素-血管紧张素-醛固酮系统（reninangiotensin-aldosterone eystem,RAAS）是心肌纤维化过程中重要的神经内分泌机制之一,血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）是RAAS最重要的效应因子,不仅来源于经典的RAAS,还可由心脏局部的心肌细胞和成纤维细胞合成释放,以旁分泌或自分泌的方式发挥生物学效应.AngⅡ致心肌纤维化的信号通路复杂,主要通过与其特异性受体AngⅡ1型受体（angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R）结合,并激活一系列信号分子通路将细胞外信号传递至细胞内产生纤维化效应.     

丹参酮Ⅱ A 磺酸钠对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌纤维化的影响

目的 观察丹参酮Ⅱ A 磺酸钠（STS）对血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）诱导的大鼠心肌纤维化的影响; 并初步探讨STS 抗心肌纤维化的作用与转录因子NF-E2 相关因子2（Nrf2）所调控的抗氧化应激反应的关系。 方法 40 只SD 大鼠随机分为5 组（对照组,模型组,低、中、高剂量STS 组）,采用皮下植入微量渗透泵缓释 Ang Ⅱ复制大鼠心肌纤维化模型,各STS 组给予不同剂量STS 处理。3 周后,采用苏木精伊红和马松染色法 观察心肌纤维化程度;采用qRT-PCR 和Western blot 检测心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原,Nrf2 和它的胞质接头 蛋白Keap1,以及Nrf2 所调控的抗氧化酶和Ⅱ相解毒酶mRNA 水平及其蛋白水平;采用比色法检测心肌组 织中丙二醛、谷胱甘肽水平及超氧化物歧化酶活性。结果 STS 呈剂量依赖性地减轻Ang Ⅱ诱导的心肌纤维化, 促使Nrf2 在细胞核内的聚集,提高抗氧化酶及Ⅱ相解毒酶的表达,增强抗氧化应激反应,降低心肌组织脂质过 氧化水平。结论 STS 能够有效减轻Ang Ⅱ诱导的大鼠心肌纤维化,其抗纤维化作用与调控Nrf2 信号通路相关。     

苦参碱对血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的 :研究苦参碱 (matrine)对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导新生大鼠心肌成纤维细胞 (cardialfibroblasts,CFb)增殖和胶原合成的影响 ,探讨其抑制心肌纤维化的机制。方法 :建立AngⅡ诱导新生大鼠CFb纤维化模型 ,采用MTT法检测Mat对CFb增殖的影响 ;羟脯氨酸测定检测CFB胶原合成量 ;RT PCR检测Mat作用下CFb的Ⅰ型胶原、间质胶原酶 (MMP 13)、组织金属白酶抑制因子 1(TIMP 1)、TGFβ 1的基因表达情况。结果 :①在一定范围内 ,苦参碱以浓度依赖性方式抑制AngⅡ诱导CFb的增殖和胶原合成 (P <0 .0 1) ,②苦参碱可以降低Ⅰ型胶原和TGFβ 1基因mRNA表达 ,③苦参碱可以提高MMP 13基因mRNA表达。结论 :苦参碱通过抑制AngⅡ诱导的CFb增殖和胶原合成增加 ,从而发挥有效的抗心肌纤维化作用     

芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响

目的：观察芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ（ Ang Ⅱ）诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌的影响,探讨其可能机制。方法应用血清药理学方法制备大鼠含药血清,采用复合酶消化和差速贴壁法原代培养心肌成纤维细胞,MTT法测定芝麻素对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响, ELISA法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原含量与转化生长因子β1（ TGF－β1）水平,比色法测定细胞总抗氧化能力（ T－AOC）及丙二醛（ MDA）含量,Western blot法测定Smad3活化水平。结果芝麻素含药血清可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌（ P＜0.05,P＜0.01）,降低TGF－β1含量及Smad3活化水平（P＜0.05,P＜0.01）。此外,芝麻素含药血清可明显提高成纤维细胞抗氧化能力,减少脂质过氧化产物MDA生成（ P＜0.05,P＜0.01）。对照血清对上述各项指标均无明显影响。结论芝麻素含药血清可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖与胶原分泌,其机制可能与改善氧化应激状态、调节TGF－β1／Smad信号通路有关。     

血管紧张素Ⅱ与转化生长因子—β1对高血压心肌纤维化的影响

目的观察阻断肾素-血管紧张素系统(RAS)对自发性高血压大鼠(SHR)心肌局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及对心肌胶原代谢的影响,探讨AngⅡ与TGF-β1在高血压心肌重构中的作用.方法以Wis-tar-Kyoto(WKY)大鼠为非高血压对照,15周龄SHR经氯沙坦(Los)或/和卡托普利(Cap)治疗15周,放免法测定AngⅡ、双抗体夹心ELISA法检测心肌TGF-β1水平、苦味酸天狼猩红染色VIDAS图像分析计算胶原容积分数(CVP)和血管周围胶原面积(PVCA)、放射性底物测定法检测心肌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的活力.结果在SHR心肌中,AngⅡ、TGF-β1、CVP、PVCA明显高于WKY大鼠,而MMP-1活力降低(P＜0.01).阻滞RAS的不同水平均降低AngⅡ、TGF-β1、CVP、PVCA,升高MMP-1活力.SHRLos+Cap或SHRLos降低TGF-β1水平、升高MMP-1活力明显优于SHRRCap(P＜0.05).心肌AngⅡ水平与TGF-β1、CVP、PVCA正相关(P＜0.01),AngⅡ、TGF-β1与MMP-1活力呈负相关(P＜0.01).结论AngⅡ可能通过AT1受体调控TGF-β1促进胶原合成、抑制胶原分解.氯沙坦在抑制TGF-β1水平方面明显优于卡托普利,合用未优于单用氯沙坦.     

小檗碱抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的作用及机制研究

目的研究小檗碱(Ber)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFB)增殖和胶原合成的影响,并探讨其作用机制。方法采用酶消化法和差速贴壁法获得纯化的CFB,应用MTT法测定CFB增殖、羟脯氨酸法测定胶原蛋白含量、化学比色法测定NO含量和NOS活力、ELISA法测定TGF-β1含量。结果小檗碱在1.25~10 mg/L浓度范围内可明显抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原蛋白合成增加,同时可升高NO含量和NOS活力、降低TGF-β1含量。结论小檗碱可抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成的作用,对抑制心肌纤维化,改善心室重构有积极意义,其作用机制与促进心肌成纤维细胞分泌NO、减少TGF-β1含量有关。     

丹参素对血管紧张素Ⅱ致心肌肥大的影响

利用体外细胞培养技术 ,观察了丹参素对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )致心肌肥大的影响。结果表明 :丹参素抑制AngⅡ引起的培养心肌细胞总蛋白含量及直径的增加 ,对AngⅡ引起的心脏成纤维细胞的增殖也有抑制作用 ,其效果与AngⅡ受体 1阻滞剂Losartan相似 ,说明丹参素具有抑制心肌肥厚的作用     

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对结缔组织生长因子表达的影响

目的 :在体外培养的新生大鼠心肌成纤维细胞中 ,研究血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及其受体拮抗剂洛沙坦对结缔组织生长因子表达 (CTGF)的影响。方法 :差速贴壁法分离新生SD大鼠心肌成纤维细胞 (CFs)及免疫组化法对其进行鉴定 ,不同浓度的AngⅡ (10 -8、10 -7、10 -6、10 -5mol/L)刺激CFs 4 8h ,再选浓度 10 -6mol/L分别作用 6、2 4、4 8及 72h得出AngⅡ对CTGF表达作用的时量关系 ;再选 10 -6mol/L作诱导浓度 ,与 10 -5mol/L洛沙坦孵育 4 8h ,采用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术测定CFsCTGFmRNA的表达 ,WesternBlot法测定CTGF蛋白的表达。结果 :不同浓度的AngⅡ (10 -8、10 -7、10 -6、10 -5mol/L)作用 4 8h及 10 -6mol/LAngⅡ分别作用 12、2 4、4 8、72h ,AngⅡ以浓度 -时间依赖的方式促进CFsCTGFmRNA及蛋白水平的表达 ;洛沙坦 10 -5mol/L作用4 8h ,与AngⅡ组比较 ,6 5 %以上抑制AngⅡ诱导的CTGFmRNA水平的表达即 (1.4 6± 0 .18)比 (2 31± 0 .2 3) ,(P<0 .0 1) ,蛋白水平上使AngⅡ诱导的CTGF的表达减弱约 73%即 (35 .99± 5 .6 4 )比 (6 8.86± 7 2 7) ,(P <0 .0 1)。结论 :AngⅡ通过AT1受体介导机制上调CFs中CTGF的形成 ,可能是AngⅡ致纤维化通路中的关键环节 ;洛沙坦可能通过抑制CTGF的表达 ,从而延缓     

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ致心肌肥大的影响

利用体外细胞培养技术 ,观察了川芎嗪对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )致心肌肥大的影响。结果表明 :川芎嗪抑制AngⅡ引起的培养心肌细胞总蛋白含量及直径的增加 ,对AngⅡ引起的心脏成纤维细胞的增殖也有抑制作用 ,其效果与AngⅡ受体 1阻滞剂Losartan相似 ,说明川芎嗪具有抑制心肌肥厚的作用。     

环孢素A对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察环孢素A（CsA)对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响，以探讨钙调神经磷酸酶（CaN)依赖的信号通路在血管平滑肌细胞增殖中的作用。方法；以体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞为模型，实验分为三组：（1）AngⅡ组，（2）CsA AngⅡ组，（3）对照组。检测细胞增殖活度（MTT法），增殖细胞核抗原（PCNA）表达（免疫组化定量技术），细胞数目（直接计数法）的变化。结果：AngⅡ组血管平滑肌细胞增殖活度（吸光度表示），PCNA表达水平（光密度值表示）和细胞数目明显高于对照组（P＜0．01或P＜0．05），CsA＋AngⅡ组血管平滑肌细胞增殖活度，PCNA表达水平和细胞数目较AngⅡ组明显降低，差异显著（P＜0．01或P＜0．05）。结论：环孢素A可显著阻滞血管紧张素Ⅱ刺激的血管平滑肌细胞增殖，这种作用可能通过抑制CaN活性，阻断CaN介导的信号传导通路所致。     

血管紧张素Ⅱ对肾成纤维细胞增殖及分泌白细胞介素—6的影响

目的 研究血管紧张素（Ang)Ⅱ对人肾成纤维细胞（KFB）增殖及分泌白细胞介素（IL－6）的影响，为完善Ang Ⅱ致肾纤维化机理提供新实验依据。方法 分离培养人胎肾成纤维细胞，经鉴定后分别采用MTT法和放射免疫分析法（RIA）检测AngⅡ对KFB增殖及分泌IL－6的影响。结果 10^-6mol/L Ang Ⅱ作用于KFB后48及72小时，可明显促进细胞增殖；无AngⅡ刺激时，体外培养的正常人KFB可分泌微量的IL－6，且呈时间依赖性，10^-7-10^-6mol/L Ang Ⅱ作用于细胞6小时，即可迅速而显著地刺激细胞分泌IL－6，10^-6mol/L AngⅡ作用24－48小时，均可显著增加细胞IL－6的分泌。结论 不同浓度的Ang Ⅱ（10^-7-10^-6mol/L)作用于人KFB后，可促进细胞增殖，提高细胞对IL－6的分泌量。推测这可能是在各种肾脏疾病进展时，AngⅡ 参与肾小管间质病变、促进肾纤维化的机制之一。     

丹参素和川芎嗪对血管紧张素Ⅱ致心肌间质成纤维细胞增殖相关基因的影响

目的通过研究活血药对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致心肌间质成纤维细胞增殖相关基因的影响,从分子生物学角度探讨活血中药的有效组分丹参素和川芎嗪在AngⅡ诱导心肌肥大反应中的作用机制。方法以胶原Ⅰ和胶原Ⅲ基因表达为心肌间质指标,采用一步法,应用TRIZOL Reagent提取总RNA,然后用RT-PCR方法测定胶原Ⅰ和胶原Ⅲ的mRNA表达。结果AngⅡ可显著增加胶原ⅠmRNA的表达(P<0.01),而Losartan可明显抑制AngⅡ所诱导的胶原ⅠmRNA的表达(P<0.01),而丹参素也可减少胶原ⅠmRNA的表达(P<0.01),川芎嗪虽无统计学意义,但也有减少胶原ⅠmRNA的趋势。AngⅡ同时也增加胶原ⅢmRNA的表达,Losartan可明显抑制AngⅡ所诱导的胶原ⅢmRNA的表达(P<0.01),而丹参素和川芎嗪也可减少胶原ⅢmRNA的表达(P<0.05)。结论活血药的有效组分丹参素和川芎嗪可抑制AngⅡ致心肌间质成纤维细胞胶原Ⅰ和胶原Ⅲ基因表达的增加,具有防止心肌细胞肥大和抗心肌间质纤维化作用,从而防治心脏肥厚。