MTT法在抗HIV药物研究中的应用

目的参考多篇文献建立用于体外药物抗ＨＩＶ研究的ＭＴＴ试验方法。方法其过程可简述为先用９６孔微量板做抗病毒实验，４天后，加ＭＴＴ（０．７ｍｇ／ｍｌ）２０μｌ／孔，置３７℃ＣＯ２箱中４ｈ，移去１５０μｌ／孔培养液，再加１００μｌ／孔的ＤＭＳＯ过１０分钟，即可测定ＯＤ５４０值，计算药物对ＨＩＶ感染细胞的保护率。结果ＨＬ的ＣＣ５０＝０．３３５４ｍｇ／ｍｌ，ＥＣ５０＝０．０８６４ｍｇ／ｍｌ，ＭＴＴ法较ＣＰＥ法更为敏感。结论ＭＴＴ法能够以光密度值快速、客观、准确地得到试验结果，提高实验的质量和效率     

CCK-8法与MTT法检测人前列腺癌PC3细胞活性的比较研究

目的 探讨CCK-8法和MTT法的最佳实验条件.方法 以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,采用CCK-8和MTT法检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞增殖的影响.结果 CCK-8法的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量范围为8×102～1×105个.结论 CCK-8法较MTT法检测的灵敏度高,准确性好,是一种优于MTT法的检测细胞增殖活性的方法.     

MTT法检测没食子酸对两种细胞的体外毒性

目的:探讨抗肿瘤单体没食子酸(GA)对体外培养的正常人肝细胞株LO2和肝癌细胞株SMMC-7721的毒性。方法:采用MTT实验分析GA对LO2和SMMC-7721的增殖抑制作用。结果:GA作用24h、48h、72h后,用药组均出现了不同程度的增殖抑制。结论:抗肿瘤单体GA对LO2和SMMC-7721细胞均有一定的毒性,表现为增殖抑制作用,作用早期(24h)对LO2的抑制大于对SMMC-7721的抑制,连续作用后(48h、72h),对SMMC-7721细胞的损伤明显超过对LO2的抑制。     

MTT法和SUB-G1法检测金克对胃癌细胞的抑制作用

目的:拟探讨金克是否能诱导胃癌细胞凋亡,金克能否有效用于胃癌患者的治疗。方法:利用MTT法和SUB-G1法分析金克诱导抑制细胞的能力。将不同浓度的金克与胃癌细胞孵育,在不同的时间点收获,探求金克诱导胃癌细胞抑制的最佳作用时间及作用浓度。结果:通过MTT法和SUB-G1法分析结果显示金克对胃癌细胞的抑制作用,浓度为1.5g/L的金克诱导胃癌细胞36小时后抑制率达到高峰。结论:MTT法和SUB-G1法是两种快捷、有效检测药物作用的方法,金克对于胃癌细胞的抑制作用介于低度敏感和不敏感之间,但是其能增强免疫,无明显毒副作用,具有广泛的临床应用前景。     

漆姑草提取物体外抗肿瘤活性的初步筛选研究

目的:对漆姑草提取物的体外抗肿瘤活性进行初步筛选研究。方法:首先选用3个人癌细胞株(人白血病K562细胞株、人宫颈癌Hela细胞株、人乳腺癌MCF-7细胞株),采用MTT法和SRB法对漆姑草5个不同溶剂萃取部位进行抗肿瘤活性筛选,并对溶剂极性较大部位中的皂苷和多糖进行针对人白血病K562和HL-60两种细胞株的筛选研究。结果:漆姑草皂苷对人白血病细胞株K562和HL-60均显示有一定的抑制作用,多糖对人白血病K562细胞可能有弱的抑制作用。结论:漆姑草皂苷是漆姑草体外抗白血病细胞的活性部位。     

MTT法检测多种肿瘤细胞对硒酸酯多糖的敏感性研究

目的:采用MTT法检测多种肿瘤细胞对硒酸酯多糖(KSC)的敏感性。方法:以30、60、120mg/L3种不同浓度的KSC分别处理HepG-2、Bel-7402、MCF-7、SGC-7901、A5495种肿瘤细胞,采用MTT法检测KSC对5种肿瘤细胞的抑制率。结果:KSC对多种肿瘤细胞都有明显的抑制增殖作用,KSC120mg/L作用72h后,对上述5种细胞株的抑制率分别为69.31%、62.24%、53.29%、52.03%、33.62%。结论:KSC对多种肿瘤细胞都有抑制作用,尤其是对肝癌细胞的抑制作用最强,具有治疗肝癌潜在的应用价值。     

鳖甲抗肝纤维化有效部位的初步筛选研究

目的:筛选鳖甲抗肝纤维化的有效部位。方法:传代培养的LX-1与鳖甲提取物的Bj1～Bj8共8个部位共同培养72h后,3H-TdR法检测对TGF-β1刺激的LX-1细胞增殖的影响,再将传代培养的HSC-T6与鳖甲的Bj61～Bj68(为Bj6的进一步的分离部位)共同培养72 h后,采用MTT比色法测定各浓度组HSC-T6的增殖情况。结果:3H-TdR法检测结果表明Bj4、Bj6、Bj7部位抑制LX-1细胞增殖,MTT比色法结果表明Bj66和Bj67部位有较强的抑制HSC-T6细胞增殖的作用。结论:Bj66和Bj67为鳖甲的有效部位。     

抗瘤丸对神经胶质瘤细胞抑制作用的实验研究

目的 考察中药抗瘤丸对神经胶质瘤细胞的抑制作用.方法 采用MTT法在不同时间(24、48、72 h)检测系列浓度(0.5、1.O、1.5、2.0、2.5 mg·mL-1)抗瘤丸对人神经胶质瘤细胞U87-MG和大鼠神经胶质瘤细胞C6的抑制作用,同时分别进行空白对照比较.结果 抗瘤丸与空白相比能降低两种胶质瘤细胞的增殖率,...     

藏药紫金标抗HSV-1的作用机理研究

目的 :探讨紫金标抗单纯疱疹Ⅰ型病毒 (HSV-1)的作用及机理 ,为进一步开发该药提供理论依据。方法 :采用不同剂量的紫金标作用于适量HSV-1感染的Vero细胞 ,以 50%组织细胞感染量 (TCID₅₀ ) ,细胞病变效应(CPE) ,MTT法和核酸分子杂交作为评价指标。结果 :MTT法测得紫金标的 50 %抑制浓度 (IC₅₀ )为 29.46mg·L^-1,50%中毒浓度 (TC₅₀ )为 1 077mg·L^-1,治疗指数 (TI)为 36.56 ,结果表明紫金标有明显抑制HSV-1的作用 ,其作用强度和有效时间与药物浓度成正比。紫金标无直接灭活HSV-1的作用 ,也不能影响病毒的释放 ;但可干扰HSV -1对宿主细胞的吸附。不同浓度的紫金标能明显抑制HSV-1gD基因复制和mRNA表达。结论 :紫金标具有显著的抗HSV-1的作用 ,能抑制HSV-1对宿主细胞的吸附以及抑制HSV-1gD基因复制与转录。     

中药复方益气消征方对体外小鼠脾细胞增殖作用的影响

目的观察中药复方益气消征方（YQXZF）对体外小鼠脾细胞增殖作用的影响。方法取不同浓度益气消征方体外作用于小鼠脾细胞,采用MTT比色法测定小鼠脾细胞的光密度值。结果益气消征方对小鼠脾细胞有促进增殖的作用,在益气消征方浓度为3μg/ml时促进增殖作用最明显。结论中药复方益气消征方具有体外促进小鼠脾细胞增殖的作用。     

外消旋体雌马酚体外抗肿瘤活性的比较研究

目的探讨外消旋体雌马酚(equol,Eq)对7种肿瘤细胞的体外抗增殖活性,并与大豆异黄酮主要成分黄豆苷原与染料木素比较。方法肿瘤细胞在RPMI-1640培养基中培养,采用MTT法测定不同浓度的雌马酚对肿瘤细胞的抑制作用;比较同浓度下雌马酚、黄豆苷原与染料木素的抗肿瘤活性。结果雌马酚对7种不同的肿瘤细胞系均有不同程度的抑制作用,且呈现浓度依赖性;在50μmol/L时,抗癌活性染料木素>雌马酚>黄豆苷原。结论雌马酚在体外具有广泛的抗肿瘤活性,且呈现一定的浓度依赖性;雌马酚的抗肿瘤活性弱于染料木素,强于黄豆苷原。     

川楝子提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究

目的在体外研究川楝子提取物抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用。方法以Vero细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,通过观察细胞病变效应(CPE)与空斑减数实验测定川楝子提取物抗HSV-1活性,计算其IC50与治疗指数,并从药物对病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的影响及对病毒穿膜的影响三个方面初探川楝子提取物抗HSV-1活性的机理。结果川楝子提取物能明显抑制HSV-1的致病变作用,其IC50为18.26μg/mL,TI值为18。研究显示,川楝子提取物在体外对HSV-1直接灭活的效果明显,而对HSV-1吸附与穿入细胞的抑制作用较差。结论川楝子提取物在体外有明显的抗HSV-1感染作用,且主要是通过直接灭活HSV-1而发挥作用。     

金线莲抗肿瘤活性部位的体外筛选及对LoVo细胞凋亡的影响

目的体外筛选出金线莲抗肿瘤作用的最佳活性部位,并检测其对肿瘤细胞凋亡的影响。方法采用MTT实验检测金线莲不同极性部位对人宫颈癌He La细胞、人体黑色素瘤A375细胞、人喉癌Hep-2细胞和人结肠癌Lo Vo细胞增殖抑制作用,从而筛选出活性最佳部位及对应细胞系。HE和AO/EB染色法观察最佳活性部位处理后细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 MTT实验结果显示,石油醚部位对各肿瘤细胞的生长增殖具有较强的抑制作用,其中对Lo Vo细胞的抑制效果最明显,作用48 h后其IC50为(45.51±1.66)μg/m L。HE染色和AO/EB荧光染色结果都显示石油醚部位作用于Lo Vo细胞后,出现了典型的凋亡形态学特征。流式细胞术检测经不同浓度石油醚部位作用后,Lo Vo细胞凋亡率和坏死率随浓度的增大逐渐上升。结论金线莲石油醚部对肿瘤细胞具有较强的抑制作用,其作用方式可能是通过诱导细胞凋亡来实现的。     

启膈Ⅰ、Ⅱ号方抗肿瘤机制的体外实验研究

目的探讨启膈Ⅰ、Ⅱ号方抗肿瘤的机制.方法运用MTT法观察启膈Ⅰ、Ⅱ号方对肿瘤细胞的抑制作用及对BALB/C小鼠脾细胞增殖的影响.结果启膈Ⅰ号方、Ⅱ号方能抑制人白血病细胞株K 562、人胃癌细胞株BGC 823、人食管癌细胞株TE 13的增殖,并能促进BALB/C小鼠脾细胞的增殖.结论启膈Ⅰ、Ⅱ号方对肿瘤有明显抑制作用,且能增强免疫功能.     

抗骨质疏松药物体外筛选试验方法的探讨

 目的探讨抗骨质疏松药物体外筛选试验方法。方法采用成骨细胞、破骨细胞和骨髓基质细胞作为抗骨质疏松药物体外药效评价的细胞模型,对抗骨质疏松药物体外筛选试验方法进行了较为系统的综述和探讨。结果与结论应用多种细胞模型、采用多种检测指标可以从不同角度更充分、深入的说明药物的作用靶点和作用机制,在此基础上有望发现更好的治疗和预防骨质疏松的药物。     

贵州老鹰茶提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究

目的研究贵州老鹰茶甲醇提取物体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)活性。方法采用细胞病变效应(Cytopatho-genic effect,CPE)法与空斑减数实验(Plaque reduction assay,PRA)测定甲醇提取物抗HSV-1活性,计算其空斑抑制率和半数抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC50),并从药物对病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的影响及对病毒穿膜的影响3个方面初步探讨其抗HSV-1的活性机理。结果贵州老鹰茶甲醇提取物能明显抑制HSV-1的致病变作用,其IC50为12.02μg/ml。药物主要是影响病毒对细胞的吸附,对病毒也有一定的直接灭活作用。结论贵州老鹰茶甲醇提取物有显著的抗HSV-1活性,初步推测其抗HSV-1活性的机理是作用在HSV-1和受体结合,侵入Vero细胞阶段。     

裙带菜茎硫酸多糖体外抗单纯疱病毒Ⅰ型活性的实验研究

目的 研究裙带菜茎多糖体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)活性.方法 采用空斑减数实验测定裙带菜茎粗多糖及纯化后多糖抗HSV-1活性,计算它们的空斑抑制率和IC50,并从药物对病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的影响及对病毒释放的影响3个方面初探裙带菜茎多糖抗单纯疱疹病毒活性机理.结果 裙带菜茎多糖能明显抑制HSV-1的致病变作用,IC50依次为 8.04,13.54 μg/ml.药物对病毒没有直接灭活作用,对病毒的释放也没有影响,主要影响了病毒的吸附.结论 裙带菜茎多糖有显著的抗HSV-1活性,且粗多糖比纯化后多糖活性要好,并且可以初步推测裙带菜茎多糖抗HSV-1活性是作用在病毒和受体结合、侵入Vero细胞阶段.     

MTT法检测通络止痛方对人膝骨关节炎滑膜成纤维细胞增殖的影响

目的:探讨通络止痛方对人膝关节骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)滑膜成纤维细胞增殖的影响。方法:取本院行全膝关节置换术患者术中废弃滑膜组织,经I型胶原酶消化后进行原代培养,取3~4代成纤维细胞进行高、中、低浓度通络止痛方干预。应用四甲基偶氮唑盐法测定(MTT)法检测KOA滑膜细胞的增殖水平,并用倒置显微镜下观察各浓度下的细胞形态。结果:加药组组间与加药组与空白组比较,差异有统计学意义(P0.05)。MTT法检测随通络止痛方浓度减小KOA滑膜细胞在490 nm波长处吸光OD值数越大;高中浓度组抑制率为正值,随浓度增加抑制率增大,低浓度抑制率为负值,随浓度降低抑制率减少。结论:高、中浓度通络止痛方对滑膜细胞增殖有抑制作用,低浓度组的通络止痛方对滑膜细胞有增殖有促进作用。     

万寿菊茎叶中2种黄酮类化合物的体外抗肿瘤活性

目的:研究万寿菊茎叶中两种黄酮类化合物4'-甲氧基-泽兰素-3-O-β-D-葡萄糖苷(化合物Ⅰ)和山柰酚-3,7-O-α-L-双鼠李糖苷(化合物Ⅱ)的抗肿瘤活性.方法:人胃癌细胞SGC7901与人肝癌细胞SMMC7721经20,40,80,120,160μmol·L-1的两种化合物作用24,48,72 h后,使用MTT法测定抑制率,并以5-氟脲嘧啶作为阳性对照.使用吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法观察浓度为160 μmol·L-1的两种化合物作用于细胞密度为1×106个/mL的2种肿瘤细胞48 h细胞形态学变化及细胞凋亡情况.结果:不同浓度的两种黄酮类化合物均可抑制人胃癌细胞SGC7901和人肝癌细胞SMMC7721的增殖,且呈现浓度与时间依赖性.化合物Ⅰ作用这2种癌细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为111.7,330.4 mg·L-1.化合物Ⅱ作用这两种癌细胞48 h的IC50分别为683.8,464.7 mg·L-1.2种化合物作用肿瘤细胞后细胞形态发生改变,并有部分细胞发生凋亡.结论:万寿菊茎叶中分离的2种黄酮类化合物具有体外抗肝癌和胃癌活性.     

柴胡含药血清的体外抗肿瘤作用的实验研究

目的：研究柴胡含药血清对体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721和乳腺癌瘤细胞MCF-7生长的影响。用血清药理学的方法探讨柴胡的抗肿瘤作用。方法：小鼠腹腔给以柴胡提取物后1、2、3、4h取血,制备含药血清。SMMC-7721、MCF-7细胞经不同时间点及浓度的柴胡舍药血清处理48h,MTT法检测各实验组和对照组的细胞增殖,计算抑制率。结果：柴胡提取物给药后1、2h后采集的血清对SMMC-7721及MCF-7细胞均有明显的抑制作用,与相同血清浓度的细胞对照组相比均有显著性差异（P〈0．05）,其中尤以1h含药血清作用最强。此外。柴胡含药血清的这种抑制作用随着血清浓度的增加而显著增强,表现出明确的浓度依赖性。结论：柴胡含药血清体外显示了一定的细胞毒活性。