miR-98在哮喘患儿外周血单个核细胞中的表达及意义

目的 探讨支气管哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-98的表达及其临床意义.方法 收集43例发作期和缓解期哮喘患儿,30例健康儿童(对照组)的外周血标本,分离PBMCs,采用实时定量PCR法检测PBMCs中miR-98及IL-13、IL-4 mRNA的相对表达量.结果 miR-98在哮喘发作期患儿PBMCs中的表达低于缓解期和对照组儿童,而IL-13、IL-4在哮喘发作期患儿PBMCs中的mRNA水平均高于缓解期和对照组,差异有统计学意义(P均<0.01);缓解期患儿和对照组间miR-98、IL-4 mRNA和IL-13 mRNA水平差异无统计学意义(P均>0.05).哮喘患儿发作期,miR-98水平与IL-4、IL-13 mRNA相对表达量均呈负相关(r=-0.794、-0.804,P均<0.001),IL-4和IL-13 mRNA相对表达量呈正相关(r=0.853,P<0.001).结论 miR-98在哮喘发作期患儿PBMCs中表达降低,可能与小儿哮喘的发作相关.     

哮喘患儿外周血单个核细胞诱生白细胞介素-2、白细胞介素-6及红霉素的调节作用

目的　探讨细胞因子白细胞介素 (IL) 2、IL 6在儿童哮喘发病中的作用及红霉素的调节作用。方法　采用双抗体夹心ELISA法测定 3 0例哮喘发作期、19例哮喘缓解期患儿外周血单个核细胞 (PBMC)经刺激后诱生IL 2、IL 6水平。 15例健康儿童做为对照组。观察培养液中加入红霉素后这些细胞因子的变化。结果　哮喘患儿发作期、缓解期PBMC经植物血凝素 (PHA)刺激后IL 6水平较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ;加红霉素后患儿IL 2、IL 6水平恢复正常。结论　细胞因子失衡是儿童哮喘发病的重要原因 ,红霉素可下调IL 6、IL 2水平 ,使细胞因子偏移状态得到逆转     

哮喘患儿外周血单个核细胞趋化因子的分泌及意义

为探讨外周血单个核细胞 (PBMC)分泌的正常T细胞活化后所表达和分泌的调节蛋白 (RANTES)与哮喘临床表型的关系 ,选择不同发病状况的哮喘患儿45例 ,取外周血分离单个核细胞 ,进行细胞培养 ,用酶联免疫吸附 (ELISA)方法测定细胞培养上清的RANTES含量。结果缓解期与发作期哮喘患儿外周血单个核细胞均能分泌一定水平的RANTES ,经植物血凝素 (PHA)刺激后RANTES分泌水平显著增加 (P<0.05) ;特应性哮喘患儿PBMC经PHA刺激后分泌RANTES水平显著高于非特应性哮喘患儿(P<0.05) ,以血清总IgE增高患儿更为明显 ;哮喘患儿PBMC经刺激后分泌RANTES与血清总IgE水平及吸入性过敏原皮肤点刺检查阳性数呈显著相关(P<0.05)。表明除趋化作用外 ,RANTES可能促进IgE合成 ,从而在特应性哮喘发病中发挥重要作用     

血清白细胞介素-17、白三烯B4及IgE水平在哮喘患儿中的表达及意义

目的 探讨血清白细胞介素-17(IL-17)、白三烯B4(LTB4)及总IgE水平在支气管哮喘发病中的作用及其关系.方法 研究组选择哮喘急性发作患儿60例(其中轻度组29例,中重度组31例),对照组选择健康儿童24例.应用酶联免疫吸附法检测各组儿童血清IL-17、LTB4水平,荧光酶联免疫法检测血清总IgE水平,哮喘患儿进行肺功能检测.全自动血液分析仪进行外周血中性粒细胞计数.结果 (1)哮喘轻度组、中重度组与对照组血清IL-17水平分别为(1.15±0.10)μg/L、(2.80±2.30)μg/L、(0.83±0.10)μg/L;LTB4水平分别为(2.22±1.01)μg/L、(8.79±9.36)μg/L、(1.94±1.13)μg/L;IgE 水平分别为(123.70±86.94)μg/L、(322.27±332.28)μg/L、(24.27±7.64)μg/L,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.001);(2)哮喘轻度组、中重度组与对照组血清中性粒细胞百分比分别为(55.06±11.15)％、(64.44±11.87)％、(47.96±13.52)％,淋巴细胞百分比分别为(42.20±11.04)％、(33.93±10.02)％、(49.65±13.02)％,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);(3)哮喘患儿血清IL-17与IgE水平呈正相关(P=0.004),哮喘患儿血清LTB4与IgE水平呈正相关(P=0.011),哮喘患儿血清IL-17与LTB4水平呈正相关(P=0.000);(4)哮喘患儿血清IL-17、LTB4水平与FEV1(P=0.000)及PEF(P=0.000)均呈负相关,与中性粒细胞百分比呈正相关(P=0.000).结论 IL-17、LTB4及IgE在哮喘的急性发作及加重中起着重要作用,在哮喘发病中彼此相互影响,共同参与哮喘的病理生理改变.     

急性肾小球肾炎患儿外周血单个核细胞白细胞介素10的表达及意义

目的 探讨白细胞介素10（IL－10）在急性肾小球肾炎（AGN）发病机制中的作用及其临床意义。方法 应用逆转录－多聚酶链反应（RT－PCR）及双抗体夹心ELISA法检测了33例AGN患儿外周血单个核细胞（PBMC）IL－10mRNA和蛋白水平。结果 1．AGN急性期IL－10 mNRA和蛋白水平较恢复期和正常对照组显著升高,恢复期降至正常水平。2．IL－10mRNA和蛋白水平与血清补体C3呈显著负相关。结论 AGN患儿存在Th1/Th2细胞免疫功能的失衡。PVMC IL－10可作为观察病情活动状态的免疫学指标之一。     

激素敏感型肾病综合征患儿血清、外周血单个核细胞白细胞介素-18表达的意义

目的探讨小儿激素敏感型肾病综合征(SSNS)与白细胞介素-18(IL-18)的关系及地塞米松(DEX)对外周血单个核细胞(PBMC)体外培养表达IL-18的抑制作用。方法单纯型SSNS23例。采用ELISA测定患儿治疗前后血清、尿液IL-18水平和PBMC体外培养上清液中IL-18表达。对照组为相应年龄健康儿童15例;另18例年龄相似的呼吸道感染病例作为感染对照组。结果治疗前后血清、尿液IL-18水平有显著性差异(t=15.072,16.149Pa<0.001)。治疗前PBMC在植物血凝素(PHA)刺激下体外培养上清液中IL-18表达明显高于治疗后和正常对照组(t=6.526,5.585Pa<0.001)。培养液中加入DEX后PBMC表达IL-18水平明显低于未加DEX组(t=4.217P<0.001)。血、尿IL-18与24h尿蛋白定量呈显著正相关(r=0.768,0.638P<0.05)。血清IL-18与PBMC体外培养上清液中IL-18水平呈正相关(r=0.574P<0.05)。结论SSNS的发病与IL-18密切相关;PBMC高表达IL-18可能是其血清IL-18增高原因之一。     

支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞17、白细胞介素-17、白细胞介素-21水平变化

目的 检测辅助性T淋巴细胞17(Th17)及细胞因子IL-17、IL-21在支气管哮喘(哮喘)患儿外周血中的表达,探讨其在儿童哮喘发病机制中的作用.方法 以哮喘患儿60例(哮喘组)为研究对象,根据病情分为哮喘发作期(发作期组,n=30)、哮喘缓解期(缓解期组,n=30);以健康儿童30例作为健康对照组.分离外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测其Th17细胞百分率.采用ELISA法检测各组IL-17、IL-21表达水平.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 哮喘发作期组患儿外周血中Th17及 IL-17 水平明显高于缓解期组和健康对照组(Pa<0.05);哮喘发作期组患儿血清IL-21表达水平明显低于缓解期组和健康对照组(Pa<0.05);哮喘缓解期组与健康对照组外周血Th17、IL-17、IL-21水平比较,差异均无统计学意义(Pa>0.05).结论 Th17、IL-17通过全身系统性炎症反应参与儿童哮喘的发病,IL-21可作为儿童哮喘的控制指标,亦有望为哮喘的治疗提供新的靶点.     

哮喘患儿血浆白细胞介素-17、-10、-4及干扰素-γ的相关性及其临床意义

目的探讨哮喘患儿血浆IL17、IL10、IL4及IFNγ水平的相关性及其临床意义。方法哮喘患儿22例,正常对照20例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(SELISA)检测其血浆IL17、IL10、IL4及IFNγ水平。结果1.哮喘患儿急性期、缓解期血浆IL17均显著低于对照组(P均<0.01);而缓解期血浆IL17明显低于急性期(P<0.05)。2.哮喘患儿急性期血浆IL10显著高于缓解期及对照组(P均<0.01);缓解期与对照组比较无显著差异。3.哮喘患儿缓解期血浆IL4明显低于急性期及对照组(P均<0.05);急性期与对照组之间无显著差异。4.与对照组比较,哮喘患儿血浆IFNγ无明显改变。5.哮喘患儿急性期血浆中IL17、IL10、IL4、IFNγ水平之间均存在显著正相关(P均<0.01)。结论哮喘患儿T细胞因子水平的改变具有特殊性。糖皮质激素对IL17、IL10、IL4的分泌可能具有抑制作用。     

支气管哮喘患儿血清白细胞介素-17、白三烯B4水平表达的临床意义

目的 探讨血清IL-17、白三烯B4(LTB4)水平及外周血中性粒细胞(PMN)计数在支气管哮喘(哮喘)发病中的作用.方法 选择哮喘急性发作患儿60例为哮喘组,其中轻度发作组29例,中重度发作组31例;另选择健康儿童24例为健康对照组.采用ELISA法检测各组儿童血清LTB4、IL-17水平,全自动血液分析仪检测其外周血PMN计数,检测哮喘患儿肺功能.结果 1.哮喘轻度发作组、中重度发作组与健康对照组3组间血清IL-17、LTB4水平比较差异有统计学意义(Pa=0.000).哮喘轻度发作组、中重度发作组血清IL-17水平与健康对照组比较差异均有统计学意义(Pa＜0.001);哮喘轻度发作组血清LTB4水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),哮喘中重度组血清LTB4水平与健康对照组比较差异有统计学意义(P＜0.001).哮喘轻度发作组血清IL-17、LTB4水平与中重度发作组比较差异均有统计学意义(Pa＜0.001).2.哮喘组与健康对照组外周血WBC总数比较差异无统计学意义(P＞0.05),PMN百分比及淋巴细胞百分比比较差异均有统计学意义(Pa=0.000).3.哮喘患儿血清IL-17水平与LTB4水平呈正相关,哮喘患儿血清IL-17、LTB4水平与FEV1及PEF均呈负相关,与PMN百分比呈正相关.结论 IL-17、LTB4及PMN在哮喘的急性发作、加重中起重要作用,共同参与哮喘的炎症过程.     

不同时期哮喘患儿血清白细胞介素-6变化的意义

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)在支气管哮喘中的临床意义。方法采用放射免疫法检测29例哮喘急性发作期患儿、32例缓解期患儿血清IL-6水平,并设20例健康儿童为对照组。结果1.哮喘急性发作期患儿血清IL-6水平明显增高,与缓解期哮喘组及对照组比较,差异均非常显著(P均<0.001)。2.缓解期哮喘患儿IL-6水平仍高于正常对照组(P<0.001)。3.缓解期>3岁哮喘患儿IL-6水平较≤3岁组高(P<0.001)。结论IL-6参与哮喘的发病,在哮喘的各个时期发挥不同的生物学效应。     

Interferon-gamma pretreatment of peripheral blood mononuclear cells partially restores defective cytokine production in children with atopic dermatitis

Interferon-gamma (IFN-γ) is considered an important determinant of the balance between T-helper type 1 and 2 cytokines and has been used experimentally for the treatment of atopic dermatitis. However, contrasting results have been reported relative to the Th-UTh-2 cytokine profile in atopic patients. In this study, we examined cytokine production by polyclonally activated peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from children with atopic dermatitis, and assessed the influence of in vitro IFN-γ pretreatment on these cells. A fraction of PBMC isolated from children with severe atopic dermatitis, as well as from age-matched controls, was initially exposed to IFN-γ. After washing, both treated and untreated cells were then put into culture either alone or with the addition of phytohemagglutinin (PHA) or phorbol myristate acetate (PMA) plus ionomycin. IL-4, IL-5, IL-10 and IFN-γ production were measured in the supernatants using commercially available ELISAs. PBMC from atopic patients produced more IL-4 (P = 0.04) and IL-10 (P = 0.03) and less IFN-γ (P = 0.01) than controls, when stimulated with PHA. Interestingly, in PMA + ionomycin stimulated cultures, the atopic cytokine profile was different with more IL-5 (P = 0.0068) and less IFN-γ production (P = 0.00046) than the control group. When cells were pretreated with IFN-γ, there were no significant differences between patients and controls. PBMC from children with atopic dermatitis show alterations in cytokine production, compatible in general terms with the Th-l/ Th-2 model. Exposure of PBMC to IFN-γ before activation results in a reduction of these differences, so that cytokine production becomes similar in the atopic and normal groups.     

������������ѪTh17ϸ�� CD4+CD25+������ϸ���仯�����벡����ط���?

目的探讨支气管哮喘患儿外周血中辅助T细胞(Th)17细胞和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的变化与儿童哮喘病情的相关性。方法收集2009年月5月至2010年4月于郑州大学第一附属医院就诊的患儿,均为首次确诊哮喘或规范吸入激素停用>3个月后复发及近1个月内无明显感染者。采用流式细胞仪测定患儿外周血中Th17细胞及CD4+CD25+Treg比例的变化。结果 Th17细胞在哮喘急性期组(2.24%±1.02%)较哮喘缓解期组(1.65%±0.38%)及健康儿童组(1.02%±0.28%)均显著增高(P<0.05),哮喘缓解期组(1.65%±0.38%)和健康儿童组(1.02%±0.28%)无明显差别,CD4+CD25+Treg细胞比例在3组儿童间差异均有统计学意义(F=45.604,P<0.05),与健康儿童组(7.11%±0.89%)相比,哮喘缓解期组(6.05%±0.87%)和哮喘急性期组(5.37%±0.80%)的比例明显下降,而哮喘急性期组较健康儿童组下降。哮喘急性期组轻、中、重度3组之间差异同样有统计学意义。Th17细胞与哮喘患儿病情呈正相关(r=0.649,P<0.05),而CD4+CD25+...     

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞细胞因子信号转导抑制蛋白1、3mRNA的表达

目的探讨细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)和SOCS3在儿童过敏性紫癜中的表达情况和作用。方法应用逆转录—聚合酶链反应检测20例过敏性紫癜患儿和15例正常健康对照儿童的外周血单个核细胞中SOCS1/SOCS3m RNA表达水平。结果过敏性紫癜患儿SOCS1、SOCS3 m RNA相对表达水平分别为(1.37±0.38)、(1.87±0.53),高于对照儿童的(0.85±0.12)、(0.77±0.13),差异均有统计学意义(P均0.001);SOCS3 m RNA表达增高更为明显。结论过敏性紫癜患儿有SOCS3的高表达。     

肺炎支原体感染患儿外周血单个核细胞CD40L的表达及其临床意义

目的 了解CD40L在肺炎支原体(MP)肺炎及支气管哮喘患儿致病中的作用。方法 采用流式细胞仪对26例MP肺炎患儿、24例支气管哮喘合并MP感染患儿、23例支气管哮喘非MP感染患儿和25例正常对照组儿童外周血单个核细胞CD40L的表达进行了研究。结果 所有MP肺炎组和支气管哮喘组患儿CD40L表达在PMA和离子霉素(ionomycin)刺激前后均显著高于正常对照组。结论 外周血单个核细胞表面CD40L的表达与支气管哮喘的发病有重要关系，MP感染后外周血单个核细胞高表达CD40L可能促进支气管哮喘的发病。     

肾病综合征患儿外周血单个核细胞糖皮质激素受体β表达

目的　探讨原发性肾病综合征 (NS)患儿外周血单个核细胞 (PBMC)内糖皮质激素受体 β(GRβ)mR NA表达与激素 (GC)治疗效应的关系。方法　RT PCR法检测NS患儿PBMC糖皮质激素受体α(GRα)和GRβmRNA表达水平。结果　GC不敏感NS组PBMC内GRβmRNA表达显著高于GC敏感组 (P <0 .0 1) ;GC敏感性与GRβmRNA表达之间呈明显负相关 (r=2 2 .75　P <0 .0 1)。结论　NS患儿外周血PBMC内GRβmRNA不适当表达增加 ,可能是GC治疗不敏感的原因之一     

卡介苗和尘螨对哮喘儿童外周血单个核细胞表达CD80的影响

目的 研究卡介苗(BCG)和尘螨(Dp)对哮喘儿童外周血单个核细胞(PBMC)表达CD19、CD80的影响,探讨CD80在哮喘发病中的作用。方法 收集哮喘儿童15例PBMC,在BCG和Dp刺激后用流式细胞术双标法检测CD19 CD80 细胞百分率结果 BCG组CD19 CD80 细胞降低(27.06±14.40)％,Dp组CD19 CD80 细胞增加(50.29±9.95)％,与对照组(34.83±16.56)％比较有显著差异。结论 CD80在哮喘发病中起重要作用,BCG抑制其表达,Dp促进其表达。 实用儿科临床杂志,2004,19(12):1026-1027