促酰化蛋白水平与儿童肥胖的关系

目的：儿童肥胖不仅是体内脂肪过度积蓄,它常延伸至成人,导致心血管疾病、糖尿病发病增高。促酰化蛋白(ASP)与脂肪代谢密切相关,据此该文测定儿童ASP及血脂水平,并分析与肥胖的相关性。 方法：将该院门诊就诊的单纯性肥胖儿童分为肥胖组(n=30);正常体检儿童分为对照组(n=30),分别测定ASP及血脂水平。ASP检测采用ELISA方法检测血浆ASP水平,试剂盒由加拿大麦吉尔大学医学中心皇家维多利亚医院心血管研究室提供,血脂检测采用免疫比浊法在全自动生化分析仪上检测。 结果：肥胖组血浆ASP、胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白B依次为 73.87 ± 24.04 g/L , 5.71 ±0.61 mmol/L, 1.77±0.30 mmol/L,0.98±0.20 mmol/L;对照组为 39.47±13.68 g/L,4.29±0.49 mmol/L,1.02±0.25 mmol/L,0.85±0.11 mmol/L。两组比较其差异有显著性意义(P<0.01或P<0.05);ASP与体重指数(BMI)、血浆甘油三酯、胆固醇呈正相关(相关系数分别为r=0.43,0.48,0.68,分别P<0.05,P<0.05,P<0.01);肥胖组中有肥胖家族史患儿血浆ASP水平比无家族史患儿增高更明显 103.4±10.57 g/L vs71.15±24.9 g/L,差异有显著性(P<0.01)。 结论：血浆ASP水平可作为脂质代谢检测的一种新指标,对判断儿童肥胖发展趋势和肥胖儿童未来发生心血管疾病危险度作出初步估价。     

血浆促酰化蛋白在评价儿童肥胖症发展中的意义

促酰化蛋白(Acylation Stimulating Protein,ASP)具有促进脂肪酸酯化和甘油三酯合成的作用,与人类脂肪代谢密切相关。为探讨ASP与肥胖症发病的关系,2000年1月至2002年8月,我们检测了在我院及武汉市妇幼保健院门诊就诊的30例单纯性肥胖症患儿和30例正常健康儿童的血浆ASP及血脂水平,现报告如下。     

单纯性肥胖症儿童血清内脂素、促酰化蛋白水平测定及其临床意义

目的 探讨血清内脂素(visfatin)和促酰化蛋白(ASP)与单纯性肥胖症儿童发病的关系及其对肥胖症防治的意义.方法 研究对象共86例,男57例,女29例;年龄7～15岁.其中单纯性肥胖儿童40例;超重儿童22例;健康对照儿童24例.采用酶联免疫吸附法检测各组儿童血清visfatin、ASP水平.结果 1.肥胖组血清visfatin与健康对照组和超重组相比,分别增加了49.80％(P＜0.05)、35.88％ (P ＜0.05).肥胖组血清ASP与健康对照组和超重组相比,分别增加了7.34％ (P ＜0.01)和5.57％(P＜0.05).超重组和健康对照组血清visfatin及ASP比较差异均无统计学意义.2.肥胖组体质量指数(BMI)、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数均高于健康对照组,差异均有统计学意义(P均＜0.05);肥胖组高密度脂蛋白和胰岛素敏感指数明显低于健康对照组,差异均有统计学意义(P均＜0.05);肥胖组BMI、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数均高于超重组,差异均有统计学意义(P均＜0.01).3.相关性分析:血清visfatin与BMI、三酰甘油均呈正相关(r =0.218,P＜0.05;r =0.500,P＜0.01).血清ASP与BMI、总胆固醇和三酰甘油均呈正相关(r=0.268,P＜0.05;r =0.250,P＜0.05;r =0.427,P＜0.01).结论 Visfatin和ASP与肥胖关系密切,均参与肥胖儿童体内脂质代谢紊乱的发生.检测血清visfatin和ASP水平将有助于判断儿童肥胖症的发展趋势,有助于评价肥胖儿童未来发生糖尿病、心血管疾病的危险程度.     

肥胖儿童血清脂类的研究

检测66例单纯性肥胖症儿童血清脂类。与健康儿童相比,单纯性肥胖症儿童的血清总胆固醇、载脂蛋白B、低密度脂蛋白-胆固醇、甘油三脂和极低密度脂蛋白-胆固醇的浓度均有显著升高(P<0.01);载脂蛋白A-I、高密度脂蛋白-胆固醇和脂蛋白(a)的浓度比较,其差异无显著意义(P>0.05)。提示:治疗小儿单纯性肥胖症对预防成人期动脉粥样硬化和冠心病的发生有重要意义。     

单纯性肥胖症血浆纤维蛋白原及单体聚合功能变化对照研究

目的 探讨单纯性肥胖症患儿血浆纤维蛋白原(Fg)水平及单体聚合功能改变.方法 2004年9月至2006年12月在华北煤炭医学院附属医院检测106例单纯性肥胖症患儿和106名健康儿童的血浆Fg水平及单体聚合功能的变化,并进行两组比较.结果 不同程度肥胖组患儿的血浆Fg浓度,纤维蛋白单体的聚合速度,最大光密度值,纤维蛋白单体的聚合速度与最大光密度值的比值,均明显高于对照组且差异有显著性(P<0.01);轻、中、重不同程度肥胖患儿的血浆Fg浓度,纤维蛋白单体的聚合速度,最大光密度值,纤维蛋白单体的聚合速度与最大光密度值的比值逐渐增高但差异无显著性(P0.05).结论 儿童不同程度单纯性肥胖症都能够引起血浆Fg及单体聚合功能的异常,成为心、脑血管疾病发生的高危因素.     

哮喘儿童呼出气一氧化氮水平的测定

目的：　探讨哮喘儿童呼出气一氧化氮(exhalednitricoxide,eNO)水平及其意义。方法：　设定13～15cmH2O呼出气阻力以关闭软腭,用化学发光法测定34例6～14岁哮喘儿童和36名6～13岁非呼吸道疾病儿童单次呼吸的eNO浓度 ,同时测定一秒钟用力呼气容积占预计值百分比 (FEV1%)。结果：哮喘儿童的eNO浓度为 (89.4± 56 .4) ppb ,较非呼吸道疾病儿童eNO浓度 [(15 .8±5.8) ppb]显著增高 (P<0.01) ;哮喘儿童eNO浓度与FEV1%之间无显著相关性(r=0.06 ,P>0.05)。结论：　哮喘儿童eNO浓度高于正常,其变化与FEV1%无关。     

不同肥胖程度儿童血浆NPY水平的研究

目的：神经肽Y(NPY)是与摄食行为有关的一种神经内分泌因子,可能与单纯性肥胖的发生有关。该文探讨NPY在不同程度单纯性肥胖儿童血浆中的水平及其在单纯性肥胖症中的作用机制。方法：选择6～13岁肥胖程度不同的单纯性肥胖儿童105例(轻度、中度、重度肥胖各35人)和35名正常体重儿童,用放免法测定血浆NPY,比较肥胖组与对照组及不同肥胖程度组之间NPY水平的差异性。结果：单纯性肥胖组血浆NPY水平(170.75±37.05)pg/ml明显高于对照组(126.97±32.17)pg/ml;轻度肥胖组(152.89±30.82)pg/ml明显高于对照组而低于中、重度组(173.66±37.25)pg/ml、(185.71±35.97)pg/ml;中度肥胖组与重度肥胖组间无差异。结论：NPY在单纯性肥胖儿童血浆中明显升高,在单纯性肥胖症的发生、发展中均可能起重要作用。     

单纯性肥胖症儿童内皮素变化研究

目的观察单纯性肥胖症儿童的内皮素(ET)变化及其与血脂、血压的关系，判断肥胖儿童早期血管内皮功能的变化，进行心血管疾病早期干预。方法正常对照组16例，实验组31例，分别测定其血浆ET水平、血脂谱及血压：结果肥胖组儿童血浆ET、血TG、血压(收缩压和舒张压)均高于正常对照组，差异显著。随着肥胖程度的增加血浆ET、血TG、LDL也逐渐增高。相关分析表明：体重与ET、TC、TG，TG、TC与ET，ET与SBP均呈直线正相关.结论单纯性肥胖症可引起儿童血浆ET、血脂、血压明显升高，三者密切相关，其中肥胖是其主要的危险因素。说明单纯性肥胖已使儿童的血管内皮细胞受到损伤，发生了内皮功能紊乱。这种内皮损伤可能是联系高血压、动脉粥样硬化病理生理学基础的关键环节。     

单纯性肥胖儿童血浆神经肽Y浓度变化及其对血压的影响

目的 研究单纯性肥胖症儿外周血神经肽Y（NPY）变化规律。探讨NPY在肥胖及高血压发病机制中的作用。方法 用放射免疫法（RIA）测量46例单纯性肥胖儿童和23例正常对照者血浆NPY浓度,并对其血压、体重等指标进行分析。结果 与正常对照组相比,单纯性肥胖组血浆NPY、收缩压、舒张压、体重均明显升高,但NPY浓度与血压之间存在相关关系。结论 血浆NPY浓度升高可能有在单纯性肥胖及高血压的发病中发挥一定作用。     

兴奋性氨基酸与儿童抽动障碍的关系

目的 探讨兴奋性氨基酸(EAAs)中谷氨酸(GLU)、天门冬氨酸(ASP)在儿童抽动障碍发病机制中的作用。方法 采用高效液相色谱法检测48例抽动障碍患儿血浆GLU、ASP水平,其中暂时性抽动13例,慢性多发性抽动20例,抽动-秽语综合征15例;单纯性抽动23例,抽动并多动障碍25例。结果1.抽动障碍患儿血浆GLU水平明显高于对照组(P<0.01)。2.慢性抽动组和抽动-秽语综合征组血浆GLU、ASP分别与对照组和暂时性抽动组比较,结果前两者血浆GLU水平明显高于对照组和暂时性抽动组(P<0.05,P<0.01)。各组血浆ASP水平比较,无显著性差异(P>0.05)。3.抽动并多动障碍组血浆GLU水平明显高于单纯性抽动组(P<0.01)。各组血浆ASP水平与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论 儿童抽动障碍存在EAAs水平变化,GLU可能参与抽动障碍的病理生理过程。     

巢式PCR法检测肝母细胞瘤中p15和p16基因启动子异常甲基化

目的：DNA甲基化被认为是反映细胞内DNA转录状态的重要遗传学标记。该研究旨在对小儿肝母细胞瘤中p15和p16基因5′启动子区CpG岛异常甲基化的相关性进行评估,并分析其与小儿肝母细胞瘤发生发展的关系。方法：采用甲基化特异性PCR法,对30例小儿肝母细胞瘤、癌旁和远癌正常组织进行巢式PCR扩增,经凝胶电泳和测序方法检测目的片段。结果：30例小儿肝母细胞瘤组织中p15和p16基因5′CpG岛有30%(9/30)和67%(20/30)、癌旁组织中有20%(6/30)和57%(17/30)、远癌正常组织有13%(4/30)和33%(10/30)异常甲基化。在肝母细胞瘤中发现1例p15E2纯合缺失,缺失率为3%(1/30),E1和部分I1区域未见缺失;p16E2和部分I2区域中3例杂合缺失,缺失率为10%(3/30),E1和部分I1区域未见缺失。结论：p15和p16基因5′启动子区CpG岛的异常甲基化可能在肝母细胞瘤发生发展中扮演了重要角色,其主要机制可能是启动子区CpG岛甲基化抑制了基因的转录。     

婴幼儿血管瘤survivin基因启动子甲基化的研究

目的 采用亚硫酸氢盐修饰后测序法(BSP)检测不同病理阶段的婴幼儿血管瘤组织及正常皮肤组织中survivin基因启动子区域CpG岛的甲基化状态,探讨survivin基因启动子甲基化与婴幼儿血管瘤增生与退化的可能关系.方法 ①采用免疫组化S-P法检测增殖期婴幼儿血管瘤石蜡标本30例、消退期30例及正常包皮皮肤组织标本10例中survivin蛋白的表达;②提取石蜡包埋块组织基因组DNA并纯化后,采用亚硫酸氢盐修饰后测序法(BSP)分别检测增殖期血管瘤30例、消退期血管瘤30例及正常包皮组织10例中survivin基因启动子CpG岛甲基化情况.结果 ①survivin 蛋白在增殖期血管瘤、消退期血管瘤和正常包皮组织中阳性表达率分别为76.6％ (23/30)、33.3％(10/30)和20.0％(2/10);②10例正常包皮皮肤组织中1例(10.0％)survivin基因启动子CpG岛非甲基化,9例(90.0％)甲基化;30例消退期血管瘤标本中8例(26.6％)survivin基因启动子CpG岛非甲基化,22例(73.3％)甲基化;30例增殖期血管瘤标本中24例(80.0％) survivin基因启动子CpG岛非甲基化,6例(20.0％)甲基化;增殖期血管瘤survivin基因启动子CpG岛甲基化率明显低于消退期和正常包皮组织;③survivin蛋白表达阳性的血管瘤33例中31例survivin基因启动子CpG岛为非甲基化,survivin蛋白表达阴性的27例中26例survivin基因启动子CpG岛为甲基化状态.结论 ①增殖期血管瘤survivin蛋白表达明显高于消退期血管瘤;②survivin基因启动子CpG岛甲基化状态在增殖期血管瘤、消退期血管瘤中存在明显差异;血管瘤组织中survivin基因启动子的甲基化状态与survivin蛋白的表达具有相关性;survivin基因启动子区CpG岛异常甲基化在血管瘤的增殖与消退调控中可能起到了一定作用.     

小儿急性淋巴细胞白血病p16基因缺失及甲基化的研究

为探讨p1 6基因缺失及甲基化在小儿急性淋巴细胞白血病 (ALL)发病中的作用 ,认识p1 6蛋白失活的分子机制。应用差异PCR技术检测 42例初治、1 7例缓解期小儿ALLp1 6基因的纯合缺失及甲基化。结果 42例ALL中p1 6基因纯合缺失率占38.1 % ,T系ALL占 80 % ,显著高于B系ALL2 2 .5 % ,P <0 0 1。 1 7例缓解期ALL均无基因缺失。 9例p1 6基因完整 ,但无蛋白表达的ALL患者 ,无一例发生基因外显子 1的甲基化。结果表明 ,p1 6基因纯合缺失是小儿ALL ,尤其T系ALL最常见的基因缺陷 ,是p1 6蛋白失活的主要分子机制。基因甲基化与p1 6蛋白失活可能无关。     

Methylation status of the retinoblastoma gene (RB1) in osteosarcoma: no evidence for hypermethylation

Alterations of the retinoblastoma (RB1) tumor suppressor gene are not only associated with retinoblastoma but also with several other malignancies including osteosarcoma. Besides direct sequence alterations, hypermethylation of a CpG island in the promoter region can cause inactivation of the RB1 gene as it has been shown in retinoblastomas. We examined the methylation status of the RB1 gene in 25 osteosarcoma specimens by using the methylation-sensitive restriction enzymes SacII and SmaI. The restriction fragments were hybridized with clone p123, which is a 1.8-kb genomic subclone that spans the RB1 CpG island including the promoter region and exon 1. Whereas we reconfirmed hypermethylation of the RB1 gene in a sporadic retinoblastoma, no hypermethylation could be detected in the 25 osteosarcoma specimens, suggesting that hypermethylation of the RB1 promoter is not of major importance during osteosarcoma genesis.     

Upstream CpG island methylation of the PAX3 gene in human rhabdomyosarcomas

BACKGROUND: Adult tumors can be characterized by hypermethylation of CpG islands associated with 5'-upstream and coding regions of specific genes. This hypermethylation can also be part of the aging process. In contrast, much less is known about gene hypermethylation in childhood cancers, where methylation changes are not part of the aging process but likely represent developmental dysregulation. PAX3 is an important gene in muscle development and muscle-producing neoplasms such as rhabdomyosarcomas. PROCEDURES: We examined the methylation status of a PAX3 5'-CpG island in rhabdomyosarcoma subtypes and in normal fetal skeletal muscle. PAX3 methylation was analyzed in 15 embryonal rhabdomyosarcomas, 12 alveolar rhabdomyosarcomas, and in six normal skeletal muscle samples, using semi-quantitative PCR analysis of DNA digested with methyl-sensitive restriction enzymes. RESULTS: The CpG island in the upstream region of the human PAX3 gene was hypermethylated in the majority of ERMS examined (13 of 15 tumors, mean of 52% methylation), whereas most ARMS (9 of 12 tumors) and all normal muscle samples showed relative hypomethylation (both 18% mean methylation). Various CpG sites differ in contribution to overall PAX3 CpG island methylation, with methylation at a HaeII site being inversely correlated with PAX3 expression. CONCLUSIONS: PAX3 CpG island methylation appears to distinguish embryonal subtype of rhabdomyosarcoma from alveolar, and methylation at certain sites within this CpG island is inversely correlated with PAX3 expression. In addition to exemplifying developmental dysregulation, methylation of PAX3 has potential in the development of an epigenetic profile for the diagnosis of rhabdomyosarcoma.     

DEHP诱导的隐睾鼠胰岛素样因子3基因CpG岛甲基化状态研究

目的 研究胰岛素样因子3(insulin-like factor 3,INSL3)基因在邻苯二甲酸二已酯(DEHP)致小鼠隐睾中DNA甲基化的状态.方法 运用"MethPrimer"软件对INSL3基因进行分析.预测CpG岛,通过甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MS-PCR)检测INSL3基因CpG岛的甲基化状况,并应用RT-PCR检测INSL3基因在正常组与实验组睾丸组织中的表达情况.结果实验组INSL3基凶第一外显子区存在CpG岛甲基化;实验组INSL3基因mRNA表达显著下降.结论 INSL3基因第一外显子区CpG岛的异常甲基化导致INSL3在隐睾鼠睾丸中表达降低,可能与隐睾的发生密切相关.     

Hypermethylation as a potential prognostic factor and a clue to a better understanding of the molecular pathogenesis of medulloblastoma--results of a genomewide methylation scan

BACKGROUND: The molecular mechanisms controlling initiation and progression of medulloblastomas are largely unclear. Changes in DNA methylation of promoter regions have been shown to disturb the expression of growth regulatory genes. PATIENTS AND METHODS: We evaluated DNA methylation patterns in 17 medulloblastomas, 5 stPNETs and 5 medulloblastoma cell lines using Restriction Landmark Genomic Scanning (RLGS), a method displaying up to 2.000 potential gene loci in a single gene. To test whether previously characterized tumor suppressor genes are affected by hypermethylation we performed MS-PCR for p15INK4B, p16INK4A, VHL, TP53 and E-cadherin. RESULTS: The analysis of RLGS profiles from tumors revealed an abundance of hypermethylation in primary tumors and cell lines. Extrapolated to the human genome with its approximately 36,000 genes a total of 420 loci become hypermethylated in the tumor genomes. The previously characterized medulloblastoma breakpoint cluster in 17p11.2 appears to be a hotspot for aberrant methylation. Cox regression analysis of survival data identified seven CpG islands for which hypermethylation is suggestive of a poor prognosis. MS-PCR analysis of known genes demonstrated hypermethylation of p16INK4A in a limited number of tumors. The pattern of DNA hypermethylation was similar in medulloblastomas and stPNETs. However, some CpG islands were shown to be specific for a tumor type, while others were shared targets. CONCLUSIONS: Hypermethylation is a common abnormality in primary medulloblastomas and supratentorial PNETs. Several hundreds of CpG islands are potential targets for methylation in medulloblastomas including the breakpoint cluster in 17p11.2. The methylation status of certain gene sequences appears to be associated with the clinical outcome. Promoter hypermethylation has an outstanding potential as a marker for the identification of novel tumor suppressors as well as diagnostic and therapeutic targets in medulloblastomas.     

Familial adenomatous polyposis in two brothers with hepatoblastoma: implications for diagnosis and screening

Two brothers with hepatoblastoma were noted to have a family history of early onset colon cancer. Genetic testing of the younger brother revealed a deletion in exon 15 of the adenomatous polyposis coli (APC) gene (2710-2711delAG), consistent with a diagnosis of familial adenomatous polyposis (FAP). We review the clinical and molecular aspects of the relationship between hepatoblastoma and FAP, and the implications for diagnostic testing and cancer screening in affected patients.     

儿童急性白血病p16基因甲基化研究

为探讨p1 6基因甲基化与儿童急性白血病 (AL)的发生、发展、预后的关系 ,采用酶切加PCR技术研究 33例初治儿童AL ,1 5例复发儿童AL及 30例对照组p1 6基因甲基化情况 ,并观察p1 6基因甲基化与化疗结果的关系。结果 33例初治AL有 3例、1 5例复发AL有 6例、30例对照组中 0例存在p1 6基因甲基化。可评价疗效的 31例初治AL中 ,3例甲基化患者未缓解 ;2 8例非甲基化者中 3例获完全缓解 ,2 3例部分缓解 ,2例未缓解 (总有效率 92 .86 % )。结果表明 :(1 )在初治儿童AL中p1 6基因甲基化率低 ,可能不是儿童AL的主要发病机制 ;(2 )p1 6基因甲基化率儿童AL复发病例显著上升 ,值得重视 ,同时对指导治疗及预测病程和预后具有重要意义。