臭氧应激促进炎症细胞与气道上皮细胞的黏附

目的：为了探讨支气管上皮细胞（brochial epithlial cells,BECs)炎症过程中一些具有保护作用的调节因子的调节效应，建立有效的细胞研究模型。方法：用臭氧（O3）应激建立细胞损伤模型，观察O3应激引起的BECs与中性粒细胞（polymorphonuclear leukocyte,PMNs)、嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS)黏附的影响，及在炎症损伤中的作用；同时观察ICAM－1抗体对黏附的阻断及ICAM－1蛋白的表达。结果：O3应激可增加BECs与PMNs、EOS的黏附率，产生应激反应；抗细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)抗体能阻断BECs与PMNs,EOS的黏附；O3应激使ICAM－1蛋白表达增加。结论：O3应激引起气道炎症，且介导BECs与PMNs,EOS黏附的黏附分子是ICAM－1。     

细胞分化剂尿多酸肽诱导乳腺癌细胞ICAM-1表达的实验研究

目的：研究细胞分化诱导剂尿多酸肽（CDA-Ⅱ）对乳腺癌细胞间粘附分子-1（ICAM-1）表达的的影响。方法：将CDA-Ⅱ与不同生物学特性的乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231进行体外培养，同时以维甲酸为阳性对照，观察CDA-Ⅱ对乳腺癌细胞生长曲线、ICAM-1表达及形态学等方面的影响。结果：CDA-Ⅱ可减缓两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力，增加乳腺癌细胞ICAM-1表达。结论：CDA-Ⅱ可抑制不同生物学特性的两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力，诱导乳腺癌细胞ICAM-1表达，为CDA-Ⅱ治疗乳腺癌提供了实验依据，揭示了其治疗乳腺癌的可能应用前景。     

胃酸分泌调节肽和KA8肽的生物活性研究

分别中枢和外周给以胃酸分泌调节肽（ＯＭ）及其Ｃ端８肽ＫＡ８肽，观察并比较它们对胃酸分泌、血糖及其调节激素的影响．结果表明，外周给以ＫＡ８肽可抑制胃酸分泌，而脑室给以ＫＡ８肽和ＯＭ对胃酸分泌无影响，外周给以ＫＡ８肽和ＯＭ对血糖调节激素无影响，中枢给以ＯＭ具升高血糖的作用。     

臭氧应激促进炎症细胞与气道上皮细胞的黏附

目的 :为了探讨支气管上皮细胞 (brochialepithlialcells,BECs)炎症过程中一些具有保护作用的调节因子的调节效应 ,建立有效的细胞研究模型。方法 :用臭氧 (O3)应激建立细胞损伤模型 ,观察O3应激引起的BECs与中性粒细胞 (polymorphonuclearleukocyte ,PMNs)、嗜酸性粒细胞 (eosinophil,EOS)黏附的影响 ,及在炎症损伤中的作用 ;同时观察ICAM 1抗体对黏附的阻断及ICAM 1蛋白的表达。结果 :O3应激可增加BECs与PMNs、EOS的黏附率 ,产生应激反应 ;抗细胞间黏附分子 1(intercellularadhesionmolecule ,ICAM 1)抗体能阻断BECs与PMNs ,EOS的黏附 ;O3应激使ICAM 1蛋白表达增加。结论 :O3应激引起气道炎症 ,且介导BECs与PMNs,EOS黏附的黏附分子是ICAM 1。     

血管活性肠肽对LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞表达MMP-9的影响

目的：探讨血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide，VIP)对经脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞分泌和表达基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响。方法：采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）及明胶酶谱法（gelatin zymography），观察经LPS诱导的大鼠肺泡巨噬细胞给予不同浓度的VIP（10-10～10-6mol/L）作用24h后MMP-9基因表达量和活性的变化。结果：(1)正常肺泡巨噬细胞仅分泌和表达少量的MMP-9，经不同浓度LPS（0.1～10mg/L）诱导后MMP-9活性和表达均明显高于未经LPS诱导的对照组（P<0.01）；(2)不同浓度VIP (10-10～10-6mol/L）的干预，均可下调LPS诱导的MMP-9的活性和表达（P<0.01）；(3)该作用可被蛋白激酶C和钙调蛋白的相应阻断剂H-7,W-7部分逆转（P<0.01）。结论：VIP能降低LPS诱导的大鼠肺泡巨噬细胞MMP-9的表达及活性，其细胞内信号途径可能与蛋白激酶C和钙调蛋白有关，提示VIP在肺内炎症时可能具有保护性作用。     

血管活性肠肽及其受体在嗜酸性粒细胞性胃肠炎儿童胃黏膜中的表达及其临床意义

目的 研究血管活性肠肽（VIP）及其受体在嗜酸性粒细胞性胃肠炎（EG）儿童胃黏膜中的表达，并探讨其临床意义。方法 选取2008年11月—2018年12月天津市儿童医院消化科收治的50例EG儿童作为研究对象（EG组）；同时选取胃镜下病理活检嗜酸性粒细胞（EOS）<10个/高倍视野（HPF），总免疫球蛋白E（IgE）正常的同年龄段急性肠胃炎儿童50例作为对照组。比较两组患儿外周血EOS计数、总IgE水平，胃镜检查其黏膜变化。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PRC）检测两组患儿VIP及VPAC1、VPAC2 mRNA的相对表达水平并进行比较。利用Logistic回归模型分析EG的相关因素。结果 EG组外周血EOS、EOS%、IgE水平高于对照组（P?<0.05）；EG组胃镜检查黏膜充血水肿、糜烂、溃疡、结节样隆起或增生例数多于对照组（P?<0.05）。EG组儿VIP及VPAC1、VPAC2 mRNA的表达水平低于对照组（P?<0.05）。Logistic回归分析结果表明，VIP及VPAC1、VPAC2 mRNA是EG的独立影响因素（P?<0.05）。结论 VIP、VPAC1及VPAC2是EG发生的独立影响因素，可能与儿童胃黏膜EG的发生、发展相关，有助于早期诊断。     

通腑汤对胃肠动力障碍大鼠小肠肌间神经丛中5-HT、SP和VIP含量的影响

目的：探讨通腑汤的药物作用及作用机制。方法：用甘草灌胃建立胃肠动力障碍动物模型；观察通腑汤对大鼠十二指肠，空肠肌间神经丛中5-羟色胺（5-HT），P-物质（SP）和血管活性肠肽（VIP）含量的影响。结果：与模型组比较，经通腑汤治疗6d后十二指肠肌间神经丛内5-HT，SP和VIP含量有显著性差异，5-HT，SP含量明显增加，VIP含量明显减少。结论：通腑汤可纠治甘草引起的胃肠动力障碍，使5-HT，SP，VIP的分泌恢复正常，说明通腑汤的药物作用机制与5-HT，SP和VIP的分泌密切相关。     

小剂量茶碱对大鼠气道平滑肌细胞表达NF-κB与ICAM-1的影响

目的：观察小剂量茶碱对培养的大鼠气道平滑肌细胞表达核因子kB（NF-kB）与细胞间黏附分子1（ICAM-1）的影响，探讨小剂量茶碱在气道发挥抗炎作用的可能机制。方法：体外培养正常大鼠鼠婴的气道平滑肌细胞，将培养出的细胞随机分为3组：空白对照组、肿瘤坏死因子α（TNF-α）刺激组、茶碱干预组。采用免疫组织化学SP法检测经TNF—α刺激的大鼠的气道平滑肌细胞中加入不同浓度的茶碱共同培养4h，以及加入同一浓度茶碱共同培养不同时间，NF-kB活性和ICAM-1表达的变化。结果：TNF-α刺激组与空白对照组的NF—kB活性和ICAM-1表达相比较，差异均有显著性（P〈0．05）。经TNF-α刺激的大鼠的气道平滑肌细胞中加入5，10，15mg／L的茶碱共同培养4h，NF-kB活性和ICAM-1表达均有所下降。与TNF-α刺激组相比，5mg／L组无统计学差异（P〉0．05），余两组差异均有显著性（P〈0．05）。且茶碱干预组内两两比较，差异均有显著性（P〈0．05）。经TNF-α刺激的大鼠的气道平滑肌细胞中加入10mg／L茶碱共同培养2，4，24h。与TNF—α刺激组相比，茶碱处理组的差异均有显著性（P〈0．05）。但茶碱处理组内不同处理时间两两比较，差异无显著性（P〉0．05）。结论：茶碱可能通过抑制气道平滑肌细胞NF—kB活性和ICAM-1的表达，进而减少炎症细胞在气道的浸润。     

慢性阻塞性肺疾病患者血管活性肽、降钙素基因相关肽、 P物质的研究

目的：了解血管活性肽（VIP），降钙基因相关肽（CGRP）和P物质（SP)在慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病机制中的作用及对疾病发生发展的影响。方法：采用放射免疫分析法检测COPD急性发作者和缓解者各19例，健康者（对照）20例血浆VIP，CGRP，SP浓度。分析其浓度变化与COPD之间的关系。结果：COPD患者血浆VIP浓度急性发作期组较对照组显著,下降P＝0．048。COPD患者的血浆CGRP和SP浓度缓解期组较对照组明显升高，急性发作组较缓解期组显著升高，P＜0．05或P＜0．01。结论：VIP，CGRP和SP诱导的神经源性气道炎症可能参与了COPD的发病过程。     

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽固定去细胞瓣构建组织工程瓣膜的实验研究

目的：研究促黏附分子精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）肽对去细胞瓣组织工程心脏瓣膜（TEHV）构建的影响：方法：酶＋去污剂法制备去细胞瓣天然支架，应用化学交联剂Sulfo-LC-SPDP，使GRGDSPC肽与之稳定纳合，然后表面种植大鼠肌成纤维细胞以构建TEHV文验组采用GRGDSPC肽固定去细胞瓣，对照组则为未处理去细胞瓣．体外培养1周后取瓣叶，作苏木精-伊红（H-E）染色和扫描电镜观察，检测羟脯氨酸和DNA含量，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测瓣膜Ⅰ型胶原、赖氨酰氧化酶（LOX）mRNA表达：结果：与对照组比较，实验组形态学显示细胞紧密联合且胞外基质丰富，羟脯氨酸和DNA含量值增高，Ⅰ型胶原、LOX mRNA表达增强：结论：RGD肽表面修饰去细胞瓣，提高天然支架细胞黏附性，促进种子细胞生长、繁殖与细胞外基质分泌，有利TEHV构建。     

表皮生长因子对气道上皮细胞VIP分泌及VIPR表达的影响

有放射免疫法检测支气管上皮细胞和肺泡巨噬细胞血管活性肠肽的分泌,放射配基法测定ＢＥＣ的ＶＩＰ受体表达,观察表皮生长因子的调控效应。提示气道上皮存在ＶＩＰ的自分泌或旁分泌,其保护效应受局部生长因子的调控。     

同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞表达ICAM-2及与树突状细胞粘附的影响

目的 探讨同型半胱氨酸（Hcy）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）分泌和表达细胞间粘附分子-2（1-CAM-2）以及内皮细胞与树突状细胞（DC）粘附的影响。方法 在人脐静脉内皮细胞培养基中加入浓度为0．5mmol／L的Hey作用不同时间，以及加入不同浓度的Hey作用24h。用ELISA法检测内皮细胞培养基中HU-VECs分泌ICAM-2的蛋白含量，用Western blot法检测HUVECs表达ICAM-2的蛋白含量，用分子探针标记的DC与HUVECs共孵育，共聚焦显微镜下计数粘附于HUVECs的DC数量，以检测Hey对HUVECs与DC粘附的影响。结果用0．5mmol／L Hey干预后，HUVECs分泌ICAM-2蛋白在12h开始高于空白组（P〈0．05），24h和48h均增加显著（均P〈0．01）；而ICAM-2蛋白的表达在6h开始高于空白组（P〈0．05），24h达峰值（P〈0．01），48h下降显著，且与空白组相比无统计学差异。用不同浓度的Hey干预24h后，ICAM-2蛋白的分泌和表达及HUVECs与Dc粘附均呈剂量依赖性增加，当Hey浓度高于0．5mmol／L时增加更显著。结论 Hey能刺激HUVECs分泌和表达ICAM-2蛋白，从而促进HUVECs与DC的粘附，这可能是其诱导动脉粥样硬化早期形成的重要机制之一。     

粘附分子在鼻息肉中的表达

目的:探讨三种粘附分子ICAM-1(细胞间粘附分子-1)、VCAM-1(血管细胞粘附分子-1)和E-selectin(E-选择素)在鼻息肉中的表达与意义.方法:SABC法免疫组化染色检测25例鼻息肉标本和9例中鼻甲粘膜标本ICAM-1、VCAM-1、E-selectin并HE染色,光镜观察.结果:鼻息肉中大量嗜酸性粒细胞浸润.三种粘附分子在鼻息肉中均显著高表达.相关性分析发现三种粘附分子在血管内皮上的表达和在间质及浸润炎症细胞上表达呈正相关.鼻息肉中ICAM-1和VCAM-1在血管内皮上的表达显著正相关.结论:三种粘附分子在鼻息肉中高表达,且均可表达于血管内皮、间质及浸润炎症细胞.在EOS等炎症细胞附壁浸润活化时它们可能作用极为重要,且可能协同作用,参与了鼻息肉的发病过程.     

芎芍胶囊对人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的影响

目的研究芎芍胶囊含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)黏附分子表达的影响。方法采用血清药理学方法,制备芎芍胶囊含药血清体干预体外培养的HUVEC,MTT实验检测其对HUVEC增殖的影响,采用RT-PCR和ELISA法测定HUVEC黏附分子VCAM-1、ICAM-1、ICAM-3、E选择素的表达水平。结果芎芍胶囊含药血清的低、中、高剂量组细胞的OD值明显高于空白血清组,同时含药血清组VCAM-1、ICAM-1、E选择素的表达和分泌水平也显著提高,而ICAM-3则无明显变化。结论芎芍胶囊对黏附分子(VCAM-1、ICAM-1、E选择素)的表达有调节作用,可能是其促血管新生的重要作用机制之一。     

siRNA沉默热休克蛋白27对雌激素心血管保护作用的影响

目的  通过基因沉默技术,研究热休克蛋白27（HSP27）对雌激素介导的心血管保护作用的影响。方法  人脐静脉内皮细胞（HUVEC）转染HSP27 siRNA,免疫荧光法检测siRNA转染效率,Western blot和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HUVEC中HSP27蛋白和mRNA表达水平;1×10-7 mol/L雌二醇（E2）处理转染HSP27 siRNA的HUVEC,24 h后采用硝酸还原酶法检测培养基中一氧化氮(NO)的含量,酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、内皮素-1（ET-1）的含量。结果  HSP27 siRNA能降低HSP27蛋白和mRNA表达。1×10-7 mol/L E2可促进HUVEC分泌NO,同时降低ICAM-1和ET-1水平。转染HSP27 siRNA后,E2介导内皮细胞分泌NO和ICAM-1受到抑制。但沉默HSP27对E2抑制内皮细胞分泌ET-1无明显影响。结论  HSP27可能通过雌激素来影响内皮细胞分泌NO和ICAM-1,参与心血管的保护。

     

IL-1β对牙龈成纤维细胞和牙周膜细胞上ICAM-1表达调节的免疫组化研究

目的 :了解牙龈成纤维细胞 (humangingivalfibroblast,HGF)、牙周膜细胞 (periodontalligamentfibroblast,PDLF)上细胞间粘附分子 1(intercellularadhesionmolecule- 1,ICAM - 1)的表达以及白细胞介素 - 1β(interleukin -1β ,IL - 1β)作用后ICAM - 1的表达。 方法 :取正畸拔牙 ,体外培养牙龈成纤维细胞和牙周膜细胞 ,检测其未受和受IL - 1β作用后ICAM - 1的表达情况 ,图像分析结果。结果 :正常牙龈成纤维细胞、牙周膜细胞上ICAM - 1表达阴性或弱阳性 ,IL - 1β作用后 ,ICAM - 1表达强阳性 ,和对照组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 1)。 结论 :牙龈成纤维细胞、牙周膜细胞受IL - 1β作用后ICAM - 1的表达增强 ,提示ICAM - 1参与牙周炎的病理过程。     

细胞间粘附分子-1与大鼠肾缺血再灌注损伤的关系及参麦注射液保护肾脏作用研究

目的　探讨细胞间粘附分子 - 1 (intercelluaradhesionmolecule - 1 ,ICAM - 1 )与肾缺血再灌注损伤 (ischemicreperfusioninjury ,IRI)的关系 ,并观察参麦注射液对肾IRI的影响。方法　利用大鼠肾缺血再灌注模型 ,观察肾组织中ICAM - 1表达及中性粒细胞(polymorphonuclearneutrophils,PMNs)浸润的变化。 结果　缺血再灌注后 ,鼠肾组织中ICAM - 1明显表达 ,出现PMNs浸润积聚 ,给予参麦注射液 (ShenMaiinjection ,SMI)的鼠肾组织中ICAM - 1表达受到抑制 ,PMNs浸润减轻。 结论　肾IRI时 ,ICAM - 1参与了PMNs的浸润和IRI的发生发展 ;SMI可通过抑制ICAM - 1的表达而保护肾脏的功能。     

miR-503-5p对IL-1β诱导的血管内皮细胞增殖、迁移、凋亡和黏附的影响

目的探讨miR-503-5p对白细胞介素1β（IL-1β）诱导的血管内皮细胞增殖、迁移、凋亡和黏附的影响和分子机制。方法将人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）分为NC组、IL-1β组、IL-1β+anti-miR-con组及IL-1β+anti-miR-503-5p组。分别采用噻唑蓝（MTT）法、黏附实验、流式细胞术、Transwell实验检测HUVECs增殖、黏附、凋亡和迁移能力。Western blotting检测细胞间黏附分子1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子1（VCAM-1）表达水平。结果与NC组比较,IL-1β组HUVECs细胞活力、迁移细胞数显著降低,细胞黏附数、凋亡率、ICAM-1和VCAM-1蛋白表达显著升高（P < 0.01）。与IL-1β+anti-miR-con组比较,IL-1β+anti-miR-503-5p组HUVECs细胞活力、迁移细胞数显著升高,细胞黏附数、凋亡率、ICAM-1和VCAM-1蛋白表达显著降低（P < 0.01）。结论抑制miR-503-5p表达可促进血管内皮细胞增殖和迁移,抑制细胞黏附和凋亡,其机制可能与抑制ICAM-1和VCAM-1表达有关。