产ESBLs大肠埃希菌基因型分析

目的 了解医院感染的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌医院感染的临床分布及其基因型特征。方法用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs大肠埃希菌151株，应用PCR方法分别扩增产酶菌株的TEM、SHV和CTX-M3种β-内酰胺酶基因，并对PCR扩增结果及ESBLs株临床分布进行分析。结果PCR扩增结果显示，CTX-M、TEM和SHV基因的阳性率分别为92．10％，49．7％和1．30％；48．3％的菌株同时携带多个基因。产ESBLs大肠埃希菌广泛分布于24个临床科室，其中普外科占23．2％，重症监护病房占10．6％。标本分布较为集中，29．8％来自尿液，24．5％来自呼吸道标本，23．9％来自穿刺液。结论医院感染中，产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型是CTX-M，尿液、呼吸道标本、穿刺液是其主要来源，产ESBLs菌分布广泛，需引起重视。     

产ESBLs大肠埃希菌的检测及耐药性分析

目的 调查临床产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出率及耐药性.方法 药敏试验采用纸片扩散法;酶抑制剂增强试验检测大肠埃希菌中的超广谱β-内酰胺酶.结果 产超广谱β-内酰胺酶菌株对临床常用抗菌药物的耐药率远高于非产酶菌株;产ESBLs菌株对哌拉西林、头孢呋辛和磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率均＞88.0％;而非产ESBLs菌株对哌拉西林、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶和头孢呋辛的耐药率分别为68.0％、70.0％、22.0％;对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦和头孢西丁有较高的敏感率(＞73.1％),而非产ESBLs菌株对上述3种抗菌药物的敏感率均＞84.0％;大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶菌株的检出率为34.2％;产酶菌株对大多数临床常用的抗菌药物表现为耐药,包括β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物.结论 产超广谱β-内酰胺酶菌株在临床分离的大肠埃希菌中已较为普遍,且产酶菌株多为多药耐药菌株,临床应重视此类菌株的出现,加强对产超广谱β-内酰胺酶菌株的检测.     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药分析

目的 了解医院近1年半产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的发生率及与细菌耐药性的关系.方法 用API半自动微生物鉴定系统进行鉴定及药敏试验.结果 大肠埃希菌中产ESBLs菌株占22.2%、肺炎克雷伯菌中占21.8%;产ESBLs菌株对青霉素类和头孢类抗菌药物大多耐药,而对亚胺培南与美罗培南敏感,产ESBLs菌株对抗菌药物的耐药率高于非产ESBLs菌株.结论 ESBLs是细菌对青霉素类和头孢类抗菌药物耐药的重要机制,及时监测产ESBLs菌的发生率及其耐药趋势以指导临床用药至关重要.     

大肠埃希氏菌ESBLs检测及其耐药性分析

目的：了解本地区人肠埃希氏菌分离株中超广谱β-内酰胺酶的阳性率，并分析产酶株对β-内酰胺类抗生素的耐约特点，为院内感染的预防与控制、治疗和流行病研究提供依据。方法：采用双纸片协同法检测所有菌株的ESBLs，并用Kirby—Bauer法检测了413株产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的人肠埃希氏凶对16种β-内酰胺类抗生素耐约性，并对其标本米源和病区分布进行了分析。结果：ESBLs总检山率为45．O％，其中ESBLs检山率较高的科室为脑外科（100．0％）、肝胆外科（67．8％）呼吸科（65．0％）。所有人肠埃希氏菌分离株均对亚胺培南羽I关洛培南敏感。产ESBLs株对其它14种β-内酰胺类抗生素的耐药率均显著高于非产酶株。结论深圳地区ESBLs检山率高，其中脑外科ESBLs检山率高达100．0％，产ESBLs株对抗生素的耐约率普遍高于非ESBLs株。     

产ESBLs大肠埃希菌尿路感染的危险因素分析

目的了解尿路感染患者尿液标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌检出情况并分析其产生的危险因素。方法回顾性分析收集的尿液标本中分离出的大肠埃希菌,根据是否产生ESBLs分为产酶菌组和非产酶菌组,对两组的临床特征进行统计分析,用logistic多因素回归分析产ESBLs大肠埃希菌尿路感染的危险因素。结果 2009年1-12月尿路感染患者尿标本中共分离出大肠埃希菌153例,其中ESBLs阴性菌株86例(56.2%),ESBLs阳性菌株67例(43.8%);产ESBLs菌株对常用抗菌药物的耐药率均显著高于非产ESBLs菌株;logistic多因素回归分析显示,住院时间较长、先期使用第三代头孢菌素、留置尿路引流管是ESBLs大肠埃希菌尿路感染的独立危险因素。结论目前大肠埃希菌中产ESBLs菌的检出率较高,住院时间较长、先期使用第三代头孢菌素、留置尿路引流管的患者更容易发生产ESBLs大肠埃希菌引起的尿路感染。     

产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因检测与耐药性分析

目的 了解临床分离的产ESBLs大肠埃希菌耐药基因存在状况和菌株的耐药性关系.方法 自临床分离20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER.结果 20株大肠埃希菌中β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER阳性率分别为75.0%、20.0%、95.0%、15.0%、70.0%、5.0%、85.0%、70.0%,β-内酰胺类药物及含酶抑制剂药物的耐药率较高.结论 临床分离的产ESBLs大肠埃希菌TEM、LEN、CTX-M-9、GES、PER基因携带率高,β-内酰胺类药物耐药率较高可能与细菌携带β-内酰胺酶耐药基因有关,产ESBLs大肠埃希菌可导致克隆传播医院感染,并存在暴发性流行.     

产ESBLs大肠埃希菌动态监测及耐药性分析

目的通过每季度监测住院患者产ESBLs大肠埃希菌分布及耐药特征,以便及时有效地指导临床合理应用抗菌药物。方法对医院2012年各季度分离的病原菌进行目标性监测,统计产ESBLs大肠埃希菌的株数及在重点科室的分布,并对各季度产ESBLs大肠埃希菌的耐药性进行动态监测;采用WHO细菌耐药性监测网提供的WHONET5软件进行数据统计分析。结果全年检出大肠埃希菌852株,产ESBLs大肠埃希菌469株占55.0%,各季度产ESBLs大肠埃希菌检出率有升高趋势,其中第四季度检出率最高,占30.7%;产ESBLs大肠埃希菌分布主要集中在ICU、神经外科、血液科及呼吸内科,占63.1%,其中ICU检出数最多,占23.9%;产ESBLs大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs大肠埃希菌,产ESBLs大肠埃希菌对常用的三代头孢菌素、氨曲南、喹诺酮类抗菌药物耐药率较高,仅对亚胺培南、头孢西丁和哌拉西林/他唑巴坦敏感,耐药率<10.0%,各季度耐药率检测结果类似,但第四季度对阿米卡星的耐药率上升至最高。结论医院产ESBLs大肠埃希菌的检出率和耐药率较高,应加强临床合理应用抗菌药物的管理,同时应加强产ESBLs大肠埃希菌的监测,预防和减少耐药菌株的产生。     

产ESBLs大肠埃希菌的耐药性研究

[目的]调查华中科技大学同济医学院附属同济医院大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的流行情况,分析产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药性。[方法]选择华中科技大学同济医学院附属同济医院细菌室非重复分离大肠埃希菌,标准纸片扩散法检测ESBLs,琼脂稀释法检测其对15种抗菌药物的最低抑菌浓度。[结果]大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的流行率为32.7%,153株产ESBLs大肠埃希菌对二代头孢菌素的耐药率大于90%;对其他β-内酰胺的耐药率在12.5%～55%之间;对氨基糖苷类的庆大霉素、氟喹诺酮类的环丙沙星、四环素的耐药率在70%～90%之间。上述药物中头孢他啶、阿米卡星的MIC50仍在敏感范围,氨曲南的MIC50已达中介范围,其他抗菌药物的MIC50和MIC90均处于耐药范围。只有碳青霉烯类的亚胺培南全部敏感。产ESBLs和ESBLs阴性大肠埃希菌的耐药率比较:除哌拉西林/他唑巴坦差异无统计学意义,其他抗菌药物差异有统计学意义。[结论]该院大肠埃希菌产ESBLs菌株对多类药物表现出较高的耐药率,仅对碳青霉烯类的亚胺培南全部敏感。     

大肠埃希菌耐药性及耐药基因检测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）与非产ESBLs大肠埃希菌（ECO）的耐药性及耐药基因携带情况,并阐明产ESBLs ECO基因型分布。方法K-B法检测54株ECO对22种抗菌药物的敏感性,PCR方法扩增ESBLs基因、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物耐药基因。结果54株ECO对阿米卡星、奈替米星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、氨曲南、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南和美罗培南敏感性达70.0%～100.0%;对喹诺酮类、庆大霉素、哌拉西林敏感性〈27.8%;27株产ESBLs ECO中,CTX-M-1型9株、SHV型5株、TEM型16株、OXA-1型8株、6株未检测出ESBLs基因型、10株有≥2种ESBLs基因型;54株ECO中耐氨基糖苷类抗菌药物44株,aac（3）-Ⅰ4株、aac（3）-Ⅱ38株、aac（6′）-Ⅰ17株、aac（6′）-Ⅱ11株、ant（2″）-Ⅰ8株及ant（3″）-Ⅰ12株;54株ECO中耐喹诺酮类抗菌药物41株,qnr基因检出率为7.3%。结论碳青酶烯类为治疗ESBLs阳性ECO的首选药物;除氨基糖苷类抗菌药物和呋喃妥因外,产ESBLs组耐药性明显高于非产ESBLs组;产ESBLsECO中TEM型为最常见的ESBLs型别;氨基糖苷类抗菌药物耐药基因以aac（3）-Ⅱ和aac（6）-Ⅰ为主;ECO对喹诺酮耐药率较高,且检测到qnr基因。     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产ESBLs及耐药性变迁

目的探讨同一地区不同时期,大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）及耐药性变迁。方法采用法国生物梅里埃公司ATB药敏试验板微量肉汤法,测定大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性,同时用表型确证法检测ESBLs。结果大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌1999-2001年与2003-2005年相比,ESBLs的检出率增长〉1倍;对亚胺培南、头孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星的耐药率相对较低,对其他β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类及磺胺类抗菌药物的耐药率,两个时期相比增加明显,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论临床产ESBLs菌株不断增多,多重耐药现象越来越严重,临床实验室应将ESBLs的检测作为常规监测工作,有效指导临床选用抗菌药物。     

新生儿产超广谱β-内酰胺酶细菌的基因型与耐药性分析

目的了解新生儿病房产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性和ESBLs的基因型,为临床合理治疗提供理论依据。方法对2010-2012年住院新生儿送检标本进行菌株鉴定;ESBLs鉴定采用VITEK-2Compact鉴定及药敏系统,采用PCR方法对ESBLs基因型进行检测。结果 2010-2012年新生儿住院患者中共分离不重复肺炎克雷伯菌1 260株、大肠埃希菌755株,ESBLs产酶率分别为70.8%和57.4%,对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物的敏感率高于65.0%;随机选取150株产ESBLs肺炎克雷伯菌、100株产EBSBLs大肠埃希菌进行PCR引物扩增;250株产ESBLs菌株中,TEM型引物扩增阳性176株,占70.4%;SHV型引物扩增阳性145株,占58.0%;CTX-M型引物扩增阳性227株,占90.8%;OXA型引物扩增阳性16株,占6.4%;PCR扩增阴性45株,占18.0%。结论在医院流行ESBLs的基因型主要是CTX-M型,加强ESBLs基因型监测、了解其基因型分布资料,对于产ESBLs菌株感染的治疗和控制具有重要指导意义。     

临床血标本中产ESBLs大肠埃希菌耐药性检测

目的了解临床血标本中产ESBLs大肠埃希菌检出率及其对常用抗菌药物的耐药性。方法 CLSI表型确证试验纸片增强法检测产ESBLs大肠埃希菌;采用药敏分析仪对产ESBLs大肠埃希菌进行抗菌药物的敏感性试验。结果 44株血标本分离大肠埃希菌中,检出产ESBLs菌株20株,占45.5%;科室分布较为分散,其中神经内科、泌尿外科及血液内科各分离出3株,均占15.0%;产ESBLs菌株对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦100.0%敏感,对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑林、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南的耐药率均为100.0%;对阿米卡星、头孢西丁的耐药率分别为5.0%、10.0%,对其他抗菌药物的耐药率均>50.0%。结论临床血标本分离大肠埃希菌中,产ESBLs菌株发生率较高,并显示多药耐药性。     

19株产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌同源性分析

目的通过对19株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌进行同源性鉴定,分析产ESBLs大肠埃希菌在医院的分布及传播。方法收集医院1个月内检出的产ESBLs大肠埃希菌菌株,采用rep-PCR法对其同源性进行鉴定,根据检出病例是否为院内获得,分析其在医院的分布及传播。结果共收集19株产ESBLs大肠埃希菌,其中10株为医院感染,2株为定植病例,7株为院外获得感染。19株菌均非同源。结论医院产ESBLs大肠埃希菌为非同源菌株,医院控制措施有力,未引起产ESBLs大肠埃希菌的广泛院内传播。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌感染及耐药性分析

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)的临床分布特点及对常用抗菌药物的耐药性。方法对2008年8月-2010年2月临床分离的287株ECO进行回顾性分析,并按标准化操作规程采用美国BD公司Phoenix100全自动分析系统进行鉴定,药敏分析,产酶检测。结果 103株产EBSLs菌临床科室分离自ICU 37株,占35.9%,呼吸科16株,占15.5%,老年病科12株,占11.7%,儿科15株,占14.6%,血液科13株,占12.6%,其他科室10株,占9.7%;标本尿液中分离出52株,占50.5%,痰液25株,占24.3%,分泌物10株,占9.7%,血液12株,占11.6%,其他4株,占3.9%;产与非产EBSLs ECO对亚胺培南、美罗培南敏感率均为100.0%,产EBSLs ECO对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、呋喃妥因敏感率>50.0%,非产EBSLs ECO的敏感率>50.0%的有哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因、阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸、氯霉素、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、氨苄西林/舒巴坦。结论产EBSLs ECO临床分布以ICU、呼吸科、老年病科、儿科、血液科较多;感染部位以泌尿道、呼吸道、血液为主;产与非产EBSLs ECO耐药性差异有统计学意义(P<0.05),临床医师应重视药敏结果,严格用药指征,延缓病原菌耐药。     

产志贺毒素大肠杆菌毒力基因检测

目的 分析河南省2000～2002年分离的351株与产志贺毒素大肠菌(STEC)感染有关的菌株，了解不同来源标本各种毒素基因携带模式。方法 应用多重PCR技术，检测所有菌株志贺毒素(stx1和stx2、hlyA、eaeA、rfbO111和rfbO157基因。结果 351株待检菌株分为枸橼酸杆菌、O157：H7大肠杆菌、rfbO157基因阳性不携带志贺毒素基因的大肠杆菌和rfbO157基因阴性携带志贺毒素基因的大肠杆菌4种不同类型。4种类型菌株具有6种rebO157、stx2、stx1基因模式。携带志贺毒素基因的菌株主要源自波尔山羊、普通本地羊和病人，其它家畜家禽中有不同程度感染STEC。结论 河南省存在STEC的感染．主要以O157：H7大肠杆菌为主，但也存在其它非O157的STEC。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药表型分析与整合子基因检测的研究

目的探讨医院ICU产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性、ESBLs基因表型及整合子分布特点,为临床治疗提供参考依据。方法选择2010年1月-2012年1月医院IUC住院患者送检标本中分离出肺炎克雷伯菌共97株,采用VITEK-2系统进行细菌鉴定,K-B纸片扩散法进行药敏试验,数据采用SPSS 16.0软件进行统计分析。结果 97株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs菌32株,检出率为33.0%;32株产ESBLs肺炎克雷伯菌株中blaTEM,、blaSHV和blaCTX-M基因检出率分别为53.1%、9.4%和71.9%;头孢唑林、头孢呋辛、哌拉西林、头孢哌酮/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸和哌拉西林/他唑巴坦耐药率在产与非产ESBLs菌株间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ICU分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌流行严重,以携带blaCTX-M和blaTEM为主,整合子基因为intΙ1,未检出intΙ2和intΙ3基因,intΙ1基因可能使部分产ESBLs株肺炎克雷伯菌耐药率增加。     

郑州地区大肠埃希菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的基因型分布

TX-M型别者2株;CTX-M型ESBLS中,CTX-M-1(43株)、CTX-M-14(56株)、CTX-M-25(7株)及CTX-M-38(5株).结论 郑州地区大肠埃希菌CTX-M型ESBLs以CTX-M14型为主,且同一菌株町有多种CTX-M酶型.     

浙南山区产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的了解浙南山区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用CLSI推荐的双纸片协同试验;用头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸和头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸确证试验确认,检测医院2008年1月-2009年12月临床标本中分离出的107株产ESBLs肺炎克雷伯菌和274株产ESBLs大肠埃希菌;用K-B法进行药物敏感试验,并用上海新和实验室管理软件分析细菌分布和耐药性。结果 2008、2009年产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为51.6%、21.5%和47.0%、17.9%,未发现对亚胺培南耐药。结论浙南山区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌与高发地区相近,但是在浙江建立多药耐药菌监测制度后,产ESBLs的菌发生率出现下降。     

煤工尘肺患者痰中分离的大肠埃希菌耐药性及耐药酶表型检测

目的 了解煤工尘肺患者痰中分离的112株大肠埃希菌对18种抗生素的耐药性以及这些菌株中超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的表型分布情况.方法 采用Kirby-Bauer法检测大肠埃希菌对各供试抗生素的敏感性,按照临床实验室标准化协会(CLSR)帝j定的标准检测供试菌株是否产生耐药酶ESBL.结果 供试的18种抗生素有17种产生了不同程度的抗性,而且有交叉耐药;供试菌株ESBL表型阳性率为48.2%,ESBL表型阳性菌株的耐药程度高于阴性菌株.结论 煤工尘肺患者痰中分离的大肠埃希菌对常见抗生素产生普遍耐药,存在交叉耐药,ESBL的存在是耐药性产生的重要原因.     

β-内酰胺酶TEM、SHV全长基因检测与应用

目的建立β-内酰胺酶TEM、SHV全长基因检测方法，并对临床分离株进行检测分析。方法检索Gen-Bank核酸库中已登录的TEM、SHV各亚型基因序列，在保守区分别设计引物、分段扩增、分段测序，并由测序仪软件拼接成全长基因序列。结果大肠埃希菌TEM-1型、TEM-2型、TEM-6型、TEM-26型、SHV-1型、SHV-2型测得序列与期望序列一致；从大肠埃希菌(苏州)、肺炎克雷伯菌(苏州)、铜绿假单胞菌(温州)、鲍氏不动杆菌(湖州)、鲁氏洛菲不动杆菌(济南)、褪色(粘质)沙雷菌(济南)、流感嗜血菌(苏州)、副流感嗜血菌(苏州)、肺炎链球菌(苏州)、淋病奈瑟球菌(常州)、MRSA(常州)、MRCNS(鄂尔多斯)等菌中检出TEM序列，并有4条TEM序列登录GenBank；从铜绿假单胞菌(温州)、鲍氏不动杆菌(湖州)等菌中检出SHV序列，并有3条SHV序列登录GenBank。结论本β-内酰胺酶的TEM、SHV全长基因检测方法在实际应用中已获得良好效果。