TNF-α+308、TNF-α+489基因态性与慢性阻塞性肺疾病的相关性研究

目的探讨TNF-α+308、TNF-α+489基因态性及环境因素与慢性阻塞性肺疾病(COPD)发生的相关性。方法根据患者的年龄、性别,病例组与对照组按1∶2配对设计的病例对照研究方法,调查180例住院COPD患者和360例健康体检者的基本信息,并应用PCR-RFLP技术检测研究对象的TNF-α+308、TNF-α+489的基因型,采用Logistic回归分析TNF-α+308、TNF-α+489基因型和吸烟因素与COPD的关系及其两者间的交互作用。结果①病例组与对照组患者的年龄、性别差异无统计学意义,吸烟、肺癌家族史、FEV1/Pre、FEV1/FVC 2组间差异有统计学意义。②病例组TNF-α+308的等位基因A频率为15.6%,对照组为8.2%,等位基因A发生COPD的风险OR值为2.06(95%CI(1.39,3.05));病例组与对照组的TNF-α+489的等位基因A频率分别为16.1%和6.9%,TNF-α+489等位基因A发生COPD的风险OR值为2.55(95%CI(1.71,3.09))。③以显性遗传模式估计,TNF-α+308(+)联合吸烟因素发生COPD的OR值5.36(95%CI(2.81,10.23)),TNF-α+489(+)联合吸烟因素发生COPD的OR值为8.18(95%CI(4.08,16.38))。④TNF-α+308联合TNF-α+489(+)发生COPD的OR值为4.02(95%CI(1.89,8.52)),高于TNF-α+308、TNF-α+489基因型独立作用。结论 TNF-α+308、TNF-α+489基因多态性与COPD相关,与吸烟因素存在相加正交互作用。TNF-α+308、TNF-α+489基因多态性可增加吸烟患者发生COPD的风险。     

肿瘤坏死因子与葡萄膜炎发病相关性的探讨

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与葡萄膜炎发病的相关性。方法:采用多聚酶链反应技术检测60例葡萄膜炎及60例正常人外周血TNF-α水平及其基因多态性。结果:观察组外周血中TNF-α水平明显高于对照组(P0.05);观察组经PCR扩增后可见特异性TNF-α扩增产物,TNF-α基因目的片段大小为117 b;对照组未见特异性TNF-α扩增产物;经PCR/RFLP分析发现两组TNF-α基因有3种酶切格局,即TNFα-308A/A纯合子的标本不发生酶切、TNFct-308G/G纯合子发生完全酶切;TNFα-308G/A杂合子产生部分酶切;两组基因型频率从高到低依次为G/G型、G/A型、A/A型,但两组比较具有明显差异(P0.05)。结论:肿瘤坏死因子TNF-α与葡萄膜炎的发病具有显著的相关性。     

新疆汉族、维吾尔族支气管哮喘患者TNF-α-308 基因多态性与中医证型相关性研究

目的：探讨新疆汉族、维吾尔族支气管哮喘患者肿瘤坏死因子琢（TNF-α）-308 基因多态性的分布,及其与哮喘中医证型的相关性。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP） 方法,检测160 例支气管哮喘患者及40 例健康对照者的TNF-α-308 基因多态性。根据支气管哮喘中医辨证标准对160 例支气管哮喘患者进行辨证分型,比较各中医证型的基因分布。结果：哮喘组与正常组、维吾尔族哮喘组与维吾尔族正常组、汉族哮喘组与汉族正常组、维吾尔族正常组与汉族正常组之间的两种基因型（野生型和突变型）及等位基因在分布上均无统计学差异。哮喘各中医证型间TTNF-α-308 基因型分布差异无统计学意义。汉族哮喘患者与维吾尔族哮喘患者在各中医证型间分布无统计学差异。结论：新疆支气管哮喘发病可能与民族、TNF-α-308 基因多态性无关;支气管哮喘中医辨证分型可能与TNF-α-308 基因型分布无关。     

雷公藤多甙抑制EM患者腹腔巨噬细胞及相应细胞模型分泌TNF-α的实验研究

目的观察雷公藤多甙(TWP)对子宫内膜异位症(EM)患者腹腔巨噬细胞和小鼠腹腔活化巨噬细胞释放TNF-α的影响,以探讨TWP用于临床治疗EM的机制并建立细胞模型,为后续研究做准备。方法收集16例经腹腔镜检查确诊为EM患者腹腔液分离纯化巨噬细胞,并给予不同剂量的TWP进行共同孵育;同时分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞,用脂多糖(LPS)激活以获得细胞模型,同样予TWP进行共同孵育。分别以间接MTT法和RT-PCR法在蛋白质水平和基因水平检测该药物影响激活状态巨噬细胞分泌TNF-α含量的变化。结果 EM患者腹腔液中TNF-α含量显著高于非EM妇女,在4～24 h后TWP(6.25～100μg/L)显著抑制了TNF-α的分泌。结论 TWP在蛋白质和基因水平均能有效抑制激活巨噬细胞分泌TNF-α。     

慢性再生障碍性贫血辨证分型与TNF-α、IFN-γ水平相关性研究

目的探讨慢性再生障碍性贫血(CAA)中医辨证分型与TNF-α、IFN-γ水平的相关性,为CAA的中医辨证分型提供客观化依据。方法选择90例患者(脾肾阳虚型、肾阴阳两虚型、肝肾阴虚型各30例),以15例健康志愿者为对照,采用ELISA法检测其血清、骨髓单个核细胞培养上清TNF-α、IFN-γ分泌水平;RT-PCR法检测骨髓单个核细胞TNF-α、IFN-γmRNA表达水平。结果患者血清、骨髓单个核细胞培养上清TNF-α、IFN-γ分泌水平均明显高于正常组(P<0.05,P<0.01);患者三组按照脾肾阳虚组、肾阴阳两虚组、肝肾阴虚组顺序,其TNF-α、IFN-γ水平逐渐升高,两两比较差异显著(P<0.05);TNF-α、IFN-γmRNA表达水平,脾肾阳虚组最低,肝肾阴虚组最高,而肾阴阳两虚组介于两者之间。结论TNF-α、IFN-γ可以作为CAA中医辨证分型的客观化依据。     

电针足三里对雷公藤甲素致急性肝损伤大鼠IL-10与TNF-α的影响

目的:观察电针对雷公藤甲素致急性肝损伤大鼠IL-10与TNF-α的影响及其对肝脏的保护作用。方法:30只健康SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组和电针组,正常组不给予任何干预,模型组给予雷公藤甲素灌胃5 d,电针组给予同等剂量雷公藤甲素灌胃并给予电针足三里刺激5 d后,检测各组大鼠ALT、AST、TNF-α、IL-10含量。结果:模型组ALT、AST、TNF-α含量高于空白组,IL-10含量低于空白组;电针组IL-10含量高于模型组,TNF-α、ALT、AST含量低于模型组;电针组IL-10、AST含量高于空白组,TNF-α、ALT含量低于空白组,差异无统计学意义。结论:电针足三里能减轻雷公藤甲素所致肝损伤,其机制可能与调节抗炎及促炎作用平衡有关。     

苏木乙酸乙酯提取物对大鼠同种异位心脏移植急性排斥外周血中TNF-α水平的影响

目的:观察在大鼠的同种异位心脏移植急性排斥反应中苏木乙酸乙酯提取物对外周血TNF-α的水平的影响。方法:以Wistar大鼠的心脏为供体,SD大鼠作为心脏移植受者,制造大鼠同种异位心脏移植模型,并将其随机分为环胆素A(CsA)组、模型组、苏木乙酸乙酯加半量CsA组、苏木乙酸乙酯组,应用ELISA法检测外周血TNF-α的水平变化。结果:苏木乙酸乙酯组及苏木乙酸乙酯加半量CsA组均能明显降低大鼠外周血TNF-α的水平。结论:苏木乙酸乙酯提取物具有显著的抑制免疫排斥反应的作用,可能是通过降低TNF-α的分泌而发挥免疫抑制作用。     

小檗碱通过JNK通路降低内脏脂肪素诱导人脐静脉内皮细胞分泌IL-6和TNF-α的研究

目的研究c-Jun氨基端激酶(JNK)信号转导通路对内脏脂肪素(内脂素)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的调控作用及小檗碱的干预作用。方法体外培养HUVEC,用内脂素不同质量浓度(0、50、100、200μg/L)及不同时间(0、6、12、24、48 h)作用HUVEC,MTT法检测HUVEC增殖;流式细胞仪检测HUVEC凋亡;ELISA法检测HUVEC上清液中IL-6及TNF-α的量;Western blotting法检测HUVEC中p-JNK、Bax、Bcl-2蛋白表达;并用小檗碱(50μmol/L)及JNK通路特异性抑制剂SP600125(10μmol/L)干预HUVEC,检测小檗碱的干预作用。结果与对照组相比,100μg/L内脂素可显著抑制HUVEC增殖,诱导HUVEC凋亡,诱导HUVEC分泌IL-6及TNF-α的量显著增高,并可显著增加HUVEC内p-JNK及Bax蛋白表达,减少HUVEC内Bcl-2蛋白表达;与内脂素组相比,小檗碱及SP600125均可显著减轻内脂素对HUVEC增殖的抑制及其诱导的HUVEC凋亡,降低内脂素诱导HUVEC上清液中IL-6及TNF-α的量并能降低HUVEC中p-JNK及Bax蛋白的表达,增加HUVEC内Bcl-2蛋白表达。结论小檗碱可减少IL-6及TNF-α的分泌,减轻内脂素诱导的HUVEC损伤,其机制可能与抑制JNK信号转导通路有关。     

雷公藤甲素对BRL大鼠肝细胞增殖和凋亡的影响

目的研究雷公藤甲素(TP)对BRL大鼠肝细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养BRL大鼠肝细胞,经不同浓度TP处理细胞后,采用CCK-8法检测BRL大鼠肝细胞增殖能力;生化仪测定细胞上清液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性;AV/PI双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡率;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)等细胞因子含量。结果与正常对照组比较,雷公藤甲素能明显抑制BRL大鼠肝细胞增殖,诱导细胞凋亡;雷公藤甲素1、10、100μmol/L能明显升高BRL大鼠肝细胞上清液中AST活性,100μmol/L能明显升高ALT活性并降低IL-10含量(P0.05,P0.01)。与雷公藤甲素100μmol/L组比较,雷公藤甲素1、10μmol/L组细胞上清液中ALT含量明显降低,雷公藤甲素10μmol/L组细胞上清液中IL-10含量明显升高,雷公藤甲素1μmol/L组细胞凋亡率明显降低且细胞上清液中TNF-α含量明显升高(P0.05,P0.01)。与雷公藤甲素10μmol/L组比较,雷公藤甲素1μmol/L组细胞凋亡率明显降低,细胞上清液中TNF-α含量明显升高(P0.01)。结论雷公藤甲素对BRL大鼠肝细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性,该抑制作用可能与诱导BRL大鼠肝细胞凋亡有关。     

雷公藤甲素对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的抑制作用及其机制

目的观察雷公藤甲素对激素依赖性人胃癌细胞株SGC-7901增殖的抑制作用,并初步探讨可能的机制。方法 MTT法检测雷公藤甲素对SGC-7901细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测雷公藤甲素对SGC-7901细胞周期的影响,Western blotting法观察雷公藤甲素对SGC-7901细胞内雌激素受体(ER-α)蛋白表达的影响。结果雷公藤甲素对SGC-7901细胞增殖有显著的抑制作用,并呈现良好的量-效关系。雷公藤甲素还能有效地使SGC-7901的细胞周期阻滞在S期,同时明显下调ER-α蛋白的表达。结论雷公藤甲素能抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖并且使细胞周期阻滞在S期,其对SGC-7901细胞增殖的抑制作用和周期阻滞作用的机制可能与其下调ER-α的表达有关。     

TNF-α基因和IL-13基因多态性与哮喘患者大鱼际掌纹特应征的相关性研究

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因和白细胞介素13(interleukin-13,IL-13)基因多态性与青岛地区汉族成人哮喘患者大鱼际掌纹特应征的相关性。方法:应用SNa Pshot方法对400例哮喘患者和200名正常对照的TNF-α基因的rs1799724,rs1800630,rs1799964和rs769178以及IL-13基因的rs2158177和rs1295687共6个多态位点的基因多态性进行检测。结果:TNF-α基因的rs1799724,rs1800630,rs1799964和rs769178以及IL-13基因的rs2158177和rs1295687的基因型频率在掌纹阴性组与掌纹阳性组间差异无统计学意义(P0.05)。结论:未发现TNF-α基因和IL-13基因多态性与青岛地区汉族成人哮喘患者大鱼际掌纹特应征存在相关性。     

雷公藤甲素配伍甘草酸对CIA大鼠血清TNF-α,IL-10的影响

目的:观察雷公藤甲素与甘草酸配伍对CIA模型大鼠关节肿胀和血清TNF-α,IL-10水平的影响.方法:使用Ⅱ型胶原诱导出成功的关节炎模型大鼠60只,并随机分为模型组、雷公藤甲素组、甘草酸组、雷草1组、雷草2组和雷草3组,另设空白组.以关节炎指数和关节肿胀度作为疗效评判标准,并采用ELISA方法检测大鼠血清中抗Ⅱ型胶原抗体,TNF-α和IL-10的水平.结果:经雷公藤甲素配伍甘草酸治疗后,模型大鼠的关节炎指数和关节肿胀度均显著下降(P＜0.01),血清中抗Ⅱ型胶原抗体和TNF-α水平显著下降,而IL-10水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:甘草酸配伍雷公藤甲素治疗CIA,可以在保持疗效的前提下减少雷公藤甲素的用量.     

重楼总皂苷对脂多糖诱导大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α及IL-1β的影响

目的:探讨重楼总皂苷对细菌内毒素脂多糖(LPS)诱导大鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)分泌TNF-α、IL-1β的影响.方法:分离并纯化大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ),与重楼总皂苷共同孵育,2小时后予LPS(100ng/ml)诱导PMΦ释放TNF-α、IL-1β,以ELISA酶联免疫吸附测定法检测上清液中TNF-α、IL-1β浓度.结果:重楼总皂苷对LPS诱导PMΦ释放TNF-α、IL-1β具有显著的抑制作用(P＜0.01).结论:重楼总皂苷可以抑制腹腔巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1β的活性.     

IL-6和TNF-α与2型糖尿病关系的探讨

目的探讨2型糖尿病患者白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)血清水平表达量的变化。方法选取30名健康志愿者、29名2型糖尿病患者,应用IL-6和TNF-α特异的酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定观察对象血清中IL-6和TNF-α的含量。结果2型糖尿病组血清IL-6和TNF-α水平显著高于正常对照组(P<0.05和0.01)。结论IL-6和TNF-α可能参与了2型糖尿病的发生、发展过程。     

雷公藤对紫癜性肾炎患儿TNF-α和IL-8的影响

目的:探讨雷公藤治疗紫癜性肾炎(HSPN)的临床疗效及对血清TNF-α和IL-8水平的影响.方法:38例紫癜肾患儿随机分为两组,对照组18例给予抗血小板聚集、抗组胺、低分子肝素、丹参、强的松等常规治疗,治疗组20例加用雷公藤片,每日1.5mg/kg,连用4周;观察两组临床治疗效果及皮肤紫癜、24小时尿蛋白定量、尿沉渣RBC计数、尿常规分析的变化,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测治疗前后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-8(IL-8)的水平,对两组结果进行比较.结果:雷公藤组的临床总有效率高于对照组;两组紫癜肾患儿血清TNF-α和IL-8水平治疗后均下降,雷公藤治疗组下降更为明显,差异具有统计学意义(P<0.001).结论:雷公藤对紫癜肾患儿有较好疗效,其机制可能与抑制TNF-α和IL-8水平有关.     

Vaticanol(B,C and G),α-Viniferin和Hopeaphenol体外抑制小鼠骨髓生成的肥大细胞介质释放

目的:α-viniferin, vaticanol(B, C and G) 和 hopeaphenol 是白黎芦醇的低聚体,具有抗肿瘤和抗氧化等活性,而这些化学保护作用是与其抗炎作用有联系.本文研究旨在了解这些化合物对小鼠骨髓分化肥大细胞(BMMC)组织胺、肿瘤坏死因子和白三烯介质释放的影响,并观察对细胞外信号调节激酶(ERK)的激活作用.方法: 分离小鼠骨髓细胞,培养4～5周(RPMI-1640,IL-3 10 ng/ml),抗-DNP IgE 致敏,以DNP-BSA(30 ng/ml)刺激释放反应.在非免疫刺激释放实验中,A23187作为刺激剂.结果:所试化合物均表现出不同程度的抑制BMMC释放反应的作用.这些化合物对IgE刺激的TNF-α和LTs释放表现出显著的抑制作用,而对IgE刺激的组织胺释放反应,只有vaticanol B和vaticanol C 具有抑制作用(100 μmol/L).在A23187介导的非免疫刺激释放反应中,vaticanol(B,C和G)和hopeaphenol对组织胺释放表现出明显的对抗作用,大多数所试化合物有效地抑制了TNF-α和LTs的释放,唯vaticanol C和vaticanol G对LTs的释放无明显影响.α-viniferin和vaticanol C有效地抑制了IgE刺激的ERK酶的激活.结论:α-viniferin,vaticanol(B,C和G)和hopeaphenol能有效地抑制肥大细胞的炎性介质的释放反应,而对BMMC的细胞活力无明显影响     

虎杖方剂对CCl4致肝损伤大鼠TNF-α及细胞凋亡的影响

目的:观察虎杖方剂(虎杖、地榆、三白草等)对CCl4致肝损伤大鼠TNF-α及细胞凋亡的影响.方法:采用CCl4致大鼠肝损伤模型,用酶联免疫吸附法测定血清TNF-α水平,用TUNEL法检测组织凋亡细胞,用SABC免疫组化检测凋亡相关基因bcl-2与bax的蛋白表达.结果:虎杖方剂能明显降低肝损伤组大鼠血清TNF-α水平,抑制细胞凋亡,并提高bcl-2/bax值,与模型组比较有显著差异(P＜0.01),而虎杖方剂对正常肝组织无明显影响.结论:虎杖方剂抗CCl4所致肝损伤的作用与抑制TNF-α分泌、抑制细胞凋亡有关.     

TNF-α-308位点多态性与COPD易感性联系的Meta分析

目的:研究TNF-α-308位点多态性与COPD发病风险的关联程度。方法:计算机检索CNKI、Pub Med、Embase、Wan Fang、CBM、维普智立方文献数据库,检索国内外有关TNF-α-308多态性与COPD易感性之间的病例(对照研究),从建库查找到2017年8月14日,共3名评价者依照纳入以及排除标准甄选出文献,对文献进行了整理和评价,用Rev Man 5.2应用软件对整理的文献做了Meta分析。结果:最后共纳入病例(对照研究)18篇,有病例组患者1697例、对照组患者1671例;在研究人群种族的基础上,对中国的汉族人群进行了亚组分析,Meta分析结果表明:TNF-α-308与COPD易感性有关联(RR=2.25,95%CI=[1.84,2.76],P[0.00001)。结论:TNF-α-308基因的多态性与COPD的易感性可能有关联。     

补肾活血法复方解除雷公藤甲素抑制人卵巢颗粒细胞分泌功能的研究

目的探讨雷公藤甲素对体外培养人卵巢颗粒细胞增殖的影响及补肾活血中药复方对此影响的解除作用。方法 MTT法检测雷公藤甲素6种不同浓度对人卵巢颗粒细胞原代培养细胞增殖的影响,并计算出细胞半数抑制浓度值(IC50);放免法分别检测颗粒细胞正常组(正常组)、雷公藤甲素抑制组(TL组)、中药含药血清组(TL+中药组)的雌二醇(E2)、孕酮(P)水平。结果雷公藤甲素浓度≥1μg/m L时对人卵巢颗粒细胞的增殖有明显抑制作用,且呈剂量依耐性;当IC50为5.33μg/m L时,TL组的E2、P水平明显低于正常组(P均0.05),而TL+中药组E2、P水平均明显高于TL组(P均0.05)。结论雷公藤甲素能抑制体外培养的人卵巢颗粒细胞的分泌功能,补肾活血中药复方能解除其抑制作用,提高体外培养的人卵巢颗粒细胞的分泌功能。     

柳茶对荷瘤小鼠脾淋巴细胞产生IL-2和TNF-α的影响

目的：观察藏药柳茶水提物对肿瘤生长的抑制作用以及其对荷瘤鼠脾淋巴细胞产生细胞因子IL-2和TNF-α水平的影响。方法：采用腹水型肉瘤细胞株和昆明种小白鼠建立小鼠肿瘤模型，用ELISA（酶联免疫吸附试验）双抗体夹心法测定荷瘤鼠脾淋巴细胞产生水平。结果：柳茶能明显抑制肿瘤的生长，可增强小鼠脾淋巴细胞产生IL-2和TNF-α的能力。结论：柳茶可以促进机体细胞因子IL-2和TNF-α的分泌，通过调节免疫功能而发挥抗肿瘤的作用。