Bcl-2基因家族与细胞凋亡

对机体而言,生与死是一对矛盾,它的对立统一构成了生命运动,而这种矛盾在细胞水平的表现就是细胞分裂和死亡。后者主要指凋亡,作为一种生理性细胞消亡方式,凋亡普遍存在于生物界。     

抑凋亡基因Bcl-2与肿瘤

<正> 近年来,随着细胞凋亡(Apoptosis)概念的确立,人们对肿瘤的发生和发展产生了新的认识。认为肿瘤的发生不仅与细胞过度增殖相关,也与细胞凋亡减少有关。细胞凋亡又名细胞程序性死亡(Programmed cell death)是一种主动的,由基因调控的,不同于坏死(Necrosis)的细胞死亡形式,其具有如下特征:细胞皱缩,染色质凝聚,细胞膜呈典型的外突,形成凋亡小体。该小体由于其改变了表面结构而被巨噬细胞和上皮细胞的特异性受体所识别并被完全吞噬,且无炎症反应。Bcl-2基因是近年来发现的一种抑凋亡基因,其最早发现于B细胞淋巴瘤,故命名为B细胞淋巴瘤/     

去除雄激素对前列腺癌中凋亡抑制蛋白Bcl-2和Bcl-XL表达的影响

目的：探讨去除雄激素对人前列腺癌（PCa)细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达的影响。方法：采用雄激素依赖PCa细胞株LNCaP为研究对象,雄激素非依赖PCa细胞株PC－3为对照;以Western印迹法检测去除雄激素后Bcl-2和Bcl-XL蛋白的表达。结果：在LNCaP中去除雄激素12h后Bcl-2蛋白的表达开始升高,到24h最明显,而去除雄激素10h后Bcl-XL蛋白表达开始降低,在24h达最低,而在PC－3中去除雄激素前后未见Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达改变,结论：去除雄激素可促PCa细胞中Bcl-XL蛋白表达降低,可能是手术或药物去势治疗前列腺癌的机制之一,Bcl-2蛋白的表达升高可能和后期PCa雄激素非依赖性生长有关。     

凋亡相关基因Bcl-2、Bax在糖尿病大鼠视网膜的表达

目的 研究凋亡相关基因Bcl-2、Bax在早期糖尿病大鼠视网膜的表达，探讨其在糖尿病视网膜病变细胞凋亡中的作用。方法 选择健康成年Wistar大鼠40只，随机分成正常对照组（CON）、糖尿病1个月（DM1）、3个月（DM3）及6个月（DM6）组。腹腔内注射链脲佐菌素（STZ诱发大鼠糖尿病。制备大鼠视网膜石蜡切片行免疫组化ABC法染色，并对染色结果行计算机图像分析。结果 于CON及DM各组，Bax和Bcl-2二基因的蛋白均在视网膜血管表达，且随病程进展，其阳性反应强度逐渐增加。此外，Bcl-2阳性反应在DM3组于色素上皮细胞出现，在DM6组，再进一步扩大到视杆内节和节细胞。而Bax和DM6亦出现于节细胞。结论 凋亡相关基因Bcl-2和Bax在早期糖尿病大鼠视网膜血管和神经细胞的表达随病程的进展逐渐增强，二者在糖尿病视网膜细胞凋亡中起重要作用。     

Bcl-2基因与消化系统肿瘤

<正> 细胞凋亡(Apoptosis)又称细胞程序性死亡(Programmed cell death,PCI)的概念最早是由Kerr等于70年代提出。它是一种普遍发生的生物学现象,为维持机体内环境稳定所必须,与细胞分裂增殖相辅相成,共同参与机体生理和病理过程。是一种主动的,在基因调控下细胞自我消亡的生理过程,不同于细胞坏死(Necrosis),具体的形态学改变有:细胞容积皱缩、染色质凝聚、胞膜     

Bcl-2基因家族与细胞凋亡和皮肤肿瘤

1972年 Kerr等 [1] 揭示了多细胞生物体的细胞死亡可分为完全不同的两种方式即细胞坏死和细胞凋亡。细胞凋亡不仅在形态特征及生化特征上有别于细胞坏死 ,其生物学意义亦截然不同。细胞凋亡是在某些生理或病理条件下 ,细胞受到某种信号的触发后遵循一定程序的主动死亡过程 ,它不仅对胚胎发育、组织发生及维持机体的自身稳定至关重要 ,而且对控制细胞增殖、肿瘤的发生发展乃至消亡起着主要的作用。人们已经注意到 ,细胞凋亡调节机制的紊乱比细胞分裂对肿瘤的发生发展更加重要 [2 ]。目前已知许多基因 (包括癌基因、抑癌基因和病毒基因 )参与…     

脑室内注射胰岛素对大鼠全脑缺血后海马CA1区Bcl-2蛋白表达及神经元凋亡的影响

目的　观察胰岛素对全脑缺血后海马 CA1区神经元凋亡及 Bcl- 2蛋白表达的影响 ,探讨胰岛素对全脑缺血后海马CA1区神经元产生中枢直接保护作用的机制 .方法　利用 4-VO法制作大鼠全脑缺血模型 .造成脑缺血 15 min后行再灌注 ,于再灌注后即刻经脑室注入 1U胰岛素 ,利用免疫组化及原位标记法分别于全脑缺血后 1和 3d观察海马 CA1区Bcl- 2蛋白表达及神经元凋亡的情况 .结果　全脑缺血后 1d,缺血组及胰岛素治疗组鼠海马 CA1区未见原位标记阳性细胞 .治疗组鼠海马 CA1区可见呈阳性表达的 Bcl- 2蛋白 ,而缺血组鼠海马 CA1区 Bcl- 2蛋白的表达则呈阴性 .全脑缺血后 3d,缺血组鼠海马 CA1区 Bcl- 2蛋白的表达仍呈阴性 ,海马 CA1区原位标记阳性细胞计数为 143.5± 11.6 .治疗组鼠海马 CA1区 Bcl- 2蛋白呈阳性表达 ,海马 CA1区原位标记阳性细胞计数为 75 .6± 6 .7.结论　全脑缺血后脑室内注入胰岛素可促进海马 CA1区 Bcl- 2蛋白表达 ,减少神经元的凋亡 ,这可能是其对全脑缺血后海马 CA1区神经元产生中枢直接保护作用的主要机制之一 .     

细胞凋亡及Bcl—2蛋白表达在胃癌发生中的意义

了解细胞调亡和Bcl－2蛋白表达在慢性胃炎、胃溃疡、胃粘膜不典型增生、胃癌中的规律和可能作用。方法：采用原位末端标记法（TUNEL法）检测细胞凋亡，采用免疫级化检测Bcl－2蛋白的表达。结果：慢性活动性胃炎、胃溃疡、轻度不典型增生、重度不典型增生、早期胃癌和进展期胃癌的凋亡指数分别为16．8±12．3％、24．1±20．0％、19．3±16．4％、15．7±15．2％、10．1±9．1％和6．3±6．0％，进展期胃癌显著低于早期胃癌和不典型增生（P＜0．05）。而Bcl－2蛋白阳性率分别为9．4％、27％．6％、52．9％、75．0％、83．3％和46．7％，早期胃癌显著高于进展期胃癌。在Lauren分型中，杨型和弥散型胃癌的细胞凋亡指数、Bcl－2蛋白的表达分别为8．3±7．2％、38．9％和5．1±4．9％、58．3％，两型比较，细胞调亡指数及Bcl－2蛋白表达均有显著差异（P＜0．05）。结论：在胃粘膜不典型增生、早期胃癌到进展期胃癌的发展中，细胞凋亡逐渐受到抑制。胃癌的形成与Bcl－2的高表达有关，而且主要的作用阶段可能在癌变早期。胃癌的Lauren分型与细胞凋亡指数及BcL－2蛋白表达密切相关。     

硫化砷诱导K562细胞凋亡中Bcl-2和Bax的表达

目的　研究 Bcl- 2和 Bax在硫化砷诱导的 K5 6 2细胞凋亡中的表达 ,探讨其在硫化砷诱导的细胞凋亡中的作用 .方法　 K5 6 2细胞经一定剂量硫化砷作用特定时间后 ,MTT法检测细胞生长、增殖状态 ,光镜及透射电镜下观察细胞形态及凋亡情况 ,S- P免疫组化染色检测 Bcl- 2、Bax的表达并进行图像分析 .结果　硫化砷对 K5 6 2细胞生长增殖有时间剂量依赖性抑制作用 ;175～ 14 0 0μg· L- 1 硫化砷作用 18～ 14 4 h后 ,K5 6 2细胞出现凋亡细胞的形态学改变 ;免疫组化染色表明 K5 6 2细胞低表达 Bcl- 2蛋白 (A值为 0 .15 2± 0 .0 2 3,阴性对照 A值 0 .10 8± 0 .0 12 ) ,硫化砷处理后对其表达无明显影响 (A值为 0 .138± 0 .0 2 8,P>0 .0 5 ) .硫化砷作用后 ,Bax蛋白的表达量 A值由 0 .2 4 0± 0 .0 13增加到 0 .316± 0 .0 2 1(P<0 .0 1) .结论　硫化砷可抑制 K5 6 2细胞的生长和增殖并诱导其发生凋亡 ,其机制可能与 Bax蛋白上调有关 .     

卡维地洛治疗心力衰竭对大鼠心肌细胞凋亡和Bcl-2、Bax蛋白表达水平的影响

目的 从细胞凋亡角度探讨卡维地洛治疗心力衰竭的机制。方法 采用结扎冠状动脉复制慢性心功能不全模型，观察卡维地洛治疗心力衰竭，对心肌细胞凋亡率、bcl-2、Bax蛋白表达水平的影响。结果 卡维地洛干预心功能不合可以剂量依赖地使心肌细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平降低，使bcl-2蛋白表达水平增加。特拉唑嗪对心肌细胞凋亡和Bax、bcl-2的蛋白表达水平无影响。结论 抑制Bax蛋白表达水平，同时增加bcl-2蛋白表达水平，从而抑制心肌细胞凋亡，是卡维地洛治疗心力衰竭的重要机制之一。卡维地洛抑制心肌细胞凋亡的效应与α1－受体阻滞作用无关。     

热疗联合DDP诱导大肠癌细胞凋亡和bcl-2表达的实验研究

目的 :研究热化疗诱导大肠癌 (LoVo)细胞凋亡及其与bcl_2基因表达的关系 ,探讨热化疗治疗大肠癌的机制。方法 :应用热疗联合顺铂 (DDP)在不同药物浓度、时间和温度条件下诱导LoVo细胞凋亡 ,以流式细胞仪检测其凋亡率及bcl_2基因的表达。结果 :随着药物浓度的升高、作用时间的延长 ,细胞凋亡率增加 ;热疗联合DDP所致凋亡率大于单纯化疗组和单纯热疗组之和 ;随着药物浓度的升高 ,bcl_2的表达下调 ;各处理组与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;热化疗使bcl_2表达下调较单纯热疗及单纯化疗显著 (P <0 .0 5 ) ;高温也可以使bcl_2的表达下调。结论 :单纯化疗、热化疗及单纯热疗均能诱导LoVo细胞凋亡且可使bcl_2基因表达下调 ;热疗联合DDP在诱导凋亡及下调bcl_2基因表达方面具有协同作用。     

低氧诱发人肝癌细胞株HepG2中IAP-2表达及相关机制

目的 研究极度低氧下人肝癌细胞株HepG2中凋亡抑制蛋白2（IAP-2）表达的变化，初步探讨其与缺氧诱导因子1（HIF-1）的相关性。方法 HepG2细胞株分组孵育，用免疫细胞化学定性检测IAP-2蛋白，再用Western blot半定量检测IAP-2蛋白变化，同时对比HIF-1蛋白表达；用RT-PCR检测IAP-2基因水平改变。结果 免疫细胞化学检测IAP-2蛋白在HepG2细胞中呈阳性表达，定位于胞质。Western blot显示，极度低氧1 h IAP-2蛋白表达明显高于常氧组（t=5．723，P〈0．05），3、5 h IAP-2持续高表达，复氧后恢复基线水平；实验还显示HIF-1和IAP-2的蛋白表达具有差异性：常氧组HIF-1未表达，低氧4h可诱发，IAP-2保持基线水平；极度低氧HIF-1无变化，IAP-2表达明显增高；复氧后HIF-1不表达，IAP-2恢复基线表达；加入氯化钴后HIF-1恢复表达，IAP-2保持基线。RT-PCR检测表明，极度低氧1 h IAP-2 mRNA表达明显高于常氧组（t=7．097，P〈0．05），3、5 h IAP-2持续高表达，该结果与上述IAP-2蛋白表达具有一致性。结论 首次表明极度低氧下IAP-2在人肝癌细胞株HepG2表达上调，并具有独立于HIF-1的抗凋亡机制。     

Bcl-2在口腔鳞癌中的表达及意义

目的　研究Bcl 2在口腔鳞状细胞癌 (OralSquamousCellCarcinoma ,OSCC)中的表达及与其发生、发展的意义。方法　应用免疫组化S P法分别检测 10例口腔正常黏膜 ,10例单纯性增生 ,2 0例癌前病变 ,76例口腔鳞状细胞癌中Bcl 2的表达。结果　Bcl 2在正常黏膜、单纯性增生中未见表达 ,在不典型增生组织中Bcl 2阳性 2例 ,阳性细胞局限于基底层细胞 ,染色较淡。在OSCC中Bcl 2蛋白阳性表达率比正常组、单纯性增生组、不典型增生组高 (P <0 .0 5 )。Bcl 2的阳性表达率、阳性分级在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期病例及是否颈淋巴结转移均无显著性差异。病理中、低分化组中Bcl 2的表达率比高分化组比较有显著增高 (P <0 .0 5 )。结论　Bcl 2的表达在口腔鳞癌的发生发展中起着重要的作用     

正常与异位子宫内膜Bcl-2表达与细胞凋亡的关系

目的 :探讨 Bcl- 2和细胞凋亡与在位及异位子宫内膜的关系。方法 :应用免疫组化法对61例正常月经周期子宫内膜及卵巢子宫内膜异位症患者进行 Bcl- 2检测。同时用 TUNEL法对其中 34例标本进行凋亡检测。结果 :正常位置的子宫内膜分泌期及月经期凋亡细胞较多 ,增生期内膜及异位内膜无凋亡。 Bcl- 2蛋白在增生期含量高 ,分泌期低落 ,月经期消失 ,异位内膜中高于增生期( P<0 .0 5 )。结论 :细胞凋亡与子宫内膜脱落有关 ;异位子宫内膜细胞通过抗凋亡基因 Bcl- 2的高表达而抑制细胞的凋亡过程 ,延长生命周期     

尼卡地平下调大鼠系膜细胞Bcl-2基因的表达

目的 探讨尼卡地平体外对大鼠系膜细胞凋亡相关基因(Bcl-2／Bax)表达的影响。方法 采用多克隆抗体间接标记，流式细胞仪检测大鼠系膜细胞凋亡相关基因(Bcl-2／Bax)的蛋白表达；以β-actin为内参标。RTPCR法测定以上基因的mRNA表达；Ho33342染色测定细胞凋亡。结果 尼卡地平在蛋白及mRNA水平均下调Bcl-2基因的表达，对Bax基因的表达则无明显影响。结论 尼卡地平下调Bcl-2基因表达是引起大鼠系膜细胞凋亡的主要原因。     

局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡及其调控基因bcl-2的表达

目的　观察大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和 bcl- 2基因表达情况及其相互关系。方法　采用健康雄性SD大鼠大脑中动脉阻断 (MCAO)模型 ,阻断 MCA血流 2 h后再灌注 ,在不同再灌注时间点断头取脑后 ,连续切片分别作 HE染色、TUNEL染色及 bcl- 2蛋白免疫组化染色。结果　 1MCAO后 ,缺血区部分神经细胞发生了凋亡 ,随着再灌注时间的延长 ,凋亡细胞数目逐渐增多 ,1天时达高峰 ,各再灌注时间组之间差异显著 (P<0 .0 1)。 2凋亡抑制基因 bcl- 2有不同程度表达 ,再灌注早期 (6 h)即达高峰 ,各组表达有显著差异 (P<0 .0 1) ;3神经细胞凋亡的出现与 bcl- 2表达在一定时程内呈直线负相关 (r=- 0 .747,P<0 .0 1)。结论　脑缺血再灌注损伤时 ,神经细胞凋亡起着重要作用 ,而 bcl- 2的表达则对凋亡起抑制作用。     

丁酸钠对HepG2细胞诱导凋亡的作用及机制

目的探讨丁酸钠（sodium butyrate，SB）对HepG2细胞的诱导凋亡作用及与端粒酶活性的关系。方法采用MTT法检测5mmol／L丁酸钠在不同时间对HepG2细胞的增殖抑制作用；流式细胞仪检测丁酸钠作用于HepG2细胞后的凋亡情况，及细胞周期的改变；TRAP-ELISA法检测细胞端粒酶活性。结果丁酸钠能明显抑制HepG2细胞增殖，并且这种抑制作用具有时间依赖性。丁酸钠处理HepG2细胞48h凋亡率明显提高（P〈0．01），S期细胞比例显著下降（P〈0．05），G0／G1期细胞比例显著升高（P〈0．05）。实验组端粒酶活性为1.16±0．12，对照组端粒酶活性为3．58±0．33，实验组端粒酶活性明显降低（P〈0．05）。结论丁酸钠具有诱导HeoG2细胞凋亡的作用，其机制与抑制端粒酶活性有关。     

睾丸复位固定术对大鼠隐睾Bcl-2表达及生精细胞凋亡的影响

目的研究实验性大鼠隐睾复位固定术对Bcl-2表达及生精细胞凋亡的影响。方法24只雄性SD大鼠建立左侧隐睾模型,右侧睾丸切断引带后还纳入阴囊作为假手术组;模型建立7天后实施左侧隐睾复位固定术,隐睾复位固定术前、术后第24天及48天分别处死大鼠8只,采用免疫组织化学检测各组睾丸Bcl-2表达的变化,运用TUNEL法检测各组睾丸生精细胞凋亡。 结果隐睾内生精细胞凋亡增加,复位固定术能降低生精细胞凋亡,增强睾丸内Bcl-2表达。假手术组凋亡指数(4.86%±0.27%)与复位固定术后48天组(5.59%±0.67%）比较差异无显著性（P＞0.05),但均低于复位固定术后24天组(14.48%±0.70%）及复位固定术前的隐睾组(29.45%±1.19%）（P＜0.05);Bcl-2表达在假手术组、复位固定术后24天组及复位固定术后48天组之间比较差异无显著性（P＞0.05),但均明显高于隐睾组（P＜0.05)。结论睾丸复位固定术能通过促进隐睾内Bcl-2表达来抑制生精细胞凋亡。     

视网膜母细胞瘤Bcl-2和Bax基因蛋白质表达

目的 :研究凋亡及凋亡调控基因 Bcl- 2 /Bax和视网膜母细胞瘤 ( Retinoblastoma,RB)的发生、发展及退化的关系。方法 :收集 36例 RB标本 ,对其分别进行 Bcl- 2和 Bax基因的蛋白质免疫组织化学染色。对其表达情况和染色强度进行观察。结果 :1 Bcl- 2在分化型 RB中表达比较好 ;2 Bax在未分化型和分化型中表达都比较好。结论 :1分化型和未分化型 RB中都有 Bcl- 2 /Bax基因蛋白表达 ;2随 RB恶性度的增加 ,Bcl- 2的表达逐渐减弱 ;Bax的表达无明显改变。 3分化型 RB受 Bcl- 2和 Bax基因共同控制 ;未分化型 RB受 Bax基因调控 ,Bcl- 2基因发挥很少的作用。     

雄黄诱导白血病细胞凋亡及其bcl-2蛋白表达的研究

目的检测雄黄诱导白血病细胞凋亡能力,探讨分子机制。方法应用形态学观察细胞凋亡,计算细胞凋亡率,免疫组化方法检测白血病细胞bcl-2蛋白表达。结果雄黄可诱导白血病细胞发生典型的凋亡,同时雄黄可使白血病细胞bcl-2蛋白表达呈时间依赖性下降。结论雄黄通过影响白血病细胞bcl-2蛋白的表达,从而导致白血病细胞发生凋亡,这是其治疗白血病的重要分子机制。