反应停对HL-60细胞马利兰耐药的逆转作用

目的:研究反应停对HL -60细胞马利兰耐药的逆转作用。方法:低剂量马利兰反复刺激HL- 60细胞造成 HL -60马利兰耐药细胞株,联合应用反应停加马利兰观察反应停对马利兰耐药HL- 60细胞的逆转作用,并检测细胞谷 胱甘肽(GSH)、血管内皮生长因子(VEGF)和细胞色素C水平。结果:马利兰对HL 60细胞的IC50为5.44mmol/L,对 马利兰耐药HL 60细胞的IC50>100mmol/L;反应停单独应用对马利兰耐药HL 60细胞生长无影响,但能使马利兰对 马利兰耐药HL -60细胞的IC50降至14.34mmol/L,同时降低细胞GSH、VEGF和升高细胞色素C水平。结论:反应停 对HL- 60细胞马利兰耐药有逆转作用,其机制可能与降低细胞GSH、VEGF和升高细胞色素C水平有关。     

异搏定逆转HL-60/ADR细胞株耐药机理的初步探讨

目的 :深入了解异搏定 (VER)对鬼臼乙叉甙 (VP16)耐药逆转作用的机制。方法 :以多药耐药相关蛋白 (MRP)高表达的耐阿霉素人急性髓性白血病细胞株HL 60 /ADR为研究对象 ,应用DNA电泳、流式细胞仪观测细胞凋亡现象 ,用Westernblotting方法测定凋亡相关蛋白BCL 2表达水平。结果 :在作用 2 0h后 ,5mg·L-1VER可使VP16对HL 60 /ADR诱导凋亡作用增强 2 .8倍 ,并可下调BCL 2蛋白表达水平。结论 :VER对VP16的耐药逆转作用可能与其具有增强VP16诱导HL 60细胞凋亡作用有关 ;BCL 2蛋白可能是这一作用的靶点     

Disulfiram（DS)联合Cu对耐药白血病细胞的作用及与JNK通路关系的研究

目的 白血病细胞对化疗耐药是导致白血病治疗失败的根本原因,为研究disulfiram(DS) 联合Cu(DS/Cu)对耐药白血病细胞株 HL60/ADM的逆转耐药作用及与JNK通路的关系。方法 MTT法检测DS/Cu对HL60/ADM细胞的增殖抑制作用;选取DS/Cu对HL-60/ADM无明显杀伤作用的IC20值作为逆转浓度,MTT法检测IC20浓度DS/Cu联合不同浓度ADM处理24h后的IC50值;流式细胞仪检测阿霉素、DS/Cu单药及DS/Cu与阿霉素联合处理HL-60/ADM 24h凋亡细胞比例的变化;Western blotting 检测c-jun表达的变化。结果 DS/Cu对HL60/ADM细胞具有显著的增殖抑制作用,处理24hIC50为(1.11±0.025)uMMOL/L。HL-60/ADM细胞经IC20浓度（0.63umol/L） DS/Cu处理24h后,ADM的IC50值从(7.69± 1.87)降到(0.48±0 .021)ug/mL,逆转倍数为15.95倍（P=0.003）。0.63umol/L的DS/ Cu、1.25ug/mL的阿霉素单药及上述浓度的DS/Cu联合阿霉素作用HL60/ADM细胞24h后,联合组凋亡细胞比例较DS/Cu或阿霉素单药组均显著增多（P<0.05）。Western blotting显示阿霉素联合DS/Cu作用24h后c-jun表达水平显著增加。结论 DS/Cu在体外对HL60/ADM细胞具有杀伤作用,IC20浓度的DS/Cu能够有效逆转HL60/ADM细胞的耐药,活化JNK通路是其机制之一。     

Disulfiram 联合Cu对耐药白血病细胞的作用及与JNK通路的关系

目的研究disulfiram(DS)联合Cu(DS/Cu)对耐药白血病细胞株HL60/ADM的逆转耐药作用及与JNK通路的关系。方法MTT法检测DS/Cu对HL60/ADM细胞的增殖抑制作用;选取DS/Cu对HL-60/ADM无明显杀伤作用的IC20值作为逆转浓度,MTT法检测IC20浓度DS/Cu联合不同浓度ADM处理24h后的IC50值;流式细胞仪检测阿霉素、DS/Cu单药及DS/Cu与阿霉素联合处理HL-60/ADM24h凋亡细胞比例的变化;Westernblotting检测c-jun表达的变化。结果DS/Cu对HL60/ADM细胞具有显著的增殖抑制作用,处理24hIC50为(1.11±0.025)μmol/L。HL-60/ADM细胞经IC20浓度(0.63μmol/L)DS/Cu处理24h后,ADM的IC50值从(7.69±1.87)降到(0.48±0.021)μg/mL,逆转倍数为15.95倍(P=0.003)。0.63μmol/L的DS/Cu、1.25μg/mL的阿霉素单药及上述浓度的DS/Cu联合阿霉素作用HL60/ADM细胞24h后,联合组凋亡细胞比例较DS/Cu或阿霉素单药组均显著增多(P<...     

干扰素—α与蟾蜍灵、槲皮素、砷剂联合逆转HL—60／ADR耐药的初步研究

目的：探讨用干扰素－α（TNF-α、IFN）分别与蟾蜍灵（Bufalin,Buf),槲皮素（Quercetin,Que)、砷剂（Arsenic Trioxide,As2O3)联合或单独孵育耐药细胞株HL－60／ADR对ADR有无增敏及逆转耐药作用。方法：用MTT法检测IFN与Buf,Que,As2O3孵育后增敏作用。结果：IFN,Buf单独应用无增敏作用,但两者联合有增敏作用。Que,As2O3单独应用有增敏作用,但分别与IFN联用后增敏作用不增强。结论：Que,As2O3能增加HL－60／ADR对阿霉素的敏感性、逆转其耐药,IFN与Buf联合亦能增敏及逆转耐药。     

姜黄素对白血病耐药细胞HL-60/ADR 的抑制及抗肿瘤作用的研究

目的 研究姜黄素对白血病耐药细胞HL60／ADR的抑制作用。并且与抗癌药物阿霉素对HL-60／ADR细胞的体外杀伤作用进行了比较。方法 应用MTT法检测姜黄素对细胞的毒作用及杀伤作用，用荧光分光光度法进行细胞内阿霉素蓄积测定。结果 姜黄素明显抑制白血病耐药细胞HL-60／ADR细胞的生长，24、48和72h的IC50分别为8.94、5．21和3．82μg／mL。姜黄素与阿霉素合用，在HL60／ADR细胞中均有增敏作用。结论 姜黄素可抑制白血病耐药细胞HL-60／ADR细胞的生长，与阿霉素之间无交叉耐药。     

汉防己甲素联合屈洛昔芬逆转K562/A02细胞耐药的研究

目的 :探讨汉防己甲素 (Tet)联合屈洛昔芬 (Drol)对耐药细胞系K5 62 /A0 2的逆转作用。方法 :采用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 )测定柔红霉素 (DNR)的细胞毒性。结果 :1μmol·L-1Tet、5 μmol·L-1Drol均能增加DNR对耐药细胞系K5 62 /A0 2的细胞毒作用 ,半数抑制量 (IC50 )分别为 (7.2 8± 2 .0 6)mg·L-1和 (7.5 8± 3 .44 )mg·L-1,逆转倍数分别为 2 .94和2 .82倍。两药联合应用后作用明显增强 ,IC50 为 (1.66± 0 .41)mg·L-1,逆转倍数达 12 .9倍。结论 :单独应用Tet、Drol可部分逆转K5 62 /A0 2细胞的耐药性 ,两药联用具有明显协同效应。     

人涎腺粘液表皮样癌耐药细胞系的建立及其生物学特性

目的　建立人涎腺粘液表皮样癌细胞系耐药细胞株并观察其生物学特性及耐药性能 .方法　采用浓度递增法长期不间断诱导并经克隆化筛选 ,建立稳定的人涎腺粘液表皮样癌细胞系耐药细胞株 (MEC- 1/ 5 - FU) .应用 MTT法、细胞计数法、软琼脂克隆形成试验、流式细胞术、免疫组化、电镜等方法观察及检测该细胞株的生物学特性、耐药性能及参数 .结果　倒置显微镜观察该耐药细胞和其亲本涎腺粘液表皮样癌细胞系 (MEC- 1)的细胞生长活跃 ,MEC- 1为单层贴壁生长于培养器皿中 ,MEC- 1/ 5 - FU则可见重叠生长 ,两种细胞形态及超微结构未见明显改变 .MEC- 1/ 5 - FU和 MEC- 1细胞的群体倍增时间分别为 2 8.8h和 30 .0 h;克隆形成率分别为4.9%和 1.2 %;细胞周期分布 S期细胞分别为 2 5 .4%和17.1%.MEC- 1/ 5 - FU耐药性能稳定 ,给药剂量已达 1.980μg· L- 1 . 12种化疗药物对 MEC- 1/ 5 - FU和 MEC- 1生长抑制作用的剂量效应参数显示 :耐药细胞诱导作用药物 5 - FU对 MEC- 1/ 5 - FU细胞和 MEC- 1的半抑制浓度 (IC50 )值分别为 6 .310 μg· L- 1和 0 .44 7μg· L- 1 ,耐药倍数为 14.1;药物敏感性试验结果同时可见该耐药细胞株对 VCR,VBL ,PYM,DNR,VP16 ,CODP,PADM等化疗药物的 IC50 较MEC- 1表现不同程度的耐药性 ,     

五味子乙素对MRP介导的肿瘤多药耐药逆转作用的研究

目的探讨五味子乙素（SchB）对表达MRP1的肿瘤耐药细胞株的逆转耐药作用及相关机制。方法噻唑蓝（MTT）法测定不同浓度SchB对柔红霉素（DNR）抑制HL60／ADR生长及同一浓度SchB对不同化疗药物抑制HL60／ADR和HLJ60/MRP细胞生长的影响；流式细胞仪检测SchB作用前后，HL60／ADR和HLJ60/MRP细胞内化疗药物DNR和MRP1特异性底物CFDA积聚的变化。结果4～25μM Sch B作用范围内浓度依赖性下降，逆转倍数显著上升；SchB可有效降低HL60／ADR、HL60／MRP对DNR、长春新碱（VCR）和VP16的IC50，逆转倍数2倍到20倍不等；SchB能够增加DNR和MRP1特异性底物CFDA在细胞内的积聚。结论SchB对同一细胞MDR的逆转与浓度相关，在一定浓度范围内，依浓度增加而增加；SchB可以逆转不同化疗药物对MRP1介导的耐药，其逆转机制与增加化疗药物的积聚能力有关。     

乙酰阿地咪逆转肿瘤细胞多药耐药及其机制的研究

目的 探讨乙酰阿地咪体外逆转多药耐药细胞株人乳腺癌耐阿霉素细胞（MCF-7/Adr）以及人非小细胞肺癌耐阿霉素细胞（A549/Adr）的耐药作用及其作用机理。方法 采用乳酸脱氢酶释放法检测乙酰阿地咪与阿霉素共处理MCF-7、A549、MCF-7/Adr以及A549/Adr细胞的细胞毒作用,以观察增敏和逆转耐药作用;用全功能酶标仪测定乙酰阿地咪与阿霉素共同处理MCF-7/Adr和A549/Adr细胞后细胞内积累阿霉素的荧光强度,并采用Western blot检测细胞膜上多药耐药蛋白P-糖蛋白（P-gp）表达的变化。结果 乙酰阿地咪能降低MCF-7/Adr和A549/Adr对阿霉素的耐药性,10 μmol/L的乙酰阿地咪对MCF-7/Adr和A549/Adr逆转倍数分别为10.8、20.1,其逆转作用与乙酰阿地咪呈剂量依赖关系,且对MCF-7和A549细胞也具有增敏作用;随着乙酰阿地咪浓度的增加,MCF-7/Adr和A549/Adr细胞内积累阿霉素的荧光强度增加率增加,呈剂量依赖性;经乙酰阿地咪处理的MCF-7/Adr和A549/Adr细胞P-gp蛋白表达水平降低,且降低水平随乙酰阿地咪浓度增加而更明显。结论 乙酰阿地咪可显著逆转肿瘤细胞的多药耐药性,其机理与抑制多药耐药蛋白P-gp的表达有关,提示乙酰阿地咪具有潜在的克服肿瘤化疗中多药耐药现象的应用价值。