使用巢式聚合酶链反应检测脑脊液快速诊断单纯疱疹性脑炎

由于单纯疱疹性脑炎的特异性抗病毒疗法的有效性,使得对单纯疱疹病毒(HSV)的快速诊断显得尤为重要,同时也需要一种实用、安全、适用于小量标本检测的方法。本文介绍一种用两对“巢式”引物扩增脑脊液(CSF)中HSV DNA的聚合酶链反应(PCR)法。用该法检测43例确诊为单纯疱疹性脑炎     

单纯疱疹性脑炎

本文报道单纯疱疹病毒(H.S.V)可引起两种神经病,一种是无菌性脑膜炎(与H.S.V.Ⅱ型有关),另一种是严重的脑炎(与H.S.V.Ⅰ型有     

用聚合酶链反应技术检测血清中HBV－DNA

本文报道了以聚合酶链反应技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的方法。将血清在０．１ＭＮａＯＨ中３７℃孵育６０分钟使ＨＢＶ－ＤＮＡ从病毒中释放出来。再经琼脂糖检测２７ＤｂＰ的ＨＢＶ－ＤＮＡ片段。本方法检测ＨＢＶ的最低检测限为１０￣（－２）ｐｇ。用建立的方法检测５０例已被证实或怀疑为慢性乙型肝炎感染的病人血清。在１６例ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ为阳性的病人中，斑点杂交和ＰＣＲ分析均为阳性；１９例ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｂ为阳性的病人中，斑点杂交法检出５例，ＰＣＲ法检出１４例；在１５例抗－ＨＢｃ病人中，杂交法检出４例，ＰＣＲ法检出１０例阳性。结果表明ＰＣＲ法比杂交法敏感。     

多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应快速检出含漱液中的乙型流感病毒

目的 建立特异敏感的快速检测含漱液中的流感病毒的分子生物学方法。方法 用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增甲1、甲3和乙型流感病毒HA基因的HA1片段,得到各病毒与特异性大小的扩增产物的对应关系。用同样的方法扩增含漱液中流感病毒的HA基因的HA1片段。根据这对应关系检测含漱液中的流感病毒。结果 以流感病毒的HA基因为模板设计的三对引物,用多重逆转聚合酶链反应能特异性地扩增出942bp、1117bp和751bp的核酸片段,它们分别和甲1、甲3和乙型流感病毒有稳定对应关系。用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增含漱液中流感病毒HA基因的HA1片段,根据扩增产物的大小检出含漱液中的乙型流感疾病。结论 多重逆转聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应能特异敏感地检出含漱液中的乙型流感病毒。     

用聚合酶链反应检测医院内乙肝病毒 DNA 污染

用聚合酶链反应检测医院内乙肝病毒ＤＮＡ污染王健１孙琳２笔者采用聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅ－ａｃｔｉｏｎ；ＰＣＲ）法检测医务人员手、操作台面及消毒后物品表面乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的污染。１材料和方法１．１随机选取临床部分科室３０...     

聚合酶链反应在HSV潜伏感染研究中的应用

潜伏感染的形成、持续和激活机制尚不清楚.为此,作者采用改进后的聚合酶链反应(PCR)检测了实验动物和人体各组织中的HSV-1 DNA和RNA序列.改进后的PCR技术包括(1)用套式引物进一步提高PCR     

用聚合酶链反应技术在猫胃内检出幽门螺杆菌

用聚合酶链反应技术在猫胃内检出幽门螺杆菌杨海涛，周殿元，徐智民，王继德，李岱宗，宋敏迄今对幽门螺杆菌（ＨＰ）的传染源和传播途径所知甚少。１９８８年澳大利亚学者Ｌｅｅ等成功地从猫胃内分离出猫胃螺杆菌（ＨＦ）。ＨＦ与ＨＰ不同，菌体较长，有６～１０个螺旋和...     

单纯疱疹脑炎的早期诊断

由于无特异性抗病毒药物治疗,单纯疱疹脑炎(HSE)的病死率可高达70％。对照研究表明,如及时诊断后给予无环鸟苷治疗可明显降低病死率及发病率。早期由于治疗HSE的抗病毒药物有许多副反应,因此认为治疗前进行特异性诊断很重要。但用无环鸟苷治疗的效果,又使人们认为治疗前不再需进行特异性诊断。     

应用巢式聚合酶链反应在唾液中检出幽门螺杆菌

用互补于幽门螺杆菌(HP)尿素酶A基因的两对引物行巢式聚合酶链反应(N-PCR),检测1株HP标准菌株、20株HP临床分离株均阳性,而12种肠道菌均阴性,特异性100%。该法敏感性好可检测0.1fg细菌DNA.57例因上消化道症状行胃镜检查者,取粘膜分别做细菌培养、尿素酶试验、组织学检查和N-PCR检测,其中27例在行胃镜前收集其唾液标本做N-PCR。19例胃粘膜HP阳性者中有11例唾液中检出HP,而8例胃粘膜HP阴性者中有1例唾液N-PCR阳性。作者认为口腔中确实存在HP,该菌可能通过口—口途径传播。     

荧光定量聚合酶链反应检测单纯疱疹病毒

目的　验证单纯疱疹病毒 (HSV )临床简单、实用、可靠的检测方法 ,以利早期诊断、早期治疗。方法　荧光定量聚合酶反应检测单纯疱疹病毒并对阳性病例进行抗病毒治疗。结果　 10 0例可疑标本检出 HSV 阳性 4 6份 ;阳性基因拷贝数范围在 (45 0～ 5 )× 10 6。结论　荧光定量聚合酶链反应检测单纯疱疹病毒 ,能较好的解决假阳性污染 ,并实现准确定量 ;对单纯疱疹病毒感染的早期诊断、治疗方案选择 ,提高疗效有较大指导意义     

聚合酶链反应技术检测血液中布鲁氏菌DNA研究

将PCR技术应用于血液中布鲁氏菌DNA检测。1．材料与方法：①根据Bp26基因片段设计的引物序列为：Bp26-f：5-ACCATGAACACTCGTGCTAGCAA-3’；Bp26-r：5＇-TCATTACTTGATTTCAAAAACGACA-3＇。②菌株：布鲁氏菌S2及M16菌株和大肠埃希菌DH5a菌株。[第一段]     

单纯疱疹病毒性脑炎的早期诊断

单纯疱疹病毒性脑炎（HSE）,是由单纯疱疹病毒（HSV）引起的急性中枢神经系统感染。是病毒性脑炎中最常见的一种非流行性中枢神经系统感染性疾病,其临床表现复杂,可见于任何年龄,发病无季节性,占所有脑炎的5％-20％,占病毒性脑炎的20％-68％;未获早期诊断和有效治疗者,死亡率高达60％-80％,且存活患者常遗留不同程度神经系统功能缺损,早诊断早治疗死亡率可降至19％-28％。故早期诊断尤为重要。以下介绍一些有关早期诊断的要点,与广大同仁探讨。     

利用聚合酶链反应快速检测结核杆菌

利用聚合酶链反应快速检测结核杆菌黄士猷，黄锋庆，杨平目前，聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在结核菌检测方面已得到了应用，它具有快速，特异性高，敏感性强等优点。现仅就我们利用ＰＣＲ检测患者标本中结核杆菌的研究报告于下：－、材料与方法１．材料：（１）标本来源：...     

单纯疱疹病毒性脑炎的CT诊断

单纯疱疹病毒性脑炎（HSV）是由单纯疱疹病毒引起的中枢神经系统较常见的病毒感染性疾病，病情多凶险，是散发的急性致死性脑炎的常见原因，早期诊断与治疗是降低病死率的关键。CT是诊断病毒性脑炎患者的重要辅助检查方法，在显示病变以及了解病变累及的部位、范围、程度等方面可为临床提供极有价值的诊断信息。为了提高临床对该病早期诊断的准确性，有必要进一步加深对其CT表现的认识。     

聚合酶链反应检测水痘带状疱疹病毒DNA

水痘带状疱疹病毒（VZV）是引起人类水痘、带状疱疹的病原体。前几年我们曾建立了VZV蚀斑减少中和试验，VZV抗体ELISA及IFA等检测方法。本文使用PCR检测VZV—DNA，取得了较好的结果，现报告如下：     

非淋菌性尿道炎患者聚合酶链反应检测单纯疱疹病毒

近年来,非淋菌性尿道炎(NGU)的发病率不断上升,在欧美国家居性传播疾病之首,2001年我国NGU的报告病例数已超过淋病,居8种报告性病的首位.NGU的病原体复杂多样[1],包括沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)、单纯疱疹病毒(HSV)等,为明确HSV感染与NGU发病的关系,我们进行了NGU患者中HSV感染情况的调查,现报告如下.     

聚合酶链反应快速诊断结核性脑膜炎

结核性脑膜炎(TBM)是最严重的肺外结核病,发展中国家的结核病例中此病的发生率为7～12％。由于脑脊液中(CSF)结核茵很少,涂片不易检出,培养又需时6～8周,因此早期诊断常为推测性。本文报道用聚合酶链反应(PCR)检测CSF标本的结果,并与常规细菌学及酶联免疫吸附试验(ELISA)等检测结果进行比较。病例组为34例疑诊为TBM的患者,对照组为51例非TBM患者。TBM临床诊断标准为:发热、头痛及颈项强直持续2周以上。支持证据通过下列检查获得:(1)CSF中淋巴细胞>0.02×10~9/L,蛋白>     

聚合酶链反应银染色检测病原体DNA

聚合酶链反应(PCR)技术自问世以来,以惊人的速度应用于生物学和医学研究的各个领域,以其灵敏度高、特异性强、简便、快速广泛用于临床检验。PCR扩增后,通常进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)或琼脂糖凝胶电泳分离DNA,溴化乙锭(EB)染色,或用同位素标记显示DNA。同位素标记费用高,操作繁杂,受同位素半衰期限制,临床实验室不易开展,而EB染色,需立     

聚合酶链反应扩增干血斑中乙肝病毒DNA的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对乙肝病毒特异性基因片段进行扩增，４０个循环可检测出１０个病毒颗粒，５０个循环可检出１个病毒颗粒。用本法同时检测８０例干血斑和血清标本，其阳性率分别为７１．２５％和７３．２２％，两者无显著性差异，而干血斑的采集，贮存和转运较后者简便安全，且需血量很少，尤适于大量人群的普查和筛选。