Aurora A激酶抑制剂Alisertib诱导结直肠癌细胞自噬的作用及与p53表达间的关系

目的 探讨Alisertib(ALS)对人结直肠癌Caco-2和HT29细胞的诱导自噬的作用及与p53表达状态间的关系.方法 本研究采用人结直肠癌Caco-2和HT29细胞进行实验.实验组用0.1、1、5μmol/L ALS而对照组用同浓度的DMSO处理细胞.流式细胞术检测细胞的自噬率,Wester Blotting法...     

人结直肠癌肿瘤干样细胞生物学特性及其与细胞自噬关系

目的:探讨人结直肠癌肿瘤干样细胞的生物特性及其与自噬发生的关系。方法:采用无血清培养法从人结直肠癌HCT116细胞中获取HCT116球细胞(结直肠癌肿瘤干样细胞);分别用克隆集落形成实验、成球实验、Transwell实验检测HCT116细胞与HCT116球细胞的增殖能力、自我更新能力及侵袭和迁移能力,用免疫荧光法检测两种细胞中自噬标志物LC3B的荧光表达,并用RT-PCR和Western blot分别检测两种细胞中LC3B及自噬相关基因ATG5、ATG7的mRNA与蛋白表达。结果:HCT116球细胞克隆形成能力、新成球能力以及侵袭与迁移能力均较HCT116细胞明显增强(均P0.05)。HCT116球细胞中LC3B的荧光表达强度较HCT116细胞明显增高(P0.05);HCT116球细胞中LC3B、ATG5、ATG7的mRNA和蛋白表达量较HCT116细胞均显明显升高(均P0.05)。结论:结直肠癌肿瘤干样细胞较结直肠癌细胞具有更强的自我更新和体外增殖能力,以及更强的侵袭和迁移能力,该生物学特性可能与其高自噬活性密切相关。     

铁死亡在结直肠癌中的作用与研究进展

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一, 在中国的发病率和死亡率呈上升趋势, 给国人健康带来极大威胁。铁死亡是一种以铁依赖的过氧化脂质聚集的新型细胞死亡模式, 广泛存在于各种类型的肿瘤细胞中。铁死亡相关基因在预测结直肠癌患者预后中展现出了极大的潜力。同时, 结直肠癌对一线化疗药耐药性逐渐增加, 而越来越多证据表明铁死亡参与其中。因此, 本文将对近年铁死亡在结直肠癌领域的研究进展进行综述, 为改善结直肠癌化疗药耐药性以及相关的药物研发提供新思路。     

N-乙酰转移酶10参与结直肠癌铁死亡抵抗

目的探究N-乙酰转移酶10(NAT10)对Erastin诱导结直肠癌(CRC)细胞铁死亡敏感性的影响及其机制。方法使用公共数据库明确NAT10在CRC中的表达及其与Erastin利用度的关系;应用荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)探索Erastin对NAT10 mRNA表达的影响;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测NAT10抑制剂Remodelin联合Erastin对CRC细胞SW620活力的影响。构建NAT10稳转敲低细胞株, 蛋白质印迹法(Western blot)验证敲减效率成功后, 进行RNA-Seq和ac4C-RNA-Seq的测序, 分析与对照组比较, NAT10敲低组出现ac4C修饰水平降低和mRNA表达水平下降的基因, 再和铁死亡抑制因子集取交集, 最后筛选出NAT10调控铁死亡的潜在下游靶基因。RT-qPCR或Western blot检测对照组和NAT10敲低组或Remodelin处理细胞中的转录调节因子核蛋白1(NUPR1)表达水平, 验证NAT10对NUPR1的调控作用。两组间比较采取t检验。结果 NAT10表达越高, Erastin的药物利用度越低(R=-0...     

铁死亡在肾结石形成中的研究进展

肾结石的发生是炎症、脂质代谢紊乱、氧化应激、细胞自噬等一系列病理反应导致的结果。越来越多的研究结果显示铁死亡在肾结石的发病中发挥着至关重要的作用,抑制铁死亡可有效抑制肾结石的产生。草酸钙诱导的自噬和铁死亡降低了细胞抗氧化的能力,导致脂质过氧化增强和肾小管上皮细胞损伤,最终引起肾脏晶体的形成和肾结石的发生。     

自噬在顺铂诱导的食管癌细胞死亡中的作用

目的 观察自噬在食管癌EC9706细胞顺铂处理过程中的表达,探讨其表达与细胞死亡的关系.方法 对数生长期EC9706细胞与顺铂共同作用0、3、6、12、24 h后,Western blot法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达;自噬特异性阻断剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)分别在顺铂前1 h、后1 h加入共同作用24 h,用CCK-8法和流式细胞术检测细胞死亡率和凋亡率的变化.结果 顺铂处理细胞0、3、6、12、24 h后LC3相对灰度值为0.33±0.04、1.13±0.18、1.92±0.25、0.89±0.12、0.58±0.08;在顺铂加入前、后1 h加入3-MA细胞的抑制率分别为(33.58±2.45)%、(21.37±1.21)%,细胞凋亡率分别为(18.30±0.92)%、(12.80±0.61)%.结论 顺铂可以诱导食管癌EC9706细胞自噬,在顺铂给药前期,自噬对细胞有保护作用,可以延迟凋亡的发生;而在顺铂给药后期,自噬则可能作为一种细胞死亡程序,进一步促进细胞死亡.     

结直肠癌组织中生长抑素受体亚型表达与Ki67、bcl-2、p53的关系

目的 探讨生长抑素受体各亚型（SSTR1～SSTR5）在结直肠癌组织中的表达分别与癌细胞增殖、bcl-2、p53表达之间的关系。方法 免疫组织化学染色方法检测127例结直肠癌组织中SSTR1-SSTR5、Ki67、bcl-2、p53的表达，分析各SSTR亚型表达与癌细胞增殖，凋亡的关系。结果 SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4、SSTR5阳性表达率为：64．6％、36．2％、18．9％、18．9％、38．6％，SSTR2、SSTR3阳性表达的癌细胞Ki67增殖指数明显低于其阴性表达（P〈0．05）。在SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR5阳性表达组中bcl-2阳性表达率明显低于其阴性表达组（P〈0．05），5种亚型的表达均与p53表达无关。结论 SSTR2和SSTR3可抑制癌细胞增殖，SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR5通过下调bcl-2表达促进癌细胞凋亡，它们可能在结直肠癌发展过程发挥重要作用，应选择SSTR2或SSTR3亲和力强的生长抑素类似物（SSTA）治疗结直肠癌。     

Bcl-2在细胞自噬中的作用

细胞凋亡是一种生理性细胞死亡机制,它是由基因控制的细胞自主的有序的死亡过程.细胞自噬是一种自我消化过程,通过包裹细胞内成分,再与溶酶体溶合,进而降解细胞成分.细胞自噬与凋亡之间存在复杂联系,在一定条件下自噬是细胞对应激适应性反应从而避免发生死亡,而在其他环境中,自噬是细胞死亡的替代途径.Bel-2家族成员在细胞凋亡与自噬过程中发挥着交叉性作用.本综述主要总结Bcl-2家族成员在细胞自噬中研究进展.     

MicroRNA与细胞自噬调控

细胞自噬是进化过程中高度保守的物质降解再循环过程,是细胞将异常蛋白质、受损细胞器转运至溶酶体降解再利用的活动。自噬过程受到精密的调控。自噬功能障碍与神经退行性疾病、心血管疾病、肿瘤、骨代谢疾病、衰老等的发生有关。MicroRNA是一类对基因进行转录后修饰的非编码单链小RNA。越来越多的证据表明,MicroRNA可以通过调控自噬相关基因及其调节因子来影响自噬水平,是治疗自噬功能障碍所引发疾病的潜在靶点。本文对有关MicroRNA参与自噬调控的最新动态进行综述。     

环状RNA TADA2A在结直肠癌组织的表达及其对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:观察环状RNA TADA2A在结直肠癌组织中的表达及其对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测58对结直肠癌组织及癌旁组织中circTADA2A的相对表达量,分析其与患者临床病理特征间的关系。构建circTADA2A过表达质粒及对照质粒并分别转染结直肠癌细胞株(人结...     

自噬与前列腺癌

自噬作用被认为具有高度复杂性及环境依赖性,在有些肿瘤中表现为肿瘤抑制和促进相对立两方面影响,比如乳腺癌和前列腺癌。本文综述了自噬对前列腺癌的发生、发展及治疗的最新研究进展。重点突出自噬调节在雄激素剥夺期间的影响,讨论了雄激素对前列腺癌细胞自噬作用所产生的调节效应。通过对一些研究的报道结果进行评价、分析,我们认为:自噬抑制并结合抗雄激素治疗对于前列腺癌是非常有前景的新型治疗方法。     

缺氧复氧对H9C2心肌细胞凋亡、自噬和焦亡的影响

目的:探讨缺氧复氧(hypoxia reoxygenation,HR)对H9C2心肌细胞凋亡、自噬和焦亡3种细胞死亡方式的影响。方法:将培养的H9C2心肌细胞按随机数字表法分为正常对照组(Ctrl组)和HR组,其中HR组H9C2心肌细胞在缺氧培养箱中进行氧糖剥夺8h,然后复氧12 h。通过检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量及四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide,MTT]比色法检测细胞活力来评估细胞损伤情况(每组6孔),Western blot检测(每组9孔)细胞凋亡相关蛋白[天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate-specific proteinase,caspase)-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia 2,Bcl-2)、Bcl相关蛋白(bcl-associate x protein,Bax)]、自噬相关蛋白[(轻链蛋白3(light chain 3,LC3)Ⅱ/Ⅰ、p62、Beclin-1、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of ra-pamycin,p-mTOR)]、焦亡相关蛋白[Nod样受体蛋白-3(nod-like receptor pyrin domain3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apopto-sis associated speck-like protein,ASC)、caspase-1p20、IL-1β、IL-18]。通过免疫荧光染色进一步评估细胞凋亡、自噬及焦亡情况(每组6孔)。结果:与Ctrl组比较,HR组H9C2心肌细胞HR后细胞活力降低(P<0.05),LDH释放增加(P<0.05),活化的cas-pase-3及Bax的表达上调(P<0.05),Bcl-2表达下降(P<0.05),TUNEL染色显示HR后细胞凋亡显著增加(P<0.05),提示HR后细胞凋亡及损伤增加;而p-mTOR、p62均表达增加(P<0.05),但LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1蛋白降低(P<0.05),LC3Ⅱ/Ⅰ免疫荧光染色显示HR后细胞内的自噬小体增加(P<0.05),表明HR后H9C2心肌细胞自噬受到明显抑制;同时炎性小体NLRP3、ASC、cas-pase-1p20蛋白均显著上调(P<0.05),活化的炎症细胞因子IL-1β、IL-18表达增加(P<0.05),提示HR后NLRP3炎性小体活化,细胞焦亡增加。结论:H9C2心肌细胞在HR损伤过程中自噬被抑制,细胞焦亡及凋亡增加。     

自噬对铁死亡的调控作用及其在肾损伤中的研究进展

自噬是一种通过降解受损的蛋白质、细胞器和胞内病原体等来维持体内平衡的保守生物过程, 它既可以促进细胞生存, 也可以加速细胞死亡。铁死亡是2012年发现的以脂质过氧化和细胞膜损伤为特征的新型调节性细胞死亡方式。在过去的几年里, 越来越多的研究表明自噬和铁死亡之间存在复杂的相互作用。肾疾病发展过程中会受多种细胞死亡途径的调节, 自噬和铁死亡在其中发挥重要作用。然而, 自噬和铁死亡在肾损伤中的潜在联系尚未被认识。本文就自噬对铁死亡的调控作用及其在肾损伤中的可能联系进行阐述, 为急慢性肾损伤的研究提供新的理论支持。     

细胞自噬在肾脏疾病中的研究进展

细胞自噬是指细胞向溶酶体运送胞内过多、衰老或异常的蛋白质和细胞器,并进行降解的过程.细胞自噬主要有3种类型:巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬.自噬体的形成可以大体归纳为4步:起始、成核、延伸、包裹.全过程均不可缺少自噬相关蛋白Atg的参与.正常状态下细胞自噬维持在低水平状态,当某些应激情况发生时,细胞自噬会大量增加.参与调节细胞自噬的分子机制非常复杂.近年来大量研究提示,细胞自噬在肾脏生理病理上具有重要作用,具有肾保护及损伤的“双刃剑”效用.本文就细胞自噬在肾脏疾病中的研究进展作一综述.     

结直肠癌手术死亡相关因素分析

目的:研究旨在探讨结直肠癌手术死亡相关的临床病理影响因素.方法:回顾中山大学肿瘤防治中心1964年1月至2004年12月经手术治疗的4498例结直肠癌患者的临床病理资料,应用单因素和多因素Logistic回归分析手术死亡的相关影响因素.结果:全组手术死亡者共62例,手术死亡率为1.38%,主要死亡原因为多器官功能衰竭、中毒性休克、心血管疾病、急性肾功能衰竭、吻合口漏等.单因素分析显示,性别、术前基础疾病、术前合并症、腹水、手术年代、手术性质、Dukes分期、术后并发症等为影响手术死亡的因素,而年龄、肿瘤部位、组织类型、病理分级与手术死亡无关.多因素分析表明,术前基础疾病、术前合并症、腹水、手术年代、手术性质、Dukes分期、术后并发症是结直肠癌手术死亡的独立影响因素.结论:术前基础疾病、术前合并症、腹水、手术年代、手术性质、Dukes分期、术后并发症是结直肠癌手术死亡的独立影响因素.     

细胞自噬与胰腺癌关系的研究进展

自噬是真核细胞对胞内受损的大分子蛋白质及细胞器进行自我降解的过程,被称作II型程序化细胞死亡。近来的研究发现细胞自噬在肿瘤的发生和发展中起着重要的作用,本文对细胞自噬与胰腺癌之间的关系作一概述。     

细胞自噬在肿瘤中的作用

自噬为一种细胞的自我消耗过程,其具有潜在的抗肿瘤生物学活性,亦与肿瘤耐药有关。该文从自噬的调节机制入手,综述自噬参与肿瘤发生的机制,自噬在肿瘤治疗中的作用及应用,以期为自噬在临床上的应用提供依据。     

Th细胞因子在结直肠癌组织中的表达

目的 检测结直肠癌组织中Th类细胞因子的表达,探讨其与癌细胞转移的关系.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例不同分期结直肠痛患者癌组织中Th1类细胞因子[白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素(IFN)]和Th2类细胞因子(IL-10)的表达,分析其表达与临床分期的关系.结果 Th1类细胞因子(IL-2、γ-IFN)在癌组织的表达量(2.22±0.90、3.26±1.15)较周围正常组织(3.07±1.67,4.77±1.52)低,而Th2类细胞因子(IL-10)在癌组织表达量(6.06±2.04)较周围正常组织(4.88±1.87)高,差异均具有统计学意义(P<0.05).Duke's分期C-D期患者癌组织中Th2细胞类细胞因子(IL-10)的表达量(5.44±1.68)较A～B期患者癌组织中的表达量(4.08±1.73)高,而Th1类细胞因子(IL-2、γ-IFN)在Duke's分期C-D期患者的癌组织的表达量(2.70±1.30、2.73±0.95)较A～B期患者癌组织中的表达(3.75±1.46、4.39±1.99)低,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 结直肠癌组织中,Th1细胞表达向Th2细胞方向漂移,肿瘤组织局部呈免疫抑制状态并可能与肿瘤侵袭转移相关.