金银花提取物体外抗甲型流感病毒FM1株的研究

目的观察金银花提取物体外抑制甲型流感病毒FM1株的作用。方法采用血凝试验方法,测定不同浓度金银花提取物体外和鸡胚内抑制流感病毒效价,分析金银花提取物对病毒增殖的影响。结果与病毒对照组比较,金银花提取物组血凝效价降低,其抑制作用时间可从1h持续到24h,其对病毒的抑制作用随着药物浓度的降低而逐渐减弱;金银花提取物在100、50、25mg/mL时,对感染流感病毒鸡胚具有预防和保护治疗作用(P<0.001),而在100mg/mL时的预防作用明显优于阳性对照病毒唑组(P<0.05)。结论金银花提取物可有效抑制甲型流感病毒FM1株。     

牛蒡子提取物体外抗甲型流感病毒FM1株的实验研究

目的：观察牛蒡子提取物体外抑制甲型流感病毒FM1株作用。方法：采用血凝试验方法，测定不同浓度牛蒡子提取物体外和鸡胚内抑制流感病毒效价，分析牛蒡子提取物对病毒增殖的影响。结果：与病毒对照组比较，牛蒡子提取物组血凝效价降低，其抑制作用时间可从1h可持续到24h，其对病毒的抑制作用随着药物浓度的降低而逐渐减弱；牛蒡子提取物在100，50及25mg／mL时，对感染流感病毒鸡胚具有预防和保护治疗作用（P〈0．001），且在100mg／mL时的预防作用明显优于阳性对照病毒唑组（P〈0．05）。结论：牛蒡子提取物可有效抑制甲型流感病毒FM1株。     

银翘散在不同煎煮时间下体外抑制流感病毒及对小鼠巨噬细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的:观察并比较银翘散在不同煎煮时间下体外抑制甲型流感病毒FM1株的作用,及其含药血清对FM1刺激小鼠巨噬细胞Ana-1株Toll样受体及其下游信号转导通路的影响,探讨银翘散的抗病毒作用及其最佳煎煮时间。方法:采用血凝试验观察银翘散在不同煎煮时间、不同浓度下体外抑制流感病毒及对流感病毒感染鸡胚的预防和治疗作用;用FM1刺激巨噬细胞Ana-1,同时给予不同煎煮时间的银翘散含药血清进行干预,培养24 h后提取细胞RNA,应用实时定量PCR方法测定TLR3、TLR4及其下游信号转导通路My D88、TRAF-6、TRAM和TRIF m RNA的表达。结果:与病毒对照组比较,银翘散在不同煎煮时间、不同浓度下均可直接抑制FM1株的活性,其抑制作用时间从1 h持续到24 h,其中以3 min高、中浓度组抑制作用最强;银翘散各组对流感病毒感染鸡胚均有一定的预防和保护作用,其中以3 min高、中浓度组和6 min高浓度组的作用最强(P0.05)。银翘散在不同煎煮时间下的含药血清均能显著降低FM1诱导的巨噬细胞TLR3、TLR4、My D88、TRAF-6、TRAM和TRIF的高表达(P0.05),尤以3 min高、中、低浓度组和6 min高浓度组最为显著(P0.05)。结论:银翘散在不同煎煮时间、不同浓度下均可有效抑制甲型流感病毒,尤以3~6 min高浓度组的作用最强;不同煎煮时间下的银翘散均能阻断TLR3和TLR4的高表达,并能阻断TLR4信号转导的My D88依赖和非依赖途径,尤以3 min和6 min组最显著,由此推断银翘散的最佳煎煮时间可能为煮沸后3~6 min。     

连花清瘟胶囊体外抗甲型流感病毒的实验研究

目的研究连花清瘟胶囊体外抗甲型流感病毒的作用。方法以利巴韦林作阳性对照药物,采用存留细胞结晶紫染色法测定连花清瘟胶囊不同给药方式对甲型人流感病毒H3N2的体外抑制作用及其时效关系。结果连花清瘟胶囊具有多环节抗甲型人流感病毒的作用:综合抑制作用、对病毒吸附的预防作用、抑制病毒吸附后的复制增殖作用以及直接杀伤病毒的作用,这4种作用的半数有效浓度(EC50)分别为0.042,0.031,0.051,0.050g/mL,以预防给药方式抗流感病毒的作用最强。随药物作用时间的延长,连花清瘟胶囊的低浓度抗病毒有效率呈减少趋势,在高浓度时(≥0.031g/mL)其抗病毒能力基本不变。同时连花清瘟胶囊可明显降低病毒的感染性。结论连花清瘟胶囊具有明显的体外抗甲型人流感病毒作用。     

连翘体外、体内抗甲型流感病毒的实验研究

目的:观察连翘体外、体内抗甲型流感病毒的作用。方法:采用血凝实验方法,将不同浓度流感病毒接种鸡胚尿囊腔制造甲型流感病毒感染鸡胚模型,观察不同浓度连翘提取物对造模后鸡胚的预防和治疗作用。采用鼻腔接种甲型流感病毒FM1株诱导幼龄昆明种小鼠肺炎,将不同浓度连翘提取物以灌胃给药途径治疗小鼠流感病毒性肺炎,观察各组小鼠一般状态、肺指数、肺组织形态学及对IV RNA表达的影响。结果:中药连翘可预防流感病毒在鸡胚内增殖,其预防作用随药物浓度降低而减弱,但各浓度之间差异无统计学意义(P0.05)。中药连翘对感染IV鸡胚具有治疗作用,其治疗作用随浓度降低而减弱,但各浓度间差异无统计学意义(P0.05)。中药连翘可改善流感病毒肺炎小鼠一般状态,可减轻流感病毒肺炎小鼠肺组织病变,并抑制流感病毒在小鼠肺组织中复制。结论:中药连翘提取物具有体外抗流感病毒作用及对流感病毒肺炎小鼠的治疗作用。     

欧意清热解毒软胶囊体外抗甲型H1N1流感病毒作用

目的 观察欧意清热解毒软胶囊抗甲型H1N1流感病毒作用,寻求有效的抗甲型H1N1流感病毒作用的中药方剂,为临床治疗甲型H1N1流感病毒感染提供理论依据.方法 观察甲型H1N1流感病毒感染MDCK细胞后引起的细胞病变效应(CPE),并用MTT法检细胞活性,采用治疗指数(TI)作为药物体外抗病毒效果的评价指标.以磷酸奥司他韦胶囊(达菲)作为阳性对照药物,从药物对病毒入侵细胞的阻断作用、直接灭活作用及增殖抑制作用3种方式检测欧意清热解毒软胶囊抗甲型H1N1流感病毒的效果.结果 清热解毒软胶囊可以明显抑制甲型H1N1流感病毒引起的细胞病变效应(CPE),对甲型H1N1流感病毒入侵细胞的阻断作用、直接灭活作用及增殖抑制作用的TI分别为(15.5±0.71),(0.55±0.07),(6.4±1.27);达菲3种作用方式的TI分别为(0.4±0.14),(1.88±0.29),(4.6±0.15).结论 与达菲组比较,清热解毒软胶囊体外具有明显的阻断甲型H1N1流感病毒入侵细胞作用(P＜0.01),其抗流感病毒主要机制可能是阻断病毒入侵细胞,对细胞具有保护作用.进一步的效果需要体内实验证实.     

鱼腥草颗粒体外抗甲型流感病毒作用的药效学实验

目的：通过实验观察鱼腥草颗粒的体外抗甲型流感病毒作用。方法：采用鸡胚接种和血凝试验测定病毒效价。结果：药物的直接灭活作用（A组）和药物抑制病毒在鸡胚内的增殖作用（B组）的血凝滴度（GMT）分别为13．65和19．42（P〈0．01）。结论：鱼腥草颗粒对甲型流感病毒有直接灭活作用,并且能抑制病毒在鸡胚内的增殖。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对甲型流感病毒致宿主细胞氧化应激损伤的影响

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在体外对甲型流感病毒感染后氧化应激的影响,初步探讨EGCG抗流感病毒的发生机制。方法:以1×104个细胞密度接种96孔板,在体外用MTT法检测不同浓度EGCG对狗肾传代细胞(MDCK)的毒性浓度;病毒感染28 h后,用CPE观察法、血凝法、实时定量荧光PCR法评价EGCG对甲型流感病毒的抑制作用;并通过共聚焦显微技术和流式细胞术,探寻EGCG对甲型流感病毒感染后氧化应激的影响。结果:EGCG在体外能有效抑制甲型流感病毒的复制,病毒抑制率与感染后加药时间正相关(P<0.05);与病毒对照相比,20 mg.L-1EGCG处理后流感病毒感染的MDCK细胞中活性氧的水平下降54%,继而有效抑制流感病毒引起的细胞凋亡。结论:EGCG主要抑制流感病毒的早期复制,可通过调控氧化应激,抑制流感病毒所致MDCK细胞凋亡。     

银翘散对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用

目的:研究银翘散对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用及作用机制。方法:将实验小鼠分为空白对照组、模型组、病毒唑组及银翘散大、中、小剂量组,分别观察实验小鼠行为状态、死亡率、肺指数及肺指数抑制百分率。结果:银翘散各剂量组有明显改善流感病毒FM1感染小鼠行为状态的作用;银翘散中、小剂量组与模型组比较,死亡率显著降低,表明银翘散对流感病毒FM1感染小鼠具有保护作用;银翘散大、中剂量组显著降低流感病毒FM1感染小鼠模型的肺指数,说明银翘散能显著抑制病毒在体内增殖,减轻肺部炎性病变。结论:银翘散中、小剂量组对流感病毒FM1感染小鼠具有保护作用,其作用机制可能与银翘散能显著抑制病毒在体内的增殖、减轻肺部炎性病变有关。     

痰咳净不同剂型体外抗甲型流感病毒的实验研究

目的:探讨痰咳净不同剂型(溶液剂、粉雾剂、散剂)体外抗甲型流感病毒作用,以及剂型与作用的关系.方法:以利巴韦林作阳性对照药物,采用存留细胞结晶紫染色法测定痰咳净提取液(溶液剂)不同给药方式对甲型人流感病毒H3N2的体外抑制作用,确定具体作用方式;并以有效的给药方式对比研究痰咳净不同剂型的抗病毒作用;再运用血清药效学方法比较痰咳净不同剂型的大鼠血清样本的体外抗病毒作用.结果:痰咳净溶液剂有一定的抗甲型人流感病毒的作用,包括综合抑制作用和抑制病毒吸附后的复制增殖作用,其最高抗病毒有效率为利巴韦林注射液的66.40%.溶液剂、粉雾剂和散剂在质量浓度为0.062 g/mL时的抗流感病毒的有效率分别为43.50%、41.50%和37.36%.血清药效学研究结果表明药物溶出较快的剂型药物吸收较多,血清抗病毒药效较好.结论:痰咳净不同剂型均有一定的体外抗甲型人流感病毒作用,粉雾剂效果优于散剂.     

5种南药的19种提取物体外抗甲型流感病毒活性的实验研究

目的探讨南药提取物体外抗甲型流感病毒的活性。方法采用细胞病变效应法(CPE法)检测19种南药提取物在MDCK细胞中的抗甲型流感病毒的活性,并通过不同的加药方式初步探索具有活性的提取物抗甲型流感病毒活性的机理。结果 在19种提取物中,直杆桉果实水提物和川楝子醇提取物具有抗甲型流感病毒的活性,初步作用机制研究表明直杆桉果实水提物对甲型流感病毒具有直接灭活的作用,而川楝子提取物则具有明显的预防效果。总体上直杆桉果实提取物的抗甲型流感病毒的活性更显著。结论 直杆桉果实水提取物和川楝子醇提取物具有抗甲型流感病毒的活性,且直杆桉果实水提物抗H1N1的活性更加显著。     

柴银感冒颗粒抗病毒作用的研究

目的:观察柴银感冒颗粒(柴胡、金银花、大青叶、板蓝根、陈皮、甘草)(无糖型)的体内、外抗病毒作用。方法:以甲型、乙型流感病毒、副流感病毒1型、柯萨奇B族病毒5型、呼吸道合胞病毒等分别接种MDCK细胞,观察记录药物对病毒致细胞病变(CPE)的影响,计算半数抑制浓度(IC50)和选择指数(SI);采用流感病毒性肺炎小鼠模型,观察药物的保护作用,计算生命延长率、死亡保护率等,并计数肺内病毒增殖量。结果:柴银感冒颗粒对甲型、乙型流感病毒、HVJ-1、CoxB5、RSV均有直接抑制作用,其IC50分别为457.0、676.1、347.2、537.0、562.4μg/mL,SI为9.8、6.6、12.8、8.3、7.9;对病毒感染小鼠有明显的保护作用,可延长生存期,降低死亡率,并抑制肺内流感病毒的增殖。结论:柴银感冒颗粒具有直接抗病毒作用。     

云南特色中药臭灵丹体外抗甲型H1N1 流感病毒的实验研究

臭灵丹Laggera pterodonta,一种民间常用的治疗感冒的具有民俗特色的中药。为了检测臭灵丹不同溶剂萃取物对甲型H₁N₁流感病毒在体外的中和杀伤作用和增殖抑制作用,本研究采用中和抑制实验和增殖抑制实验,用狗肾传代MDCK细胞培养法观察臭灵丹萃取物抑制甲型H₁N₁流感病毒的致细胞病变作用(CPE),观察2种实验中臭灵丹萃取物在体外对甲型H₁N₁流感病毒血凝效价的影响,同时采用Real time RT-PCR定量检测流感病毒的拷贝数,比较臭灵丹不同溶剂萃取物对甲型H₁N₁流感病毒在体外增殖的影响。结果显示,臭灵丹乙酸乙酯萃取物及石油醚萃取物作用72 h后,中和实验组H₁N₁病毒血凝效价下降了8倍,而增殖抑制组,H₁N₁病毒血凝效价也分别下降了2倍和4倍;Real time RT-PCR的检测结果表明,臭灵丹乙酸乙酯萃取物中和H₁N₁病毒的抑制率为72.5%,而增殖抑制组的抑制率为25.3%,石油醚萃取物中和H₁N₁病毒的抑制率为60.2%,增殖抑制组为81.4%。由此可以得出,臭灵丹乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物在体外对甲型H₁N₁流感病毒有明显的中和作用及直接的抑制增殖作用。     

KGTR颗粒体外抗流感病毒作用

目的:观察KGTR颗粒体外抗流感病毒作用,为开发中药新药提供实验基础。方法:以5μg/mL病毒唑作为阳性对照药物,体外抗甲型和乙型流感病毒作用,观察药物及药物血清对流感病毒致细胞病变效应的抑制作用。结果:KGTR颗粒的最大无细胞毒性浓度为10mg/mL,抗甲型流感病毒的有效浓度为0.5mg/mL,抗乙型流感病毒的有效浓度为2mg/mL,可以抑制流感病毒在细胞中的增殖;药物血清显示良好的抗甲型流感病毒作用,而抗乙型流感病毒作用较弱。结论:KGTR颗粒具有明显的体外抗流感病毒作用,而且抗甲型流感病毒较抗乙型流感病毒效果更好。     

麻杏石甘汤和银翘散体外抗流感病毒药理特点的比较研究

目的比较两种经典方麻杏石甘汤(MXSGT)和银翘散(YQS)抗流感病毒药理特点。方法采用细胞病变法(CPE)和MTT法检测麻杏石甘汤和银翘散体外抑制流感病毒的作用;q PCR法和ELISA法检测病毒感染后诱导细胞因子及趋化因子分泌。结果麻杏石甘汤体外对不同亚型流感病毒(甲型流感H1N1、H6N2、H9N2等亚型及乙型流感)的半数有效浓度(IC50)在0.1~1 mg·mL~(-1)之间,银翘散体外未显示抑制流感病毒的作用。与病毒对照组比较,麻杏石甘汤(3 mg·mL~(-1))和银翘散(0.5 mg·mL~(-1))体外均抑制流感病毒诱导细胞产生细胞因子及趋化因子的表达,包括IL-6、IP-10、TNF-α、IL-8、CCL5(P0.05),其中麻杏石甘汤对IP-10、IL-6的下调作用更显著(P0.05)。结论对两个经典治疗流感的复方比较发现,麻杏石甘汤兼具直接抗病毒和抑制病毒介导炎症的作用,其作用机制有待后续实验进一步验证。银翘散仅显示了抗炎药效。     

防感煎剂含药血清体外抑制甲1型流感病毒作用的研究

目的：研究防感煎剂对甲1型流感病毒的体外抑制作用,并试图揭示该药抑制甲型流感病毒的作用机理。方法：采用血清药理学的实验方法,观测防感煎剂和H1N1型流感病毒之间在不同时间点作用于MDCK细胞所发生的CPE,MTT法定量检测存活细胞数量,以及血凝效价检测。结果：含药血清与病毒同时作用及预防给药方式时病毒抑制率明显高于治疗给药方式,而又以同时作用的抑制率最高,各含药血清组抑制作用高于正常血清组,高剂量组抑制作用强于低、中剂量组,稍低于达菲对照组血清。3种给药方式中同时作用和预防方式药物组的血凝效价低于治疗方式,而又以同时作用的最低。结论：防感煎剂对甲1型流感病毒感染有显著的预防与直接作用,作用机理可能主要是通过直接杀灭病毒、以及抑制病毒吸附及膜融合作用来阻止流感病毒进入宿主体内增殖复制而产生的。     

桂枝挥发油抗甲型流感病毒作用

目的:观察桂枝挥发油及其主要成分桂皮醛体外对甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)增殖的影响及对该流感病毒株感染小鼠的治疗作用。方法:MTT法检测受试药物对狗肾传代细胞(MDCK)的半数中毒浓度(TC50)及最大无毒浓度(TC0);血凝法测定甲型流感病毒(H1N1)对MDCK细胞的感染性;MTT法和细胞病变法(CPE)测定两种药物体外抑制流感病毒增殖的有效浓度(IC50)和治疗指数(TI)。计算肺指数及HE染色观察药物对流感病毒(H1N1)感染小鼠的治疗作用。结果:桂枝挥发油和桂皮醛对MDCK细胞的TC50分别为5.38×10-3mg/ml和5.49×10-3mg/ml,TC0均为2.5×10-3mg/ml。桂枝挥发油和桂皮醛能抑制流感病毒在MDCK细胞内的增殖,其IC50分别为5.80×10-5mg/ml与5.31×10-5mg/ml,TI分别为92.82和103.35。桂枝挥发油0.174mg/kg和桂皮醛0.132mg/kg连续灌胃5d,明显降低病毒感染小鼠的肺指数,抑制率分别为26.7%和27.4%,并对病理组织形态有改善作用。结论:桂枝挥发油与桂皮醛体外明显抑制甲型流感病毒(H1N1)在MDCK细胞中的增殖,并对流感病毒株感染小鼠有较好的治疗作用。表明桂枝挥发油及桂皮醛具有抗甲型流感病毒作用,桂皮醛是桂枝挥发油抗病毒效应的主要有效成分之一。     

肺经草抗甲型H1N1流感有效部位的研究

目的:筛选肺经草抗甲型H1N1流感病毒的有效部位。方法:应用鸡胚培养法研究肺经草3个提取部位对流感病毒增殖的抑制作用。结果:肺经草的正丁醇提取部位具有明显的抑制流感病毒增殖的作用,乙酸乙酯提取部位有一定的作用。结论:肺经草抗甲型H1N1流感病毒的有效部位为正丁醇提取部位和乙酸乙酯提取部位。     

菘蓝有效成分抗流感病毒作用的实验研究

目的研究菘蓝有效成分在体内外抗甲型流感病毒的作用。方法体外用MTT法检测菘蓝有效成分对传代狗肾细胞(MDCK)的毒性浓度,观察菘蓝有效成分抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用(CPE),MTT法检测菘蓝有效成分对流感病毒的抑制率;建立在体流感病毒感染小鼠肺炎模型,通过观察小鼠肺病变程度指标,测定肺组织内流感病毒血凝滴度判定菘蓝有效成分对小鼠肺炎的治疗作用。结果菘蓝有效成分在体外主要抑制甲型流感病毒在细胞内的复制,其对病毒的半数抑制率浓度为64μg.mL-1,治疗指数达28.88;口服菘蓝有效成分能明显减轻小鼠肺组织病变程度,对肺组织内病毒的增殖有明显抑制作用。结论菘蓝有效成分具有较好的抗甲型流感病毒的作用,且呈剂量效应关系。     

骆驼蓬生物总碱体外抗病毒作用的实验研究

目的：研究骆驼蓬生物总碱体外抗病毒作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法：通过细胞病变效应．研究药物对单纯疱疹病毒1型、2型,柯萨奇病毒B1、B3,流感病毒甲型、乙型的抑制作用;采用四甲基偶氮唑盐（MTF）法及calcusyn软件计算药物对不同细胞株的毒性和抗疱疹病毒1型和2型的IC50;采用CPE抑制实验分别研究药物对疱疹病毒1型和2型的直接杀灭作用以及不同给药时间对病每感染的影响。结果：骆驼蓬生物总碱对流感病毒甲,型有一定抑制,对流感病毒乙型无抑制作用,对柯萨奇病毒B1、B3有抑制,对单纯疤疹病毒1型和2型抑制作用明显;MTT法研究证明其抗疱疹病毒作用具有量效关系．其对疱疹病毒无直接杀灭作用．对病毒在宿主细胞内复制的早期过程有抑制作用。结论：骆驼蓬生物总碱具有抗病毒作用．可抑制HSV在宿主细胞内复制的早期阶段。