Flt-1、Flk-1在人年轻恒牙和成熟恒牙牙髓表达的组织学研究

目的探讨人恒牙牙髓组织不同发育阶段血管内皮生长因子受体1（VEGFR-1/Flt-1）、血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2/Flk-1）表达的组织学特征及其在人恒牙牙根发育成熟中的可能作用。方法将因正畸治疗需要而拔除的人健康前磨牙（无畸形中央尖、牙隐裂、过度磨耗等）分为根尖开放的年轻恒牙和根尖闭合的成熟恒牙,每组各15例,采用免疫组织化学方法检测Flt-1、Flk-1蛋白的表达与定位并进行图像采集,应用Image-ProPlus 6.0和SPSS 13.0对年轻恒牙和成熟恒牙牙髓组织Flt-1、Flk-1的阳性表达进行图像和统计学分析。结果 Flt-1、Flk-1在牙髓组织血管内皮细胞免疫反应阳性;年轻恒牙牙髓VEGF、Flk-1阳性表达的平均光密度值（OD）高于成熟恒牙（P〈0.05）,而Flt-1的表达低于成熟恒牙（P〈0.05）;Flt-1、Flk-1呈显著负相关性表达（P〈0.01）。结论年轻恒牙和成熟恒牙牙髓组织Flt-1、Flk-1呈现不同特征表达,提示Flt-1、Flk-1参与了牙根的发育过程,成熟恒牙牙髓防御修复能力下降可能与Flk-1表达不足有关。     

重度颅脑损伤引发肺组织VEGF及其受体改变的研究

【目的】研究重度颅脑损伤引发肺组织血管内皮生长因子VEGF及其受体的改变。【方法】复制Marmarou’s脑损伤大鼠模型,采用免疫组化和RT-PCR方法分别检测手术对照组和各损伤组肺组织VEGF及其受体Flk-1、Flt-1蛋白和mRNA水平。【结果】VEGF和Flk-1蛋白和mRNA表达水平随损伤时间的延长而加强：VEGF蛋白表达水平在损伤后8、12、24和48 h显著升高（P〈0.01）,mRNA表达水平在损伤后24和48 h显著升高（P〈0.01）;Flk-1蛋白表达水平在损伤后24和48 h显著升高（P〈0.01）,mRNA水平损伤后48 h明显升高（P〈0.05）;Flt-1蛋白和mRNA表达水平随损伤时间的延长而降低,蛋白表达水平在损伤后24和48 h显著降低（P〈0.01）,mRNA水平在损伤后8、12、24和48 h组显著降低（P〈0.01）。【结论】VEGF及其受体在神经源性肺水肿的发生发展过程中发挥重要作用。     

VEGF及其受体Flt-1和Flk-1在人体黑色素瘤中的表达

目的：研究70例人体黑色素瘤中线形程序性坏死（LPPCN）、血管生成拟态（VM）阳性病例中的LPPCN、VM周围肿瘤细胞血管内皮生长因子（VEGF）及其受体VEGFR1（Flt-1）和VEGFR2（Flk-1）的表达情况,探讨它们在肿瘤血管生成中的作用以及与临床预后的关系。方法：应用HE染色法判断70例人黑色素瘤中的LPPCN阳性病例及阴性病例,CD31/PAS双染法判断70例人黑色素瘤中VM阳性病例及阴性病例。应用免疫组织化学二步法,检测VEGF、Flt-1和Flk-1在LPPCN及VM周围肿瘤细胞1～3层、4～6层及7～9层中的表达,对LPPCN周边VEGF阳性组与阴性组进行生存分析。结果：LPPCN阳性病例共38例,VM阳性病例共33例。VEGF及Flk-1在LPPCN周边肿瘤细胞中1～3层的表达强于4～6层和7～9层中的表达（P〈0.01）,而Flt-1在LPPCN周围肿瘤细胞1～3层、4～6层和7～9层中的表达差异比较均无统计学意义（P〉0.05）,VEGF、Flt-1和Flk-1在VM周围的表达差异比较均无统计学意义（P〉0.05）;Log-rank检验法比较显示在LPPCN周边VEGF阳性组患者的生存时间比LPPCN周边VEGF阴性组短,差异有统计学意义（P〈0.05）。LPPCN周边VEGF阳性组中,VM的阳性率高于LPPCN周边VEGF阴性组中VM的阳性率,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：VEGF及其受体Flk-1在黑色素瘤组织中VM形成的早期可能起一定的作用。VEGF及其受体Flk-1的表达与黑色素瘤患者的临床预后有一定的关系。     

血管内皮生长因子在新生鼠胫骨生长板软骨细胞中的表达

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）在鼠生长板软骨细胞增殖、分化和矿化过程中的自分泌作用。方法：新生鼠（1～2d）10只．切取干骺部软骨组织，采用免疫组织化学方法（5只）和RT—PCR方法（5只），检测VEGF及其受体Flt-1和KDR/Flk-1在胫骨生长板中的表达。结果：免疫组织化学染色VEGF、Fit-1和KDR／Flk-1在生长板的上肥大区、下肥大区和矿化区中的软骨细胞表达强阳性，在增殖区少数软骨细胞中呈阳性表达，在静止区软骨细胞中表达阴性。RT—PCR检测的5只鼠中除1只不表达Flt-1外，VEGF（251bp）、Flt-1（272bp）和KDR/Flk-1（252bp）在软骨组织中均清晰表达。结论：VEGF及受体Flt-1和KDR／Flk-1在生长板软骨中的表达具有高度一致性，并且随着软骨细胞的分化成熟表达逐渐增强。提示VEGF在生长板软骨细胞的增殖、分化和矿化过程中，可以自分泌作用方式起重要调节作用。     

血管内皮生长因子在人类成骨细胞样细胞中的表达

应用RT-PCR方法检测血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1和KDR/Flk-1 mRNA在SaOS-2和MG63细胞中的表达,探讨VEGF在人类成骨细胞样细胞中的自分泌作用方式.     

正畸治疗的年轻恒牙和成熟恒牙的牙髓组织中VEGF水平比较

目的：探讨正畸治疗的年轻恒牙和成熟恒牙的牙髓组织中血管内皮生长因子（VEGF）水平及其临床意义。方法收集2010年6月-2013年10月在新疆医科大学第二附院口腔科行正畸治疗拔除的无龋健康的第一前磨牙56颗,包括年轻恒牙30颗和成熟恒牙26颗,采用常规免疫组化链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（srteptvadin-bitin complex,SABC）法比较年轻恒牙和成熟恒牙牙髓标本中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达。结果年轻恒牙牙髓成纤维细胞中的 VEGF呈强阳性表达,向冠部和根部表达逐渐减弱;成熟恒牙牙髓成纤维细胞中的 VEGF呈阳性表达,向冠部和根部表达逐渐减弱。与年轻恒牙比,成熟恒牙牙髓成纤维细胞中的 VEGF表达较弱,在冠部和根部的表达较弱。结论 VEGF在人年轻恒牙和成熟恒牙牙髓组织中表达有差异,VEGF 参与恒牙牙根的发育与成熟。     

急性损伤对大鼠脊髓血管内皮生长因子受体表达的影响

目的 探讨急性损伤对大鼠脊髓血管内皮生长因子(VEGF)两个受体(Flt-1、Flk-1)表达的影响.方法 采用改良Allen's重量打击法大鼠急性脊髓损伤模型,用免疫组织化学方法观察急性损伤后大鼠脊髓VEGF受体Flt-1、Flk-1表达的动态变化.结果 Flt-1、Flk-1在大鼠脊髓损伤后12 h表达上调,24 ...     

胰高血糖素样肽1对内皮祖细胞 增殖分化能力的影响及其机制

目的：探讨胰高血糖素样肽1（GLP-1）对体外培养的人外周血内皮祖细胞（EPCs）增殖分化能力的影响及可能的作用机制。方法：采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞,培养7 d 后,收集贴壁细胞。贴壁细胞用不含FBS的M199培养液培养24 h后,分成4组：对照组和GLP-1各浓度组(1,10,20 nmol/L GLP-1共3组),分别用含0.2%BSA,1,10,20 nmol/L GLP-1的M199培养液培养72 h。倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,MTT法检测EPCs的增殖能力;RT-PCR技术检测EPCs中KDR, Flt-1, VE-cadherin, 内皮型一氧化氮合酶（eNOS） mRNA的表达, ELISA法测定细胞上清液内皮细胞生长因子（VEGF）浓度,SP法检测细胞VEGF蛋白表达。同时用100 ng/mL VEGF mAb对10 nmol/L GLP-1培养的EPCs进行干预。结果：与对照组比较,GLP-1各浓度组EPCs增殖明显（P＜0.05或P＜0.01）,EPCs中KDR, Flt-1, VE-cadherin, eNOS mRNA表达增强, 细胞上清液中VEGF浓度显著升高、细胞VEGF蛋白表达增强（P＜0.05 或 P＜0.01）。VEGF mAb（100 ng/mL）下调GLP-1培养的EPCs增殖能力,细胞KDR, Flt-1, VE-cadherin, eNOS mRNA表达下降。结论：GLP-1对体外培养的人外周血EPCs的增殖和分化能力具有一定的促进作用,上调VEGF自分泌是其可能的作用机制之一。     

血管内皮生长因子及其双受体系统在鼻咽癌中的表达

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)及其双受体系统串珠素、Flt-1在鼻咽癌(NPC)中的表达,探讨它们与NPC的增生、浸润及转移的关系。方法应用反转录-聚合酶链反应方法检测26例NPC及相应癌旁组织和10例正常鼻咽黏膜组织中VEGF、串珠素和Flt-1 mRNA的表达。结果 VEGF、串珠素和Flt-1 mRNA在NPC组织中的表达高于在癌旁组织和正常鼻咽黏膜组织中的表达(P<0.01)。VEGF、串珠素和Flt-1 mRNA在癌旁组织和正常鼻咽黏膜组织中的表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。VEGF、Flt-1和串珠素mRNA在有淋巴结转移的NPC组织和无淋巴结转移NPC组织中的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 VEGF及其双受体系统串珠素和Flt-1与NPC的生长、浸润有密切关系。     

子宫腺肌病在位、异位内膜组织中VEGF及Flk1的表达

目的:探讨子宫腺肌病患者在位、异位内膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)及受体1(Flk-1)的表达情况及其相关性。方法:采用SP法检测98例子宫腺肌病患者在位、异位内膜及44例正常体检者(对照组)子宫内膜组织中的VEGF及Flk-1的表达。结果:子宫腺肌病异位内膜、在位内膜中VEGF、Flk-1蛋白阳性表达与对照组差异均有统计学意义(P均<0.01);VEGF、Flk-1蛋白阳性表达在异位、在位内膜中及各增生期与分泌期比较差异均有统计学意义(P均<0.01);VEGF及Flk-1阳性表达在异位、在位内膜中均有相关性(P<0.05)。结论:子宫腺肌病患者在位、异位子宫内膜组织中VEGF及Flk-1高表达,二者可能在子宫腺肌病的发生、发展中发挥重要作用。     

Effect of qi-tonifying and stasis-eliminating therapy (益气活血法) on expression of vascular endothelial growth factor and its receptors Flt-1, Flk-1 in the brain of intracerebral hemorrhagic rats

Objective： To investigate the effects and mechanism of qi-tonifying and stasiseliminating （QTSE） therapy on the expression of vascular endothelial growth factor （VEGF） and its receptors Fit-1 and FIk-1 in the brains of intracerebral hemorrhagic （model） rats. Methods： One hundred and eighty Sprague-Dawley rats were randomly divided into six groups： the normal group （n=5）, the sham-operative （SO） group （n=35）, the model group （n=35）, the QTSE group （n=35）, the QT group （n=35） and the SE group （n=35）. All the rats except those in the normal group and SO group were established into an intracerebral hemorrhage（ICH） model by intracerebral injection of collagenase type Ⅶ and the latter three were orally administered with Buyang Huanwu Decoction （补阳还五汤, a classical recipe for QTSE） or with some of its components for qi-tonification and for stasis-elimination, respectively. To the other three groups, normal saline solutions were given instead. Behavioral tests were carried out in the animals randomly chosen from each group on days 1, 2, 4, 7, 14, 21 and 28 after modeling. The expressions of VEGF, FIk-1 and Fit-1 were determined by immunohistochemistry and the number of vascular segments with positive expression in the injured brain area of the rats was calculated. Results： From day 7 onwards, the asymmetric forelimb use rate in the QTSE group recovered more significantly than that in the other model groups. In the model group, the expressions of VEGF, FIk-1 and Fit-1 appeared on day 1 and reached a peak on day 21, then weakened gradually. In the QTSE group, as compared with the other model groups, a higher level of VEGF expression was shown from day 7 （P〈0.01） and a higher level of Fit-1 expression was shown from the 7th day to the 21st day （P〈0.01）. Conclusion： QTSE therapy can up-regulate the expressions of VEGF and its receptors （FIk-1 and Fit-l） and improve the recovery of kinetic function in the ICH rats, which may be correlated with its action in modulating vascular regeneration to promote the reconstruction of microvascular networks in the damaged areas.     

VEGF在新生鼠胫骨上端成骨细胞中自分泌作用的研究

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在鼠成骨细胞中的自分泌作用.方法:切取新生鼠胫骨上端组织,采用免疫组织化学染色方法,检测VEGF及其受体Flt-1和KDR/Flk-1在新生鼠胫骨上端成骨细胞中蛋白质的表达.结果:免疫组织化学染色证实新生鼠胫骨上端中的成骨细胞同时表达VEGF及其受体Flt-1和KDE/Flk-1.结论:作为一种重要的血管性因子,VEGF的自分泌作用方式在成骨细胞的分化中起重要作用.     

VEGF在类风湿关节炎病人骨小梁成骨细胞中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在类风湿关节炎(RA)病人成骨细胞中的表达及作用机制。方法切取RA病人和外伤对照组病人股骨粗隆部松质骨块,采用免疫组织化学染色方法检测VEGF及其受体Flt-1和Flk-1在骨小梁成骨细胞中的蛋白表达。结果RA病人骨质疏松明显,骨小梁成骨细胞数目减少。RA组和对照组骨小梁成骨细胞同时表达VEGF及其受体Flt-1和Flk-1,但RA组表达明显减弱。结论血管源性因子VEGF以自分泌作用方式调节生理和病理状态下成人成骨细胞的表达,RA病人骨质疏松与VEGF作用减弱密切相关。     

非黑色素性皮肤癌组织中血管内皮生长因子及其受体1和受体2的表达

目的:检测皮肤鳞状细胞癌(SCC)和基底细胞癌(BCC)组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体1(Flt-1)、受体2(KDR)的表达。方法:应用免疫组化SP法检测26例皮肤SCC、18例BCC组织中VEGF、Flt-1和KDR的表达。取10例正常皮肤组织标本作对照。结果:皮肤SCC、BCC和正常皮肤组织中VEGF的表达水平分别为(129.05±9.93)、(119.40±9.37)及(85.25±12.98),Flt-1的表达水平分别为(130.48±12.02)、(116.90±13.45)及(82.19±9.15),KDR的表达水平分别为(136.60±6.67)、(120.95±6.33)和(85.43±9.33),3组间VEGF、Flt-1和KDR蛋白的表达差异均有统计学意义(F分别为83.418、78.137和169.125,P均<0.001)。皮肤SCC组织中VEGF与Flt-1(r=0.773,P<0.001)、VEGF与KDR(r=0.676,P<0.001)、Flt-1与KDR(r=0.718,P<0.001)的表达均呈正相关。结论:VEGF及其受体的过表达可能与非黑色素性皮肤癌的发生有关。     

促红细胞生成素对大鼠即刻再植牙牙髓血运重建的促进作用

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）在大鼠即刻再植牙牙髓愈合过程中的表达,阐明促红细胞生成素（EPO）对大鼠即刻再植牙牙髓血运重建的作用及机制。方法：80只4周龄健康雄性Wistar大鼠随机分为未拔牙组、阴性对照（生理盐水）组、阳性药对照（庆大霉素）组和EPO组,每组20只,各组大鼠拔除的牙齿在其相对应的溶液中浸泡4min后再植,于再植术后3、7、14、21和28 d分别处死4只大鼠,制作术区标本,行HE染色观察各组大鼠在不同时间段内再植牙牙髓血运重建的情况,免疫组织化学染色观察不同时间段各组大鼠再植牙牙体组织中VEGF蛋白表达水平。结果：HE染色,与未拔牙组比较,生理盐水组大鼠再植牙牙髓组织中炎症较重,牙根发育情况较差,修复性牙本质和牙骨质沉积较少,根尖孔较宽;庆大霉素组和EPO组大鼠再植牙牙髓组织中炎症较轻,牙根发育情况相对较好,修复性牙本质和牙骨质沉积较多,根尖孔缩窄。免疫组织化学染色,与未拔牙组比较,3、7和14 d时生理盐水组、庆大霉素组和EPO组大鼠再植牙牙体组织中VEGF呈强阳性表达,随着时间的延长,VEGF阳性表达强度逐渐减弱;VEGF阳性表达区的平均吸光度（AOD）值,EPO组 > 庆大霉素组 > 生理盐水组 > 未拔牙组。与未拔牙组比较,3、7、14和21 d时生理盐水组、庆大霉素组和EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,而在28 d时各组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;与生理盐水组比较,3、7、14和21d时庆大霉素组和EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,而在28 d时庆大霉素组和EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）;与庆大霉素组比较,各时间点EPO组大鼠牙体组织中VEGF蛋白表达水平差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：EPO通过上调VEGF表达,诱导牙髓组织中血管新生,为再植牙提供了丰富的血管床,从而发挥牙髓的防御修复潜能,促进了再植牙的牙髓愈合。     

依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注后 VEGF及Flk-1表达的影响

目的 探讨依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注后VEGF及Flk-1表达的影响。方法 将脑缺血再灌注模型制备成功的雄性SD大鼠64只随机分成模型组、依达拉奉组,每组32只。试验后第2天,模型组予尾静脉注射生理盐水10ml/kg,依达拉奉组予依达拉奉3mg/kg,每日1次。在试验后第3、7、14、28天,两组各处死8只大鼠,大鼠处死前进行神经功能缺损评分。RT-PCR法检测纹状体VEGF及其受体Flk-1mRNA表达水平,ELISA检测纹状体VEGF蛋白水平。结果 实验后第7、14、28天,依达拉奉组神经功能缺失评分较模型组均显著降低,VEGF mRNA相对表达量、Flk-1mRNA相对表达量、VEGF蛋白相对表达量较模型组均显著升高(均P＜0.05)。依达拉奉组第7天神经功能缺失评分低于第3天,第14天低于第7天(均P＜0.05)。依达拉奉组第7天VEGF mRNA相对表达量、Flk-1mRNA相对表达量、VEGF蛋白相对表达量高于第3天(均P＜0.05)。结论 依达拉奉可改善脑缺血再灌注大鼠的运动神经功能,作用机制可能与促使纹状体VEGF及Flk-1表达,保护脑神经有关。     

血管内皮生长因子及其受体Flt-1在乳腺癌中的表达及意义

目的　试图揭示血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (Flt 1)在乳腺癌组织中的表达规律 ,探讨其与血管生成和肿瘤浸润、转移等生物学行为的关系。方法　应用原位杂交和免疫组织化学技术 ,检测 4 8例乳腺癌组织中VEGF和Flt 1的mRNA和蛋白表达特性。结果　乳腺癌细胞高表达VEGFmRNA和蛋白 ,阳性率分别为 75 %、70 8% ,而血管内皮细胞几乎不表达 ;血管内皮细胞主要表达受体Flt 1mRNA和蛋白 ,阳性血管数分别为 2 6个 / 0 72mm2 ± 12个 / 0 72mm2 、2 4个 / 0 72mm2 ± 12个 / 0 72mm2 ,而少数癌细胞有少量表达 ;VEGF和Flt 1高表达组血管密度明显高于低表达组 ;VEGF和Flt 1表达与组织学分级和淋巴结转移密切相关。结论　VEGF以旁分泌途径促进乳腺癌血管形成 ,并参与肿瘤浸润和淋巴道转移过程 ,检测VEGF和Flt 1表达可做为判定乳腺癌血管生成、恶性度以及浸润转移等生物学行为的可靠指标。