渴络欣胶囊对缺氧诱导视网膜血管新生的抑制作用

目的:观察渴络欣胶囊对缺氧诱导视网膜血管新生的抑制作用。方法:采用人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)开展体外研究,将低、中、高质量浓度渴络欣(5,10,20 mg·L-1)预处理细胞24 h后以150μmol·L-1CoCl2诱导,24 h后ELISA检测细胞培养上清中血管内皮生长因子(VEGF)浓度,蛋白免疫印迹检测缺氧诱导因子1-α(HIF1-α)蛋白水平,RT-qPCR检测VEGF,HIF1-αmRNA表达变化。体内实验采用60只C57BL/6J新生乳鼠随机分为6组:正常组,缺氧诱导视网膜病变(OIR)模型组,多贝斯组和渴络欣低、中、高剂量组。正常组饲养于正常空气环境,其余各组幼鼠于7日龄时置于氧体积分数为75%±2%的高氧环境中连续生活5 d,然后放回正常空气环境中饲养以建立OIR模型,多贝斯组每日ig 0.5 g·kg-1多贝斯胶囊内容物,渴络欣低、中、高剂量组分别每日ig 0.5,1.0,2.0 g·kg-1渴络欣胶囊内容物,给药5 d后麻醉处死小鼠,摘除右眼球制备视网膜组织切片,HE染色后计数突破内界膜内皮细胞核数,左眼视网膜铺片ADP酶染色观察视网膜血管形态学改变。结果:体外结果显示,CoCl2模型组VEGF分泌量、mRNA表达量和HIF1-α蛋白水平均显著高于空白组(P<0.001),而中、高浓度渴络欣处理后均显著低于模型组(P<0.01或P<0.05);体内结果显示,渴络欣不同剂量组与模型组比较视网膜无灌注区明显减少,血管迂曲、扩张和变形程度减轻,视网膜血管累计吸光度(A)和突破内界膜内皮细胞核数均显著低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:渴络欣胶囊可抑制缺氧诱导视网膜VEGF表达及血管新生。     

凉血活血药物对氧诱导小鼠视网膜新生血管影响的实验研究

目的探讨凉血活血药物对视网膜新生血管的干预及其作用机理。方法通过氧诱导C57BL/6幼鼠的方法建立视网膜新生血管的动物模型。随机分为正常对照组、模型对照组、凉血活血药物高、低剂量组。计数视网膜切片中突破血管内界膜的内皮细胞核数;免疫组织化学检测HIF-1和NF-кB在视网膜中的表达情况。结果氧诱导后,幼鼠血管内皮细胞核数目明显增加,HIF-1、NF-кB明显上调,与正常对照组比,差异有统计学意义(P<0.05),提示视网膜新生血管动物模型成功;各治疗组血管内皮细胞核数目减少、HIF-1、NF-кB下调,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。提示凉血活血药物对视网膜新生血管有抑制作用。结论凉血活血药物可抑制视网膜新生血管的形成,机理与通过下调与血管生成相关的NF-кB、HIF-1有关。     

穴位注射川芎嗪抑制氧诱导小鼠视网膜新生血管形成的实验研究

目的探讨穴位注射川芎嗪抑制氧诱导小鼠视网膜新生血管形成的作用。方法将60只C57BL/6J小鼠的健康幼鼠(出生后7 d),随机分为正常对照组、模型对照组(A组)、穴位注射组(B组)、全身用药组(C组),每组15只。除正常对照组外,其余3组于75%高氧环境中饲养5 d,建立氧诱导的视网膜新生血管病变幼鼠模型。B组、C组分别予穴位注射和鼠尾静脉注射川芎嗪稀释液,A组予鼠尾静脉注射等体积的生理盐水。采用双抗体夹心法测定血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)含量,光学显微镜下观察视网膜新生血管内皮细胞核数目。结果 1.血清VEGF含量:正常对照组(9.28±1.26)μg/L、B组(13.35±2.41)μg/L、C组(12.37±3.11)μg/L,均低于A组(18.31±4.33)μg/L,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);B组与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2.视网膜新生血管内皮细胞核数:A、B、C组均可见视网膜新生血管芽,发生率为100%。正常对照组及A、B、C组的新生血管细胞核数分别为6.56±3.41、130.83±41.63、68.39±32.07、59.39+21.78。A组明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);B组、C组均低于A组,差异有统计学意义(P<0.05);B组与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论川芎嗪能减少血管增生性视网膜病变小鼠的血清VEGF含量,抑制氧诱导小鼠视网膜新生血管形成。川芎嗪穴位注射可有效作用于视网膜新生血管病变。     

活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察中药复方活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达的影响。探讨中医药治疗糖尿病视网膜病变(DR)的机制。方法:采用链脲佐菌素(65mg/kg)一次性腹腔注射的方法,建立糖尿病大鼠模型,将78只SD大鼠随机分为模型组和活血解毒方高剂量组(15.4g/kg)、中剂量组(7.70g/kg)、低剂量组(3.85g/kg)及导升明组(0.167g/kg),每组13只,另设13只正常对照组。造模成功后,灌胃给药,24周后处死动物。检测血清和视网膜全层中VEGF的表达;采用Real-time PCR法检测视网膜VEGF mRNA的表达。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清中VEGF的含量增加(P<0.01),与模型组相比,各用药组VEGF的含量均下降,但差异无统计学意义。与正常对照组相比,模型组的视网膜全层VEGF表达增加(P<0.01),各用药组与模型组相比显著降低(P<0.01)。与正常对照组相比,模型组的VEGF mRNA表达升高,而各用药组的表达比模型组降低(P<0.01)。结论:活血解毒方可能通过降低糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达,延缓DR的发生和发展。     

高氧暴露早产鼠视网膜HIF-1α、PEDF及VEGF的表达

目的：缺氧诱导因子1α、色素上皮衍生因子和血管内皮生长因子在高氧暴露早产鼠视网膜的表达规律。方法：标准SD大鼠的3日龄早产鼠随机分为高氧组、高氧返回组和空气组,免疫组织化学法检测各组早产鼠视网膜HIF-1和VEGF表达水平。结果：1）高氧组HIF-1α、VEGF比空气组表达增加（P〈0．05）;高氧返回组HIF-1α、VEGF表达进一步增强,显著高于高氧组（p〈0．05）,突破内界膜的内皮细胞核数亦明显多于高氧组（p〈0．001）;空气组有PEDF阳性表达。高氧组表达明显增强,均高于空气组和高氧返回组（P〈0．05）。2）HIF-1α的表达与VEGF、新生血管数的表达成正相关（r分别为0．56和0．64,P〈均0．01）,PEDF的表达与VEGF的表达、新生血管数呈负相关（r分别为-0．43和-0．58,P分别〈均0．05,0．01）。结论高氧暴露后HIF-1α和VEGF的高表达是早产儿视网膜病血管异常增生的重要原因,VEGF和PEDF的表达失衡可能与早产儿视网膜病的发生密切相关。     

血管抑素对视网膜新生血管的抑制作用及机制

目的研究血管抑素对视网膜新生血管的抑制作用及可能的机制。方法选用Wistar大鼠21只,随机分为3组:A组:IL-1α组,B组:血管抑素组,C组:正常对照组,每组各7只大鼠。A、B两组通过玻璃体腔注入重组鼠IL-1α建立视网膜新生血管模型。通过组织切片及免疫组化方法观察血管抑素对视网膜新生血管的抑制作用。并检测血清中一氧化氮、一氧化氮合酶及诱导型一氧化氮合酶的含量,初步探讨血管抑素抑制视网膜新生血管的机制。结果玻璃体腔注入重组鼠IL-1α可以建立视网膜新生血管模型;B组突破内界膜的血管内皮细胞核数较A组少,分别为7.85±0.58及24.49±2.70,两组相比差异有显著性(P<0.05)。视网膜组织切片经用CD34抗体检测,证明这些细胞为血管内皮细胞。A、B两组血清N0含量分别为30.69±3.62及21.47±3.23,两组比较差异有显著性(P<0.05),两组诱导型一氧化氮含量分别为18.44±2.41及14.37±1.98,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论血管抑素具有抑制视网膜新生血管的作用,其作用可能与抑制诱导型一氧化氮合酶的表达及降低一氧化氮的浓度有关。     

中药单体葛根素对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子、蛋白激酶的影响

目的通过观察糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)、蛋白激酶(PKC)的表达,探讨中药单体葛根素对于抑制糖尿病大鼠视网膜病变的作用机制。方法建立糖尿病大鼠模型,随机分为正常组(正常SD大鼠)、模型组、葛根素组、血塞通组。正常组给予正常饲养20 d;模型组给予注射等量生理盐水,10mg/kg,1次/d;葛根素组给予腹腔内注射葛根素10 mg/kg,1次/d;血塞通组给予腹腔内注射血塞通10 mg/kg,1次/d,后3组每组连续注射20 d。在第20 d过量麻醉后处死上述大鼠,轻摘眼球,进行免疫组织化学染色,检测视网膜组织中VEGF、PKC的表达,并对其进行观察比较。结果模型组PKC蛋白表达及VEGF表达均增加,葛根素组、血塞通组大鼠视网膜组织中PKC蛋白表达及VEGF表达均降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),葛根素、血塞通两组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论中药单体对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)、蛋白激酶(PKC)有明显的抑制作用。     

血管内皮细胞生长因子反义寡聚脱氧核苷酸对视网膜新生血管的影响

目的探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODNs)对增生性视网膜病变视网膜血管发育及新生血管形成的影响.方法注射血管内皮细胞生长因子反义寡聚脱氧核苷酸干预高浓度氧诱导SD幼鼠建立的增殖性视网膜病变动物模型,取眼球作病理切片,计数视网膜新生血管芽、测量视网膜内血管横断面积并比较.结果球后注药组和静脉注药组视网膜新生血管芽细胞核数均明显低于未用药组(P＜0.01);球后注药组与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);而静脉注药组则显著高于正常对照组(P＜0.01).球后注药组(P＜0.01)和静脉注药组(P＜0.05)视网膜内血管横断面积均显著低于正常对照组,球后注药组亦明显低于未用药组(P＜0.05).结论VEGF ASODNs能在明显抑制视网膜新生血管形成的同时,影响新生幼鼠视网膜血管的正常发育,且局部用药作用明显优于全身给药.     

丹参注射液对氧诱导幼鼠视网膜增生变性的保护作用

目的探讨丹参注射液对氧诱导幼鼠视网膜凋亡相关基因的表达及其外周血血管内皮生长因子(VEGF)的影响,以明确其抑制视网膜增生变性的作用机制。方法将100只出生7 d的SD幼鼠随机分为对照组、模型组及丹参注射液4,2,1 g/kg组,每组20只。对照组幼鼠生活在正常氧环境下,其余4组幼鼠均制成视网膜病变模型。模型组给予腹腔注射生理盐水,丹参注射液4,2,1 g/kg组分别给予腹腔注射相应剂量的丹参注射液,连续注射5 d后处死幼鼠,经右侧眼球取静脉血检测VEGF浓度,取出眼球用RT-PCR法检测视网膜中bax与bcl-2 mRNA表达水平。结果模型组幼鼠视网膜组织中bax mRNA表达水平明显低于对照组(P0.05),而血清VEGF浓度与视网膜组织中bcl-2 mRNA表达水平均明显高于对照组(P均0.05)。丹参注射液2 g/kg组血清VEGF浓度及视网膜组织中bcl-2 mRNA表达水平均明显低于丹参注射液1 g/kg组(P均0.05),高于丹参注射液4 g/kg组(P均0.05);视网膜组织中bax mRNA表达水平明显高于丹参注射液1 g/kg组(P0.05),低于丹参注射液4 g/kg组(P0.05)。bax mRNA表达水平与bcl-2 mRNA表达水平间存在显著负相关关系(r=-0.653,P0.05)。结论丹参注射液能抑制氧诱导的幼鼠视网膜细胞增生。     

姜黄素对高氧诱导的新生小鼠视网膜病变及notch通路的影响

目的研究姜黄素对高浓度氧(高氧)诱导的新生小鼠视网膜病变(OIR)的治疗效果及对notch通路的影响。方法建立高浓度氧诱导的C57BL/6J新生小鼠OIR模型,姜黄素组分为高剂量(HCG)、中剂量(MCG)及低剂量(LCG)三个剂量组。按照实验分组处理各组幼鼠,视网膜组织HE染色、内皮细胞核计数、视网膜铺片评价处理后幼鼠OIR缓解情况,蛋白印迹法(WB)测定幼鼠视网膜组织中notch、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平。结果 (1)组织病理学:与对照组(CG)相比,高氧模型组(HOG)视网膜内界膜结构不完整,有大量血管内皮细胞突破内界膜,血管内皮细胞数显著增加(q=81.42,P=0.000),大血管明显变细,分支减少,行走紊乱,视网膜周边及中央可见无灌注区,周边血管密度增加,可见大量渗漏点,血管丧失放射状结构;HCG组OIR症状明显得到改善,缓解程度与阿帕替尼组(APG)组相当;(2)视网膜内皮细胞核计数:与CG组相比,HOG组突破视网膜内界膜血管内皮细胞数显著增加(q=81.42,P=0.000)。与HOG组相比,低剂量组(LCG)、中剂量组(MCG)、高剂量组(HCG)个数依次减少(qLCG=27.21,qMCG=44.95, qHCG=55.93,均P=0.000),APG组与HOG组相比显著减少(q=57.39,P=0.000),差异均有统计学意义;(3)notch蛋白表达:与CG组相比,HOG组表达水平显著升高(q=28.01,P=0.000);与HOG组相比,LCG组、MCG组、HCG组notch蛋白表达水平依次下降(qLCG=10.57,qMCG=17.69,qHCG=22.36,均P=0.000),APG组表达水平与HOG组相比下降(q=22.61,P=0.000),差异均有统计学意义;(4)VEGF蛋白表达:与CG组相比,HOG组表达水平显著升高(q=25.68,P=0.000);与HOG组相比,LCG组、MCG组、HCG组表达水平依次下降(qLCG=5. 49, P=0. 005; qMCG=14. 27, P=0. 000; qHCG=18.88,P=0.000)。APG组表达水平与HOG组相比显著下降(q=19.10,P=0.000),均有统计学意义。结论姜黄素可能通过抑制notch通路活化,降低VEGF表达,减少血管异常增生,缓解高氧诱导的新生小鼠OIR症状。     

Efficacy of Ciji Hua'ai Baosheng formula on the expressions of vascular endothelial growth factor,kinase insert domain-containing receptor and basic fibroblast growth factor in mouse models of H_22 hepatocellular carcinoma

OBJECTIVE: To investigate the efficacy of Ciji Hua'ai Baosheng formula(CHBF) on microvessel density(MVD) and vascular endothelial growth factor(VEGF), kinase insert domain-containing receptor(KDR) and basic fibroblast growth factor(b FGF) expression in serum and tumor tissue of mice receiving chemotherapy for the treatment of H22 hepatocellular carcinoma.METHODS: Sixty Kunming mice were injected subcutaneously with H22 hepatoma carcinoma cell suspensions into the right anterior armpit. Seven days later, all transplanted tumor were formed and the mice were intraperitoneally injected 200 mg/kg cytoxan(CTX) to establish the models of tumor-bearing mouse chemotherapy, then they were randomly divided into model group, continuing CTX chemotherapy group(CTX group), and three CHBF(117, 58.5 and 29.25 g/kg) groups. After ten days of treatments, histology was observed, contents of VEGF, KDR and b FGF in serum and tumor tissue were measured by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA), VEGF and b FGF protein expression and MVD tagged by CD34 were detected by immunohistochemisty.RESULTS: MVD in CHBF(117, 58.5 g/kg) and CTX groups was significantly lower than that in model group(P 0.01); expressions of VEGF, KDR and b FGF in serum and tumor tissue in CHBF(117 g/kg)group were less than those in model group(P 0.05; P 0.01); the expressions of MVD, VEGF and b FGF in tumor tissue of CHBF(117 g/kg) groupwere also less than those in CTX group(P 0.05;P 0.01).CONCLUSION: CHBF can effectively reduce the expression of VEGF, KDR and b FGF in serum and tumor tissue, and decrease MVD and delay tumor progression.     

桃红四物汤Ⅱ号抑制小鼠B16黑色素瘤生长及VEGF,KDR/FLK-1表达

目的:观察桃红四物汤Ⅱ号对小鼠B16黑色素瘤生长、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(KDR/FLK-1)表达及肿瘤微血管密度(MVD)值的影响。方法:采用C57BL/6J小鼠皮下接种B16黑色素瘤细胞建立模型,分别给予2.5,5,10 g.kg^-1桃红四物汤Ⅱ号水煎剂、环磷酰胺0.05 g.kg^-1及联合用药桃红四物汤Ⅱ号10 g.kg^-1+环磷酰胺0.025 mg.kg^-1,检测各组肿瘤体积、重量、VEGF和KDR/FLK-1表达及肿瘤MVD值。结果:桃红四物汤Ⅱ号5,10 g.kg^-1及联合用药组肿瘤体积、重量、VEGF和KDR/FLK-1表达及肿瘤MVD值均较生理盐水组明显降低(P<0.01)。结论:桃红四物汤Ⅱ号能抑制小鼠B16黑色素瘤的生长,其抗肿瘤机制可能与抗血管生成作用有关。     

金针菇多糖对环磷酰胺的增效减毒作用

目的:观察金针菇多糖(FVP₁)对化疗药环磷酰胺的增效减毒作用。方法:①NIH小鼠右腋皮下接种0.2mL的1×10⁷·mL^-1的S180肉瘤后,随机分为3组:模型对照组腹注生理盐水;环磷酰胺组在第1,3天腹注30mg·kg^-1体重的环磷酰胺,其余时间用生理盐水;FVP₁合并环磷酰胺组在第1,3天腹注30mg·kg^-1体重的环磷酰胺,同时每天腹注10mg·kg^-1的FVP₁,连续10d。剥取肿瘤称重,计算抑瘤率。②小鼠腹注100mg·kg^-1环磷酰胺,连续2d建立免疫抑制小鼠模型,随机分成4组:环磷酰胺组腹注生理盐水;FVP₁小、中、大剂量组分别腹注5,10,20mg·kg^-1的FVP₁,连续7d;另设不用环磷酰胺造模的作为空白对照组。实验结束后检测各组小鼠的外周白细胞、胸腺指数、脾指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾淋巴细胞转化和NK细胞活性。结果:①FVP₁与小剂量环磷酰胺伍用能明显提高环磷酰胺对小鼠S180的抑瘤率。②5,10,20mg·kg^-1的FVP₁均能明显对抗环磷酰胺所致的小鼠白细胞减少和免疫器官萎缩,拮抗环磷酰胺所致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的降低,恢复免疫受抑小鼠的淋转功能以及NK细胞杀伤活性。结论:FVP₁对环磷酰胺具有一定的增效减毒作用。     

复方守宫散抗人胃癌裸鼠移植瘤血管生成的实验研究

目的通过研究复方守宫散对VEGF、bFGF的影响,探讨其抑制血管生成的机理。方法裸鼠皮下接种人胃癌MKN-45细胞悬液,待肿瘤直径长至0．5cm左右,随机分组,分别给予生理盐水、5-FU、I、2、4mg／kg／d复方守宫散进行干预,共6周。治疗前后及治疗期间用游标卡尺测量肿瘤最大直径和最小直径,计算肿瘤体积。采用S-P免疫组织化学法检测复方守宫散对裸鼠皮下胃癌组织中VEGF、bFGF表达的影响。结果治疗前各组裸鼠肿瘤体积无明显差异（P〉0．05）。治疗结束后。复方守宫散各组及5-FU组肿瘤体积及重量小于生理盐水组（P〈O．05）,而且复方守宫散对肿瘤生长的抑制作用呈现剂量依赖性,5-FU的抑瘤效果强于中、高剂量复方守宫散（P〈O．05）。免疫组织化学检测结果显示,与生理盐水组比较,复方守宫散和5-FU均能下调裸鼠皮下胃癌组织中VEGF、bFGF的表达（P〈O．05）,并且存在剂量依赖性。复方守宫散中低剂量组VEGF表达高于5-FU组,复方守宫散各组bFGF表达亦高于5-FU组（P〈O．05）。结论复方守宫散抗血管生成的机理可能是通过抑制VEGF、bFGF的表达,导致肿瘤血管生成受到抑制。     

续骨丹对调节胫骨骨不连大鼠CD34和VEGF增强骨修复的影响

目的：探讨续骨丹外敷疗法对胫骨骨不连大鼠CD34细胞和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的影响，探讨续骨丹修复胫骨骨不连潜在的效应机制。方法：将60只SD雄性大鼠随机分为模型对照组，续骨丹低、中、高剂量组(25、75,150 mg/kg)，经皮神经电刺激疗法(transcutaneous electrical nerve stimulation, TENS)组和中剂量+TENS组，每组10只。采用胫骨截骨法制备大鼠胫骨骨不连模型。分别在造模8周后，干预第4、8周后通过X射线、苏木素-伊红(HE)染色法观察骨组织形态变化；运用免疫组织化学法检测骨损伤区CD34和VEGF分布、定位情况。结果：与模型对照组相比，高剂量组和中剂量+TENS组断骨两端骨痂大部分桥接，皮质间隙消失，断骨被新生骨小梁覆盖，骨折损伤区纤维组织明显减少。与模型对照组相比，续骨丹高、中、低剂量组、TENS、中剂量+TENS组中CD34和VEGF的表达水平显著升高。中剂量+TENS组的CD34和VEGF表达水平与续骨丹高剂量组相似，续骨丹低剂量组中CD34和VEGF表达水平显著低于续骨丹中剂量组和TENS组。结论：续骨丹外敷疗法可通过调节CD34和VEGF的表达，改善局部血流供应，促进骨重建和骨不连愈合。     

不同时机给药对原发性痛经模型小鼠雌激素受体、缩宫素受体的影响

目的观察不同时机给药对原发性痛经模型小鼠雌激素受体(ER-α)和缩宫素受体(OTR)的影响。方法将km小鼠按体重分层随机分为:JQF动情周期给药组、JQF第4天给药组(JQF剂量均为0.218 g/kg)、元胡止痛片组(0.1 g/kg)、模型组和正常组。除正常组外每日皮下注射苯甲酸雌二醇0.2 mg/只,连续6 d。采用Western blot和Real-time PCR分别检测1周期给药和3周期连续给药对ER-α和OTR蛋白与m RNA表达的影响。结果与模型组比较,JQF动情周期给药组与第4天给药组ER-α和OTR蛋白、m RNA的表达均呈现显著下调(P<0.01)。动情周期给药组和第4天给药组组间比较无差异,3周期连续给药实验结果与1周期一致。结论不同时机给药对原发性痛经模型小鼠ER-α和OTR蛋白、m RNA表达有相同的抑制作用。     

Extract of Hypericum perforatum blocks caffeine-induced locomotor activity in mice: a possible role of nitric oxide

The present study investigated the effects of HPE on caffeine-induced locomotor activity in mice. Caffeine (4-16 mg/kg) or saline were given to adult male Swiss-Webster mice, and the locomotor activity was immediately measured for 30 min. HPE (6-48 mg/kg) and saline were injected to another group of mice and the locomotor activity was measured 20 min later. HPE (6-24 mg/kg) was also administered to another group of mice 20 min before caffeine (16 mg/kg) injections and the locomotor activity was recorded for 30 min immediately after caffeine administrations. Finally l-arginine (1 g/kg) was administered i.p. 20 min before HPE (6 mg/kg) and the locomotor activity was measured as mentioned above. Each group of mice was used only once. Caffeine produced some significant increases in locomotor activity of the mice. HPE (6-24 mg/kg) significantly blocked the caffeine-induced locomotor hyperactivity. Pretreatment of l-arginine (1 g/kg) reversed the inhibitory effect of HPE (6 mg/kg) on caffeine-induced locomotor activity without producing any significant effect on locomotor activity of the mice when it was administered alone. The results suggest that HPE blocks caffeine-induced locomotor hyperactivity in mice. Furthermore, the inhibitory effect of HPE on caffeine-induced locomotor activity may be related to its NOS inhibitory property.     

冰片配伍黄芪甲苷和三七总皂苷通过Notch信号通路对大鼠脑缺血再灌注损伤模型的神经保护作用

目的 从Notch信号通路探讨冰片配伍黄芪甲苷（astragaloside IV,AST IV）和三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）对大鼠脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI）模型的神经保护作用。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、冰片（7.5 mg/kg）组、PNS（25 mg/kg）组、AST IV（10 mg/kg）组、AST IV（10 mg/kg）+PNS（25 mg/kg）组、冰片（7.5 mg/kg）+AST IV（10 mg/kg）+PNS（25 mg/kg）低剂量组、冰片（15 mg/kg）+AST IV（20 mg/kg）+PNS（50 mg/kg）高剂量组、依达拉奉（4 mg/kg）组。假手术组、模型组ig 0.5% CMC-Na,依达拉奉组ip相应药物,其余各组ig相应药物,2次/d,间隔12 h。末次给药后2 h采用线栓法阻断大鼠右侧大脑中动脉,建立CIRI模型。缺血2 h,再灌注22 h后,进行神经功能缺损评分;HE染色法观察缺血皮质区病理变化;免疫组化法检测神经元特异性核蛋白（neuron specific nuclear,NeuN）、内皮屏障抗原蛋白（endothelial barrier antigen,EBA）表达;Western blotting法检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、Notch1、Notch胞内域（intracellular domain of Notch,NICD）蛋白表达。结果 模型组大鼠神经功能缺损评分和细胞损伤率显著增加（P<0.01）;各给药组大鼠神经功能缺损评分和细胞损伤率显著降低（P<0.05、0.01）,冰片+AST IV+PNS组的效应强于各药物单用及AST IV+PNS组（P<0.05、0.01）。模型组大鼠缺血皮质区NeuN、EBA蛋白表达均显著降低（P<0.01）;各给药组NeuN、EBA蛋白表达显著增加（P<0.05、0.01）,冰片+AST IV+PNS组的效应强于各药物单用及AST IV+PNS组（P<0.05、0.01）。模型组大鼠缺血皮质区VEGF蛋白表达显著增加（P<0.05）,NICD、Notch1蛋白表达无显著变化;冰片+AST IV+PNS组VEGF、NICD、Notch1蛋白表达显著上调（P<0.01）,且3种药物配伍的效应强于各药物单用及AST IV+PNS（P<0.05、0.01）。结论 冰片、AST IV、PNS具有抗脑缺血再灌注后神经元和脑微血管损伤的作用,3种药物配伍的作用强于各药物单用及AST IV+PNS,其作用可能与激活Notch信号通路、上调VEGF表达,从而发挥对缺血脑组织的保护作用有关。