稀土对受照射小鼠辐射损伤影响的实验研究

稀土化合物因具有其特殊的物理特性，在医学领域的应用也已引起广泛关注。有文献报道，稀土化合物能增强机体免疫功能和抑制肿瘤作用，能诱导某些抑癌基因的表达，对癌基因有抑制作用。但稀土及其化合物在辐射损伤中的作用，尤其是对电离辐射诱导细胞DNA损伤的影响报道较少。笔者重点研究柠檬酸镧在电离辐射引起动物骨髓细胞DNA损伤中的作用。     

血管内皮生长因子转基因治疗小鼠辐射损伤的实验研究

目的 通过构建血管内皮生长因子(VEGF)基因的真核表达质粒,并将其转入受照小鼠机体,研究VEGF蛋白表达对放射损伤的救治作用及其分子机制。方法 昆明种小鼠通过随机化分组表法随机分为正常对照组、单纯照射组和转基因组。转基因组应用VEGF重组质粒进行肌肉注射,注射后24 h接受8 Gy X射线照射,进行小鼠临床表现和死亡率观察。并于照后不同时间处死动物,进行组织器官病理学和原位胸腺和脾细胞凋亡检测。结果 用PCR方法从pSP73/H_VEGF165质粒扩增得到VEGF₁₆₅基因片段,经双酶切后与酶切的pcDNA3.1载体连接,构建重组质粒pcDNA3.1/ VEGF₁₆₅,经电泳和测序表明序列与GeneBank完全一致。X射线8 Gy照射小鼠,单纯照射组14 d内死亡率为64%,而转基因组为36%,两组比较差异有统计学意义(t=3.92,P＜0.05)。转基因组小鼠胸腺和脾组织的细胞凋亡率显著降低(t=3.11、3.53,P＜0.05),放射病理损伤明显改善。结论 成功构建了重组质粒pcDNA3.1/ VEGF₁₆₅,重组质粒转基因治疗可显著降低严重辐射损伤小鼠的死亡率,显著减低胸腺和脾脏细胞凋亡率,明显改善免疫器官的病理变化。     

茶多酚对荷瘤小鼠辐射损伤的影响

由于放射治疗副作用大，许多肿瘤患者难以坚持而影响治疗，辐射损伤的机理主要是产生大量的活性自由基攻击生物大分子，因此自由基清除剂在抗辐射损伤方面日益受到关注。茶多酚(tea polyphenols．TP)主要成分为儿茶素是一种有效的自由基清除剂，其抗辐射和抗肿瘤作用已有大量研究。而TP对肿瘤放射治疗损伤保护方面的报道相对较少。笔者研究了TP对小鼠及荷瘸小鼠辐照损伤影响.     

钩吻对小鼠急性辐射损伤的保护作用

钩吻 (ＧＥＢ)是一种主要含多种吲哚类生物碱的剧毒植物。具有消炎、镇痛、抗肿瘤、调节免疫功能和保护骨髓选血功能等作用[1 3] 。ＧＭ ＣＳＦ是公认的造血细胞生长因子 ,它对放射损伤有较好的治疗作用 ,ｒｈＧＭ ＣＳＦ ＩＬ 3融合蛋白同时具有ＧＭ ＣＳＦ和ＩＬ 3的功能 ,作用效果优于ＧＭ ＣＳＦ[4 ] 。笔者旨在比较ＧＦＢ和ｒｈＧＭ ＣＳＦ ＩＬ 3融合蛋白对小鼠急性放射损伤的治疗效果 ,现报道如下。一、材料和方法1 药物 :钩吻乙醇粗提物为广西产钩吻茎乙醇粗提物 ,提取和制备方法见文献 [3],配成浓度 6 0ｍｇ ｍｌ,过滤除菌备用。…     

不同剂量富氢水对小鼠辐射损伤保护作用的研究

目的 观察不同剂量富氢水对小鼠辐射损伤的保护作用,为富氢水的应用提供科学依据。方法 ICR小鼠按随机数字表法分为对照组、单纯照射组、氨磷汀组和富氢水低、中、高剂量组,经9.0 Gy γ射线全身照射后,观察各组动物30 d存活情况、体重和血液指标变化、存活动物的血清生化指标、脏器重量和系数、骨髓微核率、骨髓有核细胞计数等的变化。结果 富氢水高剂量组在30 d存活率和照后体重方面表现出比较明显的保护作用并呈现一定的剂量效应关系,其中30 d平均存活天数跟单纯照射组比较,差异有统计学意义（t=-2.67,P<0.05）,富氢水组在血清生化指标方面也表现出一定的保护作用,其中,富氢水低剂量组总蛋白、白蛋白、肌酐,中剂量组总蛋白、白蛋白、总胆红素、肌酐,高剂量组总蛋白、白蛋白、血糖、总胆红素、尿素氮、肌酐、尿酸等指标跟单纯照射组比较差异有统计学意义（t=-2.04~-4.11,P<0.05）。富氢水组在血液学指标、脏器重量和系数、骨髓微核率等方面未观察到有明显保护作用。结论 富氢水具有抗辐射损伤作用,而且存在一定的剂量效应关系。     

当归多糖对急性辐射损伤小鼠外周血淋巴细胞的保护作用

当归为伞形科植物当归[Angelica sinensis （Oliv.）Diels]的干燥根。近年来研究发现,当归多糖具有激活补体活性,可去除自由基、调节免疫力,在抗肿瘤方面也显示显著疗效。本实验以当归多糖ASP3为受试物,考察其对亚急性辐射损伤小鼠外周血淋巴细胞的保护作用。     

三七总皂甙对小鼠抗辐射损伤的实验研究

三七多用于体内外各种出血之证及跌打损伤等，具有多种化学成分，其中三七总皂甙为主要有效成分之一，笔者就三七总皂甙对辐射损伤的保护作用进行了以下研究。     

亮菌多糖抗小鼠辐射损伤作用的研究

目的观察亮菌多糖（ATS）对辐射损伤的保护作用。方法将小鼠随机分为空白对照组（0．9％生理盐水）、辐射模型组、阳性对照组（参芪片）和ATS多糖不同剂量实验组（80、160和320mg／kg）。以γ射线照射小鼠全身，引起辐射损伤后观察各组小鼠30d存活率、白细胞（WBC）数、精子畸变率、骨髓微核（MN）细胞数、骨髓DNA含量和免疫器官重量及血清和肝组织中的超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量等。结果ATS能提高受照小鼠存活率（P〈0．05）及SOD活性（P〈0．05）、升高WBC数（P〈0．05）和骨髓DNA含量（P〈0．05），抑制小鼠精子畸变率（P〈0．05）和骨髓MN细胞数的增加（P〈0．05），并使受照小鼠胸腺、脾脏重量回升（P〈0．05），还能增加内源性脾结节数（P〈0．05），降低MDA含量。结论ATS对γ射线所致小鼠辐射损伤有较好的保护作用。     

海生多糖肽对亚急性辐射损伤小鼠的防护作用

目的 研究海生多糖肽对小鼠亚急性辐射损伤的防护作用。方法 给小鼠饲以海生多糖肽制剂，用^60Coγ射线进行全身性亚急性照射，检测外周血白细胞、脾淋巴细胞转化率、红细胞超氧化物歧化酶、丙二醛和过氧化酶含量、精子畸形率、睾丸精母细胞染色体畸变率和肝细胞半胱氨酸蛋白酶-3等指标。结果 海生多糖肽高、低剂量组小鼠的血白细胞数量、脾淋巴细胞转化率、红细胞超氧化物歧化酶值和过氧化酶值均高于照射对照组，红细胞丙二醛值、精子畸形率、睾丸精母细胞染色体畸变率和肝细胞半胱氨酸蛋白酶-3阳性表达率则低于照射对照组，差异有显著性。结论 海生多糖肽对亚急性辐射损伤有良好的防护作用。     

五鹤续断对辐射损伤小鼠保护作用的研究

目的 研究五鹤续断(WHDA)注射液对辐射损伤小鼠的保护作用.方法 将160只昆明种雌性小鼠分为正常对照组、照射组和低剂量WHDA+照射组、高剂量WHDA+照射组,观察其30 d存活率;测定辐射后6 h、3 d、6 d、9 d小鼠的外周血象;测定辐射后小鼠的胸腺、脾脏和肝脏质量;测定辐射后小鼠外周血和肝脏的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)及丙二酰二醛(MDA)水平.结果 WHDA可提高辐射后小鼠的存活率,对其白细胞及血小板的数量变化有显著影响,但对其胸腺、脾脏、肝脏质量均无明显影响.WHDA还能显著提高辐射后小鼠的SOD活性,增加GSH水平,降低MDA水平.结论 WHDA对辐射损伤小鼠有明显的保护作用.     

地甘口服液对辐射损伤小鼠细胞周期及凋亡相关基因的影响

目的　探讨中药复方地甘口服液对辐射损伤小鼠骨髓细胞周期素基因 (cyclinD1)及凋亡相关基因 (bcl 2和bax)mRNA表达的作用。方法　建立辐射损伤模型 (一次性用直线加速器给予6 0Gy的X射线照射 ) ,喂饲小剂量 10 0 %和大剂量 2 0 0 %的地甘口服液每次 0 2ml 10g小鼠 ,每日 2次。第 9天用原位杂交法检测小鼠骨髓单个核细胞cyclinD1、bcl 2和baxmRNA的表达。结果　地甘口服液组与对照组比骨髓细胞促凋亡基因baxmRNA表达显著减少 (P <0 0 1) ,而cyclinD1和bcl 2m RNA的表达显著增强 (P <0 0 1)。结论　中药复方地甘口服液抗辐射损伤可能是通过上调细胞周期素基因cyclinD1和bcl 2的表达及降低baxmRNA的表达 ,从而促进造血细胞的增生和提高机体免疫力 ,达到保护机体的目的 ,为临床用药提供理论指导     

褪黑素对重离子辐射损伤小鼠肺的防护作用研究

目的探讨褪黑素(melatonin,MLT)对重离子辐射损伤小鼠肺的防护作用。方法预先给小鼠腹腔注射10mg/kg的MLT,1h后给予0、0.5、1.0、2.0及4.0Gy的全身12C6+束均匀照射,剂量率约1.4Gy/min,辐射后8h,检测辐射损伤小鼠肺组织的SOD活性和MDA、GSH含量,并通过单细胞凝胶电泳技术检测辐射损伤小鼠肺细胞的拖尾长度和尾距。结果和单纯辐射组相比,10mg/kg的MLT腹腔注射能有效抑制重离子辐射引起的小鼠肺组织SOD活性降低、GSH含量下降和MDA含量提高;同时,MLT还能使受损小鼠肺细胞的拖尾长度和尾距显著降低,且都存在剂量效应关系。结论MIT对重离子全身辐射所致小鼠的抗氧化系统有一定的激活效应,对辐射损伤有一定的防护作用,这可能与对抗膜脂质过氧化、清除自由基及其减轻DNA损伤有一定的关系。     

Flt3配体联合其他细胞因子对受照射小鼠免疫系统的作用研究

目的：研究Flt3配体（FL）在受照射小鼠免疫系统恢复中的作用。方法：采用F－800血细胞自动计数仪行外周血细胞计数及血细胞分类计数，流式细胞仪分析外周血淋巴细胞表型。结果：照射前应用FL或照射后联合应用FL，IL－11，EPO和G－CSF等细胞因子，能有效地促进受照小鼠外周血白细胞和淋巴细胞的恢复，对CD8^ 细胞的恢复作用尤为明显，同时使CD4^ /CD8^ 细胞比值较早恢复正常，提高受照射小鼠的生存率，结论：FL不但能促进辐射损伤机体造血功能的恢复，对免疫系统的亦具有重要的作用，FL单独或与其他细胞因子联合应用，对辐射损伤动物具有明显的防护和治疗效应。     

急性辐射损伤小鼠T细胞功能亚群的变化

为了解T细胞功能亚群在急性辐射损伤后的改变,探讨急性放射病细胞免疫功能长期低下的发病机制,用^60Co γ射线5Gy对二级Balb／c小鼠一次性全身照射。在照射后约10、28和120天用双标记免疫荧光流式细胞术检测脾脏淋巴细胞CD4^ 和CD8^ T细胞亚群,用相对定量的RT—PCR法检测脾脏细胞经ConA刺激活化后IL-4基因表达情况。结果发现,照射组相对于对照组CD4^ ／CD8^ 比值显著升高,随着照射后时间的延长,CD4^ ／CD8^ 比值逐渐降低,但至120天左右仍未恢复到同批正常对照的水平。受照后10天左右的小鼠脾细胞IL—4基因在mRNA水平明显升高。提示小鼠CD8^ T细胞比CD4^ T细胞辐射敏感性强,且照射后Thl／Th2的细胞因子分泌模式是向Th2型偏移的。     

苦豆子总碱对辐射损伤小鼠脂质过氧化作用的影响

目的：研究苦豆子总碱对辐射损伤小鼠脂质过氧化作用的影响。方法：小鼠腹腔注射不同剂量苦豆子总碱，^60Coγ射线全身均匀照射，吸收剂量5.0Gy，检测苦豆子总碱对肝组织中丙二醛（MDA）含量，血清谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）、超氧化物歧化酶（SOD）以及全中硒－谷胱苷肽过氧化物酶（Se-GSH-PX）活力的影响。结果：辐射损伤后小鼠脱毛明显，体重减轻，尾部出现多个出血斑，MDA含量增高，SOD及GSH－PX活力下降，GPT，GOT活力增加。苦豆子总碱可促进上述指标恢复。结论：苦豆子总碱对受照小鼠具有一定的保护作用，其机理可能与抗氧化作用有关。     

不同年龄小鼠造血系统辐射损伤与修复的比较观察

目的 观察辐射对不同年龄小鼠（幼年鼠、青年鼠、老年鼠）造血系统的损伤及恢复的影响,探讨幼年鼠、老年鼠受照后造血系统的变化及其与青年鼠的差异。 方法 不同年龄（幼年鼠：3周龄、青年鼠：8周龄、老年鼠：14月龄）雄性C57BL/6小鼠各60只,按照随机区组法分为对照组、2 Gy照射组、4 Gy照射组,每组各20只。其中,照射组小鼠用137Cs γ射线给予全身照射,对照组给予假照射。分别于照射后第3、7、14、28天取材,检测小鼠外周血计数、单侧股骨骨髓有核细胞计数、骨髓中造血干细胞（HSC）百分比、造血祖细胞（HPC）百分比及粒单系造血祖细胞集落形成单位（CFU-GM）绝对百分比。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验。 结果 照射组小鼠白细胞计数、单侧股骨骨髓有核细胞计数、HSC百分比和HPC百分比在第3天降至最低值,其中,幼年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的34.8%（t=6.129,P<0.05）、19.6%（t=7.084,P<0.05）,青年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的43.8%（t=3.043,P<0.05）、20.0%（t=7.084,P<0.05）,老年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的19.0%（t=22.080,P<0.05）、8.4%（t=24.590,P<0.05）, 4 Gy照射组降低程度重于2 Gy照射组,且呈剂量依赖性。第28天时幼年鼠照射组单侧股骨骨髓有核细胞计数未恢复正常,4 Gy照射组HSC绝对百分比仍低于50%,HPC绝对百分比恢复至50%左右。青年鼠照射组CFU-GM在第28天恢复至正常水平,而幼年鼠照射组（2 Gy照射：t=2.067,P<0.05;4 Gy照射：t=3.358,P<0.05）和老年鼠照射组（2 Gy照射：t=2.586,P<0.05;4 Gy照射：t=4.772,P<0.05）在第28天时显著低于青年鼠照射组,仍未恢复至正常水平。 结论 照射组小鼠造血系统大多数指标在第3天出现急性抑制且呈剂量依赖性,3 d后为损伤恢复期,多数指标在第28天可恢复至正常水平。与青年鼠相比,幼年鼠的血小板和造血干细胞功能对辐射损伤更为敏感,老年鼠的骨髓细胞增殖功能恢复能力下降。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对急性辐射损伤小鼠的防护作用

目的 研究吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对急性辐射损伤小鼠的防护作用.方法 6~8周龄雄性ICR小鼠,按体重随机分为5组,每组10只:空白单照组(IR)、阳性对照组(氨磷汀WR-2721 250 mg/kg)和PDTC30、60、90 mg/kg剂量组,照射前30 min给予相应药品.¹³⁷Cs γ射线7.5 Gy一次性全身照射,观察小鼠30 d存活率;¹³⁷Cs γ射线5.0 Gy一次性全身照射,照射后第8天检测外周血、造血系统、脏器系数指标.结果 PDTC可以提高小鼠30 d存活率,60 mg/kg剂量组效果最为明显,存活率提高到60%(6/10),空白单照组为10%(1/10),阳性对照组为70%(7/10).与空白单照组相比,PDTC 60 mg/kg剂量组的脾脏指数、白细胞、血红蛋白含量、血小板数、股骨有核数和脾结节数,差异有统计学意义(t=2.354、4.793、2.342、6.542、2.649、3.982,P<0.05).结论 PDTC具有抗辐射损伤作用,尤以60 mg/kg作用最为明显.     

甲状旁腺素对辐射损伤小鼠造血功能的防护作用

目的 探讨重组人甲状旁腺素(parathyroid hormone, PTH)对辐射所致小鼠造血功能损伤的防护作用。方法 雄性C57小鼠60只,经⁶⁰Co γ射线照射后随机分为PTH治疗组和照射对照组。PTH治疗组每天给予PTH 80 μg ·kg^-1 ·d^-1 腹腔注射,对照组给予等量生理盐水。全自动血细胞分析仪检测小鼠外周血细胞数,手工计数骨髓有核细胞数,流式细胞仪分析骨髓中CD34+细胞数,集落细胞培养法观察骨髓粒系造血祖细胞数。结果 在照射后10、15和20 d,PTH治疗组小鼠的外周血红细胞计数显著高于照射对照组(t=6.48、3.66和4.98,P<0.05)。在照射后各时间点外周血白细胞计数显著高于照射对照组(t=6.32、9.19、11.18、7.44和4.42,P<0.05)。在照射后5和30 d血小板计数显著高于照射对照组(t=2.57和3.10,P<0.05)。在照射后各时间点PTH治疗组骨髓有核细胞数均显著高于照射对照组(t=5.80、3.72、17.89、4.90和16.49,P<0.05)。PTH显著增加了照射后小鼠的骨髓粒细胞集落形成单位数和CD34+细胞数(t=16.12、7.82和20.00,P<0.05)。结论 甲状旁腺素对辐射引起的造血损伤具有明显的保护作用。     

亚低温对急性辐射损伤小鼠的保护作用及其机制研究

目的 探讨亚低温对急性辐射损伤小鼠的辐射防护作用及其机制.方法 105只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为3组,即单纯照射组、亚低温干预组和健康对照组,每组35只.单纯照射组和亚低温干预组小鼠均接受6 Gy ⁶⁰Co γ射线单次全身照射,亚低温干预组在照后即刻进行亚低温干预并维持6 h,观察照后1、3、7、14、21和28 d小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞计数,骨髓病理组织学变化,照后6和24 h, 检测小鼠血清中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,采用流式细胞术检测骨髓细胞周期.结果 与单纯照射组比较,亚低温干预组小鼠外周血白细胞数和骨髓有核细胞数在照后早期较高(t=-2.63、-3.41,P<0.05),且提前1周恢复;同时,小鼠骨髓细胞衰减较晚,恢复较早.受照后6 h与其他组相比,亚低温干预组小鼠血清MDA含量较低(t=3.83,P<0.05),SOD活力较高(t=-6.57,P<0.05),骨髓S期细胞比例较高(t=-4.67,P<0.05),G₂期细胞较低(t=3.04, P<0.05);受照后24 h与其他组相比,亚低温干预组小鼠血清GSH-px活力较高(t=-3.13, P <0.05),骨髓S期细胞比例较单纯照射组降低(t=7.19,P<0.05).结论 照后亚低温干预对急性辐射损伤有较好的保护作用,机制与亚低温可增强机体抗氧化力、抑制骨髓细胞周期进程有关.     

山莨菪碱对耳蜗电离辐射损伤防护作用的实验研究

目的 观察电离辐射对耳蜗毛细胞的损伤情况,探讨山莨菪碱对耳蜗辐射损伤的防护作用。方法 将健康豚鼠50只随机分成3组,健康对照组10只,单纯照射组和药物防护组各20只,每组观察20耳。各组豚鼠行听觉脑干反应(ABR)阈值测定后,对药物防护组和单纯照射组豚鼠的耳颞部用直线加速器所产生的6 MeV电子线予以分次放射(2 Gy/d),每次照射前30 min于药物防护组豚鼠的股部肌肉注射山莨菪碱,单纯照射组在同一部位注射等量生理盐水,总剂量达到60 Gy后,各组豚鼠行ABR检测听功能。并通过光镜、透射电镜及扫描电镜观察耳蜗毛细胞的形态学变化。结果 放射后单纯照射组的平均ABR阈值为(52.27±2.42)dB peSPL,较药物防护组(37.65±1.92)dB peSPL明显提高 ( t =2.01, P<0.05);耳蜗基底膜铺片外毛细胞计数,单纯照射组为(54.75±7.71)个/视野,较药物防护组(144.50±7.30)个/视野明显减少( F =135.362, P<0.05)。透射电镜观察见单纯照射耳蜗外毛细胞边界不清,细胞肿胀变形,细胞器和细胞核明显异常;防护组耳蜗外毛细胞病变明显减轻;健康对照组外毛细胞完好。扫描电镜观察见单纯照射组耳蜗外毛细胞的纤毛明显倒伏、缺失、排列紊乱;药物防护组耳蜗外毛细胞的纤毛排列基本整齐,偶见倒伏现象;健康对照组耳蜗外毛细胞的纤毛排列整齐无倒伏、缺失。 结论 分割剂量60 Gy对豚鼠耳颞部放射可造成耳蜗毛细胞损害,山莨菪碱对耳蜗辐射损伤具有保护作用。