在Staib琼脂上形成厚膜孢子是都柏林念珠菌种的特异性特征

念珠菌主要通过形态学和生化试验来鉴别。新近发现的都柏林念珠菌的主要鉴定特征与白念珠菌极其相似 ,只能用其他不同的试验加以鉴别。Ｓｔａｉｂ琼脂是临床用于从艾滋病患者分离新生隐球菌的常规培养基 ,作者研究利用Ｓｔａｉｂ琼脂鉴定白念珠菌和都柏林念珠菌。方法 :待测白念珠菌和都柏林念珠菌经分子生物学、表型和温度试验明确鉴定 ,接种于Ｓｔａｉｂ琼脂 3 0℃培养。自培养皿上形成菌落开始 ,观察菌落形态和显微镜下形态。Ｓｔａｉｂ琼脂的成分为鸟子粉 (Ｇｕｉｚｏｔｉａａｂｙｓｓｉｎｉｃａｓｅｅｄ) 5 0ｇ、葡萄糖 1ｇ、ＫＨ2 Ｐ…     

都柏林念珠菌的国内首次分离

都柏林念珠菌是最近从白念珠菌菌种中分离出来的一种具厚壁孢子和芽管试验阳性的独立菌种。４５℃孵育是一种简便、可靠的区分都柏林念珠菌和白念珠菌的方法。我们采用这一方法分析了都柏林念珠菌的临床分离率。结果口腔念珠菌病和健康人口中都柏林念菌的分离率分别为８．８２％和４．７６％,阴道念珠菌病和健康人阴道中都柏林念珠菌的分离率分别为１０．３４％和０。这提示都柏林念珠菌在临床有较高分离率。     

巴西首例HIV阳性患儿口腔分离出都柏林念珠菌

都柏林念珠菌是 1995年最新报道的病原真菌 ,其生物学特性和基因类型有别于白念珠菌 ,主要从ＨＩＶ阳性患者分离出。 1998年 9月至 1999年 3月 ,从 173例 0～ 12岁ＨＩＶ阳性儿童中分离真菌。于舌根部刮取分泌物接种于Ｍｙｃｏｓｅｌ琼脂培养基室温培养 ,出芽酵母转种至土豆葡萄糖琼脂培养基 (ＰＤＡ) ,再转种至显色念珠菌琼脂平板 37℃培养 ,以分离都柏林念珠菌。从 1例 3岁ＨＩＶ阳性、无口腔损害的患儿分离出 4个暗绿色的菌落。 4个菌落均于ＰＤＡ4 2℃培养 4 8小时 ,玉米吐温琼脂培养基 2 7℃培养 2周观察厚壁孢子 ,5 0 %生理盐水马血清…     

奶粉吐温琼脂鉴定白念珠菌的实验研究

目的 改进白念珠鉴定方法。方法 设计奶粉吐温琼脂（ＭＴＡ）可一次鉴定白念珠菌的芽管和顶端厚壁孢子,并选择来源不同的１０３株念珠菌（白念珠菌８８株,克柔念珠菌,季也蒙念珠菌,近平滑念珠菌、热带念珠菌和乳酒念珠菌各３株）与灭活人血清和玉米吐温琼脂相比较。结果 ８８株白念珠菌在ＭＴＡ上能产生芽管的有６９株,在灭活人血清上有７８株。ＭＴＡ上能产生芽管的有６９株,在灭活人血清上有７８株。ＭＴＡ ２４ｈ能产生     

用念珠菌产色培养基从临床标本中快速鉴别念珠菌

白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌是念珠菌病的主要致病菌。常规分离鉴定念珠菌的方法既繁琐且所需时间长 ,迫切需要一种快速简便的实验方法。作者研究应用念珠菌产色培养基 (ＣＨＲＯＭ)筛选念珠菌同时鉴定主要念珠菌 ,取得满意结果。方法 :1 1 5 0份临床样本接种到ＣＨＲＯＭ和沙堡琼脂基 (ＳＧＡ) ,3 7℃培养 48小时。所有ＣＨＲＯＭ上生长的分离菌按菌落形态和产生的色素来鉴定 ;ＳＧＡ上的分离菌作生化和显微镜下形态鉴定。ＣＨＲＯＭ可配制成培养皿 ,4℃保存 2周。结果 :1 1 5 0份样本中有 41 9例培养后有菌落生长。在Ｃ…     

微孔板双探针杂交法快速鉴别都柏林念珠菌和白念珠菌

目的 建立微孔板双探针杂交法,快速鉴别都柏林念珠菌和白念珠菌,并应用于临床分离株的快速鉴定。方法 利用真菌保守区核糖体基因和可变区内转录间隔区基因为靶序列,应用生物素标记的通用引物进行念珠菌DNA的PCR扩增,并将该PCR产物分别与固定在微孔板上的都柏林念珠菌和白念珠菌特异性探针杂交,经酶联显色反应测其A值。结果 能特异地鉴别白念珠菌和都柏林念珠菌标准菌株。对108株常规培养方法从临床标本分离的白念珠菌检测,结果显示106株菌株仅白念珠菌探针检测阳性,另2株菌株仅都柏林念珠菌探针阳性。结论 微孔板双探针杂交法能快速、特异地鉴别都柏林念珠菌和白念珠菌。     

阴道都柏林念珠菌的分离和体外药敏试验

目的：了解都柏林念珠菌在阴道念珠菌病的临床分离率及对常用抗真菌药物的敏感性。方法：通过45℃生长试验，区分都柏林念珠菌和白念珠菌，用微量稀释法测定都柏林念珠菌对氟康唑等6种药物的MIC。结果：都柏林念珠菌在阴道念珠菌病的临床分离率为13．74％，25株都柏林念珠菌的MIC范围：氟康唑0．25～64μg/mL，伊曲康唑0．06～8μg/mL，5-氟胞嘧啶0．25～64μm/mL，酮康唑0．06～8μg/mL，咪康唑0．015～4μg/mL，特比萘芬0．06～8μg/mL。结论：都柏林念珠菌在阴道念珠菌病有较高的临床分离率，多数都柏林念珠菌对常用抗真菌药物敏感，部分都柏林念珠菌可产生剂量依赖敏感或耐药。     

93例女性生殖道感染念珠菌菌种分布及药敏结果分析

目的:明确93例女性生殖道念珠菌感染菌种分布及药敏。方法:收集93例女性生殖道感染患者分泌物,采用Sabouraud琼脂培养基进行菌落培养,血清芽管试验及CHROMagar显色培养基进行菌株的筛选,DL-96 FUNGUS念珠菌鉴定系统进行念珠菌鉴定及药敏试验。结果:菌种构成分布依次为白念珠菌81株(87.10%),光滑念珠菌8株(8.60%),都柏林念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、乳酒念珠菌各1株(1.08%)。白念珠菌对两性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感率为100.00%,其它依次为伏立康唑(93.83%)、氟康唑(85.19%)和伊曲康唑(62.96%)。光滑念珠菌对两性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感率为100.00%,其它依次为伏立康唑(87.50%)、氟康唑(62.50%)和伊曲康唑(25.00%)。结论:女性生殖道感染的念珠菌主要菌种是白念珠菌,敏感率最高的药物为两性霉素B和5-氟胞嘧啶。     

一种快速鉴定光滑念珠菌与热带念珠菌的方法

目的：探讨一种快速检测光滑念珠菌与热带念珠菌的方法。方法：试验菌株经API 20、科玛嘉色原法、玉米吐温琼脂鉴定后,并以传统发酵法检测光滑念珠菌、白念珠菌、热带念珠菌发酵海藻糖情况。采用4％海藻糖液孵育各试验株3小时后用尿糖试纸检测。E－test法测试光滑念珠菌对氟康唑、伊曲康唑的敏感性。结果：光滑念珠菌与热带念珠菌皆可发酵海藻糖,尿糖试纸呈阳性反应,但后者菌落在科玛嘉色原培基为蓝色,在米粉吐温琼脂有假菌丝。结论：采用海藻糖法配合米粉吐温琼脂或科玛嘉色原培养基可以快速简便鉴定光滑念珠菌和热带念珠菌。     

复发性阴道念珠菌病念珠菌的菌种及药敏分析

目的：了解复发性外阴阴道念珠菌病(RVVC)临床分离菌株及其对几种常见抗真菌药物的敏感性：方法：分别采用念珠菌显色培养基和ROSCO纸片扩散法进行RVVC念珠菌菌种鉴定和药敏试验。结果：62株阳性标本中,分离出白念珠菌47株(75．81％),热带念珠菌4株(6．45％),光滑念珠菌2株(3．23％),克柔念珠菌5株(8．06％),其他念珠菌4株(6．45％)．62株念珠菌对4种常用的抗真菌药物,即两性霉素B、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑的敏感率分别为：100．00％(62／62)、88．71％(55／62)、96．77％(60／62)、95．16％(59／62)。结论：RVVC的主要致病菌仍是白念珠菌,但非白念珠菌所占比例呈上升趋势：RVVC分离菌株对咪唑类抗真菌药物仍有较高的敏感率。     

氟康唑对白念珠菌厚壁孢子形成的影响

在医学真菌临床检验中，我们常常发现一些白念珠菌感染患者，治疗前在玉米吐温琼脂上可产生典型的顶端厚壁孢子，而治疗一段时间后这一形态就消失了。这一现象系实验误差、混合感染、还是确实形态发生了改变？同时在奶粉吐温琼脂 (MTA)上我们还观察到一种礼花样结构，这是否为白念珠菌的特征性结构？围绕这两个课题及相关性我们进行了研究。 一、材料和方法 1.材料：① 0.1％ MTA：奶粉 0.1 g,吐温 80 1.0 mL,琼脂 1.5 g,蒸馏水加至 100 mL,0.11MPa 20 min灭菌，无菌分装于 6 cm直径培养皿制成平板，放置 4℃冰箱保存； ② 氟康唑原粉…     

阴道非白念珠菌的PCR-RFLP鉴定

目的对分离自外阴阴道念珠菌病(VVC)患者阴道的常见致病性非白念珠菌进行聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法的鉴定。方法首先采用芽管试验、厚壁孢子试验、法国科玛嘉(CHROMagar)念珠菌显色培养基及API20CAUX酵母菌鉴定系统将分离自VVC患者阴道内的念珠菌菌株鉴定到种,然后采用真菌通用引物将4种常见非白念珠菌(包括光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌和热带念珠菌)进行PCR扩增,并选用MspⅠ和HaeⅢ两种内切酶对扩增产物进行酶切分析。结果在4种非白念珠菌中光滑念珠菌15株(7.50%),近平滑念珠菌7株(3.50%),克柔念珠菌5株(2.50%),热带念珠菌2株(1.00%);PCR扩增后均产生稳定、清晰的条带,扩增产物经MspⅠ,HaeⅢ酶切后分别产生4种和2种特异性带型。结论外阴阴道念珠菌病非白念珠菌中以光滑念珠菌为主;PCR-RFLP方法在鉴定常见致病性非白念珠菌中比较可靠、稳定、特异,但仍有方法繁琐等不足之处。     

上海地区1366例浅部念珠菌病致病菌种分析

目的 分析上海地区1366例浅部念珠菌病的致病菌种构成及分布情况。方法 对1366例儿童与成人浅部念珠菌病的致病菌种进行菌种鉴定：采用科玛嘉平板、API20C AUX等鉴定手段常规鉴定;采用Pal平板、木糖同化试验、45 ℃生长试验鉴定都柏林念珠菌;采用分子鉴定方法鉴定近年发现的新种,包括Candida orthopsilosis、Candida metapsilosis、Candida fermentati、Candida nivariensis、Candida bracarensis。对致病菌种的构成及分布情况进行分析。 结果 1366例浅部念珠菌病的主要致病菌为白念珠菌（占79.0%）,排在2 ~ 4位的依次为近平滑念珠菌（9.5%）、热带念珠菌（2.9%）和季也蒙念珠菌（1.9%）,致病株中包括念珠菌新种Candida orthopsilosis（2株）和Candida metapsilosis（4株）;儿童患者与成人患者的致病菌种构成差异有统计学意义（?字２ = 196.46,P < 0.01）,其中非白念珠菌分离率分别为14.4%和45.8%。结论 白念珠菌仍为浅部念珠菌病的主要致病菌;新种Candida orthopsilosis和Candida metapsilosis可引起浅部念珠菌病。与儿童病例相比,成人病例中非白念珠菌的分离比例明显上升。     

婴幼儿皮肤念珠菌病的致病菌株及药敏试验分析

目的 分析婴幼儿皮肤念珠菌病的致病菌种类及对抗真菌药物的敏感性。方法 收集皮肤念珠菌病患儿病例，对临床分离的致病菌进行常规菌种鉴定，采用琼脂稀释法（药基法）对临床分离的念珠菌进行6种药物（氟康唑、咪康唑、联苯苄唑、益康唑、克霉唑、制霉菌素）敏感性试验，选取9株白念珠菌临床菌株和1株白念珠菌标准菌株，参考NCCLS M27-A推荐的微量液体稀释法界定琼脂稀释法的药敏分界点，分析耐药性。结果 共收集75例皮肤念珠菌病病例，分离到的88株念珠菌均为白念珠菌，用琼脂稀释法所测的MIC范围是：氟康唑1 ～ 256 mg/L，咪康唑0.25 ～ 64 mg/L，联苯苄唑0.5 ～ 64 mg/L，益康唑0.25 ～ 32 mg/L，克霉唑1 ～ 64 mg/L，制霉菌素0.5 ～ 32 mg/L。临床株对唑类药物均有耐药株出现，氟康唑1株，克霉唑4株，益康唑3株，咪康唑5株，联苯苄唑9株。结论 婴幼儿皮肤念珠菌病主要由白念珠菌引起；白念珠菌对5种唑类药物均有耐药株出现，且有交叉耐药现象，对制霉菌素敏感。     

阴道念珠菌病的菌种构成及其体外对抗真菌药物敏感性检测分析

目的:了解阴道念珠菌病的菌种构成及其对4种抗真菌药物的敏感性。方法:采用念珠菌定位显色培养基和真菌鉴定卡(YBC卡)进行念珠菌菌种鉴定,用法国梅里埃公司的真菌药敏试条FUN-ATB2进行药敏试验。结果:从阴道分泌物标本中共培养分离出念珠菌125株,其中白念珠菌98株(78.4%)、近平滑念珠菌14株(11.2%)、热带念珠菌9株(7.2%)、光滑念珠菌4株(3.2%)。4种念珠菌对两性霉素B敏感率达100%,非白念珠菌对5-氟胞嘧啶敏感率为100%,白念珠菌为91.8%。对氟康唑和伊曲康唑,白念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠茵的敏感率分别为79.6%、92.9%、66.7%、75.0%利43.9%、71.4%、22.3%、50.0%。结论:阴道念珠菌感染仍以白念珠菌为主,临床治疗应参考体外药敏试验结果合理选用抗真菌药物,以提高其治愈率和减少耐药株的产生。     

玉米粉液基培养促进白念珠菌厚壁孢子的形成

厚壁孢子的形成是白念珠菌的形态特征之一,也是鉴定白念珠菌的有效方法。以往曾用玉米粉(CM)琼脂培养基观察白念珠菌厚壁孢子的形成,作者通过对147株临床分离念珠菌的检测,认为玉米粉液基中加入牛血清及牛奶更易促进白念珠菌厚壁孢子的形成。     

耐氟康唑白念珠菌两种基因分型方法的比较研究

目的比较钳位均匀电场电泳(CHEF)和限制性核酸内切酶BssHII电泳核型(PFGE-BssHII)分型方法对耐氟康唑白念珠菌基因型的区分能力,探索不同部位、不同地区、不同耐药性菌株DNA核型的差异。方法采用CHEF和PFGE-BssHII分型方法对54株不同来源白念珠菌(氟康唑耐药株16株,剂量依赖型敏感株7株,敏感株31株)进行核型分析。结果54株白念珠菌经CHEF和PFGE-BssHII分别分出20种和37种DNA核型。16株从同一AIDS患者口咽部念珠菌病多次发作中分离的白念珠菌对氟康唑的敏感性发生变化,通过两种方法检测的DNA核型完全相同,显示为同一菌株,且核型不随耐药性的变化而改变。结论PFGE-BssHII方法区分DNA核型的能力高于CHEF。本研究白念珠菌菌株间的基因型具有个体差异,但与分离的部位、不同地区来源及抗真菌药耐药性间差异无显著性。     

白念珠菌芽管特异性抗原的研究

运用ⅡＦ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫印迹技术，证实８株临床分离的白念珠菌芽管表面存在芽管特异性抗原。白念珠菌菌丝相胞壁提取物中含有比孢子相更多的、不同的蛋白成份；发现白念珠菌菌丝相胞壁提取物中有一分子量大约为３９ ０００蛋白抗原成份很可能是白念珠菌芽管特异性抗原；认为白念珠菌孢子相和其它念珠菌孢子相胞壁中有以隐蔽状态存在的芽管抗原成份。     

用套式PCR法诊断系统性念珠菌病时血清优于全血

用ＰＣＲ法诊断系统性念珠菌病既可以使用血清 ,也可以使用全血 ,但比较这两种类型样本检测的结果还未见正式报道。作者设计了含有 5对特异性内引物的嵌套式ＰＣＲ方法 ,可以扩增白念珠菌、热带念珠菌、假热带念珠菌、克鲁斯念珠菌和光滑念珠菌的核糖体ＲＮＡ(ｒＲＮＡ)的特异性靶序列。真菌特异性通用引物为 :ＩＴＳ1 :ＴＣＣＧＴＡＧＧＴＧＡＡＣＣＴＧＣＧＧ ;ＩＴＳ4:ＴＣＣＴＣＣＧＣＴＴＡＴＴＧＡＴＡＴＧＣ。白念珠菌的内引物为 :ＣＡＬ1 :ＡＡＣＴＴＧＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＧＧＣ ;ＣＡＬ3 :ＴＧＧＡＣＧＴＴＡＣＣＧＣＣＧＣＡ…     

都柏林念珠菌和白念珠菌的致病性比较研究进展

都柏林念珠菌是一种新近分离鉴定的条件致病念珠菌,以往曾被误认为是白念珠菌,但实际上是一个独立的菌种,由于该菌常引起免疫缺陷者的感染,所以近年来颇受关注。本文就近年对该菌在致病性方面的研究及与白念珠菌致病性的比较进行了综述。