小鼠细胞外基质与颗粒子宫腺细胞发育的关系

采用免疫组织化学ＬＳＡＢ法对妊娠小鼠胎盘进行研究，显示Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ型胶原蛋白，纤维粘连蛋白及层粘连蛋白的分布及其在妊娠过程中的变动情况，从而了解细胞外基质与颗粒子宫腺细胞（ＧＭＧ细胞）的关系。结果表明，妊娠１６天左右大部分细胞外基质在子宫腺细胞区出现高峰，这一时期正是ＧＭＧ细胞数量最多而且分化最为成熟的时期。这一结果提示：细胞外基质与ＧＭＧ细胞增殖及分化等方面关系密切。     

瘢痕子宫妊娠的孕期保健与分娩期处理

近年来,二孩政策全面开放,剖宫产术后再次妊娠以及高龄孕产妇人数快速增长,随之而来的是母儿不良妊娠结局的增加。明确瘢痕子宫再次妊娠所存在的风险,孕前咨询评估,加强孕期管理及分娩期处理,是保障母儿安全,提高产科质量的关键。     

瘢痕子宫妊娠的孕期保健与分娩期处理

近年来,二孩政策全面开放,剖宫产术后再次妊娠以及高龄孕产妇人数快速增长,随之而来的是母儿不良妊娠结局的增加。明确瘢痕子宫再次妊娠所存在的风险,孕前咨询评估,加强孕期管理及分娩期处理,是保障母儿安全,提高产科质量的关键。     

子宫蜕膜NK细胞和妊娠

子宫蜕膜中NK细胞是妊娠早期出现最多的淋巴细胞,与外周NK细胞(CD16+CD56-)相比,子宫NK细胞表面抗原通常为CD56+CD16-mCD3-.在着床过程中,NK细胞的活性一般处于抑制状态.从子宫NK细胞的细胞毒性作用和分泌的细胞因子阐述其在妊娠期可能起的作用,提示子宫NK细胞与反复自然流产、异位妊娠及先兆子痫的关系.说明在复杂的母胎界面免疫内分泌网络中,子宫NK细胞能影响滋养细胞侵入过程和胎盘的生长发育.     

子宫内的免疫学相关细胞

叙述巨噬细胞及天然杀伤（ＮＫ）细胞等免疫学相关细胞在子宫内的分布以及在妊娠期间子宫内的重要新分布并讨论了它们的趋化、分化、活化及其功能。     

妊娠晚期子宫平滑肌细胞融合体的形成

分娩期子宫平滑肌作为一个整体 ,收缩与舒张协调地交替进行 ,形成功能上的合胞体 [1 ] ,但其结构上是否形成细胞融合体 ,鲜见报道。在以往研究子宫平滑肌细胞膜缝隙连接(gap junctions,GJS)及细胞膜通透性变化时 ,曾观察到子宫体部平滑肌细胞有融合体形成 [2 ,3 ] ,提示我们进行子宫平滑肌细胞融合体的研究 ,并探讨其与分娩发动的关系。一、资料与方法1.资料来源与分组 :收集 1996年 3月～ 1999年 12月我院剖宫产手术分娩者 2 6例 ,分临产前、已临产、产后三组 ,前两组每组 12例、产后组 2例。分组标准 :(1)临产前组 :电子宫缩监护仪示无…     

妊娠滋养细胞肿瘤的子宫血管结构特点

妊娠滋养细胞肿瘤的子宫血管结构特点万小云石一复妊娠滋养细胞肿瘤（ＧＴＮ）起源于胎盘绒毛的滋养细胞，该肿瘤具有不同于人类其它实体肿瘤的一般特性，它本身并无固有的血管，但滋养细胞极易侵袭并破坏邻近血管以获取营养，临床上较早即出现远处血行转移灶。本研究用血...     

利用小鼠模型研究子宫内膜异位症者在位内膜种植能力

目的:探讨子宫内膜异位症(EMs)在位内膜异位种的植能力。方法:EMs组及非内异症(NEMs,宫颈原位癌)组患者各20例,分别取分泌晚期子宫内膜,再分别以0.2g、0.4g、0.6g种植量腹腔注射方法建成EMs小鼠模型,5d后处死,测量病灶大小,进行HE染色检测异位种植率及免疫组化法检测芳香化酶表达。结果:EMs组病灶数(3.9±0.3)高于NEMs组病灶数(3.2±0.1),P<0.05;0.2gEMs组种植率(60%)高于NEMs组(15%),P<0.01;0.4g的EMs组与NEMs组比较(100%vs85%)及0.6gEMs组与NEMs组比较(100%vs100%)无统计学差异,P>0.05。病灶体积:EMs组0.2g(2.3±0.7mm3)、0.4g(11.4±2.1mm3)、0.6g(21.6±3.4mm3)分别大于相应的NEMs组(0.4±0.2mm3、5.8±0.7mm3、12.0±2.5mm3),P<0.05。组内不同内膜种植量种植率比较0.2gvs0.4g,P<0.05;0.4gvs0.6g,P>0.05。光镜下未观察到EMs组与NEMs组人在位内膜有明显的形态学差异,鼠内异位病灶EMs组腺体结构较完整,NEMs组仅见少量残存的腺体细胞。芳香化酶表达EMs组在位内膜(2.10±1.12)及异位病灶(7.71±3.08)均高于NEMs组在位内膜(0)及异位病灶(5.80±3.01),P<0.05。结论:EMs在位内膜种植能力强于正常子宫内膜,芳香化酶能增强在位内膜的种植能力。     

绒毛膜GnRH对子宫内组织和妊娠的作用

活体和离体研究支持以下假设,即一个旁分泌轴(绒毛膜 GnRH→甾体→PG)参与妊娠和内分泌功能的生理性调节。此轴与 CRH-PG 轴相互作用,可能也与子宫内 TRH、ATⅡ、OT、PRL 和抑制素活性相互作用。“异位”下丘脑因子这一术语已可废弃。已经确定,绒毛膜GnRH 参与hCG、甾体和 PG 类物质生成的生理性调节,以及 CRH、抑制素和 PRL 等影响绒毛膜 GnRH 的生成、作用和代谢。已经认识到绒毛膜 GnRH 轴的中断能够损害妊娠的结局。     

Immunoglobulin G in the decidua basalis and metrial gland of the pregnant mouse uterus

The distribution of immunoglobulin G (IgG) in the decidua basalis and metrial gland of the mouse uterus at days 10 and 14 of pregnancy has been investigated using immunohistochemical methods. IgG was found in the intercellular spaces but none was found in decidual cells, stromal cells of the metrial gland or granulated metrial gland cells. These results differ from those of other studies which have localised IgG in the cytoplasm of rat granulated metrial gland cells.     

Patterns of expression of Bax, Bcl-2 and Bcl-x(L) in the implantation site in rat during pregnancy

The uterine endometrium responds to blastocyst implantation with extensive proliferation and differentiation of stromal cells into decidual cells, forming the antimesometrial and mesometrial decidua. These undergo regression by apoptosis but as this process occurs at different time periods suggest that there is spatially dependent temporal control of apoptosis in these specific regions. To elucidate the role of the mitochondrion-dependent signalling pathway in tissue regression, we investigated the spatial and temporal pattern of expression of the Bcl-2 family members in uterine tissues of the implantation site, from the post-implantation period to parturition. Furthermore, the activities of the initiator caspases-8 and -9, and of the executioner caspase-3 were determined. Overall Bax and Bcl-2 were expressed from day 8 till day 19, whilst Bcl-x(L) was extinguished by day 16. In the antimesometrial and in the mesometrial decidua both Bcl-2 and Bax declined from days 10 to 12. In the latter Bcl-2 immunoreactivity decreased till the end of pregnancy, whilst for Bax a constant level remained thereafter. The pattern of variation of enzymatic activities throughout pregnancy for all the enzymes was similar, increasing from days 10 to 14 and decreasing towards the end of pregnancy. The increased levels of active caspase-9 correlated with Bax/Bcl-2 and Bcl-x(L) expression suggesting that the apoptotic mitochondrion-dependent pathway is involved in decidual regression during pregnancy progression.     

小鼠子宫内膜上皮细胞表面肝素受体及性甾体激素对它的影响

取5～6周龄ICR 小鼠子宫,用酶消化,分离出上皮细胞,并接种于24孔培养碟中,待细胞长成片后,加入不同剂量[~3H]标记的肝素孵化。实验结果表明,上皮细胞表面肝素受体量,随[~3H]肝素含量增加而增加,直至饱和为止。另外,上皮细胞上肝素受体量也与[~3H]标记肝素孵化时间相关。随着孵化时间增加,其表面受体含量也增加,30min 基本饱和。在培养液内加入0.045μmol/L 及0.09μmol/L 雌二醇,其结果表明,雌二醇可增加小鼠子宫内膜上皮细胞表面肝素受体的含量,但两种剂量组间未见明显差异。     

γ-氨基丁酸(GABA)及其A型受体π亚基在植入前小鼠子宫的动态表达

目的:探讨γ-氨基丁酸(GABA)及其A型受体π亚基在胚胎植入中的作用。方法:①Real-time PCR方法检测π亚基mRNA在妊娠小鼠第1￣5日子宫组织的表达变化。②免疫组织化学方法检测GABA和π亚基在妊娠小鼠第1日、第4日子宫组织的表达。结果:①π亚基mRNA在妊娠小鼠第1￣5日子宫组织均有表达,并随妊娠进程逐渐降低,第1日、第2日表达较强,第3日开始下降,第4日、第5日显著下降(P<0.01),且第5日植入位点组织明显低于植入位点旁组织(P<0.01);②GABA和π亚基蛋白在妊娠第1日、第4日小鼠子宫内膜均有表达,第4日时在腔上皮的表达降低,而在基质细胞的表达升高;③第1日时,π亚基蛋白在子宫肌层有表达,但第4日时却不再表达。结论:①GABA和π亚基可能参与调节小鼠植入前期子宫内膜的容受性改变;②π亚基可能还参与植入前期子宫肌肉收缩,调节胚胎在子宫的空间分布。     

米非司酮对围植入期小鼠子宫内膜中STAT3表达的影响

目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)在小鼠胚泡植入过程中的生物学作用。方法:将孕鼠随机分为米非司酮组、溶剂组和空白对照组,用免疫组织化学技术和图像分析方法检测各组小鼠孕3～8 d子宫内膜中STAT3的动态表达,并对其进行半定量分析。结果:溶剂组和对照组小鼠子宫内膜中STAT3的表达在孕3 d明显增强,孕4 d达到峰值,且溶剂组和对照组间在孕3～8 d各时间点的表达差异无统计学意义;米非司酮组STAT3的表达较2个对照组显著降低(P<0.01),在孕4 d亦无表达高峰。结论:STAT3是介导胚泡植入的重要因子之一,米非司酮可能通过抑制孕激素与其受体结合而下调STAT3的表达,影响子宫内膜容受性的建立,阻碍胚泡顺利植入。     

骨髓间充质干细胞条件培养液促进小鼠卵母细胞体外成熟的研究

目的:研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)条件培养液对小鼠未成熟卵母细胞体外成熟、受精及胚胎发育的影响。方法:分离、培养小鼠MSC,获取MSC条件培养液(conditioned medium of MSC,CM)。收集小鼠生殖泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,根据有无完整颗粒细胞层包裹颗粒细胞-卵母细胞复合物(cumulus-oocyte complex,COC)分为2类,分别在4种培养基(CM、DMEM、α-MEM、HTF)中培养不同时间,观察卵母细胞核成熟情况,荧光标记后激光共聚焦检测皮质颗粒(cortical granules,CG)分布和含量变化;体外受精后观察受精率和囊胚形成率。结果:2类COC卵母细胞的成熟率CM组明显高于DMEM组、α-MEM组、HTF组(P<0.01);体外受精率和囊胚形成率CM组明显高于DMEM组、HTF组(P<0.01),与α-MEM组和体内成熟组间差异无统计学意义(P>0.05);CM组卵母细胞内CG分布和含量变化与核成熟同步。结论:CM能使小鼠卵母细胞核、质同步成熟,提高了成熟率和卵母细胞质量。     

米非司酮对小鼠卵丘颗粒细胞超微结构的影响

目的:观察米非司酮对小鼠卵丘颗粒细胞超微结构的影响。方法:雌性昆明小鼠40只,随机均分为4组:对照组(A组),米非司酮0.048mg/kg组(B组)、0.143mg/kg组(C组)、0.429mg/kg组(D组)。4组动物均于动情前期一次灌胃给药,10h后取其双侧卵巢组织,透射电镜观察4组小鼠成熟卵泡内卵丘颗粒细胞超微结构的变化。结果:与A组相比,B组小鼠卵丘颗粒细胞的间隙变宽,部分线粒体水肿明显。C组细胞外形不规则,细胞间隙宽,可见髓样小体,线粒体更加肿胀,呈空泡状。D组细胞胞浆内有凋亡现象出现,胞浆内可见部分凋亡小体,细胞核形态不规则。结论:米非司酮可损伤小鼠成熟卵泡中卵丘颗粒细胞超微结构,随着剂量的增加,凋亡现象明显。     

盐酸克仑特罗对小鼠胚胎体外发育的影响

目的:探讨盐酸克仑特罗对小鼠1-细胞胚胎和2-细胞胚胎体外发育的影响。方法:获取小鼠1-细胞和2-细胞胚胎,分别与盐酸克仑特罗10 ng/mL,3 ng/mL和1 ng/mL的3个剂量组共培养,观察胚胎各阶段的发育情况并计算胚胎的发育率。结果:1ng/mL和3ng/mL组的1-细胞小鼠胚胎,从4-细胞期到囊胚阶段的发育率与对照组相比差异显著(P<0.05),3 ng/mL组显现出比1ng/mL组更强的抑制作用(P<0.01),10 ng/mL组,2-细胞期就与对照组有差异(P<0.05,其中 4-细胞至囊胚阶段P<0.01),囊胚率只有2.4％。10 g/mL组及3 ng/mL组的2-细胞小鼠胚胎,分别从4-细胞期和8-细胞期与对照组相比差异显著(P<0.05),1 ng/mL组的各个阶段胚胎发育率与对照组相比未见统计学差异(P>0.05)。培养液中含有盐酸克仑特罗使胚胎的粗颗粒增多,部分印裂球碎裂、退化。结论:盐酸克仑特罗对小鼠胚胎的体外发育有毒性作用并呈一定的剂量效应。盐酸克仑特罗使1-细胞小鼠胚胎被抑制在2-细胞期,对处于晚2-细胞期胚胎的影响明显降低。     

激活素-抑制素-卵泡抑素系统对小鼠卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育潜能的影响机制

目的:探讨激活素-抑制素-卵泡抑素(ACT-INH-FS)系统在小鼠生发泡(GV)期卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育中的的影响机制。方法:取小鼠GV期卵母细胞,随机分成8组,A组:100ng/ml激活素A(ACTA);B组:100ng/mlACTA+100ng/ml卵泡抑素(FS);C组:100ng/ml抑制素A(INHA);D组:100ng/mlINHA+100ng/mlFS;E组:100ng/mlACTA+INHA;F组:100ng/mlACTA+100ng/mlINHA+100ng/mlFS;G组:100ng/mlFS;H组(对照组):人输卵管液(HTF)+10%血清蛋白代用品(SPS)。体外培养16-18h后,MⅡ期卵母细胞进行体外受精,观察ACTA-INHA-FS对GV期卵母细胞生发泡破裂(GVBD)、第一极体(PB1)排出及受精率、卵裂率、囊胚形成率的影响。使用MitoTrackerRed荧光探针对A组及E组MⅡ期卵母细胞内活性线粒体数目及分布进行检测。结果:与H组比,A、E、G组GVBD发生率、A、C、E组的MⅡ期卵母细胞发生率和4-细胞、8-细胞及囊胚形成率均显著增加,C组受精率下降,P均<0.05。A、E组卵母细胞内线粒体形态半周型及弥散型比例明显高于H组,整体分布存在显著性差异(P<0.01)。结论:①ACTA、INHA对GV期卵母细胞体外成熟及胚胎发育潜能具有显著的促进作用,并可以被FS所拮抗。②在ACTA/INHA缺乏或不足的条件下,FS可出现ACTA样作用,促进卵母细胞成熟。③ACTA-INHA对体外成熟卵母细胞核质成熟同步化具促进作用。