反义表皮生长因子受体RNA对U251胶质瘤细胞生长的抑制作用

目的探讨反义靶向表皮生长因子受体（EGFR）在体内外对U251细胞生长抑制作用。方法构建反义EGFR的pcDNA3表达质粒并进行了脂质体介导的U251人脑恶性胶质瘤细胞系基因转染。应用RT-PCR检测EGFR表达水平，应用MTT法、流式细胞术、Matrigel基质生长实验和Transwell方法评价肿瘤细胞转染前后的生物学行为。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导反义EGFR基因治疗对U251细胞生长抑制作用。对肿瘤组织应用免疫组织化学的方法进行EGFR、PCNA和GFAP表达比较。结果脂质体介导反义EGFR可显著抑制U251细胞ECFR表达，MTT法分析显示反义EGFR转染组胞生长抑制率为68％；与对照组和pcDNA3转染组比较，细胞周期分析结果表明p-anti-hEGFR转染组G0～G1期细胞数没有明显变化，进入S期的细胞数较对照组减少了，而进入G2期细胞则增加。Matrigel基质生长实验显示对照组和peDNA3转染组细胞呈正常形态贴壁生长。而p-anti-hEGFR转染组细胞不能贴壁生长，呈团块状簇集生长。Transwell方法显示肿瘤细胞的体外侵袭能力显著下降。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示反义EGFR RNA可以显著抑制皮下肿瘤生长，组织病理学分析显示治疗组EGFR表达下降而GFAP表达上调。结论反义EGFR可以显著抑制U251细胞的EGFR表达，在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用。     

表皮生长因子受体单克隆抗体对胶质瘤U87细胞放疗敏感性的影响

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体对胶质瘤放疗敏感性的影响及其机制.方法 U87胶质瘤细胞体外培养,建立小鼠的皮下和颅内胶质瘤动物模型,予以尼妥珠单抗或西妥昔单抗或联合两种抗体治疗,同时予以放疗,取各组实验肿瘤标本,计算相对肿瘤体积,比较治疗前后卫星肿瘤频率变化以及细胞增殖,比较各组以上结果的差异.结果 尼妥珠单抗和西妥昔单抗可增强体内U87MG肿瘤放疗敏感性,h-R3tRT和C255tRT组的中位RTV分别为2.2及2.8,与对照组中位RTV3.5比较差异有统计学意义.小鼠接受抗体的治疗后,卫星肿瘤数量减少了40％～80％,h-R3tRT组及C255tRT组卫星肿瘤频率分别为(9、1～25)和(4、0～17),与对照组卫星频率(18、3～40)比较差异有统计学意义.联合组尼妥珠单抗加强了放疗引起的增殖抑制为56.5％,而单独抗体组和单独放疗组分别为39.9和19.9％,而西妥昔单抗无论单独使用(7.8％),还是与放疗联用(21.7％),不产生明显的细胞增殖抑制作用.结论 EGFR单克隆抗体可增强U87MG细胞的放疗敏感性.     

前列腺癌细胞中表皮生长因子受体的表达和激活

目的：探讨前列腺癌（ＰＣａ）细胞中表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达和激活及其与雄激之间的相互作用。方法：采用免疫沉淀和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法,检测雄激素依赖人ＰＣａ细胞株ＬＮＣａＰ及雄激素非依赖人ＰＣａ细胞株ＤＵ－１４５、ＰＣ－３中ＥＧＦＲ的表达和磷酸化激活,测定雄激素对ＬＮＣａＰ ＥＧＦＲ表达和激活的影响。结果：在ＤＵ－１４５和ＰＣ－３中,ＥＧＦＲ表达和激活的基础与表皮生长因子（ＥＧＦ）处     

乳腺癌表皮生长因子受体的检测及意义

表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）具有酪氨酸激酶活性，与表皮生长因子结合激活后，具有促有丝分裂作用而增强细胞分裂。我们以免疫组化法对４６例原发性乳腺癌检测其ＥＧＦＲ表达，结果显示其阳性表达与组织学分类无关（Ｐ＞０．０５），与组织学分级有显著相关，恶性程度越高，阳性率越高（Ｐ＜０．０１），与组织学分级指标中的有丝分裂核和核的多形性二项显著相关（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１），提示ＥＧＦＲ与乳腺癌细胞的生长分化密切相关。认为ＥＧＦＲ可能对预测乳腺癌的潜在恶性程度有较重要的参考价值，在临床上可能预测出某些一般预测因素未能确认的早期复发预后不良患者。     

膀胱移行细胞癌表皮生长因子及其受体表达和意义

目的 探讨表皮生长因子(EGF)、EGF受体(EGFR)在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及意义。方法 用免疫组化ABC法对56例BTCC标本和20例癌旁组织EGF、EGFR进行研究。结果 20例癌旁正常膀胱组织中EGF，EGFR几乎不表达；56例ETCC标本中EGF，EGFR表达明显，与正常组比较有显著性差异(P＜0．01)，不同分期和分级BTCC中的阳性表达率均存在显著性差异(P＜0．05)。结论 EGF，EGFR的检测可以作为判断BTCC预后的一个指标。     

大鼠血清表皮生长因子和睾丸表皮生长因子受体与精子生成的相关性

目的　探讨血清表皮生长因子 ( EGF)和睾丸组织表皮生长因子受体 ( EGF-R)与大鼠精子生成的关系。　方法　 40只性成熟期雄性 SD大鼠 ,随机分为假手术组( SOG)、去颌下腺组 ( SG)、去颌下腺加腹腔注射 EGF I组 ( SG-EGF I)和 II组 ( SG-EGFII) ,每组 1 0只。SG-EGF I和 SG-EGF II分别腹腔内注射 EGF0 .2 5和 0 .50 μg·kg- 1·d- 1。大鼠常规喂养 48d,断头取血和睾丸。放射免疫法检测血清 EGF水平 ,病理检查睾丸生精功能和免疫组织化学检测睾丸组织 EGF-R的表达。　结果　大鼠血清 EGF水平SG-EGF I组明显下降 ( P<0 .0 5) ,SG组有非常显著下降 ( P<0 .0 1 ) ;睾丸生精功能中、重度障碍 ;间质细胞 EGF-R表达明显减少 ( P<0 .0 5)。补充不同剂量的 EGF对睾丸生精功能有不同影响。 SOG、SG-EGF I和 SG-EGF II大鼠睾丸生精细胞、支持细胞及间质细胞 EGF-R表达无显著性差异 ( P>0 .0 5)。　结论　EGF对精子发生具重要的调控作用 ,血清 EGF水平和睾丸间质细胞 EGF-R高表达与睾丸生精功能呈正相关     

合成角质细胞生长因子活性短肽促进表皮细胞增殖的实验研究

目的 应用噬菌体随机7肽库筛选角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor,KGF)的关键序列,进行KGF活性短肽的调整和合成,并研究其对表皮细胞增殖的作用。方法 以KGF单克隆抗体为靶,筛选噬菌体随机7肽库,获得KGF的特异性序列,并进行序列调整。用免疫荧光法检测KGF活性短肽的表皮细胞亲和力。用CCK-8法检测KGF活性短肽对表皮细胞增殖的影响。用RT-PCR法和Western-blot法检测表皮细胞上特异性受体KGFR的表达水平。结果筛选噬菌体随机7肽库,获得2个与KGF相似的特异性序列,合成获得2个KGF活性短肽,并纯化至98%纯度,短肽的C端进行氨基化封闭,N端进行罗丹明激光染料标记。免疫荧光检测结果显示,2个KGF活性短肽均能够与表皮细胞相结合。CCK-8检测结果显示,与阴性对照组相比,2个KGF活性短肽能够促进表皮细胞增殖,并呈浓度依赖性。RT-PCR和Western-blot检测结果显示,2个KGF活性短肽组中表皮细胞表达KGFR增强。结论 从噬菌体随机7肽库中筛选到2个KGF的关键序列,合成的2个KGF活性短肽能够与KGFR相结合,并增强KGFR的表达,从而促进表皮细胞增殖,有望应用于促进创面愈合。     

表皮生长因子和表皮生长因子受体在隐睾症男童表达的改变及其临床意义

目的:探讨表皮生长因子(EGF)及表皮生长因子受体(EGFR)在隐睾症男童的表达改变及其临床意义。方法：用放射性免疫法测定血清EGF，免疫组化法测定EGFR表达。结果(1)5—9岁及10—14岁隐睾症男童血清EGF水平显著低于正常男童(P＜0．01)，(2)腹腔隐睾症患者的血清EGF水平比腹股沟管内及腹股沟管外隐睾症患者显著为低，(3)睾丸固定术后6个月血清EGF水平显著增高(P＜0．05)，(4)2—4岁患者间质细胞中EGFR的表达显著低于5岁以上的患者(P＜0．05)，(5)腹腔隐睾症及腹股沟管内隐睾症患者的EGFR阳性表达显著低于腹股沟外隐睾症患者(P＜0．01)。结论：EGF及EGFR的表达可能和年龄及睾丸位置有关。睾丸固定术可改善隐睾症男童的EGF及EGFR的表达。     

抗表皮生长因子受体单抗基因治疗胰腺癌的实验研究

目的EGFR靶向治疗和AAV介导的基因治疗在胰腺癌治疗方面具有广泛前景。本实验将上述两种手段相结合，构建表达人抗EGFR单链可变区抗体的rAAV载体，并筛选出对抗EGFR治疗敏感的胰腺癌细胞株。方法以包含人IX因子基因的rAAV载体中的FIX基因替换成目的基因，转染293细胞，WesternBlot法检测目的蛋白：同时将C225作用于六株胰腺癌细胞，通过CCK一8法测定生长曲线，P1染色法及AnnexinV-FITC试剂盒检测细胞凋亡。结果WesternBlot法检测到目的条带；生长曲线显示C225仅对AsPC-l的生长有明显的抑制作用（P〈0.01），Annexin V-FITC试剂盒可检测C225引起ASPSl细胞的早期凋亡（P〈0.05）。结论rAAV载体构建成功，并在293细胞中获得表达；ASPSl对C225的敏感性明显高于其它五株胰腺癌细胞。     

反义表皮生长因子受体与p53基因联合治疗脑胶质瘤

基于前期研究我们发现不论是表皮生长因子受体(EGFR)扩增/过表达或p53基因突变率均随星形细胞瘤的恶性程度增高而增高[1],体外实验也表明联合应用反义EGFR RNA及p53基因转染胶质母细胞瘤细胞株对抑制细胞增殖和诱导凋亡的作用显著,较单独应用其中之一为强[2],为此,我们进行了体内实验.     

非小细胞肺癌中表皮生长因子受体基因拷贝的检测及其临床意义

目的 检测国人非小细胞肺癌标本中表皮生长因子受体(EGFR)基因高拷贝的发生率及与临床特征的关系.方法 236例非小细胞肺癌标本制作成组织微阵列,使用Vysis公司的荧光原位杂交探针检测EGFR基因拷贝数.结果 193例标本得到结果 ,检测到EGFR基因高拷贝81例(占42.0%),其中42例(21.8%)为高多倍体,39例(20.2%)为基因扩增.其发生与病理、分期、性别、吸烟等临床特征无明显相关,与患者的1-3年生存率无明显相关.结论 国人肺癌中EGFR基因拷贝数的分布情况与西方人类似,与临床特征及预后无明显相关.     

肝细胞生长因子受体和表皮生长因子受体在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨肝细胞生长因子受体(Met)及表皮生长因子受体(EGFR)在胰腺癌临床病理和生存预后中的意义.方法 回顾性分析1995至2005年间收治的70例胰腺癌患者的临床病理数据及随访资料,以免疫组织化学染色法(EnVision法)检测Met和EGFR在胰腺癌病理石蜡组织中的表达水平,分析其与临床病理指标的关系,并探讨两种受体表达水平之间的相关性;对总生存时间进行Kaplan-Meier生存分析及相关风险因素的Cox回归检验.结果 Met和EGFR与胰腺癌TNM临床分期、肿瘤大小、血管侵犯相关(P＜0.05).Met和EGFR的表达水平呈正相关(rp=0.658,P＜0.05),两者的表达水平与患者生存时间相关(P＜0.05).Met为影响预后的独立危险因素.结论 Met和EGFR与胰腺癌的生物学行为及临床预后相关;两种受体存在相关性.胰腺癌的靶向治疗策略应兼顾Met及EGFR.     

表皮生长因子受体、erbB癌基因和膀胱癌

表皮生长因子受体为表皮生长因子和转化生长因子-α膜受体,它的过表达见于人类肿癌,本文综述了表皮生长因子的生理效应,erbB癌基因产物之间的关系以及erbB癌基因状态及其产物表达与膀胱癌的生物学行为的关系.同时对有关方法问题也作了阐述。     

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白2-胶质瘤细胞表皮生长因子受体信号网络新的调控靶点

目的 确定富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白2(LRIG2)是胶质瘤细胞系GL15中EGFR信号通路新的调控靶点.方法 培养胶质瘤细胞系GL15细胞,经表皮生长因子(EGF)100μg/L,AG1478 10 μmol/L,放线菌酮(CHX)10 mg/L体外干预后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot测定LRIG2 mRNA和蛋白表达的时间效应变化.结果 随着EGF作用时间的延长,LRIG2 mRNA先上升后恢复至正常水平.EGF作用后,表皮生长因子受体(EGFR),磷酸化EG-FR(pEGFR)均先上升后下降,LRIG2蛋白先下降,在30min时上升,120min下降至原水平的50%.CHX作用1.5 h后,再加入EGF刺激,可见LRIG2蛋白60 min降至原水平的50%.而AG1478作用1 h后,再用EGF刺激,EGFR未受明显影响,pEGFR被明显抑制,LRIG2蛋白水平变化不明显.结论 EGFR活化后可导致LRIG2 mRNA表达上升,LRIG2蛋白合成增加.     

膀胱肿瘤表皮生长因子和受体表达的意义

表皮生长因子（ＥＧＦ）以尿液中浓度最高［１］。表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）是细胞恶变的标志。为了解ＥＧＦ、ＥＧＦＲ在膀胱肿瘤中的表达及意义,我们采用免疫组化技术对９６例膀胱肿瘤和１０例正常膀胱粘膜进行了研究。１．资料和方法：组织标本系本院和解放军第１５３医院１９７５～１９９４年间手术及电切的膀胱肿瘤组织。其中乳头状瘤１５例,移行细胞癌８１例。１０例正常粘膜来自非泌尿系疾患者群。标本常规ＨＥ染色,进行病理组织学分类,判别分化程度,浸润深度。ＡＢＣ免疫组化染色,分别作二种抗体染色的阳性对照和磷酸盐缓…     

转化生长因子和表皮生长因子受体在人膀胱癌中的表达

通过分子杂交方法，对膀胱癌产体肿瘤（人）进行ＴＧＦα，ＴＧＦβ和ＥＧＦＲ ｍＲＮＡ表达的研究。结果显示：９例膀胱癌均有ＴＧＦαｍＲＮＡ不同程度的表达，１例癌０旁正常对照未见表达。５对样品（肿瘤和癌旁正常组织自身对照）ＴＧＦββｍＲＮＡ均有表达，其中４例肿瘤样品比自身癌旁正常组织对照量更高。９例肿瘤样品中４例ＥＧＦＲ高表达，均为恶性程度高的肿瘤。由此推测：ＴＧＦαｍＲＮＡ高表达是肿瘤发生发展的早期表     

表皮细胞生长因子和受体在胎儿肠道细胞中的表达特征及其意义

目的研究表皮细胞生长因子(EGF)及其受体(EGFR)在胎儿和成人小肠组织中的表达特征以及可能的生物学意义.方法21例被测标本中包括不同胎龄的胎儿小肠组织19例和成人小肠组织2例.用免疫组化方法和病理技术确定这两种蛋白在胎儿和成人小肠组织中的定们和表达量的变化规律.结果EGF及其受体在不胎龄的胎儿和成人小肠组织中都有阳性表达.随着胎儿生长发育,小肠组织中EGF和EGFR的蛋白含量逐渐啬,这一变化趋势一直保持到成人皮肤组织中,其中EGF蛋白主要存在于小肠粘膜上能上能下细胞、粘腊下层的血管内皮细胞内和浆膜上皮细胞的胞浆和胞外基质中,EGFR则分布于这些细胞的细胞膜上.结论EGF的生长发育、结构和功能的维持以及损伤后的修复.     

放射性碘标记表皮生长因子核素靶向治疗乳腺癌的实验研究

目的　观察放射性核素碘 (13 1I)偶联表皮生长因子 (EGF)对人乳腺癌裸鼠移植瘤的作用 ,探讨其靶向治疗乳腺癌的有效性和可行性。方法　氯胺 T法碘标EGF和人血清白蛋白 ;建立表达表皮生长因子受体 (EGFR)的人乳腺癌荷瘤裸鼠模型 ,36只裸鼠模型分为 6组 ,分别为阴性对照组、阳性对照组、13 1I EGF静脉组、13 1I 白蛋白组、13 1I组和13 1I EGF瘤内注射组 ,每组 6只。观察肿瘤生长增殖情况及放射性核素碘标EGF对正常组织脏器的放射毒副作用。结果　自第 1次给药后第 7天至第2 6天各时间段 ,13 1I EGF静脉和瘤内注射组肿瘤体积与阴性对照组、13 1I组及13 1I 白蛋白组肿瘤体积差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;13 1I EGF静脉和瘤内注射组抑瘤率分别为 82 0 %和 80 7% ,与13 1I组和13 1I 白蛋白组比较 (抑瘤率分别为 7 4 9%、6 91% ) ,差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;光学显微镜和透射电镜下见13 1I EGF静脉和瘤内注射组肿瘤细胞发生了一系列不可逆损害变化 ;未发现肝、肾和骨髓非特异性放射损伤。结论　经EGF转载的13 1I对人乳腺癌裸鼠移植瘤有明显抑制肿瘤细胞增殖生长的作用 ,无明显毒副作用。