游离亚油酸对胰腺腺泡细胞的影响及其机制的探讨

目的 探讨游离亚油酸对胰腺腺泡细胞的影响及其可能的机制。方法 分离胰腺腺泡细胞，分别与0．1、0．5、1．0mmol／L亚油酸共同孵育30、60、90min，测定细胞的LDH释放率，DNA片段梯度分析腺泡细胞凋亡，流式细胞仪测定细胞凋亡率，Western blot检测腺泡细胞PKC的膜转位，激光共聚焦测定细胞内钙的变化。结果腺泡细胞与亚油酸共同孵育后，台盼蓝染色显示存在细胞损伤，LDH释放率与亚油酸呈时间和剂量依赖关系。细胞总DNA凝胶电泳结果显示1．0mmol／L亚油酸可出现DNA梯状条带，证明存在细胞凋亡。同时，腺泡细胞凋亡率及PKC的膜转位率，均与亚油酸呈剂量和时间依赖关系。另外，钙离子是参与细胞损伤和PKC激活的因子之一，采用激光共聚焦方法检测腺泡细胞内钙浓度，发现其升高与亚油酸呈浓度依赖性。结论 亚油酸对胰腺腺泡细胞损伤存在剂量和时间依赖关系。游离亚油酸刺激腺泡细胞内钙升高和活化PKC诱导细胞凋亡可能是高脂血症性胰腺炎的发病机制之一。     

游离亚油酸对胰腺腺泡细胞的影响及其机制的探讨

目的探讨游离亚油酸对胰腺腺泡细胞的影响及其可能的机制。方法分离胰腺腺泡细胞,分别与0.1、0.5、1.0mmol/L亚油酸共同孵育30、60、90min,测定细胞的LDH释放率,DNA片段梯度分析腺泡细胞凋亡,流式细胞仪测定细胞凋亡率,Westernblot检测腺泡细胞PKC的膜转位,激光共聚焦测定细胞内钙的变化。结果腺泡细胞与亚油酸共同孵育后,台盼蓝染色显示存在细胞损伤,LDH释放率与亚油酸呈时间和剂量依赖关系。细胞总DNA凝胶电泳结果显示1.0mmol/L亚油酸可出现DNA梯状条带,证明存在细胞凋亡。同时,腺泡细胞凋亡率及PKC的膜转位率,均与亚油酸呈剂量和时间依赖关系。另外,钙离子是参与细胞损伤和PKC激活的因子之一,采用激光共聚焦方法检测腺泡细胞内钙浓度,发现其升高与亚油酸呈浓度依赖性。结论亚油酸对胰腺腺泡细胞损伤存在剂量和时间依赖关系。游离亚油酸刺激腺泡细胞内钙升高和活化PKC诱导细胞凋亡可能是高脂血症性胰腺炎的发病机制之一。     

急性胰腺炎与胰腺腺泡细胞凋亡的关系

目的：研究急性胰腺炎严重程度与胰腺泡细胞凋亡的关系。方法：建立不同严重程度的急性胰腺炎大鼠模型，通过原位末端标记法定量检测胰腺腺泡细胞凋亡率。结果：单纯水肿性胰腺炎时极少有腺泡细胞凋亡。出血坏死性胰腺炎时有腺泡细胞凋亡，且随着出血坏死程度的加重，腺泡细胞的凋亡先较快地增加后逐渐减少，细胞坏死则逐渐增多。结论：在急性单纯水肿性胰腺炎时极少有腺泡细胞凋亡。急性胰腺炎的严重程度与腺泡细胞的凋亡率在程度较轻的急性出血坏死性胰腺炎时呈正相关，而在程度较重的急性出血坏死性胰腺炎时则呈负相关。     

胰腺腺泡钙超载与急性胰腺炎

对急性胰腺炎 (ａｃｕｔｅｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ ,ＡＰ)的研究已有 10 0多年的历史。然而临床上 ,ＡＰ仍是一危重病症 ,尤其重型急性胰腺炎 (ｓｅｖｅｒｅａｃｕｔｅｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ,ＳＡＰ)更是病势凶猛、死亡率高。究其原因 ,主要是其发病机制尚未阐明 ,致使相应的治疗观点摇摆不定。近年来 ,国内外对ＡＰ发病机制研究的重点已从“胰酶消化学说”、“胰腺微循环障碍学说”、“自由基损伤学说”转至“细胞因子学说”、“胰腺腺泡钙超载学说”[1] 。本文就胰腺腺泡钙超载与ＡＰ的关系研究进展综述如下。1　ＡＰ时胰腺腺泡Ｃａ2…     

中性粒细胞对大鼠急性重症胰腺炎胰腺腺泡凋亡的作用

目的探讨中性粒细胞在大鼠急性重症胰腺炎时对胰腺的病理损害及对胰腺腺泡凋亡的作用。方法氨甲蝶呤（MTX）腹腔注射制成大鼠低中性粒细胞模型，然后以脱氧胆酸胰胆管注射诱发急性重症胰腺炎，造模后0、3、6、9、24、48、72h随机分批处死动物，按各时间点检测胰腺组织髓过氧化物酶活性（MPO），血清淀粉酶，应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的DUPT末端标记染色（TUNEL）和电镜技术检测胰腺腺泡凋亡情况，胰腺组织的病理学检查。结果实验组MPO在造模24h开始明显低于对照组（P〈0．01），胰腺组织的病理损害程度也较对照组轻。两组胰腺腺泡凋亡在造模3和6h均仅出现少量凋亡，在24和48h显著增多，以后逐渐下降；实验组胰腺腺泡凋亡指数明显高于对照组胰腺腺泡凋亡指数（P〈0．01）。结论适当地降低外周血的中性粒细胞水平能够增加胰腺腺泡凋亡，从而减轻急性重症胰腺炎时胰腺的病理损害程度。     

紫杉醇诱导胰腺腺泡细胞凋亡与减轻急性胰腺炎严重度的研究

我们比较了几种临床常用的化疗药物，发现紫杉醇具有较强的诱导胰腺腺泡上皮细胞凋亡的能力。但是，其能否应用于急性胰腺炎时诱导胰腺腺泡细胞凋亡从而减轻胰腺炎的严重度则未见报道，现将本研究结果报告如下。     

两种不同因素对胰腺腺泡细胞损害机制的研究

目的探讨蛙皮素和牛磺胆酸钠这两种不同因素对胰腺腺泡细胞的损害机制.方法采用一步消化法分离Wistar大鼠胰腺腺泡细胞,然后与不同浓度蛙皮素、牛磺胆酸钠共同孵育,采用台盼蓝法和双标法测定细胞活率、全自动生化仪测定淀粉酶浓度、比色法测定乳酸脱氢酶浓度、激光显微共聚焦法测定钙离子波动和浓度.结果蛙皮素处理后,腺泡细胞仍保持较高的活率,淀粉酶分泌率明显上升,同时乳酸脱氢酶漏出率增加,与淀粉酶分泌率之比约为4：1;而胆酸钠处理后细胞活率明显下降,淀粉酶分泌率明显升高的同时伴有乳酸脱氢酶漏出率也等比例的增加.蛙皮素可引起胰腺腺泡细胞内游离钙离子脉冲式升高,其波动方向由分泌极向基底极;牛磺胆酸钠引起细胞内钙离子持续低幅增高,细胞两极间未出现钙离子波动.结论蛙皮素及牛磺胆酸钠通过不同机制影响胰腺腺泡细胞的存活率,导致胰腺细胞损害.     

内毒素对人外周血单核细胞内游离钙离子浓度的影响

用新型钙离子荧光探针Ｆｕｒａ－２对受不同浓度ＬＰＳ刺激的人外周血单核细胞内游离钙离子水平进行检测。结果表明ＬＰＳ体外能刺激单核细胞内游离钙离子浓度升高，并呈明显的剂量效应依赖关系。随着ＬＰＳ刺激浓度的增加，单核细胞内游离钙离子水平亦升高。     

青蒿素诱导急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡的实验研究

目的探讨青蒿素（artemisinin）对急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡的影响,并了解是否减轻急性胰腺炎严重程度。方法腹腔内注射雨蛙素（cerulein）诱导大鼠胰腺炎模型建立,设正常对照组、胰腺炎组及青蒿素组,通过原位末端标记（TUNEL）法检测各组胰腺组织中腺泡细胞的凋亡指数,并用分光光度法检测髓过氧化物酶（MPO）活性。采用两步酶消化法分离正常大鼠胰腺腺泡细胞,离体分组培养,采用丫碇橙（AO）染色及caspase-3活性的检测,评估青蒿素对胰腺腺泡细胞凋亡的影响,并检测各组培养液中的乳酸脱氢酶（LDH）及淀粉酶（AMS）活性,评估胰腺腺泡细胞酶的释放。结果在体实验中,青蒿素组与胰腺炎组比较,胰腺腺泡细胞凋亡指数明显增高（P〈0.05）,MPO活性明显减低（P〈0.05）。体外实验中,青蒿素组胰腺腺泡细胞凋亡指数及caspase-3活性较胰腺炎组明显增高（P〈0.05）,培养液中的LDH和AMS活性也明显降低（P〈0.05）。结论青蒿素可促进大鼠急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡,减少胰酶释放及中性粒细胞激活,可减轻急性胰腺炎严重程度。     

大鼠急性胰腺炎胰腺细胞凋亡改变的实验研究的实验研究

目的 :了解急性胰腺炎 (AP)发病过程中胰腺腺泡细胞凋亡情况。方法 :将 48只SD大鼠随机分为两组 (胰腺炎组和假手术组 ) ,每组 2 4只。经十二直肠行胆胰管逆行加压注射 4%牛磺胆酸钠 ,诱导大鼠AP模型 ,于术后 3小时、6小时、12小时和 2 4小时分批处死动物 ,应用末端脱氧核苷酸转换酶 (TdT)介导的末端标记 (TUNEL)方法检测胰腺组织中的腺泡细胞凋亡。结果 :假手术组胰腺组织中存在极少量的凋亡细胞 ,数量相对恒定 ,与时间无关 ;胰腺炎组术后病变加重 ,胰腺凋亡细胞明显增多 ,3小时、6小时、12小时凋亡指数均明显高于假手术组 (P <0 .0 1) ,术后 2 4小时接近假手术组水平。结论 :急性胰腺炎胰腺存在腺泡细胞凋亡的改变 ,胰腺细胞凋亡可能是急性胰腺炎病变过程中的一个重要特征     

急性胰腺炎由水肿型向坏死型转化时血液流变学的变化

目的:观察急性胰腺炎由水肿型向坏死型转化时的血液流变学变化.方法:将188只Wistar大鼠分成六组作胰组织学、胰微循环体视学、酶学和血液流变学观察.结果:胰管梗阻伴胰高分泌状态可致急性水肿性胰腺炎;胰管梗阻时给予DX_(110)致血液流变学改变伴胰微循环障碍但无胰腺坏死;胰管梗阻伴胰高分泌状态并给予DX_(110)导致急性坏死性胰腺炎并伴有明显血液流变学改变和胰微循环障碍.结论:血液粘度和红细胞聚集倾向增大伴红细胞钱串形成及红细胞变形性的降低是造成胰微循环紊乱的原因,并在急性胰腺炎由水肿型向坏死型转化中起重要作用.     

Propofol induces a lowering of free cytosolic calcium in myocardial cells

Background: The intravenous anaesthetic drug propofol has been shown to depress myocardial contractility. Ketamine, on the other hand, is a well-documented cardiovascular stimulant. These differences could possibly be due to different effects of the drugs on the calcium homeostasis of the myocardium. Methods: The fluorescent intracellular probe fura-2 acetoxyme-thy1 ester (fura-2/AM) was used in this in vitro investigation to study the influence of intravenous anaesthetic drugs on free cytosolic calcium concentration in suspensions of isolated rat myocardial cells.     

水肿型胰腺炎向坏死型胰腺炎进展中VEGF的表达及意义

目的：探讨在胰腺微循环障碍加重过程中血管内皮生长因子（VEGF）的表达及意义。方法：将大鼠随机分为假手术对照组（N组）、急性水肿型胰腺炎组（AEP组）及急性坏死型胰腺炎组（ANP组）。于建模后6、12和24h,分别采用ELISA法检测各组血清中的VEGF、TNF-α及淀粉酶（AMY）含量,免疫组织化学方法检测各组胰腺组织中VEGF蛋白的表达情况,并分析比较。结果：AEP组与ANP组胰腺组织中各时相点VEGF染色评分均明显高于N组（P〈0．05）;建模6hANP组的评分显著高于AEP组（P〈0．05）,而12和24hANP组的评分均明显低于AEP组（P〈0．05）。ANP组和AEP组血清VEGF、TNF-α与AMY含量均显著高于N组（P〈O05）;ANP组与AEP组之间差异亦有统计学意义（P〈0．05）,但AEP组建模24hVEGF含量和12hAMY含量与ANP组差异无统计学意义（P〉0．05）;血清VEGF与TNF-α（正相关（P〈O.05）。结论：VEGF作为相对独立的微循环影响因素与全身炎症反应呈正相关,但在胰腺微循环障碍持续加重期,胰腺组织及血管内皮细胞严重受损,VEGF表达减少,胰腺坏死病变难以逆转。     

粉防己碱(Tet)对兔子阴茎海绵体平滑肌细胞质中自由钙离子浓度的影响(英文)

目的:探讨粉防己碱(tetrandrine,Tet)松弛阴茎海绵体平滑肌的作用机制。方法:体外培养新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌细胞,经钙荧光指示剂 Fluo-2/AM 负载后,用荧光离子数字成像系统观察 Tet 对平滑肌细胞内[Ca~(2 )]_i 的影响。结果:Tet(1,10,100μmol/L)对平滑肌细胞内静息[Ca~(2 )]_i无明显影响(P>0.05)。当细胞外钙离子浓度为2.5 mmol/L 时,Tet(1μmol/L,10 μmol/L,100 μmol/L)抑制了高钾和去氧肾上腺素(PE)导致的细胞内[Ca~(2 )]_i 升高(P<0.05),这种抑制作用具有浓度依赖性。在无细胞外钙时,1 μmol/L和10μmol/L Tet 对 PE 引起的细胞内[Ca~(2 )]_i 升高无明显影响(P>0.05);而100 μmol/L Tet 能明显抑制 PE 引起的细胞内[Ca~(2 )]_i 升高(P<0.05)。结论:Tet 通过阻滞电压依赖性钙通道、α_1受体依赖性钙通道和抑制细胞内钙库释放,降低阴茎海绵体平滑肌细胞内[Ca~(2 )]_i 水平,这是 Tet 松弛阴茎海绵体平滑肌的作用机制之一。     

一氧化氮等炎性介质与急性坏死性胰腺炎的关系

目的.探讨一氧化氮(NO)等相关炎性介质在急性坏死性胰腺炎(ANP)中的作用.方法:采用3.5%牛磺胆酸逆行胰胆管注射建立鼠ANP模型,观察NO、内毒素、白细胞介素(IL)-1、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)的变化,同时观察重组IL-2对ANP的治疗作用.结果;NO参与了ANP的病变,与IL-1、IL-6、TNF.和内毒素的表达相平行,又与多器官损伤的严重程度呈正相关.结论:NO在ANP的病损中起重要作用,而且IL-2对ANP有潜在的治疗价值.     

中药复方“清下1号”对急性水肿性胰腺炎局部微循环损伤的作用

目的探讨大鼠急性水肿性胰腺炎(AEP)动物模型的早期微循环改变及中药复方清下1号（MCP-1）对AEP胰腺微循环的作用。方法用异硫氰酸荧光素-荧光标记红细胞(FITC-RBC)胰腺活体微循环技术、微血管树脂/墨汁灌注光镜和扫描电镜、透射电镜技术,用蛙皮缩胆囊肽诱发大鼠急性胰腺炎（AP）动物模型,观察36只Wistar大鼠的早期微循环改变、MCP-1应用后胰腺局部微循环的反应。结果与AEP自然病程组比较,MCP-1治疗组血清淀粉酶由（2997.7±801.4）?IU/L降至（1909.7±295.5）?IU/L（P<0.01）;胰腺间质炎性细胞浸润减少;腺泡细胞胞浆内空泡减少;毛细血管密度由（52.8±6.1）%增至（63.2±5.5）%（P<0.01);微血管管径由（4.5±0.4）?μm增至（5.9±0.6）?μm（P<0.05）;FITC-RBC显示胰腺微循环流速、流量增加,灌流稳定(0.87±0.06)nl/min（P<0.01)。结论MCP-1具有显著改善AP胰腺微循环的作用,抗AP胰腺局部微循环损伤是实现MCP-1疗效的重要机制。     

Variation of increases in free cytosolic calcium ion induced by prostaglandin E2 in mouse osteoblast clone,MC3T3-E1—Single cell assay using microspectro-fluorometry

Osteoblasts exhibit multiple phenotypic expression in response to prostaglandin E₂ (PGE₂). Intracellular calcium concentration ([Ca²⁺] _i ) was elevated by PGE₂ treatment in the mouse osteoblast clone, MC3T3-E1, but the degree of elevation was varied by the day after subculturing. To study the different response to PGE₂, we have used microspectrofluorometry to measure [Ca²⁺] _i in a single MC3T3-E1 cell loaded with fura-2. In the presence of extracellular Ca²⁺, the increase in [Ca²⁺] _i in the osteoblast exhibited multiple patterns. The patterns were roughly classified into four groups by the time reached maximum level; “transient”, “gradual”, “transient and gradual” and “no response”. Within 2 days after subculturing, the cells showing “gradual” and “no response” were predominant, whereas after day 3 the cells showing “transient” and “transient and gradual” were predominant. We also investigated the daily change in the maximum level of [Ca²⁺] _i in the cells showed “transient” in response to PGE₂. The magnitude of [Ca²⁺] _i increase was also varied in cultivating period. These data suggest that there are phenotypic variations in a single cell even in a cloned cell line and this phenotype may change in the stage of cell proliferation.     

早期应用L-精氨酸治疗急性出血坏死性胰腺炎的实验研究

目的: 探讨早期应用L-精氨酸对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)的治疗作用. 方法: 经大鼠胰胆管注射牛磺酸钠制备AHNP模型,分别静注L-精氨酸、生理盐水、山莨菪碱;观察血清淀粉酶、白介素6(IL-6)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)改变及胰腺的病理改变. 结果: 应用L-精氨酸后,能升高血NO浓度,清除氧自由基,降低血清IL-6水平,降低血清淀粉酶,改善胰腺病变,其作用优于山莨菪碱. 结论: 早期应用一定剂量的L-精氨酸对AHNP具有一定的治疗效果.     

左旋精氨酸对急性胰腺炎的作用

探讨左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）在大鼠急性水肿性胰腺炎（ＡＥＰ）中的作用。方法观察倍数剂量Ｌ－Ａｒｇ治疗ＡＥＰ大鼠后,血浆和胰组织一氧化氮（ＮＯ）浓度、血浆淀粉酶、平均动脉压（ＭＡＰ）、胰组织病理的变化。结果ＡＥＰ大鼠血浆、胰组织ＮＯ浓度明显降低,Ｌ－Ａｒｇ５０、１００ｍｇ／ｋｇ升高血浆、胰组织ＮＯ浓度,改善了大鼠ＡＥＰ;Ｌ－Ａｒｇ８００、１６００ｍｇ／ｋｇ体重使ＮＯ浓度过度升高,加重ＡＥＰ成为急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）;胰组织病理评分与血浆、胰组织ＮＯ浓度呈正相关。Ｌ－Ａｒｇ对ＭＡＰ的影响较小。血浆淀粉酶除８００ｍｇ／ｋｇ体重组明显降低外,其余各组间无明显差异。结论Ｌ－Ａｒｇ因升高ＮＯ浓度而参与了大鼠ＡＥＰ的病理过程。