转录因子Sp1与肿瘤关系研究的新进展

Sp1参与了细胞的生长和分化等重要的生命过程,是目前研究极为广泛和系统的转录因子之一.在肿瘤的生长和转移过程中,Sp1可以通过调控癌基因、抑癌基因、细胞周期调控分子和生长相关信号转导通路、血管生成相关因子和细胞的凋亡过程,对各型肿瘤细胞产生重要影响.Sp1的表达水平和活性均受到严格的调控,具体机制包括对Sp1蛋白本身的修饰以及其它分子对Sp1的调控作用等.以Sp1作为靶点的新的肿瘤治疗方法,将会对临床肿瘤化疗策略产生深远的影响.     

长链非编码RNA 对基因表达的调控

哺乳动物基因组中的大部分DNA序列在动物生长的不同阶段被转录成长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)。它们对基因表达的调控作用已成为生命科学研究的热点。目前已发现lncRNA有多种基因调控方式： 在细胞核中顺式或反式地调控基因转录,作为蛋白诱饵进行间接调控;在细胞质中作用于mRNA影响其稳定性及翻译 过程,作为竞争性内源RNA参与microRNA调控,与转录因子结合影响其功能发挥等。LncRNAs在转录水平及转录后 水平对基因表达的调控作用对于机体的发育过程和疾病的发生发展都有重大意义。     

转录因子Sp1在人内皮细胞高表达脂多糖相关因子1基因转录中的作用

目的 明确转录因子Sp1在人内皮细胞高表达脂多糖相关因子1(endothelial-overexpressed lipopolysiccharide-associated factor 1,EOLA1)基因转录调控中的作用.方法 定点突变EOLA1基因核心启动子- 734～- 666序列中推断的Sp1结合位点,观察启...     

高迁移率蛋白1相关信号通路在肾脏疾病中的作用

高迁移率蛋白1(HMGB1)是高迁移率蛋白家族成员之一,其生理作用广泛,参与细胞核内DNA重组、染色质结构稳定、基因转录调控、细胞修复、分化等生命活动,是细胞及生物体存活的关键。HMGB1相关信号通路作为晚期炎性介质信号,参与了缺血/再灌注损伤、急性肾损伤、慢性肾脏病、狼疮性肾炎等肾脏病。     

经典Wnt信号通路中β-catenin在细胞核内外分布的调控机制及潜在治疗靶点的研究进展

 经典Wnt信号通路在肿瘤细胞的增殖分化中发挥重要作用,该信号通路中的核心蛋白分子β-catenin介导信号从细胞质传递到细胞核,并在核内参与组成转录复合体,激活下游靶基因转录。β-catenin进入细胞核内是其激活下游转录因子的重要前提,其出入细胞核的方式尚未完全解析。β-catenin入核方式主要为利用经典入核途径关键蛋白直接入核及通过“分子伴侣”协助入核,而出核方式主要为依赖染色体维持区域1（chromosome maintenance region 1,CRM1）的出核途径。细胞膜上的钙黏蛋白、细胞质内的降解复合体相关蛋白及细胞核内的转录复合体相关蛋白等均可导致β-catenin滞留,从而影响其在细胞核内外的分布。在不改变细胞内β-catenin总量的情况下,通过减少β-catenin入核及核内滞留作用、增加其出核及核外滞留作用,从而阻断Wnt/β-catenin信号通路,也是治疗经典Wnt信号通路相关疾病的有效途径。本文总结近年来关于β-catenin在细胞核内外分布状态的调控机制,为进一步研究治疗经典Wnt信号通路相关疾病提供潜在靶点及新思路。     

转录因子Sp1基因克隆及表达载体的构建

目的 通过转录因子Sp1基因克隆以及真核表达载体的构建,为探讨转录因子Sp1在牙釉质发育的分子调控奠定基础.方法 根据引物设计原则设计Sp1基因的PCR引物,以从小鼠成釉细胞中提取的总RNA逆转录所得cDNA为模板,进行PCR扩增,用PCR法扩增得出含有EcoRⅠ和XbaⅠ的Sp1目的 基因连接到pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体上.结果 经过PCR引物扩增得到2343bp基因片段,将获得的重组质粒pcDNA3.1/myc-HisA-Sp1双酶切分析鉴定,测序结果与GenBank登录基因完全一致.结论 成功实现了Sp1基因克隆及表达载体的构建,为以后研究转录因子Sp1在牙釉质发育的分子调控方面奠定基础.     

NF-κB与变态反应性疾病

NF-κB(核因子)是具有基因转录调节作用的蛋白质因子,几乎存在于所有有核细胞中,调节着包括趋化因子、生长因子、细胞粘附分子及各种疾病的蛋白基因.当细胞受到炎症介质、病毒感染、氧化应激等刺激后,NF-κB蛋白在胞质内被激活,进入细胞核,与病毒、细胞因子、生长因子、细胞粘附分子、酶等基因的增强子序列结合,调控着这些基因的表达.NF-κB在一系列由细胞因子、炎症介质及蛋白酶类参与的疾病的发病过程中发挥重要作用.     

CREB磷酸化在心肌肥厚作用中的研究进展

cAMP反应元件结合蛋白是位于细胞核内的转录因子。生理状态下,cAMP反应元件结合蛋白在多种刺激因素作用下被激活,参与真核生物靶基因的转录调控,发挥许多生物学效应。近年来对cAMP反应元件结合蛋白在神经元再生、突触形成和学习等方面的作用研究有了很大进展。最近发现,核转录因子cAMP反应元件结合蛋白磷酸化异常也在心肌肥厚基因转录调节中发挥重要作用。     

N-ras癌基因负调控因子的研究(简报)

笔者曾通过分子杂交、Run-off转录活性的检测及原位杂交技术证明,肝癌细胞中N-ras癌基因的表达明显高于正常肝细胞,其分子机理可能是由于转录水平的异常.进而采用Southwestern Blot技术对反式作用因子(trans-acting factor)进行检测,结果发现在肝癌细胞中缺失了一组(分子量45 000、40 000和35 000)DNA结合蛋白.本实验对该组DNA结合蛋白进行分离、鉴定并利用体外转录系统证明其具有抑制转录的作用,提示存在N-ras癌基因的负调控因子.     

缺氧诱导因子-l与肿瘤

缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子。HIF-1作为调控细胞氧平衡和诱导缺氧反应基因表达的重要的核蛋白,对肿瘤的发生发展起重要作用。HIF-1还受多种肿瘤抑制蛋白、癌基因等的调节,参与了对肿瘤生长过程的调控。了解HIF-1的结构、功能及与肿瘤的关系,将为肿瘤的诊疗提供新的思路。     

Sp1对HL-60细胞人端粒酶逆转录酶表达的调控

目的:探讨Sp1转录因子在人白血病细胞株HL-60中对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响.方法:电泳迁移率分析(EMSA)hTERT启动子区(-116~-88 bp)是否存在Sp1结合位点.RT-PCR检测经普卡霉素处理的细胞hTERT mRNA表达.结果:hTERT启动子序列(-116~-88 bp)与核蛋白作用,出现DNA-核蛋白结合条带,普卡霉素抑制Sp1与此序列结合.普卡霉素浓度依赖性下调 hTERT mRNA表达,200 nmol/L组和100 nmol/L组均明显低于50 nmol/L组、25 nmol/L组和对照组(P<0.01).结论:Sp1与hTERT启动子区(-116~-88 bp)结合,转录激活hTERT表达.     

人Smac基因启动子区结合蛋白的生物信息学分析

目的分析线粒体促凋亡蛋白(Smac)基因启动子区结合蛋白,预测其转录调控因子。方法从基因参考序列数据库获取Smac基因启动子区序列,使用TFSEARCH程序对启动子序列中的转录因子结合位点进行预测。结果成功获得了长度为2 kb的人Smac基因启动子区序列。该启动子区Threshold score≥90的共有71个转录因子结合位点,涉及STAT家族、bZIP家族、叉头蛋白家族、锌指蛋白Kruppel家族、POU家族、runt家族、MYB家族、GATA结合蛋白家族、SOX家族、同源异型框基因家族10个家族的转录因子和1个TATA box。结论 Smac表达的调控是在一定时间或空间上、一种或多种调节蛋白作用的复杂过程。调控Smac的转录因子绝大部分与胚胎发育、性别决定、个体生长密切相关。     

ERK1/2-Sp1信号通路对肺癌细胞VEGF的调控作用

目的探讨ERK1/2-Sp1信号通路对肺癌细胞VEGF的调控作用。方法选择2016年10月至2017年10月医学院附院收治的肺癌60例患者,随机数字表法分为两组,经过细胞培养、ERK激酶抑制剂处理、RT-PCR等相关技术处理分析后,对比两组细胞ERK激酶活性、VEGF以及Sp1转录因子的m RNA表达量等指标。结果经过不同浓度的ERK激酶抑制剂PD98059和DMSO处理后,浓度越高,ERK激酶活性抑制越严重,并且研究组细胞在25μmol/L、50μmol/L、75μmol/L、100μmol/L下ERK激酶活性抑制情况明显高于对照组(P0.05);VEGF、Sp1转录因子的m RNA表达量随着浓度上升逐渐下降,并且研究组细胞的VEGF、Sp1转录因子的m RNA表达量明显低于对照组(P0.05)。结论 ERK1/2-Sp1信号通路能通过ERK1/2激酶磷酸化反应,诱导肺癌细胞VEGF的表达,Sp1因子也是重要调控因子,这为肺癌的治疗提供了新的途径。     

液-液相分离在基因转录调控中功能机制的研究进展Research progress in functional mechanism of liquid-liquid phase separation in gene transcription regulation

基因表达的转录是指在RNA聚合酶的催化下，以单链DNA为模板，合成mRNA的过程，这一过程需要多种不同蛋白大分子相互协调，在基因组DNA位点上组装成大型稳定的蛋白复合物，通过转录调节在基因表达中发挥核心作用。转录蛋白分子复合物可以通过多价相互作用，形成液-液相分离聚集，定位于细胞核中特异的基因位点处，参与基因转录的调控。目前液-液相分离在转录调控过程中的功能机制尚不完全清楚，现从基因转录抑制、转录激活、转录延伸和剪接等方面阐述液相分离在基因转录过程中的研究进展，总结其对基因表达调控的研究成果，为生物分子液-液相分离在基因转录中的进一步研究提供依据。     

缺氧诱导因子-1与肿瘤

<正> 缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子。HIF-1作为调控细胞氧平衡和诱导缺氧反应基因表达的重要的核蛋白,对肿瘤的发生发展起重要作用。HIF-1还受多种肿瘤抑制蛋白、癌基因等的调节,参与了对肿瘤生长过程的调控。了解HIF-1的结构、功能及与肿瘤的关系,将为肿瘤的诊疗提供新的思路。     

血清反应因子在心血管疾病中的作用

血清反应因子（serum response factor,SRF）属于MADS转录因子家族的成员之一,是高度保守且广泛表达的转录因子。SRF在成年或发育期的心肌组织中均有表达,主要与下游靶基因启动子上特定DNA序列CArG盒[血清反应元件（SRE）的组成部分,CC（A/T）6GG box]结合,调控抗凋亡或促细胞增殖等基因（如IEGs：c-fos、mcl-1、Egr-1）的表达,对外界因素（如：缺血、缺氧等）刺激表现出快速的基因响应,影响心肌细胞的发育、分化、增殖及凋亡[1-2]。许多辅助转录调节因子蛋白（co-activator/co-repressor,如TCF家族成员Elk-1和MRTFs家族等）与SRF/SRE发生相互作用,激活与心肌分化、增殖及凋亡相关基因的转录。因此,对SRF-CArG box依赖基因转录的调控,是影响心肌凋亡/生存的关键因素之一[3]。另外,研究表明skeletal a-actin、b-MHC、car原diac a-actin、MLC-2v、dystrophin等收缩类蛋白[4-6]及非收缩类蛋白,诸如参与心脏功能的ANF、肌质网Ca-ATPase（SERCA2）、Na+/Ca2+交换离子通道 NCX1[7-8]均为SRF依赖的基因。由此可见,SRF在调控收缩蛋白基因和收缩功能器官的重要作用充分说明SRF在心脏功能中发挥着重要的调控作用。     

NKX 3.1基因上游一个30 bp负调控区结合蛋白的初步鉴定

目的：鉴定NKX 3．1基因上游30bp负调控区的结合蛋白。方法：人工合成30bp负调控序列．用末端转移酶对其进行地高辛标记;提取细胞核蛋白,采用电泳迁移率变动分析(EMSA)方法．检测细胞核提取液中与30bp负调控序列特异结合的核蛋白。结果：在LNCaP细胞及其他不同肿瘤细胞系核提取液中,检测到与30bp负调控序列特异结合的核蛋白,但在不同的细胞系中有不同种类的结合蛋白。结论：NKX 3．1基因上游的30bp负调控机制在不同的细胞中普遍存在。不同的细胞核中有不同的结合蛋白．可能涉及不同的调控机理。     

冠心病易感基因MEF2A的研究进展

冠心病易感基因MEF2A的转录产物MEF2A蛋白是一类脱氧核糖核酸（DNA）结合蛋白，其在功能上有许多独特点。它们与基因启动子中特定序列结合，从而调节基因的表达。近年来的研究表明，转录因子MEF2A在血管平滑肌细胞（MSMC）的增殖及内皮细胞的发育、功能和结构维持中起重要调控作用。最近发现，易感基因MEF2A的遗传变异会导致MEF2A蛋白构象的改变，影响了MEF2A在细胞核内的定位，     

人瘢痕成纤维细胞中Sp-1等转录因子的研究

目的 :研究增生性瘢痕成纤维细胞中纤维化相关的转录因子。方法 :人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞原代、传代培养后抽提核蛋白。人工法合成转录因子Sp 1、NF Ⅰ、NF κB识别序列的双链寡核苷酸 ,并采用Dig ddUTP 3′末端标记该双链寡核苷酸。电泳迁移率改变实验 (EMSA)法研究瘢痕成纤维细胞中纤维化相关的Sp 1、NF Ⅰ、NF κB等转录因子。结果 :在人增生性瘢痕成纤维细胞的核蛋白中存有纤维化相关的Sp 1、NF Ⅰ、NF κB等转录因子。结论 :瘢痕纤维化的发生、发展与纤维化相关的转录因子Sp 1、NF Ⅰ、NF κB密切相关。     

Osterix对成骨细胞分化影响的研究进展

Osterix(OSX)是最近由Nakashima等[1]发现的成骨细胞特异性转录因子,只在发育的骨组织中特异性表达,是成骨细胞分化和骨形成过程中所必需的转录因子[2]。骨髓基质干细胞分化为表达典型的成骨性标志基因的成骨细胞需要OSX的作用。OSX自身的突变或缺失也可导致骨形成的迟滞或停止。本文就OSX的结构组成,对成骨细胞生物活性的影响及其调节机制进行综述。1OSX的结构与生化特性OSX是一种具有锌指基序结构域的转录因子,由428个氨基酸组成。在其氨基酸序列的C末端存在的3个C2H2锌指结构为DNA结合域,此锌指结构与转录因子Sp1、Sp3和Sp4…