实时定量逆转录PCR技术在前列腺癌微转移诊断中的应用进展

根治性前列腺切除术是早期前列腺癌的主要治疗手段,淋巴结转移是前列腺癌根治术后不良预后最有价值的预测指标,然而,有大约30%的经常规病理检查证实无盆腔淋巴结转移的病人术后发展为生化复发,许多研究认为是由于常规的病理检查未能发现盆腔淋巴结的微转移病灶.本文对前列腺癌盆腔淋巴结微转移病灶检测的实时定量逆转录PCR方法 应用进展作一.     

前列腺癌根治术前盆腔淋巴结微转移检测的研究

目的 明确新辅助治疗后前列腺癌根治术前,real-time PCR检测盆腔淋巴结微转移的意义.方法 2007年8月至2010年3月对21例临床局限性前列腺癌病例,根据病理检查阳性(A组)、real-time PCR检查前列腺特异性抗原(PSA)mRNA和前列腺特异性膜抗原(PSMA)mRNA阳性(B组)、病理检查及real-time PCR检查PSA mRNA及PSMA mRNA均阴性(C组)进行分组,D组为对照组.术前行淋巴管造影显示盆腔淋巴结,对可疑淋巴结在X线定位下穿刺抽吸淋巴液,用real-time PCR方法检测淋巴液中PSA mRNA和PSMA mRNA的表达,阳性表达提示淋巴结转移的存在,术后对淋巴结组织切片进行免疫组化检查.结果 对术前盆腔淋巴结穿刺抽吸淋巴液用real-time PCR方法检测PSA mRNA和PSMA mRNA的表达,证实有14例淋巴结存在微转移,术后对清扫淋巴结进行免疫组化检查有3例存在淋巴结转移,A组与B组PSA mRNA和PSMA mRNA的表达存在明显的差异;A、B组淋巴液中PSA mRNA及PSMA mRNA的表达明显高于淋巴结(P＜0.01).结论 采用real-time PCR方法检测淋巴液中PSA和PSMA mRNA的表达有利于探测到淋巴结微转移的存在,术前穿刺淋巴结抽吸淋巴液提高了术前前列腺癌分期的准确性.     

利用逆转录聚合酶链反应及DNA印迹杂交技术检测乳腺癌腋窝淋巴结微转移

目的　评价检测原发性乳腺癌腋窝淋巴结微转移的方法。方法　用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Southern杂交方法,检测腋窝淋巴结中CK-19基因表达。同时与免疫组织化学(组化)方法比较其检测敏感性。结果　RT-PCR、Southern杂交及免疫组化方法的检测敏感性分别为1∶5×10