LY294002联合多柔比星对脑胶质瘤U87细胞株增殖的影响

目的体外观察磷酸肌醇-3激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002联合多柔比星(adriamycin,ADR)对人脑胶质瘤U87细胞株增殖的抑制作用。方法用MTT法、流式细胞术检测LY294002单独或联合ADR对人脑胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用,并观察细胞形态学变化。结果 LY294002与ADR均能抑制U87细胞生长,呈剂量依赖性。ADR 0.625 mg/mL与LY2940025μmol/L联用具有协同作用,联合用药组细胞凋亡明显高于LY294002和ADR单药组,细胞被阻滞在G1期,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 LY294002能有效提高神经胶质瘤U87细胞对ADR的敏感性。     

磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B抑制剂对人脑胶质瘤细胞株U251增殖的影响

目的研究磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)特异性抑制剂LY294002对人脑胶质瘤细胞株U251增殖的影响。方法采用免疫细胞化学S-P法检测LY294002对U251细胞磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)蛋白的表达,噻唑蓝(MTT)法检测LY294002(LY2940025、10、20、40μmol·L-1)干预24、48、72h后U251细胞增殖的抑制率。结果 LY294002以剂量、时间依赖性方式抑制U251细胞的生长,LY294002组中不同剂量的干预组与对照组相比P-PKB蛋白的表达降低,差别均有统计学意义(P<0.05);LY294002组中随着剂量的增加,其对U251细胞生长抑制率增加,不同剂量干预组间比较差别有统计学意义(P<0.01)。结论 LY294002对人脑胶质瘤U251细胞有抑制生长的作用。LY294002对P-PKB表达的抑制可能是细胞增殖受抑的重要原因。     

细胞外ATP对U87胶质瘤细胞生长和侵袭的作用

目的观察细胞外三磷酸腺苷(adenosine Triphosphate,ATP)对体外培养的U87人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法采用MTT法检测不同浓度细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖的影响;以相同条件下不加ATP作为对照组,以加入100μmol/L ATP作为处理组,采用Transwell细胞侵袭实验检测100μmol/L细胞外ATP对U87胶质瘤细胞侵袭能力的影响;用时间显微镜动态观察100μmol/L的ATP作用下U87胶质瘤细胞的迁移情况。结果高浓度(5 000μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖有显著抑制作用,较低浓度(50、100、500μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖无明显影响,5 000μmol/L ATP组与其他浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验中,处理组细胞跨膜细胞数为(163.83±17.81)明显多于对照组(89.83±13.27)(P<0.01);迁移实验中,处理组细胞运动速度为(163.83±17.81)μm/h,对照组细胞运动速度为(89.83±13.27)μm/h,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 100μmol/L的细胞外ATP对体外培养的U87胶质瘤细胞的侵袭和迁移具有明显促进作用。     

顺铂联合吡柔比星对脑胶质瘤U87细胞株增殖的抑制作用

目的 观察顺铂（CDDP）联合吡柔比星（THP）对脑胶质瘤U87细胞株增殖的抑制作用.方法 采用MTT法检测不同浓度CDDP、THP以及两者联合应用时对U87细胞增殖作用的影响.结果 随药物浓度增加,CDDP组、THP组和联合组对U87细胞增殖抑制作用逐渐增强（均P＜0.01）.联合组对U87细胞增殖抑制率较同浓度CDDP组、THP组明显增加（P＜0.05或P＜0.01）.当CDDP和THP浓度为≤0.625μg/mL时,联合组Q值分别为1.72、1.31,两药联合应用具有协同作用,当CDDP和THP浓度≥1.25 μg/mL时,联合组Q值分别为0.94、0.88、0.86、0.89,两药联合应用具有相加作用.结论 CDDP联合THP较单纯的CDDP或THP抑制U87细胞增殖作用更强,具有浓度依赖性.在较低剂量下就能达到明显肿瘤抑制效应,对杀伤U87细胞具有确切协同效应.     

PI3K抑制剂LY294002联合吡柔比星对膀胱癌BIU-87细胞增殖作用的影响

目的:探讨PI3K抑制剂联合吡柔比星对人膀胱癌BIU-87细胞增殖作用的影响。方法:用不同浓度的PI3K抑制剂LY294002联合吡柔比星对BIU-87细胞作用0、12、24、36 h后,通过MTT方法检测抑瘤率;通过Western blotting检测Caspase-3、Bax、Bcl-2及P-gp蛋白的表达。结果:THP能明显抑制BIU-87细胞的增殖,并且具有明显的时间的依赖性(P<0.05)。THP联合应用不同浓度LY294002组与单独使用同剂量的THP组比较,BIU-87细胞的增殖随着药物浓度的增加和时间的延长进一步受到抑制,而且,联合应用LY294002的低浓度THP组对BIU-87细胞抑制作用明显强于高剂量THP组(P<0.05)。此外,PI3K抑制剂LY294002联合应用THP后,BIU-87细胞Bax与Caspase-3表达都明显上升(P<0.05),Bcl-2与P-gp表达量明显降低(P<0.05)。结论:PI3K抑制剂联合THP比单独应用THP对人膀胱癌BIU-87细胞抑制作用效果明显。     

LY294002联合顺铂通过细胞自噬效应抑制人喉癌HEP-2细胞的生长

目的：探讨PI3K/AKT通路抑制剂LY294002联合顺铂抑制人喉癌HEP-2细胞生长的机制。方法：采用MTT及细胞活力检测单独LY294002处理对HEP-2细胞的毒性作用，并且观察LY294002联合顺铂对HEP-2细胞产生的影响；采用免疫荧光检测LY294002联合顺铂对HEP-2细胞内自噬特异性标志蛋白LC3B表达的诱导作用；采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LY294002联合顺铂处理HEP-2细胞后相关自噬因子的表达。结果：单独LY294002对喉癌HEP-2细胞无明显毒性作用，而1μg/ml顺铂联合2μg/ml LY294002可显著增强顺铂杀伤HEP-2细胞的效能，并且明显刺激LC3B的表达。RT-qPCR结果显示，1μg/ml顺铂联合2μg/ml LY294002作用显著升高细胞中自噬标志物ATG3、ATG4A、ATG4B、ATG4C、ATG5和ATG7 mRNA的表达。结论：顺铂联合LY294002可能通过激活细胞自噬抑制喉癌HEP-2细胞生长的作用。     

替莫唑胺联合氟桂利嗪对胶质瘤细胞体外作用机制

目的:探讨替莫唑胺(TMZ)联合氟桂利嗪(FZ)对人脑胶质瘤细胞体外清除作用及可能机制。方法:用伊格尔培养基培养胶质瘤U87、U251、CHG-5、SHG-44细胞株,用CCK-8试剂检测并评价TMZ、FZ两者单药及联合用药处理后的U87、U251、CHG-5、SHG-44细胞增殖抑制率及观察TMZ的半数抑制浓度(IC_(50));流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:FZ单独处理胶质瘤细胞株后能起到一定的抑制作用,而远远起不到治疗效果;在同类细胞中,TMZ单药作用细胞株后IC_(50)分别为(562.3±56.7)、(370.5±40.2)、(480.9±29.6)、(420.5±61.4)μg/mL。在不同浓度的FZ联合TMZ应用后TMZ IC_(50)均有不同程度下降(P0.05);与对照组、替莫唑胺、氟桂利嗪单药作用组比较,TMZ联合FZ用药诱导胶质瘤细胞凋亡率显著提高。结论:FZ可抑制胶质瘤U87、U251、CHG-5、SHG-4增殖,与TMZ联合应用后能提高化疗效果。     

TrkB-BDNF的三条下游信号传导通路对神经母细胞瘤细胞耐药的影响

目的本研究探讨阻断TrkB-BDNF信号传导通路的三条下游信号传导通路后,NB细胞对化疗药物敏感性的影响。方法常规培养SH-SY5Y NB细胞,用纳摩尔浓度全反式维甲酸(ATRA)诱导酪氨酸激酶受体B(TrkB)高表达,加入脑源性神经营养因子(BDNF)、化疗药顺铂(CDDP)和PI3K抑制剂LY294002、PLC抑制剂U73122、MAPK抑制剂U0126处理。四甲基偶氮蓝比色(MTT)实验方法检测应用三种抑制剂前后细胞的存活率的变化;流式细胞仪(FCM)检测应用三种抑制剂前后细胞凋亡率的变化。结果 ATRA+BDNF+CDDP组NB细胞的存活率及凋亡率与对照组相比,差异无显著性(P>0.05)。ATRA+BDNF+LY294002+CDDP组细胞对顺铂的敏感性增加,细胞的存活率明显降低,凋亡率明显升高,与ATRA+BDNF+CDDP组相比,差异有显著性(P<0.05),而ATRA+BDNF+U73122+CDDP组、ATRA+BDNF+U0126+CDDP组细胞对顺铂的敏感性降低,细胞的存活率明显升高,凋亡率明显降低,与ATRA+BDNF+CDDP组相比,差异无显著性(P>0.05)。结论激活TrkB-BDNF信号传导通路可增强NB细胞耐药。TrkB–BDNF信号传导通路可能通过进一步激活其下游PI3K/Akt通路逆转耐药。     

LY294002联合Znpp IX对人乳腺癌细胞增殖及侵袭能力的影响

[目的]探讨PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002联合血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂Znpp IX对人乳腺癌MCF7/Adr细胞增殖及侵袭能力的影响.[方法]将Znpp IX(0.625~10.000μmol/L)与LY294002(5~80μmol/L)单独或联合应用于人乳腺癌MCF7/Adr细胞,用MTT法检测药物对MCF7/Adr细胞增殖的影响.实验分为对照组、LY294002组(10μmol/L)、Znpp IX组(1.250μmol/L)和联合用药组(LY294002 10μmol/L+Znpp IX1.250μmol/L),用Transwell小室测定各组MCF7/Adr细胞的侵袭力和迁移力,Western blot法检测Akt,p-Akt和HO-1蛋白的表达水平.[结果]联合用药组、LY294002组及Znpp IX组MCF7/Adr细胞的增殖抑制率分别为58.60%±3.24%,42.50%±2.44%和39.70%±3.21%,联合用药组MCF7/Adr细胞的增殖抑制率明显高于LY294002组和Znpp IX组(P<0.05).LY294002和Znpp IX单独或联合应用均可显著抑制人乳腺癌MCF7/Adr细胞的侵袭和转移(P<0.05),其中联合用药组抑制作用显著优于LY294002组和Znpp IX组(P<0.05).Western blot检测结果显示,各组Akt蛋白表达水平间差异无统计学意义(P>0.05);LY294002组p-Akt,HO-1表达水平均明显低于对照组(P<0.05),Znpp IX组HO-1表达水平明显低于对照组(P<0.05),与LY294002组和Znpp IX组比较,联合用药组p-Akt,HO-1水平均明显降低(P<0.05).[结论]Znpp IX和LY294002单独应用均可抑制人乳腺癌MCF7/Adr细胞的增殖、侵袭及转移,联合应用时作用加强,提示Znpp IX和LY294002联合应用具有协同增效作用.     

醋酸棉酚通过诱导铁死亡抑制脑胶质瘤细胞生长

目的:探讨醋酸棉酚(gossypol acetate, GAA)对人脑胶质瘤细胞铁死亡的影响。方法:选取处于对数生长期的人脑胶质瘤U87MG、LN229和U251MG细胞,各分为2组,分别用0,10μmol/L GAA处理,CCK-8法和克隆形成实验检测脑胶质瘤细胞增殖能力;实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法分别检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4) mRNA和蛋白表达水平;化学发光法检测还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛含量。另将3种人脑胶质瘤细胞分别用0、10μmol/L GAA联合0、1μmol/L Ferrostatin-1(铁死亡挽救剂)进行培养,CCK-8法检测细胞增殖率。结果:与0μmol/L GAA组相比,10μmol/L GAA组U87MG、LN229和U251MG细胞相对增殖率和克隆形成能力明显下降(P均<0.05),LN229和U251MG细胞中GPX4 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P均<0.05),GSH含量明显减少且代谢产物丙二醛含量明显增加(P<0.05),而U87MG细胞内上述指标变化不...     

2001年我国医药研究的若干进展

随着国内外生命科学和生物技术等的飞速发展,我国医药技术在2001年取得了长足的进步。提前完成了我国所承担的人类基因组汁划中的1％测序任务,到2000年,中国科学家在功能基因研究和基因组多样性领域共完成研究论文1850篇,遍及医药各领域,研究手段和水平可于国际先进水平媲美,中国完全有条件在“后基因时代”成为主角之一。     

小儿耳鼻喉手术麻醉的新进展

因小儿耳鼻喉手术刺激强,时间短,且常与气道相关,故麻醉的控制有一定难度,现对国内外现阶段小儿耳鼻喉手术麻醉的改良方法及新观点进行评述,以期对临床工作有较好的指导意义。     

成都市属医院1，175例儿童支气管肺炎住院费用分析

为探讨成都市不同级别医疗机构儿童支气管肺炎单病种费用水平以及不同收费项目占总费用的比例特点及控制医疗费用的有效途径,为患者自主选择就诊医疗机构提供参考指导,对成都市卫生局所属不同级别医院儿童支气管肺炎住院医疗费用分析如下。1资料与方法1.1资料来自成都市卫生局2     

Malaria in children in Birmingham in the 1970s

Thirty-two children with malaria were admitted to Dudley Road Hospital, Birmingham, in the 1970s. None was admitted before 1974 and there was a rapid increase after that. All the infections were due to Plasmodium vivax and occurred in children of Asian immigrant families who had been born in or had visited India or Pakistan apart from one infant born in England who acquired the disease transplacentally. All presented within 12 months of entering or re-entering the United Kingdom. The clinical features of the 32 patients have been analysed and it is suggested that more effort should be made to educate travellers about the need for anti-malarial chemoprophylaxis and the necessity to continue it for one month after return.     

2005年广西流动人口疟疾监测结果分析

目的了解广西流动人员疟疾流行现状,进而提出针对性防治措施。方法收集全区网络直报疫情资料和各级疾病预防控制机构疟疾监测数据进行分析。结果2005年广西流动人口发热病人平均疟原虫阳性率为0·33%。80·62%的病人为本地居民外出到疟疾流行区务工感染所致。以从事护林/砍伐比例最高,占44·19%。结论加强返乡流动人口疟疾监测是巩固广西疟疾防治的关键所在。