低温对培养的血管内皮细胞损伤作用的研究①

将体外培养的大鼠血管内皮细胞（ＶＥＣ）在不加任何低温保护剂的条件下，以１℃／ｍｉｎ的速率分别冷冻至０、－１０、－２０和－４０℃；以１０℃／ｍｉｎ的速率冻至－４０℃，在冻后１ｄ和３ｄ观察ＶＥＣ生长及其某些功能的改变。结果显示，冻后１ｄ，以１℃／ｍｉｎ冷冻的各组ＶＥＣ数及生长率降低、培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性增加，因子Ⅶ相关抗原（ⅦＲ：Ａｇ）免疫荧光阳性细胞减少，且冷冻温度愈低，其改变程度愈严重，１０℃／ｍｉｎ冻至－４０℃，上述指标的改变相当于１℃／ｍｉｎ的速率冻至－２０℃时的情况。冻后３ｄ，各项指标有不同程度的恢复。结果表明，冷冻速率和冷冻温度均与细胞的损伤程度有密切关系。     

血管内皮细胞生长因子对内皮细胞放射损伤的保护作用

目的 探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）对原代脐静脉内皮放射损伤的保护作用。方法 采用HE染色及MTT法观察6Gy和12Gy辐射对内皮细胞形态及增殖活性的影响，同时观察EGF对内皮细胞放射损伤的保护作用。结果 放射损伤组在细胞大小和形态方面发生明显改变，6Gy能引起内皮细胞增殖活性增强，而12Gy则导致活性下降；VEGF明显促进内皮细胞增殖，并能改善12Gy所引起的损伤。结论 VEGF可作为放射损伤的拮抗剂，在创面修复中具有很好的应用前景。     

亚低温对颅脑损伤后脑血管内皮细胞紧密连接开放的影响

目的　观察颅脑损伤后早期亚低温治疗对脑毛细血管内皮细胞紧密连接开放的影响 ,阐明亚低温降低伤后血脑屏障通透性的可能机制。　方法　Wistar大鼠 90只 ,随机分为常温对照组 (10只 )、常温损伤组 (40只 )和亚低温治疗组 (40只 )。在镧示踪法电镜下分别观察亚低温及常温条件下颅脑损伤后内皮细胞紧密连接的开放及其程度 ;用干 -湿重法测定常温损伤组及亚低温治疗组伤后不同时相脑组织含水量并行统计学分析。　结果　常温损伤组伤后 3h紧密连接初步开放 ,2 4～ 4 8h紧密连接开放达高峰 ,72h紧密连接仍大量开放。亚低温治疗组紧密连接仅轻度开放 ;亚低温治疗组脑组织含水量较常温损伤组明显减少 ,伤后 3,2 4 ,72h差异有显著性意义(P <0 .0 5 ) ,伤后 4 8h差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　亚低温有减轻颅脑损伤后血脑屏障毛细血管内皮细胞紧密连接的开放程度及减轻脑水肿的作用 ,亚低温减轻伤后内皮细胞紧密连接开放是降低伤后血脑屏障通透性机制之一。     

高频超声评估低温对兔血管内皮细胞功能的影响

目的 研究高频超声评估低温对兔血管内皮细胞功能的影响.方法 18只新西兰大白兔分3组,每组6只:常温组,低温4h组,低温8h组.常温组兔置于室温环境(23℃～25℃),低温4h组兔置于-23℃-30℃环境中4h,低温8h组兔置于-23℃-30℃环境中8h.应用高频超声检测各组兔髂外动脉内皮细胞依赖性舒张功能(EDD)与...     

血栓调节蛋白在血管内皮细胞损伤中的作用及意义

血栓调节蛋白（TM）是位于血管内皮细胞表面的蛋白质[1],它与凝血酶以化学计量1：1的比例形成可逆性复合物,该复合物形成后,凝血酶不再具有促凝活性但却获得了比游离的凝血酶强1000信的激活蛋白C的能力,活化的蛋白C在蛋白S存在情况下可以使血液凝固因子Va及Ⅶ活化,这样,通过催化蛋白C的激活,TM在血管壁表面作为凝血调节剂具有重要作用,进而TM抑制凝血酶对大分子底物的蛋白溶解作用,同时含有一氨基半乳糖精元的TM,可通过抗凝血酶Ⅲ而促进凝血酶的失活。TM是一含有575个氨基酸和5个主要基团的完整的膜糖蛋白,它可出现在动脉…     

510.6nm激光对兔血管平滑肌细胞、内皮细胞选择性损伤作用的研究

目的 观察激光照射后兔血管平滑肌细胞、内皮细胞形态结构变化特点，观察激光对血管壁的损伤是否有选择性，为防止再狭窄提供实验依据。方法 用能量密度为50、100、150和200J／cm^2的铜蒸气激光照射兔腹主动脉，分别用光镜、电镜、图像分析方法，观察激光照射后第24小时，血管平滑肌细胞、内皮细胞形态、结构变化。结果 100J／cm^2能量密度的激光照射后，血管平滑肌细胞出现细胞核固缩，细胞质凝集贴边，细胞核面积均值缩小等损伤性改变。经同等剂量激光照射，而内皮细胞无明显变化。结论 经100J／cm^2的铜蒸气激光照射可损伤在体血管平滑肌细胞，而对内皮细胞无明显作用。激光对血管壁的损伤具有一定的选择性。     

血管内皮细胞损伤的研究进展

血管内皮细胞（ＥＣ）多种生理功能的正常发挥有赖于其完整性的维持。ＥＣ损伤与众多疾病和病理过程有关，与创伤及其并发症关系密切。对ＥＣ损伤进行研究有助于进一步认识与其有关的疾病、病理过程和创伤的发生发展过程。     

一氧化氮损伤内皮细胞的机制研究

体外培养人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ），主要研究：①内毒素损伤内皮细胞过程中一氧化氮（ＮＯ）的作用；②不同浓度ＮＯ供体ＳＩＮ－１对内皮细胞的作用以及ＳＯＤ、ＣＡＴ对内皮细胞的保护作用。结果提示：ＮＯ在内毒素损伤内皮细胞过程中发挥重要作用；高浓度ＳＩＮ－１可严重损伤内皮细胞；ＳＯＤ、ＣＡＴ对内皮细胞的不同保护作用说明ＯＮＯＯ＾－的产生可能是ＮＯ损伤内皮细胞的重要机制。     

人骨骼肌细胞体外分化过程及特征

为研究人骨骼肌细胞（HSMC）体外分化模式及其生物学、形态学、生化学特征,在体外培养HSMC,并进行免疫组化鉴定,细胞生物学和形态学观察、肌酸激酶（CK）及蛋白质含量测定。结果发现,体外培养的HSMC能达到高度分化;CK活力、肌细胞蛋白质合成与其分化、成熟程度及肌管的功能状态呈正相关。提示HSMC体外重新分化过程与在体相似。     

苯那普利对动脉粥样硬化形成及循环内皮细胞与假血管血友病因子的影响作用

观察苯那普利对高胆固醇饲喂的家兔动脉粥样硬化形成及其对循环内皮细胞 (CEC)、假血管血友病因子(vWF)的影响。 2 4只新西兰雄性大白兔随机分成 3组 ,对照组饲喂普通饲料 ,动脉粥样硬化组饲喂 1 %胆固醇饲料 ,苯那普利组饲喂 1 %胆固醇及苯那普利5mg/d。实验前、实验后 5周、实验后 1 0周分别抽血测血脂、vWF、CEC计数。第 1 0周末处死大白兔 ,计算主动脉斑块面积。结果显示 ,苯那普利治疗组与动脉粥样硬化组血脂水平无明显变化 ,但动脉粥样硬化斑块面积却明显减少(P <0 0 1 ) ,其血浆vWF浓度亦明显降低(P <0 0 1 )。提示苯那普利具有抗动脉粥样硬化作用 ,其机制可能与保护内皮功能有关     

Calponin对培养的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

Ｃａｌｐｏｎｉｎ是一种抗细胞增殖基因，在多种病理情况下表达失调。用脂质体＋载体质粒ｐＣＡＧＧＳ作介导向培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞内导入人重组Ｃａｌｐｏｎｉｎ（ｈＣＮ），目的基因可在该细胞组织内表达，并持续较长时间（４周以上）。ＭＴＴ法的检测结果表明，导入ｈＣＮ基因能明显抑制ＳＨＲ平滑肌细胞的增殖。这种作用对血管成形术后再狭窄的防治和高血压时血管壁肥厚的逆转具有潜在的实用价值。     

急性呼吸窘迫综合征血管内皮细胞功能改变的研究

为研究急性呼吸窘迫综合征血管内皮细胞功能改变,采用同种骨髓提取液（ＢＭＥ）复制兔急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）模型,连续多时相点检测血管内皮标记物;循环内皮细胞（ＣＥＣ）,血浆颗粒膜蛋白－１４０（ＧＭＰ－１４０）和内皮素（ＥＴ－１）以及肺组织ＧＭＰ＿１４０含量,并行常规病理及电镜检查。发现致伤后０．５ｈ,ＣＥＣ,血浆ＧＭＰ－１４０,ＥＴ－１均显著升高,持续６ｈ仍显著高于伤前和对照,其中血浆ＧＭＰ－     

不同浓度同型半胱氨酸对培养的人脐静脉内皮细胞分泌一氧化氮及内皮素的影响

目的　研究不同浓度的同型半胱氨酸(Hcy)对内皮细胞分泌一氧化氮 (NO)、内皮素 (ET)的影响。方法　收集人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)进行细胞培养 ,传至第三代后 ,将其与不同浓度的Hcy共同培养 2 4h,分别在 4、6、8、2 4h检测培养液中NO、ET的含量。结果　HUVEC与不同浓度的Hcy培养 2 4h后 ,其NO呈剂量依赖性下降 (P <0 0 1) ,ET也呈剂量依赖性降低 (P <0 0 5 ) ,但ET/NO却较对照组明显升高(P <0 0 5 )。结论　Hcy可以导致血管内皮细胞释放活性因子NO、ET减少。     

脂多糖对复合培养的肺微血管内皮细胞表达IL-6的影响

以脂多糖（LPS）处理与大鼠肺动脉平滑肌细胞复合培养的肺微血管内皮细胞，测定两种细胞培养上清中白细胞介素6（IL-6）的活性，采用RT-PCR方法检测单独培养和复合培养的肺微血管内此细胞正常组以及LPS2h、6h、12h组IL-6基因的表达水平。结果发现，LPS刺激单独培养和复合培养2h组肺微血管内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞上清中IL-6的活性均明显增强，8h组两种细胞上清中IL-6的活性均最强，16h组的活性均减弱，24h组的活性低于2h组；两种细胞单独培养组的活性明显强于复合培养组；LPS刺激单独培养和复合培养2h组肺微血管内皮细胞中IL-6mRNA表达水平升高，8h达最高，16h有所降低，但仍高于正常组；单独培养组的IL-6mRNA表达水平明显高于复合培养组。说明LPS可促进单独培养和复合培养的两种细胞培养上清中IL-6活性升高，增强单独培养和复合培养的肺微血管内皮细胞中IL-6基因的表达，复合培养可使IL-6活性和基因水平降低。     

炎性损伤对肺微血管内皮细胞β-受体的影响

用放射性配基结合分析法 ,测定 β 肾上腺素能受体 ( β AR)在大鼠肺微血管内皮细胞 (RPMVEC)的分布情况 ,并观察炎性损伤对它的影响。结果表明 ,β AR的最大结合容量Bmax为 ( 5 .5 83± 0 .30 6 )fmol/1 0 5 细胞 ,Kd值为 ( 0 .2 7± 0 .0 3)nmol/L ;LPS、TNF和H2 O2 作用后 ,β AR的Bmax均较正常对照组显著降低 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 )。提示 :RPMVEC胞膜存在高亲和力的 β AR ;LPS、TNF和H2 O2 可引起 β AR的显著下调。     

碱性成纤维生长因子对大鼠骨骼肌细胞缺氧复氧损伤的影响

应用培养的新生Wistar大鼠骨骼肌细胞缺氧复氧（A/R）损伤模型，观察碱性成纤维细胞生工因子（bFGF）对A/R损伤及损伤后骨骼肌细胞凋亡（apoptosis)的影响，以探讨bFGF作物药物预处理保护骨骼肌细胞的可行性。结果表明，bFGF预处理呈浓度依赖性地提高了A/R后肌细胞存活率，减少了胞浆乳酸脱氢酶（LDH）的漏出，明显上调了骨骼肌细胞凋亡相关基因蛋白Bcl-2的表达，提示bGFG对A/R损伤的骨骼肌细胞有明显保护作用。